專利名稱：24-同一維生素-d-衍生物的藥用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I的24-同-維生素-D-衍生物， 式中R1為一個氫原子、一個羥基或有1至8個碳原子的酰氧基，R2和R3各自獨(dú)立地為一個有1至4個碳原子的直鏈或有支鏈的烷基、一個三氟甲基或者共同為一個與碳原子25相連的有3至9個碳原子的飽和碳環(huán)，R4和R5各自獨(dú)立地為一個氫原子或有1至8個碳原子的?；?，A和B各為一個氫原子或者共同為一個第二鍵，n為1、2、3、4或5，本發(fā)明還涉及上述衍生物的制備方法、含有這些化合物的藥物制劑以及其對于制造藥品的應(yīng)用。
可能作為取代基R1、R4和R5的酰氧基及酰基特別是由飽和的羧酸或也由苯酸衍生的。
如果R2和R3與碳原子25共同為一個飽和的碳環(huán)，則特別優(yōu)先考慮環(huán)丙環(huán)、環(huán)戊環(huán)或環(huán)己環(huán)。
本發(fā)明優(yōu)選的通式I的24-同-維生素-D-衍生物是，R1為一個羥基，R2和R3為一個甲基，R4和R5為一個氫原子，和n為1、2或3。
在碳原子22和23之間最好有一個雙鍵。
特別優(yōu)選的化合物是(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇，和(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇。
天然維生素D2和D3及其生物活性代謝物(天然維生素D2和D3本身是非生物活性，在肝的25位或腎的1位上羥基化后才是活性的)在C10和C19的位置之間有一個雙鍵作為區(qū)別的結(jié)構(gòu)特征，該雙鍵對維生素D活性起決定性作用(見通式Ⅴ)。維生素D2和D3的作用在于使等離子體Ca++和等離子體磷酸鹽反射體穩(wěn)定化，它們抑制等離子體Ca++反射體的沉積。
麥角鈣化醇Ra＝Rb＝H，Rc＝CH3，維生素D2雙鍵C-22/23膽鈣化醇Ra＝Rb＝Rc＝H 維生素D325-羥膽鈣化醇Ra＝Rc＝H，Rb＝OH1a-羥膽鈣化醇Ra＝OH，Rb＝Rc＝H1a，25-二羥基膽鈣化醇Ra＝Rb＝OH，Rc＝H 鈣三醇除了對鈣和磷酸鹽物質(zhì)交換的明顯作用外，維生素D2和D3及其合成的衍生物還具有抑制增殖和區(qū)分細(xì)胞的作用(H、F、Deluca，維生素D在甾類激素生物化學(xué)中的代謝作用和功能，Hrsg、H.L.Makin，第二版，Blackwell科學(xué)出版社，1984，71-116頁)。但在應(yīng)用維生素D時可能出現(xiàn)過劑量現(xiàn)象(血鈣過多)。
DE-AS2526981已經(jīng)公開過在24位羥基化的1a-膽鈣化醇;它的毒性低于未羥基化的相應(yīng)1a-膽鈣化醇。羥基化的化合物顯示了腸鈣吸收的選擇性活化作用和比1α-膽鈣化醇弱的骨吸收作用。
國際專利申請WO87/00834中描述的24-羥基維生素-D-類似物可以用于治療人和動物由于不正常的細(xì)胞增殖和/或細(xì)胞分化所引起的障礙。
對于各種1，25-二羥基-同-維生素-D-衍生物，Deluca不久前曾提及與骨吸收作用和HL-60細(xì)胞區(qū)分性質(zhì)有關(guān)的離解。其中，體外的骨吸收作用是體內(nèi)鈣活動化作用的直接量度。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，與維生素-D-衍生物鈣三醇(1a，25-二羥基膽鈣化醇)相比，本發(fā)明通式I的24-同-維生素-D-衍生物具有好的驚人的作用圖譜。當(dāng)對于鈣和磷酸鹽物質(zhì)交換的影響明顯減弱時(通過過劑量或要求高劑量減少副作用)，抑制增殖和區(qū)分細(xì)胞的作用大體保持不變(離解)。
本發(fā)明化合物的維生素-D-活性借助于鈣三醇受體試驗確定。用一種由患佝僂病的雞腸中得到的特定受體蛋白質(zhì)進(jìn)行該試驗。在一個試管中，用反應(yīng)體積為0.575ml的3H-鈣三醇(0.5ng/ml)將含有受體的粘合蛋白質(zhì)培育1小時，分有和沒有待試物質(zhì)兩種情況。用木炭-葡聚糖吸收分離沒有和粘有受體的鈣三醇。為此，向每個試管加入200μl木炭-葡聚糖懸浮液，并在22℃培育30分鐘。接著，在4℃和1500×g條件下離心分離10分鐘。沉淀分離剩余物，平衡1小時后，在一個β計數(shù)器中用原子光測量。用不同濃度的待試物質(zhì)以及參比物(未作標(biāo)記的鈣三醇)得到一些排斥3H-標(biāo)記的參比物的競爭曲線，將其相互關(guān)聯(lián)，找出一個競爭因子(KF)。它被定義為50%競爭所需的待試物質(zhì)濃度與參比物濃度的商KF＝ (50%競爭時的待試物濃度)/(50%競爭時的參比物濃度)因此，(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇(化合物A)的KF值為67，(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇(化合物B)的KF值為0.8。
為了確定本發(fā)明化合物的抗增殖能力，代之以化合物A和B作為待試物質(zhì)，進(jìn)行了下述試驗用Yuspa，S和Harris，C.C，的改進(jìn)方法，“用乙酸視黃酯體外處理老鼠表皮細(xì)胞的變更分異”，Exp.CellRes.8695-105，1974制備和培養(yǎng)新生老鼠的角化細(xì)胞。
通過斷頭殺死兩種性別的新生NMRI老鼠，剝?nèi)テつw，在一種抗菌素-抗霉菌劑溶液中洗凈，用這一側(cè)朝下在Dispase II溶液中(1.2U/ml在組織培養(yǎng)介質(zhì)M19.9中+25mmol/L HEPS+15%胎兒小牛血清(FCS)+50U/ml青霉素/鏈霉素(P/S)(制備介質(zhì)，PM))于4℃下培養(yǎng)一夜。取出表皮，通過受胰蛋白酶作用制備單細(xì)胞懸浮液。離心分離后，使細(xì)胞沉積物重新懸浮，變?yōu)殄F蟲藍(lán)色后確定活的小圓細(xì)胞數(shù)目，在Primaria 24孔板中和組織培養(yǎng)介質(zhì)(M199+15%FCS+50U/ml P/S)中以4×105細(xì)胞/cm2的密度播種細(xì)胞。在37℃培養(yǎng)24小時后，用以磷酸鹽緩沖的鹽溶液(PBS)洗細(xì)胞，再在32.5℃及有和沒有待試物質(zhì)的無血清組織培養(yǎng)介質(zhì)(M199，50U/ml P/S+0.5%乙醇)中繼續(xù)培養(yǎng)24小時。然后，加入0.4μCi/50μl3H-甲基胸苷(40Ci/mmol)。4小時后抽出介質(zhì)，加入500μl冰冷的10%三氯醋酸(TCA)結(jié)束反應(yīng)。用TCA和PBS洗細(xì)胞，并通過在一種朊酶K-溶液(10mmol/l三-HCl，10mmol/l EDTA，10mmol/i NaCl，0.2%Triton-X100，PH8.0，50μg/ml朊激酶K)中培養(yǎng)使之溶解，并通過離心分離提純?nèi)馨a(chǎn)物。在剩余物中用閃爍計光法確定放射性，用聯(lián)咪苯基吲哚(DAPI)對DNA進(jìn)行比染色后，用熒光計光法確定DNA濃度。
因此，鈣三醇及化合物A和B按所用劑量以大約相同的IC50阻止3H-胸苷進(jìn)入DNA鈣三醇 2.7×10-9mol/l化合物A 6.0×10-9mol/l化合物B 9.5×10-9mol/l由于減少了血鈣過多的危險，本發(fā)明的物質(zhì)適用于以特定方式制造治療以過度增生為特征的疾病，例如皮膚的過度增生疾病(牛皮癬)和惡性腫瘤(白血病，結(jié)腸癌，乳腺癌)。成功治療的前提條件是證明標(biāo)的組織中的鈣三醇受體。
該化合物可以配制成具有藥理上可接受溶劑的溶液，或者在適當(dāng)?shù)乃幬锶軇┗蜉d體中的乳液、懸浮液或分散液，或者配成以已知方式含有固體載體的丸劑、片劑或膠囊。對于局部應(yīng)用，這些化合物最好配制成乳脂、膏劑或一種適用于局部應(yīng)用的類似藥品形式。這類配制品中的每個還可以含有其它藥學(xué)上可接受且無毒的助劑，例如穩(wěn)定劑、抗氧化劑、粘合劑、色素、乳化劑或調(diào)味劑。這些化合物的施用方式優(yōu)選注射或靜脈注射合適的無菌溶液，或者作為口服藥劑經(jīng)食管(消化道)喂入，或以乳脂、膏劑、洗液或合適的經(jīng)皮膚的硬膏劑(經(jīng)皮膚的橡皮膏片)形式局部施用，如EP-A-0387077所述。
每天的劑量為0.1μg(微克)/病人/天-1000μg(1mg)/病人/天，優(yōu)選1.0μg/病人/天-500μg/病人/天。
所以，本發(fā)明的化合物也與至少含有一種通式I的化合物和一種藥理上容許的載體的醫(yī)藥制劑有關(guān)。
此外，本發(fā)明涉及用式Ⅰ的化合物制備藥品。
按照本發(fā)明，式Ⅰ的24-同-維生素-D-衍生物是這樣制備的，即通式Ⅳ的一種化合物
式中R1′為一個氫原子或一個被保護(hù)的羥基，R4為一個羥基保護(hù)基團(tuán)，R2和R3及n與式Ⅰ含義相同，必要時對22，23-雙鍵進(jìn)行選擇性加氫后，通過24-羰基官能團(tuán)的還原轉(zhuǎn)化成一種通式Ⅲ的化合物， 式中R1′、R4′、R2和R3及n的含義與式Ⅳ相同，A和B共同為一個第二鍵或各為一個氫原子，通過用紫外線照射使通式Ⅲ的一種化合物在5，6-雙鍵進(jìn)行立式異構(gòu)轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)化為一種通式Ⅱ的化合物，
式中R1′、R4′、R2和R3、n及A和B與式Ⅲ含義相同，接著，通過裂化存在的羥基保護(hù)基團(tuán)并在必要時使羥基基團(tuán)部分或全部地酯化而轉(zhuǎn)變?yōu)橥ㄊ絀的一種化合物。
通式Ⅳ化合物24-羰基官能團(tuán)的還原例如用氯化鈰(Ⅲ)/硼氫化鈉在一種極性溶劑中進(jìn)行。還原時既有通式Ⅲ的(24R)-又有(24S)-24-羥基異構(gòu)體產(chǎn)生。這兩種異構(gòu)體可用色譜法分離。
在需要的情況下，可在羰基官能團(tuán)還原之前對C22，C23的雙鍵進(jìn)行選擇性加氫。
通式Ⅲ的一種化合物接著向通式Ⅱ的一種化合物的轉(zhuǎn)變例如通過在所稱的“三合鏡感光劑”存在下用紫外光照射進(jìn)行。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，對此應(yīng)用了蒽。通過5，6-雙鍵π鍵的裂化、A環(huán)繞5，6-單鍵旋轉(zhuǎn)180°和5，6-雙鍵的重鍵，倒換了5，6-雙鍵的立體異構(gòu)體。
接著，裂解存在的羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選使用四-n-丁基氟化銨以及希望時按通用方法用相應(yīng)的羧酸鹵化物(鹵化物＝氯化物、溴化物)或羧酸酐使自由的羥基部分或全部酯化。
由Calverley等在Tetrahedron43，4609(1987)及國際專利申請WO87/00834中所述類型的化合物
式中羥基保護(hù)基團(tuán)R1″和R4″為二甲基特丁基甲硅烷基;制備通式Ⅳ的原料化合物;按照本發(fā)明，也可設(shè)想其它的三烷基甲硅烷基作保護(hù)基團(tuán)。
與式Ⅵ的正膦反應(yīng)得到通式Ⅳ的化合物(維悌希反應(yīng))。
下面的合成實施例用來進(jìn)一步說明本發(fā)明。
原料化合物的制備I)異丁基羰基亞甲基三苯基正膦1a)溴甲基異丁酮將50ml異丁基甲基酮溶入240ml甲醇中，在0℃下?lián)饺?0ml溴，并在10℃下攪拌1.5小時。接著加入360ml水，在室溫下攪拌16小時。用飽和食鹽溶液稀釋反應(yīng)混合物，分離有機(jī)相，用乙醚萃取含水相。用10%的碳酸鈉溶液洗滌合并起來的有機(jī)相并用氯化鈣干燥。過濾后，蒸發(fā)溶劑并蒸餾殘留物。得到無色油狀的53.7g溴甲基異丁酮;Kp15-20為67-69℃。
b)異丁基羰甲基三苯基溴化磷將53.6g溴甲基異丁酮加進(jìn)78.5g三苯膦中，使冷卻的反應(yīng)混合物在二氯甲烷/乙醚(12)中重結(jié)晶。得到111.7g熔點為244-245℃的溴化磷。
c)異丁基羰基亞甲基三苯基正膦1將111.6g異丁基羰甲基三苯基溴化磷溶入1500ml二氯甲烷中，摻入1500ml2N的NaOH，在室溫下攪拌30分鐘。分離出有機(jī)相，用水沖洗，并用硫酸鈉干燥。過濾和蒸發(fā)溶劑后，使殘余物在特丁甲醚中重結(jié)晶。得到72.2g熔點為120-121℃的標(biāo)題化合物。通過改變反應(yīng)步驟a)的酮組分，可以相似的方式制備下式其它的正膦。
Ⅱ)(環(huán)丙基甲基)-(三苯基正膦亞基)-酮2將180mg氯化鋰和540mg氯化銅(Ⅰ)在氮?dú)獯嬖谙略?ml四氫呋喃中于室溫下攪拌1.5小時。冷卻到10℃后，加入溶入225ml四氫呋喃中的15.0g(溴甲基)-(三苯基正膦亞基)-酮(M.LeCorre，C.R.Acad.Sc.(C)273，81(1971))，并攪拌30分鐘。接著，滴入29.5ml環(huán)丙基溴化鎂在四氫呋喃中形成的1.6摩爾濃度的溶液(G.F.Reynolds等，有機(jī)化學(xué)雜志，23，1217(1958))，并在相同溫度下攪拌1.5小時。為了分離，將反應(yīng)混合物倒入冰/飽和氯化銨溶液中，接著用醋酸乙酯萃取。用硫酸鈉為有機(jī)相脫水，然后濃縮。用帶醋酸乙酯/丙酮(31)的硅膠色譜分離固體剩余物，得到5.6g熔點為152℃的標(biāo)題化合物2。
Ⅲ)(5E，7E，22E)-(1S，3R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)-22-膽甾四烯-24-酮3在105℃和氮?dú)獯嬖谙?，?.0g(1S，3R)-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-(20S)-甲酰基-9，10-閉聯(lián)孕甾(5E，7E，10(19))-三烯(CalverleyTetrahedron43，4609(1987))和12.091在46ml二甲亞砜中攪拌6小時。接著，在室溫下用醋酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，并用食鹽溶液沖洗。用硫酸鈉使有機(jī)相脫水并過濾。脫除溶劑后，用甲苯通過硅膠過濾殘余物。蒸去溶劑并用硅膠對殘余物進(jìn)行梯度色譜分離(甲苯/已烷(1)→甲苯)，產(chǎn)生3.6g非晶形固體標(biāo)題化合物3。
(5E，7E，22E)-(1S，3R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-環(huán)丙基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-酮4反應(yīng)進(jìn)行及處理同Ⅱ。
加料3.72g與Ⅱ相同的(20S)-甲?；衔?，5.6g2;在21ml二甲亞砜中。
產(chǎn)物2.2g晶體油狀的4，熔點97-98℃。
Ⅳ)(5E，7E，22E)-(1S，3R，24R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-24-醇5Ⅴ)(5E，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙-(特丁基二甲硅烷氧基)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-24-醇6將3.5g化合物3放入9ml四氫呋喃和20.6ml甲醇中，并與20.6ml的一種0.4摩爾濃度的甲醇CeCl3·7H2O溶液混合。在氮?dú)夥蘸捅錀l件，分份加入570mg硼氫化鈉。將懸浮液再在冰冷卻下攪拌40分鐘，然后加到冰/食鹽溶液中。用醋酸乙酯萃取水相，用水中和洗滌有機(jī)相，并在硫酸鈉上干燥。過濾并除去溶劑，得到3.5g油。用醋酸乙酯/已烷(19)在硅膠上進(jìn)行色譜分離，得到作為晶體油的534mg 5和692mg 6。
(5E，7E，22E)-(1S，3R，24R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-環(huán)丙基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇7(5E，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-環(huán)丙基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁5，7，10(19)，22-四烯-24-醇8反應(yīng)的進(jìn)行和處理與Ⅳ/Ⅴ相同。
加料在5.8ml THF和13.0ml甲醇中的2.2g 4，13.0ml 0.4摩爾濃度的CeCl3·7H2O溶液，359mg NaBH42.22g油作為粗產(chǎn)物。
產(chǎn)物1.05g7(與8合在一起)，
330mg8作為樹脂。
在下面的反應(yīng)中僅僅描寫8的進(jìn)一步的轉(zhuǎn)化;7也可以類似于下述方式繼續(xù)加工。
Ⅵ)(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-24-醇9使534mg5溶于75ml甲苯，加入89mg蒽和1滴三乙胺后，在室溫下用一個高壓水銀燈(HeraeusTQ150)穿過派萊克斯玻璃照射5分鐘。過濾、濃縮渾濁的反應(yīng)混合物，并用醋酸乙酯/已烷(19)在硅膠上色譜分離殘余物。得到410mg油狀的標(biāo)題化合物。
Ⅶ)(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-24-醇10模擬Ⅵ的條件，由680mg化合物6得到570mg油狀的標(biāo)題化合物。
(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-環(huán)丙基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇11使320mg8溶于45ml甲苯中，加入54mg蒽和1滴三乙胺后，在室溫下用一個高壓水銀燈(HereausTQ150)通過派萊克斯玻璃照射5分鐘。濃縮反應(yīng)混合物，殘余物(375mg)-一種由11和蒽組成的混合物-直接與四丁基氟化銨進(jìn)行反應(yīng)。
例1
(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇12使200mg化合物9溶于8.8ml四氫呋喃，使其與1.5ml由四丁基氟化銨和四氫呋喃形成的1摩爾濃度的溶液在60℃下放置50分鐘。用醋酸乙酯稀釋冷卻后的反應(yīng)混合物，并用碳酸氫鈉溶液和食鹽溶液洗滌。用水中和洗滌有機(jī)相，并用硫酸鈉脫水。過濾和蒸發(fā)溶劑，形成210mg油作為殘余物。用醋酸乙酯/已烷(21)在硅膠上色譜分離，得到124mg作為非晶形固體的標(biāo)題化合物12。UV(MeOH)λ＝210(ε＝14720)，264(14240)。
例2(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-9，10-閉聯(lián)-24a-同-5，7，10(19)，22-膽甾四烯-1，3，24-三醇13。
在例1的條件下，由200mg化合物10得到88mg熔點為128-129℃的標(biāo)題化合物13。
例3(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-24-環(huán)丙基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇14使375mg11的殘余物溶于14.2ml四氫呋喃，使其與2.39ml由四丁基氟化銨和四氫呋喃形成的1摩爾濃度的溶液在60℃和氮?dú)夥障路胖?0分鐘。為了分離，將冷卻后的反應(yīng)混合物澆入冷的碳酸氫鈉溶液中，接著用醋酸乙酯萃取。用硫酸鈉對有機(jī)相脫水，過濾并蒸去溶劑后，得到400mg樹脂狀的殘余物。用醋酸乙酯/已烷(21)在硅膠上色譜分離，產(chǎn)生150mg熔點為137-139℃的14。
例4(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-24-環(huán)戊基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇(16)Ⅰ)異戊基羰基亞甲基三苯基正膦15類似于制備異丁基羰基亞甲基三苯基正膦的方法，由異戊基甲基酮得到熔點為64-67℃的固體標(biāo)題化合物15。
Ⅱ)-Ⅴ)類似于例1中Ⅱ)-Ⅴ)所述的方法，由5.69g(1S，3R)-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-(20S)-甲?；?9，10-閉聯(lián)孕烷-(5E，7E，10(19))-三烯A和8.93g異戊基羰基亞甲基三苯基正膦15，得到熔點為119-120.5℃的固體標(biāo)題化合物16。
例5(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-24-環(huán)戊基甲基-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇18Ⅰ)環(huán)戊基甲基羰基亞甲基三苯正膦17類似于制備異丁基羰基亞甲基三苯正膦的所述方法，由環(huán)戊基丙酮得到熔點為84-87℃的晶體油狀標(biāo)題化合物17。
Ⅱ)-Ⅴ)類似于例1中Ⅱ)-Ⅴ)所述順序，由3.50g(1S，3R)-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-(20S)-甲酰基-9，10-閉聯(lián)孕烷-(5E，7E，10(19))-三烯A和5.68g17得到熔點為90-93℃的固體標(biāo)題化合物18。
例6(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-24-(2-乙丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇25例7(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-24-(2-乙丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇26Ⅰ)4-乙基-戊酰基亞甲基三苯基正膦19a)乙基-2-丁烯-1(2)-腈19a將170g(2摩爾)氰基醋酸、10g醋酸銨、10g醋酸和100ml苯一起放在一個1L的燒瓶中。向其加入172g(2摩爾)二乙基丙酮，并在用一個冷凝器回流的情況下非常小心地煮沸18小時。苯蒸發(fā)后，將殘余物放入1000ml 2n的HCL中，用乙醚萃取，分出有機(jī)相，用飽和的NaCL溶液洗滌，由Na2SO4脫水并濃縮。在18mmHg柱條件下對殘余物蒸餾2次。得到96.7g無色油狀的19。
沸點66-68℃，IRV(CN)2240-2212cm-1b)乙基-2-丁烷腈19b用乙醇使96.7g(886mMol)4-乙基-2-丁烯-1(2)-腈19a補(bǔ)充至體積為150ml。向其加入2g10%的pd/碳，并在50℃氫化7小時。用硅藻土過濾反應(yīng)混合物并濃縮，用400ml2n的HCL吸收，用乙醚萃取，脫水，濃縮，并在真空下蒸餾。得到50.5g無色油狀的物質(zhì)19b。
KP6-845℃，NMR(300MHz)[δ]0.92(6H，t)1.5(5H，m)2.34(2H，d)c)4-乙基-2-己酮19c將14.4g(600mMol)Mg屑和150ml二乙醚一起放在一個三頸瓶中。向其滴入85.2g(600mMol)溶于50ml乙醚中的碘甲烷。接著加入100ml苯，并蒸餾出一部分二乙醚。加入33.3g(300mMol)乙基-2-丁基腈19b，并回流煮沸5小時。用NH4CL溶液水解該反應(yīng)混合物，用乙醚萃取;用水洗滌，用Na2SO4脫水、濃縮并經(jīng)一個維格羅分餾柱真空蒸餾。得到12.4g無色油狀的19c。
KP1654℃，IRV(CO)1730cm-1NMR[δ]0.86(6H，t)1.30(4H，m)1.80(1H，m)2.13(3H，s)2.33(2H，d)d)溴甲基-4-乙基戊基酮19d將12g(93mMol)溶于60ml甲醇的4-乙基-2-己酮在0℃下與14.8g(93mMol)溴相混合，在0℃再攪拌30分鐘。接著在冷卻條件下加入100ml水，并在室溫下攪拌16小時。用飽和的食鹽溶液稀釋反應(yīng)混合物，用乙醚萃取，用飽和NaHCO3洗滌并用Na2SO4干燥脫水。過濾后蒸去溶劑并蒸餾殘留物。得到13.4g溴甲基-4-乙基戊基酮19d。
KP1254℃NMR(300MHz)[δ]0.86(6H，t)1.23(4H，m)1.86(1H，m)2.58(2H，d)3.88(2H，s)e)4-乙基戊酰基甲基三苯基溴化磷19e將13.4g(65mMol)溴甲基-4-乙基戊基酮19d加到17.3g(65mMol)三苯膦中。放置過夜后再加入76ml二氯甲烷并回流煮沸30分鐘。冷卻后用110ml乙醚稀釋反應(yīng)混合物，再用80ml二氯甲烷/乙醚(35)洗滌。得到26.4g溴化磷19e。
NMR(300MHz)[δ]0.78(6H，t)1.20(4H，m)1.77(1H，m)2.87(2H，d)5.7(2H，d)7.78(15H，m)f)4-乙基戊?；鶃喖谆交?9將26g(55mMol)溶于70ml甲醇的4-乙基戊?；谆交寤?9e用5.04g(60mMol)溶于70ml水的碳酸氫鈉稀釋，在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物加入水中，用二氯甲烷萃取，分離有機(jī)相，用水洗滌，用Na2SO4脫水并濃縮。用醋酸乙酯攪動殘余物。得到18.8g標(biāo)題化合物19。
NMR(300MHz)[δ]0.93(6H，t)1.52(4H，m)2.31(1H，m)2.48(2H，d)3.94(1H，寬d)7.48和7.88(15H，m)Ⅱ)(5E，7E，22E)-(1S，3R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-(2-乙基丁基)-9，10閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-酮(20)將3.4g(5.9mMol)(20S)甲?；衔顰和5.7g(14.7mMol)19在100ml甲苯中加熱至80℃過一夜。接著將反應(yīng)混合物加入水中，分出有機(jī)相，用飽和食鹽溶液洗滌，用Na2SO4脫水并濃縮。在硅膠上用甲苯色譜分離該油狀殘余物。得到1.1g油狀化合物20。
NMR(300MHz)[δ]0.53(3H，S)0.79(24H)1.2(3H，d)4.17(1H，m)4.48(1H，m)4.81(2H，d)5.78(1H，d)5.98(1H，d)6.39(1H，d)6.62(1H，q)Ⅲ)(5E，7E，22E)-(1S，3R，24R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-(2-乙基丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇21(5E，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-(2-乙基丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇22反應(yīng)的進(jìn)行和處理同Ⅲ例1/2所述。
加料1.1g(1.6mMol)溶于2.8mlTHF和6.3ml甲醇的20920mg(2.47mMol)溶于6.1ml甲醇的CeCl3×7H2O
263mg(6.96mMol)NaBH4產(chǎn)物油狀的340mg21和140mg22。
21和22NMR(300MHz)[δ]0.50(3H，s)0.7-0.88(24H)4.05(1H，m)4.14(1H，m)4.48(1H，m)4.91(2H，d)5.32(1H，dd)5.47(1H，dd)5.77(1H，d)6.40(1H，d)(Ⅳ)(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24R)-1，3-雙-(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-(2-乙基丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇23將340mg21溶于60ml甲苯，加入53mg(0.30mMol)蒽和1滴三乙胺后，在室溫下用一個高壓水銀燈(選自TQ150)通過派萊克斯玻璃照射5分鐘。過濾混濁的反應(yīng)混合物，并濃縮。得到340mg標(biāo)題化合物23。
(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-1，3-雙(特丁基二甲基硅烷氧基)-24-(2-乙基丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-24-醇24類似于Ⅳ)所述的條件，由130mg化合物22得到130mg油狀的標(biāo)題化合物24。
Ⅴ)將340mg溶于10ml四氫呋喃的化合物23與2ml在四氫呋喃的1n四丁基氟化銨在55℃下保持1小時。用醋酸乙酯稀釋冷卻后的反應(yīng)混合物，并用碳酸氫鈉溶液和食鹽溶液洗滌。用水中和洗滌有機(jī)相，由硫酸鈉脫水并濃縮。用醋酸乙酯在硅膠上色譜分離并蒸發(fā)濃縮后，用已烷吸收殘余物并過濾。得到110mg作為非晶形固體的標(biāo)題化合物25。
熔點147-154℃。
(5Z，7E，22E)-(1S，3R，24S)-24-(2-乙基丁基)-9，10-閉聯(lián)膽汁-5，7，10(19)，22-四烯-1，3，24-三醇26在制備25的條件下，由130mg化合物24得到40mg熔點為135-138℃的標(biāo)題化合物26。
權(quán)利要求
1.式Ⅰ的24-同-維生素-D-衍生物在制備藥物中的應(yīng)用 式中R1為一個氫原子、一個羥基R2和R3各自獨(dú)立地為一個有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或者共同為一個與碳原子25相連的有3至9個碳原子的飽和碳環(huán)，R5和R6各自獨(dú)立地為一個氫原子，A和B各為一個氫原子或者共同為一個第二鍵，n為1、2、3、4或5。
全文摘要
本文描述了式I的新24-同一維生素-D-衍生物，式中R
文檔編號A61P35/00GK1106666SQ94115050
公開日1995年8月16日 申請日期1994年8月18日 優(yōu)先權(quán)日1989年10月2日
發(fā)明者蓋爾拉德·克舒, 根特·尼夫, 卡迪加·舒爾茨, 馬休斯·布勞迪格姆, 露斯·瑟羅夫-?？说? 皮特·拉赫 申請人:舍林股份公司