專利名稱:含植物來源精油作為活性組分的抗焦慮組合物、含該組合物的抗焦慮藥及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含植物來源精油作為活性組分的抗焦慮組合物，一種含該組合物的抗焦慮藥及其生產(chǎn)方法。更詳細(xì)地，本發(fā)明涉及一種含抗焦用的經(jīng)皮吸收型組合物，一種含該組合物的抗焦慮藥及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
植物來源的精油通常都具有芳香性，其中含有多種例如萜類和醇類的化合物。為人們所熟知的是，含有多種這類化合物的芳香性成分也具有緩解緊張或鎮(zhèn)靜的功效；因此，自古以來，這些成分就在多種儀式聚會(huì)、治療等方面得到廣泛的應(yīng)用。
有很多種植物都可以作為提取精油的原材料；由于具有出眾的芳香性，玫瑰也被用作是生產(chǎn)香水的原材料。在歐洲，精油自古就用于治療領(lǐng)域，并且在1930年以后，也建立了以精油為內(nèi)用或外用擦劑的芳香性療法。芳香性療法中最常用的是從玫瑰中提取的精油(在下文中稱為“玫瑰油”)。
另一方面，現(xiàn)代社會(huì)中，越來越多的人由于壓力而罹患一些特定疾病，如焦慮性神經(jīng)機(jī)能癥和抑郁癥。為了治療這些疾病，人們開發(fā)了很多藥物，例如抗焦慮藥、抗抑郁藥等。
作為這類疾病的治療藥物，常常使用苯并二氮卓類化合物。其起效的機(jī)制是改善位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的γ-氨基丁酸(GABA)受體與GABA之間的親和性以增加它們之間的結(jié)合率，從而降低神經(jīng)細(xì)胞的興奮性。
迄今為止，人們已開發(fā)出了多種用于檢測(cè)抗焦慮、抗抑郁及其他療效的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。通過應(yīng)用這些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，能夠以較理想的準(zhǔn)確性來預(yù)測(cè)對(duì)于人的治療效果。
本專利的發(fā)明者通過使用其中的一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，證實(shí)了當(dāng)以高濃度(100至800mg/kg)腹腔給藥后，玫瑰油將產(chǎn)生抗心理沖突的效果。(見非專利文獻(xiàn)1)。
生物工業(yè)月刊(Monthly Bioindustry)，2004年1月，第58-63頁，CMC出版社

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的問題苯并二氮卓(benzodiazepine)具有不低于100的較廣的治療范圍，且比巴比妥酸和其他鎮(zhèn)靜藥的治療范圍大10倍。因此，對(duì)于病人來說，服用該類藥物導(dǎo)致呼吸抑制的風(fēng)險(xiǎn)很低。然而，藥物具有使病人對(duì)外界環(huán)境刺激的反應(yīng)性降低、不能迅速且恰當(dāng)?shù)刈鞒龇磻?yīng)的副作用。
除此之外，當(dāng)病人在短時(shí)間內(nèi)集中服用了具有較好相容性(compatibility)的苯并二氮卓類藥物后，性格可能會(huì)發(fā)生改變，比如，變得冷漠。另外，如果長(zhǎng)期服用苯并二氮卓類藥物，病人也會(huì)對(duì)藥物產(chǎn)生依賴性。
當(dāng)產(chǎn)生任何一種副作用后，最好停止服用藥物。然而，由于血藥濃度應(yīng)保持在有效濃度以上，所以口服給藥將比其他的給藥途徑所使用的劑量更大。因此，在藥物完全消除至體外之前，藥物的影響還會(huì)殘存。
雖然苯并二氮卓類被認(rèn)為是比較安全的藥物，但該類藥物仍有許多副作用。因此，對(duì)于開發(fā)劑量低、療效好、并具有高度安全性的藥物仍有強(qiáng)烈的需求。
本發(fā)明的目的在于提供一種以植物精油為有效成分的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，含有該組合物的抗焦慮藥及其生產(chǎn)方法。
解決問題的方法在這樣的情況下，本發(fā)明的發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，制成經(jīng)皮吸收制劑的玫瑰油即使在劑量很低時(shí)也能夠發(fā)揮良好的抵抗焦慮或抗壓力效果。之后，他們就完成了本發(fā)明的研究工作。
也就是說，本發(fā)明是一種經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥，其活性成分為玫瑰精油(以下稱為“玫瑰油”)。由于該經(jīng)皮吸收型的抗焦慮藥以玫瑰油為活性成分，因此，不會(huì)產(chǎn)生藥物依賴性以及任何因服用傳統(tǒng)藥品而引發(fā)的副作用。
以下文中所提到的玫瑰為原材料，得到了具有芳香性高的花精油(absolute)。作為花精油中的典型例子，下文將介紹奧圖玫瑰精油(Rose Otto)和玫瑰精油(Rose Absolute)。
在純品中，較常使用的是玫瑰精油。奧圖玫瑰精油是通過水蒸汽蒸餾而獲得的，在此過程中就除去了大多數(shù)的苯乙醇成分。相反地，由于萃取是提取玫瑰精油的方法，因此其中保留了苯乙醇成分。
本發(fā)明中經(jīng)皮吸收型的抗焦慮藥組分最好包含玫瑰精油、精油吸附劑，游離水除去劑，精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑，發(fā)熱劑(exothermic agent)，熱傳導(dǎo)抑制劑，吸附促進(jìn)劑，成片基質(zhì)(a base for sheet formation)和壓接用薄片(a sheet for pressure bonding)。以這樣的構(gòu)成制備的經(jīng)皮吸收型藥物由于玫瑰油的緩釋作用而將在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)發(fā)揮藥效。
這里所用的精油吸附劑是疏水主鏈上至少含有一個(gè)親水取代基的樹脂，具體地，精油吸附劑最好為皂化值為98.0至98.5之間的聚乙烯醇類水吸附樹脂。
游離水除去劑優(yōu)選丙烯酸系吸水性樹脂，所述吸水性樹脂優(yōu)選吸水容量是干燥樹脂體積的400至800倍。精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑最好使用表面積在200至800m2/g之間的多孔性碳。
發(fā)熱劑(exothermic agent)最好采用孔徑在0.1至0.8之間的沸石。最好用多糖類化合物作為熱傳導(dǎo)抑制劑。
最好以單萜類化合物作為吸附促進(jìn)劑，尤其以l-薄荷醇或檸檬烯為佳。
另外，最好以皂化值在88.0左右的熱塑樹脂為成片基質(zhì)。
另外，本發(fā)明還提供一種經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物的制備方法，該方法包括以下步驟按預(yù)定重量稱量玫瑰精油，將精油和精油吸附劑混合以使精油涂敷在精油吸附劑上；將對(duì)精油進(jìn)行吸附和解吸附的多孔性碳加入到具有精油涂層的吸附劑中，使形成被多孔碳材料所涂敷的碳涂層顆粒；均勻攪拌預(yù)定量的碳涂層顆粒、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑和成片基質(zhì)，從而制備具有均一厚度的片層。然后進(jìn)行加熱，制備成抗焦慮藥用組合物。
通過使用上述本發(fā)明的生產(chǎn)方法，可獲得片狀經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥，該藥物均一地含有理想含量的活性成分。將抗焦慮組合物的經(jīng)皮吸收制劑切成所定大小的薄片后，其中所含的活性成分將符合不同病人的體質(zhì)狀況。
本發(fā)明還提供一種生產(chǎn)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的方法，該方法包括以下步驟按預(yù)定重量稱量玫瑰精油；將精油和精油吸附劑混合以使精油涂敷在精油吸附劑上；將對(duì)精油進(jìn)行吸附和解吸附的多孔性碳加入到具有精油涂層的吸附劑中，使形成被多孔碳材料所涂敷的碳涂層顆粒；將預(yù)定量的碳涂層顆粒、發(fā)熱劑(exothermic agent)、熱傳導(dǎo)抑制劑和成片基質(zhì)進(jìn)行混合，從而制備具有均一厚度的片層；加熱以形成抗焦慮藥用組合物；將經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥切成預(yù)定大小的薄片后，將其夾在兩片片狀材料中間并將片狀材料的四邊進(jìn)行熱粘合。
通過使用上述本發(fā)明的生產(chǎn)方法后，涂覆于精油吸附劑表面的玫瑰精油被能夠?qū)瓦M(jìn)行吸附/解吸附的碳顆粒所覆蓋，從而形成碳涂層顆粒。另外，碳涂層微粒與發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑、成片基質(zhì)等一起形成片狀組合物。然后用片狀材料覆蓋所述組合物。通過這樣的結(jié)構(gòu)，可生產(chǎn)出一種經(jīng)皮吸收型藥物制劑，其中，含有藥效成分的玫瑰精油不與皮膚直接接觸，而是長(zhǎng)時(shí)間釋放玫瑰精油。該經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥沒有目前的抗焦慮藥的副作用，并且，還具有將該藥物移開給藥位置后給藥即可停止的優(yōu)點(diǎn)。
發(fā)明的效果如上所述，本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥在低劑量時(shí)即可起效，且由于在使用過程中不產(chǎn)生特別的副作用，因此具有高度的安全性。另外，該藥物的優(yōu)點(diǎn)還在于給藥部位不受限制。
除此之外，根據(jù)本發(fā)明提供的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的生產(chǎn)方法，可以很方便地生產(chǎn)出該經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥。特別地，該藥物中使用精油的吸附/解吸附作為碳涂層顆粒，因此緩釋效果高。
根據(jù)本發(fā)明所提供的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，可通過將抗焦慮藥用組合物切成合適的大小，從而調(diào)整至每個(gè)病人所需要的藥物劑量。
另外，根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，也可通過改變碳涂層顆粒的含量來生產(chǎn)具有理想含量活性成分的膏藥制劑。
圖1是用氣相色譜對(duì)玫瑰精油進(jìn)行分析的色譜圖；圖2是顯示樣品放置在25℃下，芳香度變化的圖；圖3A是表示無壓力情況下高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖；圖3B是表示有壓力情況下高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖；圖4A是表示無壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(運(yùn)動(dòng)性)(hole-board test)結(jié)果的圖；圖4B是表示無壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(窺視小孔的次數(shù))(head-dip)結(jié)果的圖；圖4C是表示無壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(站立次數(shù))結(jié)果的圖；圖4D是表示無壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(行為發(fā)生潛伏時(shí)間)結(jié)果的圖；圖5A是表示有壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(運(yùn)動(dòng)性)結(jié)果的圖；圖5B是表示有壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(窺視小孔的次數(shù))結(jié)果的圖；圖5C是表示有壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(站立次數(shù))結(jié)果的圖；圖5D是表示無壓力情況下孔板實(shí)驗(yàn)(行為發(fā)生潛伏時(shí)間)結(jié)果的圖；圖6A是表示當(dāng)涂抹于正常皮膚時(shí)，含玫瑰油的經(jīng)皮吸收型藥物的經(jīng)時(shí)變化的圖；圖6B是表示當(dāng)涂抹于受損皮膚時(shí)，含玫瑰油的經(jīng)皮吸收型藥物的經(jīng)時(shí)變化的 圖7A是表示雄性大鼠在經(jīng)皮吸收型毒性試驗(yàn)期間的體重變化的圖；圖7B是表示雌性大鼠在經(jīng)皮吸收型毒性試驗(yàn)期間的體重變化的圖；圖8A是表示雄性大鼠在經(jīng)皮吸收型毒性試驗(yàn)期間攝食量的變化的圖；以及圖8B是表示雌性大鼠在經(jīng)皮吸收型毒性試驗(yàn)期間攝食量的變化的圖；具體實(shí)施方式
下文詳細(xì)解釋本發(fā)明的內(nèi)容。
以鮮玫瑰花為原材料，提取得到浸膏；由此制備成本發(fā)明中使用的玫瑰精油。提取方法如下將浸膏溶于高純度的溫乙醇中，進(jìn)行再次萃取；在-20℃到-25℃下冷卻再萃取所得到的物質(zhì)，從而去除一些不溶性的物質(zhì)(諸如蠟等)；然后將乙醇蒸干。這也可稱為玫瑰原精。
這里，浸膏被定義為用純化后的溶劑(一般為正己烷)從鮮花提取物中獲取殘余物得到浸膏，在室溫中加以攪拌，然后在減壓狀態(tài)下除去用于萃取的溶劑。浸膏中除香味成分外，還含有大量的蠟。然而，幾乎不含樹脂成分，并且樹脂成分的組成與油性樹脂或類樹脂有較大的不同。
用于生產(chǎn)玫瑰精油的玫瑰屬于薔薇科的薔薇屬植物，有100至200種分布于北半球的溫帶和亞寒帶。其中，包括作為園林品種的親本種的50至60種玫瑰，不過，重要的物種大約有15種左右。過去，作為古代歐洲的玫瑰花的百葉薔薇(Rose centifolia L.)，以及大馬士革玫瑰(Rose damacscena Mill.)，紅玫瑰(Rosa gallicia L.)和白玫瑰(Rosa alba L.)常用作制備香水的原材料。然而，最近以百葉薔薇(Rose centifolia L.)和大馬士革玫瑰(Rosedamacscena Mill.)為制備香水的主要原材料。
其中，百葉薔薇(Rose centifolia L.)的英語名稱是西洋玫瑰(cabbage rose)。有多種玫瑰都被稱為centifolia，但適合制備香水的玫瑰品種自古以來都在法國(guó)培育栽種。
另外，Rose damacscena Mill.一般都稱為大馬士革玫瑰，且這種玫瑰具有濃郁的芳香性并且富含芳香油組分。直到現(xiàn)在，這種玫瑰現(xiàn)在在保加利亞附近也有栽培。
當(dāng)用石油醚處理在法國(guó)或摩洛哥生長(zhǎng)的百葉薔薇(Rose centifolia L.)時(shí)，浸膏的得率為0.24％到0.26％。從浸膏中，可以55％-65％的得率得到玫瑰原精。不僅在法國(guó)，在摩洛哥及埃及也出產(chǎn)這類玫瑰，并且也可從在土耳其栽培的大馬士革玫瑰中獲取這類組分。在這些不同的來源中，高質(zhì)量的品種是在法國(guó)南部格拉斯生長(zhǎng)的玫瑰，且以名稱“我的玫瑰”(Rose de Mai)而聞名。
本發(fā)明所使用的玫瑰油就是上文中所提到的玫瑰原精，其中含有芳樟醇、β-苯乙醇、香茅醇、橙花醇、香葉醇、甲基丁香酚等，還有玫瑰氧化物、玫瑰呋喃(ロ一ズフラン)、damascone、大馬酮等少量成分。
至于玫瑰原精，可能使用由香水生產(chǎn)商，如Ogawa&CO.有限公司所生產(chǎn)的市售商品。
l-薄荷醇(5-甲基-2-(1-甲乙基)環(huán)己醇)通常被稱為薄荷醇(薄荷腦)。這個(gè)化合物在化學(xué)結(jié)構(gòu)中有12個(gè)異構(gòu)體，薄荷醇所特有的清涼香味是天然的或合成的l-薄荷醇。l-薄荷醇是無色柱狀晶體或針晶，可溶于乙醇，難溶于水，并且可在室溫中逐漸升華。
為了獲得天然的薄荷醇，首先要冷卻薄荷油，然后將析出的結(jié)晶離心分離得到薄荷腦。從香茅油的分餾組分中可以得到d-香茅醛，。將d-香茅醛轉(zhuǎn)變?yōu)閘-異胡薄荷醇，然后氫化從而得到合成的薄荷醇。
可使用上述兩個(gè)方法中的任何一個(gè)來獲取合成的薄荷醇在其中的一個(gè)方法中，可從蒎烯中獲取桂葉烯(myrcene)，以其作為原材料，通過使用特定的催化劑先獲取具有光學(xué)活性的香茅醛，不對(duì)稱地合成薄荷醇，而不進(jìn)行光學(xué)分離。另外一方面，也可以從氫化麝香草酚中獲取薄荷醇混合物，通過光學(xué)分離得到薄荷醇。
本發(fā)明中經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所使用的精油吸附劑即為作為上述玫瑰精油的載體的樹脂，其中，該類樹脂應(yīng)具有疏水性主鏈和一定數(shù)量的親水性取代基，例如，最好使用皂化值在98.0至98.5之間的聚乙烯醇(PVA)系吸水性樹脂。如果皂化值低于98.0，則載體表面會(huì)成膠狀，并將失去作為吸附載體的功能。然而，當(dāng)皂化值處于98.0到98.5的范圍之間時(shí)，該表面就不會(huì)成膠狀，也將保留作為吸附載體的功能。
具體地，包括Shin-Etsu波瓦爾(Poval)C-17GP，波瓦爾A(由Shin-Etsu化學(xué)有限公司生產(chǎn))等。最好使用Shin-Etsu波瓦爾C-17GP或波瓦爾A。
本發(fā)明提供的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥中使用的游離水除去劑(release water remover)即用于除去在皮膚上給予經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥后存在于皮膚上的水分。最好使用丙烯酸系吸水性樹脂，這是因?yàn)檫@類樹脂通常具有高性能吸水性，并且在下文所述的組合物生產(chǎn)過程中的加熱處理時(shí)具有良好的粘著性。
在經(jīng)皮吸收型制劑應(yīng)用于皮膚表面的某一區(qū)域時(shí)，丙烯酸系吸水性樹脂將吸附該區(qū)域所生成的水分，且在該類樹脂中不僅是一種特定的樹脂具有這類功能。所使用的吸水性樹脂最好能吸附400倍至800倍自身體積的水分。如果吸水能力低于400倍自身體積，則樹脂無法吸附所有生成的水分；不過吸水能力也沒有必要高于800倍。該類樹脂的例子包括Sanfresh(Sanyo化工公司)、Aquakeep(Sumitomo Seika化學(xué)有限公司的注冊(cè)商標(biāo))及其類似商品。其中，最好使用破碎狀(fractured form)的Sanfresh，因?yàn)榕c球狀顆粒型Aquakeep相比，該種樹脂具有更好的粘看性。
在本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所使用的精油吸附解吸附調(diào)節(jié)劑即一種多孔性碳材料，該多孔性碳在上文所述的玫瑰精油表面上形成了一層薄層，從而可以對(duì)精油的吸附和解吸附進(jìn)行調(diào)解，例如，能吸附多種分子的活性炭。最好使用表面積為200到1000m2/g的活性炭；這是因?yàn)椋褂迷擃惢钚蕴?，則每份質(zhì)量所需吸附的精油量較少，從而不難對(duì)精油進(jìn)行解吸附。應(yīng)用表面積為400到800m2/g的活性炭尤佳。
在本發(fā)明中，上述細(xì)?；钚蕴靠墒褂檬惺凵唐?。比如，Shirasagi P(武田制藥株式會(huì)社)等產(chǎn)品。其中，最好使用Shirasagi P，這是因?yàn)槠湮絽^(qū)域不太大且價(jià)格合理。
本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所采用的發(fā)熱劑(exothermic agent)即一種可吸附空氣中的水分并產(chǎn)生吸附熱的材料。吸附水分的過程中將產(chǎn)生熱能，通過利用所述熱能，已吸附在載體吸附劑上的精油被解吸附。具體地，可例舉沸石。
在本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所采用的沸石是孔徑為0.1到0.8nm的合成材料；因?yàn)樗梢蕴峁┖线m的吸附能及解吸附能。使用孔徑為0.3到0.4nm的沸石尤佳。只要孔徑符合標(biāo)準(zhǔn)，可使用市場(chǎng)上購(gòu)買的沸石，如Zeolum(Tosoh集團(tuán))等。
本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所采用的熱傳導(dǎo)抑制劑是一種抑制熱量傳導(dǎo)的化合物，所述熱量是在游離水吸附到游離水吸附劑上的過程中生成的。熱傳導(dǎo)抑制劑的實(shí)例即一些多糖化合物，如殼聚糖和纖維素等。
當(dāng)藥物制劑中含有色素時(shí)，如果使用殼聚糖作為熱傳導(dǎo)抑制劑，有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)就是殼聚糖可以用作為該色素的載體。為了抑制熱量的傳導(dǎo)，也可以使用纖維素及其類似物來代替殼聚糖。
本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所采用的吸附促進(jìn)劑即用來促進(jìn)制劑中精油吸收的單萜類化合物。可作為吸附促進(jìn)劑的包括l-薄荷醇及其它萜類化合物，以及市售品。其中，l-薄荷醇具有可去除殘留在皮膚上的游離水分、然后為精油的經(jīng)皮吸收提供條件的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明中，經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所采用的成片基質(zhì)為使上述抗焦慮藥組合物形成片狀的基質(zhì)，最好使用皂化值大約為88.0左右的熱塑樹脂。為了制備經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥，抗焦慮組合物須經(jīng)過加熱處理。這時(shí)，優(yōu)選樹脂優(yōu)選具有這樣的特性即使在低溫(如180℃)下進(jìn)行粘合時(shí)，樹脂既不會(huì)從碳涂層微粒中釋放玫瑰油，也不會(huì)阻塞樹脂微粒的空隙。
具體地，例如，優(yōu)選使用Gohselan L-0301(注冊(cè)商標(biāo)，日本合成化學(xué)株式會(huì)社)，這是因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品在180℃左右的低溫情況下也有良好的粘合性。
本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥可以通過將精油、精油吸附劑、游離水分除水劑(thereleased water remover)、精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑、吸附促進(jìn)劑和成片基質(zhì)按照以下步驟進(jìn)行混合而制得。其生產(chǎn)方法如下所述。
首先，稱取需要量的精油，然后在尺寸合適的容器中使其與PVP混合以對(duì)PVP顆粒的表面進(jìn)行包被。隨后，按需對(duì)活性炭進(jìn)行稱重，加入混合物中；活性炭將覆蓋在精油涂層的PVP表面，從而制得炭涂層顆粒A。
然后，稱取薄荷醇。由于薄荷醇是固體，因此將所稱重的薄荷醇稱為顆粒B。
混合微粒A和微粒B，然后繼續(xù)加入熱傳導(dǎo)抑制劑和成片基質(zhì)進(jìn)行混合，從而制備均質(zhì)混合物。之后，將兩片壓接用薄片夾在混合物兩面，加熱制得本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的片狀組合物。
將混合物夾在壓接用薄片中間之后，最好將夾好的混合物加熱至160℃～200℃，180℃尤佳。通過在上述溫度范圍后加熱該混合物，成片基質(zhì)和樹脂將相互粘合，并且兩者之間保持一定的間隔。本發(fā)明所提供的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥在皮膚表面進(jìn)行給藥，這些間隔對(duì)于從炭涂層顆粒釋放到皮膚表面的在玫瑰油分子起到島嶼(isle)的作用，玫瑰油分子通過這些間隔被釋放到皮膚上并且被經(jīng)皮吸收。另外，當(dāng)加熱混合物至一個(gè)較高的溫度(如230℃)時(shí)，由于樹脂熔化，因此樹脂間的空隙將被阻塞，所以上述的玫瑰油分子無法釋放到皮膚表面上。
最好采用Kasenshi紙張(基本重量為18到20克)作為壓接用薄片(sheet for contactbonding)。應(yīng)用該紙張有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，即，碳涂層顆粒的壓接比率較高。
和組合物壓接的薄片由兩片片層材料夾在中間，該片層材料由大小合適的無紡布料制成；隨后，將片層的四邊進(jìn)行熱封合，從而制備本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥。
片層材料最好選自紙、紡織布和無紡布。其中，由于具有良好的滲透性，因此無紡布更佳。經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥所含的玫瑰油以氣態(tài)釋放，玫瑰油將在成片基質(zhì)顆粒之間的空隙間流動(dòng)，從布料中滲透出去。
如上所述，制備得到本發(fā)明中的抗焦慮藥組合物和抗焦慮藥。
實(shí)施例通過以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。然而，本發(fā)明并不僅限于這些實(shí)施例。
(實(shí)施例1)(1)試劑在生產(chǎn)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥組合物以及經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的過程中，需要使用以下試劑。
(1-1)精油從Ogawa&CO有限公司購(gòu)得的玫瑰油(Rose de MaiAbsolute)和l-薄荷醇。
(1-2)其他試劑PVP、Shin-Etsu波瓦爾C-17GP購(gòu)自Shin-Estu化學(xué)有限公司，Goselan L-3031購(gòu)自日本合成化學(xué)株式會(huì)社。丙烯酸系吸水樹脂Sunfresh(注冊(cè)商標(biāo))購(gòu)自Sanyo化工公司?；钚蕴浚琒hirasagi P購(gòu)自武田制藥株式會(huì)社。沸石Zeolum(注冊(cè)商標(biāo))購(gòu)自Tosoh公司。殼聚糖，Koyo殼聚糖購(gòu)自Koyo化學(xué)有限公司。
(實(shí)施例2)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥組合物和經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的制備(2-1)碳涂層微粒的制備根據(jù)下文表1中的配方制備涂層顆粒。需要注意的是，在制備藥物制劑的過程中(制劑的名稱從ANX-A到ANX-C)，應(yīng)該對(duì)每份試劑加以控制，以便含有1.1mg的通過使用表1所示量的碳涂層顆粒。
表1
以ANX-A為例。按表1所示的量稱取玫瑰油，然后放入500ml的透明玻璃密閉容器中。往容器中加入PVA(Shin-Etsu波瓦爾C-17GP)，在室溫下和玫瑰油混合，制得以精油涂層的顆粒。隨后，按照表1所示的量將活性炭加入容器中，然后混合。如上所述，制得碳涂層顆粒；在室溫中放入密封的容器中進(jìn)行保存，如可放入一個(gè)有磨口瓶塞的玻璃容器中。(2-2)抗焦慮藥經(jīng)皮吸收型組合物的制備如上述(2-1)，制得三種碳涂層顆粒，將碳涂層顆粒和下述表2所示量的基質(zhì)相混合，制成經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥組合物。
表2
如下混合上述碳涂層顆粒和基質(zhì)。
首先，依次加入Sanfresh(Sanyo化工有限公司)、Zeolum(沸石，Tohsoh集團(tuán))、l-薄荷醇(Ogawa&CO有限公司)以及Koyo殼聚糖(Koyo有限公司)，混合，從而制得基質(zhì)。隨后，對(duì)按上述(2-1)制得的碳涂層顆粒1-3根據(jù)表2所列的量進(jìn)行稱重，和基質(zhì)混合。之后，加入Koyo殼聚糖、Shiarasagi P和Gohselan，然后混合。需要注意的是，在進(jìn)行熱壓接時(shí)(contact bonding)，組合物中精油的損失率可估計(jì)為20％，從而可以對(duì)質(zhì)量進(jìn)行計(jì)算。
這里，需要把含基質(zhì)和碳涂層顆粒的混合物在熱壓接用薄片上以均勻的厚度鋪開，然后將另一張熱壓接用薄片放在其上，將混合物夾在中間。將夾好的混合物在加熱狀態(tài)下進(jìn)行壓接，從而制成片狀抗焦慮藥組合物。例如，可以合適的大小將片狀組合物切割成幾片，無紡布材料也切成可以覆蓋住薄片的合適尺寸，夾在薄片兩邊。然后，將無紡布料的四側(cè)進(jìn)行加熱封合，制成本發(fā)明的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥。根據(jù)順序先后，將每個(gè)配方依次命名為ANX-A至ANX-C。
含ANX-A至ANX-C組合物的薄片大小都為2cm×4cm。ANX-A的薄片內(nèi)含有1.4mg的玫瑰油，ANX-B的薄片內(nèi)有1.05mg的玫瑰油，ANX-C內(nèi)有0.87mg玫瑰油。
(實(shí)施例3)對(duì)玫瑰油組合物進(jìn)行分析以氣相色譜法(GC)和氣-質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)對(duì)玫瑰油中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。(3-1)氣相色譜法(GLC)在以下條件下進(jìn)行氣相色譜(GLC)分析氣相色譜(GLC)HITACHI G-3000(日立有限公司)
色譜柱TC-WAX Bonded(內(nèi)徑為60m×0.32mm)柱溫40℃至220℃(升溫速率為3℃/分鐘)進(jìn)樣口溫度250℃載氣氦氣(0.8kg/cm2)FID氫氣1.4kg/cm2空氣1.1kg/cm2為了對(duì)成分進(jìn)行鑒別，以相似的方式將內(nèi)標(biāo)苯乙醇和纖維素進(jìn)樣，并分別測(cè)量其保留時(shí)間。根據(jù)保留時(shí)間，可以對(duì)玫瑰油中所含有的成分進(jìn)行確認(rèn)。
圖1即氣相色譜圖。如圖1所示，保留時(shí)間41.943分鐘時(shí)的色譜峰為香茅醇，48.176分鐘的色譜峰為苯乙醇。
(3-2)高效液相色譜(HPLC)高效液相色譜的色譜條件如下色譜柱Wakosil 5C18φ4.0×250mm(和光純藥株式會(huì)社)YMC Pack ODS-Aφ20.0×250mm(Yamamura化學(xué)有限公司)泵PU980Intelligent HPLC泵(JASCO公司)檢測(cè)器UV-970Intelligent UV/VIS實(shí)驗(yàn)器(JASCO公司)色譜自動(dòng)記錄器SIC色譜自動(dòng)記錄器12(Showa Denko K.K.)梯度設(shè)備LG-980-02 Trenary梯度設(shè)備(JASCO集團(tuán))HPLC的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明，圖1中41.943分鐘的色譜峰為香茅醇，48.176分鐘的色譜峰為苯乙醇。
(實(shí)施例4)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥組合物的緩釋實(shí)驗(yàn)以芳香顆粒量為指標(biāo)，對(duì)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的揮發(fā)性成分的釋放進(jìn)行檢測(cè)。
例如，使用經(jīng)皮吸收型的抗焦慮藥和上述4片實(shí)施例2中所生產(chǎn)的藥物。用便攜式氣味監(jiān)測(cè)器OD-85(RIKENKIKI有限公司)在0小時(shí)，3小時(shí)，6小時(shí)，12小時(shí)和24小時(shí)對(duì)芳香性顆粒的量進(jìn)行2分鐘的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的室溫為25℃，濕度為30±10％。結(jié)果示于表3和圖2。
表3
如表3和圖2所示，從測(cè)量開始后3小時(shí)，芳香性顆粒的數(shù)量急劇下降，到6小時(shí)時(shí)達(dá)到最低值。然而，之后緩慢地上升。24小時(shí)時(shí)，結(jié)果表明，芳香性顆粒仍在持續(xù)釋放。
在數(shù)量實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后，l-薄荷醇香味最強(qiáng)烈，不過3小時(shí)之后香味變得微弱。因此，認(rèn)為l-薄荷醇的大部分在3小時(shí)內(nèi)被釋放出來，在6小時(shí)之后釋放量增加的揮發(fā)性成分是玫瑰油中成分。
(實(shí)施例5)在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中的抗焦慮測(cè)試高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)是藥物抗焦慮效果的評(píng)價(jià)系統(tǒng)之一，應(yīng)用該實(shí)驗(yàn)來評(píng)價(jià)對(duì)小鼠的抗焦慮療效。
在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中，所使用的設(shè)備中有一個(gè)由兩條無墻通道交叉所形成的路口；記錄在一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)入該路線的小鼠數(shù)量以及小鼠在那里探尋路線所花的時(shí)間。正常的小鼠幾乎不會(huì)進(jìn)入該無墻通道，并且它們會(huì)花費(fèi)大多數(shù)的時(shí)間探尋有墻的道路。
另一方面，試驗(yàn)結(jié)果表明，服用了抗焦慮藥物的小鼠會(huì)進(jìn)入無墻道路，且在無墻道路的探尋時(shí)間明顯增加。。因此，記錄在一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)入路線的小鼠的數(shù)量和探尋道路所花的時(shí)間，以此為指標(biāo)可評(píng)價(jià)ANX-C的抗焦慮療效。
(5-1)實(shí)驗(yàn)方法(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在本實(shí)驗(yàn)中所使用的是5到6周齡的雄性ICR小鼠。
(2)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)使用自動(dòng)高架十字迷宮設(shè)備。將小鼠置于迷宮中央，使它的頭部直接面對(duì)著無墻道路的方向，然后通過錄像監(jiān)測(cè)器連續(xù)5分鐘觀察小鼠的行為。測(cè)量小鼠探尋無墻道路的次數(shù)，和小鼠位于無墻道路中的時(shí)間；當(dāng)小鼠的四肢進(jìn)入無墻道路時(shí)即可認(rèn)為小鼠進(jìn)入了道路。對(duì)于有墻道路的實(shí)驗(yàn)方法也是類似的。
通過下列公式(1)和(2)對(duì)所得到的結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
進(jìn)入無墻道路的次數(shù)所占的百分比(％)＝進(jìn)入無墻道路次數(shù)/進(jìn)入有墻和無墻道路總次數(shù)×100...............(1)在無墻道路中的停留時(shí)間的百分比(％)＝在無墻道路中的停留時(shí)間/在有墻和無墻道路中停留的總時(shí)間×100...............(2)
(3)給藥將小鼠分為2組。用剃須刀剃去給藥組小鼠(n＝11)后背上的毛，然后將根據(jù)實(shí)施例1生產(chǎn)的含玫瑰油的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥(ANX-C)的四角粘合在小鼠后背24小時(shí)。如上所述，以相似的方法給予安慰劑。
給藥后，為了避免藥物從小鼠后背上脫落，所有的小鼠都必須分別關(guān)在單個(gè)鼠籠中。
(4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)對(duì)變量進(jìn)行一元分析，然后應(yīng)用t-檢驗(yàn)，進(jìn)行具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著差異分析。和安慰劑組相比，顯著性水平＜0.05，即可判斷為存在顯著性差異。統(tǒng)計(jì)結(jié)果示于圖3A和3B。
(5-2)結(jié)論在圖3中，空心柱代表的是安慰劑組，其他的柱狀物代表的是實(shí)驗(yàn)組。如圖3A所示，在安慰劑組和實(shí)驗(yàn)組之間，進(jìn)入無墻道路的次數(shù)所占的百分比并沒有顯著性差異。
另一方面，如圖3B所示，在安慰劑組和實(shí)驗(yàn)組之間，小鼠在無墻道路中的停留時(shí)間所占的百分比具有顯著性差異。這就表明，ANX-C具有抗焦慮療效。
(實(shí)施例6)通過孔板實(shí)驗(yàn)(hole-board test)考察藥物的抗焦慮療效和抗應(yīng)激療效孔板實(shí)驗(yàn)(hole-board test)是評(píng)估小鼠情緒狀態(tài)的方法之一。在實(shí)驗(yàn)中，所采用的設(shè)備是灰色的丙烯酸板，大小為50cm×50cm×50cm，且在離盒子中心等距離處的底板上有四個(gè)孔。
當(dāng)將小鼠放入設(shè)備中時(shí)，小鼠就會(huì)表現(xiàn)出各種搜索行為，如，自發(fā)運(yùn)動(dòng)，站立和窺視小孔(head-dip)。
給予抗焦慮藥之后并不會(huì)引起自發(fā)運(yùn)動(dòng)和運(yùn)動(dòng)距離發(fā)生改變，只是引起窺視小孔次數(shù)的增加。相反，當(dāng)給予致焦慮藥物之后，抑制了小鼠窺視小洞的行為，由此可知，給藥引起了小鼠情緒狀態(tài)的變化。
當(dāng)將約束壓力施加于小鼠身上時(shí)，可以觀察到小鼠窺視小洞的行為受到抑制，這與給與致焦慮藥后的情況相似。然而，預(yù)先給予地西泮(安定)則使情緒的變化得以改善。
如上所述，在試驗(yàn)方法中，可通過以窺視小孔(head-dip)的行為作為指標(biāo)，評(píng)估藥物是否具有抗焦慮作用或抗壓力作用。因此，應(yīng)用孔板實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可研究ANX-C的抗焦慮或抗壓力療效。
(6-1)實(shí)驗(yàn)方法(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用5到6周齡的雄性ICR小鼠。
(2)對(duì)于情緒變化進(jìn)行評(píng)估應(yīng)用自動(dòng)孔板實(shí)驗(yàn)設(shè)備，通過錄像監(jiān)視器連續(xù)5分鐘觀察小鼠在設(shè)備中的行為。作為情緒狀態(tài)變化的指標(biāo)的探尋行動(dòng)包括運(yùn)動(dòng)行為、站立行動(dòng)的次數(shù)、窺視小孔的次數(shù)及其行為發(fā)生潛伏時(shí)間的時(shí)間。根據(jù)這些指標(biāo)，可評(píng)估情緒狀態(tài)的變化。
為了研究施加壓力刺激所引起的的情緒性變化，以上述項(xiàng)目為指標(biāo)，在施加壓力刺激和無壓力刺激的情況下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。壓力刺激的施加是通過將小鼠束縛在容積為50ml的塑料圓柱管中30分鐘。
(3)給藥在無壓力狀態(tài)下，將小鼠分為2組；剃去給藥組小鼠(n＝12)后背上的毛，并在實(shí)驗(yàn)開始24小時(shí)之前將實(shí)施例1中生產(chǎn)的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥(ANX-C)黏附在小鼠的后背上。
如上所述，以相似的方式剃去給安慰劑組小鼠(n＝12)后背上的毛。先生產(chǎn)出與ANX-C基本相同但不含玫瑰油的經(jīng)皮吸收型制劑(PNX)。然后在實(shí)驗(yàn)開始24小時(shí)前就將藥物黏附在小鼠的后背上。為了避免藥物從小鼠后背上脫落，所有的小鼠在給藥后都必須分別關(guān)在單個(gè)鼠籠中。
在施加壓力的情況下，將小鼠分為3組，對(duì)于給藥組(n＝10)和給安慰劑組(n＝8)進(jìn)行與無壓力實(shí)驗(yàn)相似的處理。需要注意的是，對(duì)照組中的小鼠并不服用任何藥物，且也不給予壓力刺激。為了在實(shí)驗(yàn)過程中藥物不從小鼠的后背上脫落，因此，在將藥物黏附后須把小鼠分別單獨(dú)安置。
(4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)在考察顯著性差異的過程中，先將數(shù)據(jù)進(jìn)行變量的一元分析，然后再進(jìn)行t-檢驗(yàn)。在無壓力的情況下，將所獲得的結(jié)果與給安慰劑組的數(shù)據(jù)相比，顯著性水平不高于5％判定為存在顯著性差異。在有壓力實(shí)驗(yàn)情況下，將所獲得的結(jié)果與給安慰劑組的數(shù)據(jù)相比，顯著性水平不高于5％判定為存在顯著性差異。
(6-2)結(jié)果圖4A到4D表示的是從無壓力狀態(tài)下所獲取的數(shù)據(jù)，圖5A到5D表示的是有壓力狀態(tài)下所獲取的數(shù)據(jù)。
在圖4A到4C中，空心柱表示的是安慰劑組，其他的柱狀物則表示給藥組。如圖4B所示，在給ANX-C組中，窺視小孔的次數(shù)有明顯的上升。在圖4D中，并沒有顯著性差異，但是可以看到窺視小孔的行為發(fā)生潛伏時(shí)間有縮短的傾向。其他項(xiàng)目，如運(yùn)動(dòng)性和站立次數(shù)在每組中都沒有發(fā)生變化(見圖4A和4C)。
如上所述，ANX-C并不影響自發(fā)運(yùn)動(dòng)或站立現(xiàn)象，但是激發(fā)了窺視小孔，由此說明，ANX-C具有抗焦慮療效。
如圖5B所示，給予30分鐘的壓力后，與對(duì)照組相比，安慰劑組或ANX-C給藥組中窺視小孔的次數(shù)都急劇下降。這時(shí)，與安慰劑組相比，ANX-C給藥組中窺視小孔的次數(shù)明顯增加。另外，與對(duì)照組相比，安慰劑組或給ANX-C組中窺視小孔的行為發(fā)生潛伏時(shí)間顯著延長(zhǎng)。然而，ANX-C給藥組的時(shí)間延長(zhǎng)率明顯低于安慰劑組。
關(guān)于運(yùn)動(dòng)行為，對(duì)照組和安慰劑組之間沒有顯著差異。關(guān)于站立行為，安慰劑組和ANX-C給藥組都趨于下降，但沒有表現(xiàn)出顯著差異(見圖5A和圖5C)。
如上所述，在安慰劑組中，窺視小孔的次數(shù)明顯被抑制了；不過和不受壓力的對(duì)照組相比，在ANX-C組中該次數(shù)有明顯的恢復(fù)。并且，行為發(fā)生潛伏時(shí)間也有所減少。因此，可以說明，ANX-C除了有抗焦慮療效外還有抗壓力療效。
(實(shí)施例7)ANX-C對(duì)皮膚的一次刺激實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)適用于GLP部門條例中的一條名稱為《有關(guān)進(jìn)行藥物安全性非臨床監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的部門條例》(1997年3月26日，勞工、福利和衛(wèi)生部的第21條部門條例)。并且應(yīng)以化妝品的安全性指導(dǎo)方針2001和化妝品及類似藥品生產(chǎn)批準(zhǔn)申請(qǐng)指南(第4版)作為本實(shí)驗(yàn)的指導(dǎo)方針。
(7-1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從Saitama實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司購(gòu)得常規(guī)型的雌性日本白兔(2.16-2.36kg，11周齡)。在7天中對(duì)這些兔子進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)，然后將其應(yīng)用于下列試驗(yàn)。在開始給藥時(shí)，除了對(duì)照組的動(dòng)物外，其他的兔子體重都在2.27至2.42kg范圍內(nèi)。
(2)實(shí)驗(yàn)樣品在制備樣品的過程中使用了上述ANX-C。對(duì)照品以與ANX-A相似的方式進(jìn)行制備，其中不含本發(fā)明所提供的組合物。
(7-2)試驗(yàn)方法和結(jié)果(1)試驗(yàn)部位的形成給藥前，先用剃須刀(THRIVE動(dòng)物剪型號(hào)6000AD，Daito電器有限公司)將兔子左右后背的毛都剃去。剃好后，一邊作為正常皮膚加以應(yīng)用；另一邊作為受損皮膚，在不傷及真皮的情況下用18G的針在角質(zhì)層上磨成3條突出的平行線。
(2)試驗(yàn)樣品的給藥方法按如上所述制得的ANX-A和對(duì)照品分別貼在試驗(yàn)部位，然后使用非全身性粘性膏藥進(jìn)行24小時(shí)的阻塞試驗(yàn)(BLENDERM，注冊(cè)商標(biāo)，3M公司)。
為了改善黏附性能，用粘性海綿狀膏藥(商標(biāo)名Microform，3M公司)和伸展性膏藥(商標(biāo)名Silkytex，Alcare有限公司)對(duì)BLENDERM的外側(cè)進(jìn)行固定。
(3)對(duì)刺激物的強(qiáng)度和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確定根據(jù)下列表3中的Draize’s判斷標(biāo)準(zhǔn)在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)(附上樣品和安慰劑之后的1小時(shí)、24小時(shí)和48小時(shí))上，判定紅斑、結(jié)痂和浮腫的形成。
表4
根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)，在貼上樣品和安慰劑之后的1小時(shí)和48小時(shí)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)判斷紅斑的嚴(yán)重程度、結(jié)痂的形成和水腫的形成。對(duì)反應(yīng)強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分，分?jǐn)?shù)的平均值即一次刺激的指標(biāo)(P.I.I)。
根據(jù)表5所列的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)確定一次刺激物的性能。
表5
(4)判斷結(jié)果表6和表7分別表示了一次刺激指標(biāo)的評(píng)分，以及在單個(gè)動(dòng)物評(píng)分的基礎(chǔ)上的評(píng)級(jí)。圖6A和6B即移開試驗(yàn)樣品或安慰劑1小時(shí)后皮膚反應(yīng)的照片。
表6
*移開貼片后的時(shí)間表7
*移開貼片后的時(shí)間如表6所示，試驗(yàn)開始后，使用實(shí)驗(yàn)試劑48小時(shí)之后，在正常皮膚和受損皮膚上都沒有觀察到任何紅斑、結(jié)痂和浮腫的生成。
如表7所示，在敷藥后開始對(duì)經(jīng)時(shí)變化進(jìn)行個(gè)別觀察，在1小時(shí)、24小時(shí)或48小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)上都沒有觀察到任何變化。另外，也沒有觀察到紅斑、結(jié)痂以及浮腫的形成。
(實(shí)施例8)在21天的重復(fù)給藥過程中對(duì)于ANX-A對(duì)大鼠的經(jīng)皮吸收毒性進(jìn)行檢測(cè)本試驗(yàn)適用于部門條例中的一條名稱為《有關(guān)進(jìn)行藥物安全性非臨床監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的部門條例》(1997年3月26日，勞工、福利和衛(wèi)生部的第21條部門條例)、應(yīng)用或進(jìn)口藥物所須進(jìn)行的毒性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)方針(1989年9月11日，藥物評(píng)價(jià)1所制定的第24條通告)、化妝品及類似藥品生產(chǎn)批準(zhǔn)申請(qǐng)指南(第4版)、化妝品安全性指導(dǎo)方針(2001年)和OECD化學(xué)品實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)方針(TG410，1981年5月12日實(shí)施)。
(8-1)動(dòng)物等(1)試驗(yàn)動(dòng)物從日本SLC公司購(gòu)得16只雄性及雌性SlcWister SPF大鼠(8周齡)。飼養(yǎng)6天后，開始動(dòng)物試驗(yàn)。在開始飼養(yǎng)時(shí)，雄性大鼠的體重為170至188g，雌性大鼠的體重為120至139g。開始給藥時(shí)，除了對(duì)照組，雄性大鼠的體重為213到231g，雌性大鼠為146至164g。
將2～3只雄性或雌性大鼠分別單獨(dú)放在一個(gè)籠子中，不限量提供水(自來水)和鼠糧(丸狀MF，Oriental Yeast有限公司生產(chǎn))。
(2)實(shí)驗(yàn)制劑使用上述的ANX-A作為實(shí)驗(yàn)制劑。對(duì)照組以和ANX-A相似的方法進(jìn)行制備，但在制備過程中并不使用本發(fā)明中的片狀組合物。
將上述的雄性大鼠分為對(duì)照組(n＝5)和試驗(yàn)組(n＝5)，雌性大鼠也以相似的方法進(jìn)行分組。根據(jù)以下方法，進(jìn)行21天的經(jīng)皮吸收型給藥。
(3)試驗(yàn)方法(1)試驗(yàn)樣品和對(duì)照品給藥位點(diǎn)的形成及其給藥在給藥前用剃須刀(THRIVE動(dòng)物剪型號(hào)6000AD，Daito電器有限公司生產(chǎn))剃去大鼠后背的毛。然后隔幾天就為動(dòng)物剃毛。
將試驗(yàn)樣品直接敷在給藥位點(diǎn)上，然后用粘性膏藥(Dermapore，Alcare有限公司生產(chǎn))進(jìn)行24小時(shí)的阻塞附著試驗(yàn)。將對(duì)照品也直接敷在給藥位點(diǎn)上，然后用Dermapore進(jìn)行24小時(shí)的阻塞性附著試驗(yàn)。
(2)試驗(yàn)項(xiàng)目給予試驗(yàn)制劑21天的試驗(yàn)組與對(duì)照組將進(jìn)行以下步驟(A)稱量體重，(B)攝食量測(cè)定，(C)病理學(xué)測(cè)試，(D)血液學(xué)測(cè)試，凝血時(shí)間測(cè)試，以及生化測(cè)試。
(A)對(duì)體重進(jìn)行稱量在試驗(yàn)開始的當(dāng)天就用精確天平(PB3001，Mettler-Toredo K.)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行稱重，然后每周兩次在上午為動(dòng)物稱重(上午9:19至10:03)。
(B)攝食量測(cè)定用精確天平(PB3001，Mettler-Toredo K.)每周一次在上午(上午8:30至9:27)對(duì)所有籠子中的鼠糧進(jìn)行稱量。
(C)病理學(xué)試驗(yàn)在最后一次給藥后的翌日(停止喂食16小時(shí)后)為大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(30mg/kg，i.p Dynabot有限公司)進(jìn)行麻醉，然后放血處死。
隨后，對(duì)于所有動(dòng)物的體表、口部、顱骨內(nèi)部、胸腔、腹腔及其內(nèi)容物進(jìn)行肉眼觀察。取出肝臟、腎臟、腎上腺、卵巢和睪丸，用電子天平稱重。其中，對(duì)腎臟、卵巢和睪丸進(jìn)行成對(duì)稱重。
在病理學(xué)檢測(cè)中，將解剖取出來的所有動(dòng)物的肝臟、腎臟、腎上腺、卵巢和睪丸按傳統(tǒng)的方法包埋在石蠟中制成切片，然后用蘇木精-曙紅(HE)染色，在顯微鏡下進(jìn)行檢查。
(D)血液學(xué)測(cè)試，凝血時(shí)間測(cè)試和生化測(cè)試在上述(C)中進(jìn)行放血處死時(shí)，保留一部分血液樣品進(jìn)行血液學(xué)測(cè)試和生化測(cè)試。在戊巴比妥的麻醉狀態(tài)下進(jìn)行剖腹手術(shù)，將用于采血的帶硅樹脂試管的針頭插入腹主動(dòng)脈中，從自然流出的血液中采血。進(jìn)行表8和9列出的檢測(cè)項(xiàng)目。
表8
表9
(4)結(jié)論(A)稱重圖7A和圖7B表示對(duì)照組和試驗(yàn)組中每個(gè)雄性和雌性動(dòng)物的體重變化。到了第三天，與性別無關(guān)，實(shí)驗(yàn)組顯示出減輕體重的趨勢(shì)，不過之后，它們顯示出體重增加的趨勢(shì)。表10所示的是整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間(21天)所觀察到的總體狀態(tài)的變化。
(表10)
*表格中的次數(shù)表示的是沒有異常的動(dòng)物數(shù)量。
(B)攝食量測(cè)定表8A和8B按每個(gè)雄性和雌性組別顯示了結(jié)果。如表8A和8B所示，和對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組的攝食量并沒有下降。
(C)病理學(xué)檢測(cè)對(duì)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的動(dòng)物的體表、口腔、胸腔、腹腔和淋巴結(jié)進(jìn)行觀察，結(jié)果如表11所示。
(表11)
*表格中的次數(shù)表示的是沒有異常的動(dòng)物只數(shù)。
如表11所示，肉眼沒有觀察到體表、口腔、顱內(nèi)部位、胸腔、腹腔和淋巴結(jié)的任何變化。
接著，從對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的每只動(dòng)物體內(nèi)取出肝臟、腎臟、腎上腺、卵巢和睪丸，進(jìn)行肉眼觀察。用電子天平對(duì)這些器官進(jìn)行稱重，檢查是否有質(zhì)量變化。表12和13表示的是檢測(cè)結(jié)果。
(表12)
(表13)
如表12所示，給藥組和對(duì)照組相比，無論雌性組或雄性組，其任一器官中都沒有表現(xiàn)出病態(tài)。如表13所示，在取出的肝臟、腎臟、腎上腺、卵巢和睪丸中沒有觀察到明顯的變化。
表14至17表示的是對(duì)照組和試驗(yàn)組的血液學(xué)實(shí)驗(yàn)和生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也分為雄性組和雌性組。
(表14)
(表15)
如表14和表15所示，可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組和給樣品組之間在血液學(xué)實(shí)驗(yàn)中沒有明顯差異。
(表16)
(表17)
如表16和17所示，對(duì)照組和給樣品組在生化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果中沒有明顯的差異。
因此，由于本發(fā)明的抗焦慮藥物只有極其低的刺激性，且不會(huì)引發(fā)透皮毒性，因此可以說明本發(fā)明的抗焦慮藥物具有高度的安全性。
工業(yè)實(shí)用性如上所述，本發(fā)明的抗焦慮藥物在藥物領(lǐng)域可安全、有效地使用。特別是，由于藥物能有效地釋放到目標(biāo)器官，因此該藥物可有助于降低副作用，如依賴性等。
權(quán)利要求
1.經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，以玫瑰精油為活性成分。
2.如權(quán)利要求
1所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，包括玫瑰精油、精油吸附劑、游離水除去劑、精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑、吸附促進(jìn)劑、成片基質(zhì)以及壓接用薄片。
3.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述精油吸附劑是皂化值為98.0到98.5的聚乙烯醇系吸水性樹脂。
4.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述游離水除去劑是丙烯酸系吸水性樹脂。
5.如權(quán)利要求
4所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述丙烯酸系樹脂以吸水性樹脂的體積為基準(zhǔn)，可吸附400至800倍自身體積的水分。
6.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑是表面積為200至800m2/g的多孔碳材料。
7.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述發(fā)熱劑是孔徑為0.1至0.8nm的沸石。
8.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述熱傳導(dǎo)抑制劑為多糖類化合物。
9.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述吸收促進(jìn)劑為單萜類化合物。
10.如權(quán)利要求
9所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述單萜類化合物是l-薄荷醇或檸檬烯。
11.如權(quán)利要求
2所述的經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物，其特征在于，所述成片基質(zhì)是皂化值為約88.0的熱塑樹脂。
12.一種經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥，其特征在于，含有如權(quán)利要求
1至11中任一項(xiàng)所述的抗焦慮藥用組合物。
13.一種生產(chǎn)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥用組合物的方法，包括以下步驟稱取預(yù)定量的玫瑰精油；將所述玫瑰精油與精油吸附劑混合，使在精油吸附劑上形成精油涂層；在具有精油涂層的吸附劑中加入用于吸附和解吸附精油的多孔性碳材料，以形成被多孔性碳材料所涂覆的碳涂層顆粒；均勻混合預(yù)定量的碳涂層顆粒、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑以及成片基質(zhì)，以制成具有均勻厚度的層，和對(duì)其進(jìn)行加熱，以形成抗焦慮藥藥用組合物。
14.一種生產(chǎn)經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥的方法，包括以下步驟稱取預(yù)定量的玫瑰精油；將所述玫瑰精油與精油吸附劑混合，使在精油吸附劑上形成玫瑰精油涂層；在具有精油涂層的吸附劑中加入用于吸附和解吸附精油的多孔性碳材料，以形成被多孔性碳材料所涂覆的碳涂層顆粒；均勻混合預(yù)定量的碳涂層顆粒、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑以及成片基質(zhì)，以制成具有均勻厚度的層，然后對(duì)其進(jìn)行加熱，以形成抗焦慮藥藥用組合物；所述抗焦慮藥用組合物為經(jīng)皮吸收型，將其切割成預(yù)定尺寸的片并夾在兩張片狀材料中間；然后對(duì)所述片狀材料的四邊進(jìn)行熱粘合處理。
專利摘要
本發(fā)明提供了一種經(jīng)皮吸收型抗焦慮藥，其活性成分為從植物中提取的精油；和該類抗焦慮組合物，及其生產(chǎn)方法。經(jīng)皮吸收型的抗焦慮藥包括作為活性成分的玫瑰精油，精油吸附劑、游離水除去劑、精油吸附/解吸附調(diào)節(jié)劑、發(fā)熱劑、熱傳導(dǎo)抑制劑、吸附促進(jìn)劑、成片基質(zhì)和用于壓接的薄片。同時(shí)本發(fā)明也提供了抗焦慮藥和抗焦慮組合物的生產(chǎn)方法。
文檔編號(hào)A61K9/70GK1997380SQ200580020926
公開日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2005年6月13日
發(fā)明者刈田毅 申請(qǐng)人:自然工藝株式會(huì)社導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan