青黛酮在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及青黛酮在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 青黛酮（Qingdainone)為生物堿類(lèi)物質(zhì)，暗紫色細(xì)針晶，CAS號(hào)97457-31-3,分子 式C 23H13N3O2，分子量363. 38,結(jié)構(gòu)式為：
青黛酮來(lái)源于爵床科（Acanthaceae)馬蘭 Cusia(Nees)Brem.的莖 葉。研宄表明，青黛酮具有抗腫瘤活性。對(duì)小麗J^ewisl癌及黑色素瘤細(xì)胞株B16均有抑 制作用。
[0003] 馬蘭味辛，性微寒。歸肝、腎、胃、大腸經(jīng)。能清熱解毒，散瘀止血，利濕，消食，消 積。用于感冒發(fā)燒,咳嗽，急性咽炎，扁桃體炎，流行性腮腺炎，傳染性肝炎，胃、十二指腸潰 瘍，小兒疳積，腸炎，痢疾，吐血，崩漏，月經(jīng)不調(diào);外用治瘡癤腫痛，乳腺炎，外傷出血；痢疾 或濕熱腹瀉；咽喉腫痛，癰腫瘡瘍；血熱衄血、便血；濕熱黃疸；或水腫，小便不利；飲食積 滯，脘腹脹滿(mǎn)。
[0004] 通過(guò)文獻(xiàn)檢索，國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)青黛酮用于制備抗腫瘤藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為滿(mǎn)足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療癌癥，應(yīng)用青黛酮制備抗腫瘤藥物。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 本發(fā)明所述的青黛酮，其制備方法包括以下步驟： (1) 取瓣?duì)詈凶硬莘鬯?，按固液體積比為5 :1. 5-2加入夾帶劑，在壓力22-35MPa，溫度 35-48°C條件下，通入液態(tài)CO2萃取90-180min，在壓力7-9MPa，溫度30-35°C條件下解析，收 集萃取液； (2) 將步驟（1)中得到的萃取液加硅藻土攪拌脫色，過(guò)濾得到脫色液； (3) 將步驟（2)中得到的脫色液濃縮至相對(duì)密度為1. 12,上中性氧化鋁柱，用石油 醚-乙酸乙酯洗脫純化，得到青黛酮粗品； (4) 粗品經(jīng)過(guò)制備型高效液相色譜精制得到高純度的青黛酮。
[0007] 所述步驟（1)中，夾帶劑為甲醇或乙醇溶液。
[0008] 所述步驟（2)中，硅藻土加入量為藥材量的3-4. 5%。
[0009] 所述步驟（3)中，石油醚-乙酸乙酯的體積比為3:14。
[0010] 所述步驟（4)中，制備型高效液相色譜流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水，體積比為 19:38:45。
[0011] 青黛酮在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0012] 通過(guò)體外腫瘤細(xì)胞體外抑制試驗(yàn)，觀察青黛酮的抗腫瘤作用，結(jié)果表明青黛酮對(duì) GLC4肺癌和B16黑色素癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。
[0013] 本發(fā)明的有益效果通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證： 實(shí)驗(yàn)方法： 1、受試提取物：青黛酮提取物 (1)性狀：結(jié)晶，味苦。
[0014] (2)規(guī)格：含青黛酮彡90%。
[0015] (3)溶劑：乙醇或甲醇。
[0016] (4)儲(chǔ)存條件：4°C，密封保存。
[0017] 2、細(xì)胞株：肺癌細(xì)胞株GLC4、黑色素癌細(xì)胞株B16。
[0018] 3、給藥劑量和方法 青黛酮組：l〇mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。
[0019] 陰性對(duì)照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0020] 陽(yáng)性對(duì)照組：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0021] 灌胃后2h，用HPLC檢測(cè)血漿藥物濃度。
[0022] 4、種植瘤模型的建立與給藥 (1)皮下種植：分別將上述細(xì)胞培養(yǎng)至90%融合，收集細(xì)胞，取2 X 10 6細(xì)胞懸液，注射 至小鼠肋下皮下組織，于術(shù)后15天取材，稱(chēng)量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計(jì)算藥物對(duì) 模型動(dòng)物存活率的影響。
[0023] (2)肺內(nèi)種植瘤肺轉(zhuǎn)移模型：取2X 10 6細(xì)胞懸液注射至小鼠肺包膜內(nèi)，于術(shù)后15 天取肺，測(cè)量瘤重和肺轉(zhuǎn)移數(shù)。
[0024] (3)給藥方式：種植瘤細(xì)胞同時(shí)給藥。
[0025] 5、結(jié)果 結(jié)果如表1、表2和表3顯示，青黛酮組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作 用，可延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期。
[0026] 表1青黛酮對(duì)種植瘤的抑制作用（η=20，ι 土S)


由表1、表2和表3可以看出，青黛酮組用藥抑制腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的效果與陽(yáng)性對(duì)照組基 本相當(dāng)，可有效延緩實(shí)驗(yàn)小鼠的生存壽命，其效果明顯優(yōu)于對(duì)照組。
[0027] 本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時(shí)，將青黛酮與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤 的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
[0028] 本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時(shí)，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂 肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0029] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0030] 實(shí)施例1 青黛酮的制備 取500g瓣?duì)詈凶硬荽址?，置于萃取釜中，按固液體積比為5 :2加入甲醇作為夾帶劑，在 壓力22MPa，溫度38°C條件下，通入液態(tài)C02, C02流量為4. 5ml/g生藥/min，萃取120min， 在壓力7MPa，溫度32°C條件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土攪拌脫色，過(guò)濾得到脫色 液，濃縮至相對(duì)密度為1. 12,上中性氧化鋁柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:8)，用石油醚-乙 酸乙酯3:14洗脫純化，得到青黛酮粗品；以體積比19:38:45甲醇-乙腈-水為流動(dòng)相，粗 品用流動(dòng)相溶解，注入制備型高效液相色譜儀，控制流速為20ml/min，收集目標(biāo)流分，連續(xù) 制備，冷凍干燥得高純度的青黛酮，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度94. 4%。
[0031] 實(shí)施例2 片劑：青黛酮40g，淀粉135g，鶴去氧膽酸鹽25g，制粒，壓片制成1000片。服用方法： 成人一次1片，一日2次。
[0032] 實(shí)施例3 膠囊：青黛酮40g，淀粉135g，殼聚糖25g，混勻，制成1000粒。服用方法：成人一次1 粒，一日2次。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 結(jié)構(gòu)式如下所示的青黛酬在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。2. 如權(quán)利要求1所述的青黛酬在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，青黛酬在肺 癌藥物中的應(yīng)用。3. 如權(quán)利要求1所述的青黛酬在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，青黛酬在黑 色素癌藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種青黛酮在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，通過(guò)體外腫瘤細(xì)胞體外抑制試驗(yàn)，觀察青黛酮的抗腫瘤作用，結(jié)果表明青黛酮對(duì)肺癌和黑色素癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。將青黛酮與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【IPC分類(lèi)】A61K31/519, A61P35/00
【公開(kāi)號(hào)】CN104922129
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510263740
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請(qǐng)人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年5月22日