本發(fā)明涉及脂肪組織制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
由于外傷、痤瘡、燒傷等原因，使皮膚產(chǎn)生創(chuàng)面，皮膚創(chuàng)傷愈合是皮膚組織受到損傷后的修復(fù)過程，修復(fù)過程包括炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增生和新生組織重塑等。對于較大面積的創(chuàng)傷，傳統(tǒng)的皮瓣移植技術(shù)存在著供區(qū)選擇與損傷的問題，而且最終所能達(dá)到的修復(fù)效果并不能令人滿意，移植的皮膚顏色往往與周圍皮膚相差較大，加之術(shù)后容易發(fā)生攣縮，牽拉周圍組織器官變形或引發(fā)功能障礙。自體脂肪移植技術(shù)的誕生在很大程度上解決了以上的問題，而且在很多方面具有許多無可比擬的優(yōu)勢，如供區(qū)廣、操作簡便、塑性效果好等；然而，在脂肪移植術(shù)后組織存活成為技術(shù)難題，存在存活率低、容易被機(jī)體吸收等缺點(diǎn)，不能滿足實(shí)際需要。
重組人生長因子是一種能促使表皮細(xì)胞的分化、增殖、分泌和移行的生長因子，可促進(jìn)潰瘍創(chuàng)面組織修復(fù)的過程中細(xì)胞DNA、RNA和羥脯氨酸的合成，并與通過與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激發(fā)受體內(nèi)在的酪氨酸激酶的活性，從而啟動了信號傳導(dǎo)級聯(lián)而導(dǎo)致多張生化改變，細(xì)胞內(nèi)鈣水平上升，增加糖酵解與蛋白質(zhì)合成，使成纖維細(xì)胞的數(shù)量增加、促進(jìn)新生血管形成、膠原積聚和上皮再生，加速潰瘍創(chuàng)面肉芽組織的增生和表皮細(xì)胞的增殖，最終使?jié)兠嬗系臅r(shí)間縮短。
燈盞花素又名燈盞細(xì)辛，冬菊，主要分布在我國西南地區(qū)，其性寒，味微苦甘溫辛，具有散寒解表、祛風(fēng)除濕、活血化瘀、通經(jīng)活絡(luò)、消炎止痛、驅(qū)風(fēng)散寒等功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹痛、中風(fēng)癱瘓、胸痹心痛、牙痛和感冒等。藥理研究發(fā)現(xiàn)其有改善心腦血管血流量、抗血小板凝聚、抗氧自由基、增強(qiáng)肝臟解毒，保護(hù)糖尿病性肝臟、腎臟等作用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，提供一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，不僅對脂肪組織有較大的保護(hù)作用，且能對創(chuàng)面的愈合有較好的促進(jìn)作用，對瘢痕的形成有較好的控制作用。
本發(fā)明還提供一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)該目的：
一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括包括以下濃度的組分：
燈盞花素 0.01～2mg/mL
重組人生長因子 0.05～5ug/mL
余量為脂肪組織。
作為優(yōu)選的，所述脂肪組織的用量為1～5mL。
作為優(yōu)選的，所脂肪組織顆粒的大小為0.2～0.3cm3。
一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法，包括以下步驟：
1)脂肪組織抽?。涸诟共拷】灯つw下無菌抽取一定量的脂肪置于離心管中；
2)脂肪組織處理：在無菌操作條件下用D-Hank’s液離心清洗，然后用眼科剪刀剪成0.2～0.3cm3的小塊，再加D-Hank’s液清洗，待用；
3)燈盞花素稀釋：利用生理鹽水溶解稀釋燈盞花素的濃度至25mg/mL，待用；
4)按照各組分的濃度量取一定體積的重組人生長因子以及燈盞花素加入到制備的脂肪組織顆粒組織中，混合均勻，制得促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑。
其中，制得的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑于4℃的條件下儲存。
相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，采用脂肪組織作為基礎(chǔ)成分，并向其中添加重組人生長因子以及燈盞花素，不僅對脂肪組織有較大的保護(hù)作用，且能對創(chuàng)面的愈合有較好的促進(jìn)作用，加速傷口愈合，對瘢痕的形成有較好的控制作用，有利于減少疤痕結(jié)痂的形成、淡化瘢痕顏色，提高愈合質(zhì)量。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
實(shí)施例1。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 2mg/mL
重組人生長因子 5ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法，包括以下步驟：
1、脂肪組織抽取：在腹部健康皮膚下無菌抽取5ml脂肪至于15ml離心管；
2、在無菌操作條件下用D-Hank’s液離心清洗3遍，用眼科剪刀剪成0.2-0.3cm3的小塊，再加D-Hank’s液清洗2遍，待用；
3、用0.9％氯化鈉注射液稀釋燈盞花素至25.0mg/ml，待用；
4、以重組人生長因子5.0μg/ml，燈盞花素2.0mg/ml的濃度加入已經(jīng)制備好的脂肪顆粒組織中，混勻，制劑制備完成，轉(zhuǎn)移至3支2ml的注射器中備用。
實(shí)施例2。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 0.01mg/mL
重組人生長因子 0.05ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例3。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 0.05mg/mL
重組人生長因子 0.1ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例4。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 0.1mg/mL
重組人生長因子 0.5ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例5。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 1mg/mL
重組人生長因子 1ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例6。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
燈盞花素 1.3mg/mL
重組人生長因子 3ug/mL
余量為脂肪組織。
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
效果驗(yàn)證試驗(yàn)：以裸鼠為試驗(yàn)對象
選取周歲相同重量為150g左右的健康雌雄裸鼠9只，隨機(jī)分為三組，一組為實(shí)驗(yàn)組，一組為對照組、一組為空白組，鑷子通過酒精燈加熱，分別灼傷各裸鼠背部皮膚，創(chuàng)面大小為邊長約4.0cm的正方形；實(shí)驗(yàn)組裸鼠使用以上制備的制劑，對照組使用只含脂肪顆粒組織的制劑，空白組使用0.9％氯化鈉注射液。無菌條件下，消毒好創(chuàng)面周圍的皮膚，圍繞創(chuàng)面皮下均勻點(diǎn)狀肌注以上準(zhǔn)備的制劑2ml，1h內(nèi)完成肌注；連續(xù)定時(shí)觀察10天創(chuàng)面愈合情況，做好創(chuàng)面的記錄，如表1所示。
表1各組裸鼠創(chuàng)面面積
由上表試驗(yàn)結(jié)果可知：實(shí)驗(yàn)組裸鼠創(chuàng)面在第1天已經(jīng)開始縮小，至第5天時(shí)基本恢復(fù)完成，且沒有產(chǎn)生瘢痕；對照組裸鼠創(chuàng)面在第3天開始灰度至第10天還問完全恢復(fù)，且有一定的瘢痕形成；空白組裸鼠創(chuàng)面在第6天開始恢復(fù)，第10天時(shí)創(chuàng)面大小約4.60cm2，恢復(fù)創(chuàng)面有瘢痕形成。
以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。