一種復(fù)方姬松茸多糖組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復(fù)方姬松茸多糖組合物及其應(yīng)用，它是由姬松茸5-15份，黃芪15-45份，黃芩5-18份，香菇10-38份，板藍(lán)根10-30份，金銀花10-20份，甘草10-35份的中藥材組成，本發(fā)明的試驗(yàn)結(jié)果表明：復(fù)方姬松茸多糖提取物對沙門氏菌抑制效果較強(qiáng)，大腸桿菌次之，豬鏈球菌最弱，其MIC分別為0.075g/mL、0.075g/mL、0.3g/mL。本發(fā)明的藥理實(shí)驗(yàn)證明：復(fù)方姬松茸多糖口服液對臟器無明顯病變。復(fù)方姬松茸多糖口服液毒性低，安全范圍大，具有明顯的增加機(jī)體免疫了的功能。因此，將復(fù)方姬松茸多糖組合物開發(fā)成臨床用藥具有很大的潛力。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥提取【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及復(fù)方姬松茸多糖組合物及其應(yīng)用。 一種復(fù)方姬松茸多糖組合物及其應(yīng)用

【背景技術(shù)】
[0002] 我國中藥資源豐富，其中發(fā)現(xiàn)有多種中藥具有提高機(jī)體免疫力的作用。例如紅景 天提取物紅景天甙不僅可以促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的成熟和其抗原呈遞的能力，而且可以誘導(dǎo)持 續(xù)的細(xì)胞和體液免疫（Zhao etal，2013);穿心蓮具有提高小鼠腹腔細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的能 力；甘肅黨參可以增強(qiáng)由D-半乳糖誘導(dǎo)的大年齡鼠的免疫功能能。通過研究人員大量臨 床實(shí)踐表明，具有提高機(jī)體免疫作用的扶正藥有：黨參、黃芪、當(dāng)歸等；增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng) 細(xì)胞吞噬能力的清熱解毒類藥有：黃連、大青葉、魚腥草等；能提高T細(xì)胞比值的中藥有：黨 參、人參、白術(shù)等；能促進(jìn)機(jī)體抗體生成的中藥有：金銀花、菟絲子、刺五加等等。
[0003] 隨著中醫(yī)學(xué)的不斷創(chuàng)新發(fā)展，中醫(yī)學(xué)者依據(jù)君、臣、佐、使組方原則，研究出多種具 有益氣補(bǔ)血，提高機(jī)體免疫力的處方。中醫(yī)科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，很多種類的中藥具有顯著的抑菌 作用。例如草果提取物對金黃色葡萄球菌MIC為0. 75mg/ml，對大腸桿菌的MIC為1. 5mg/ ml ;廣林九號桉葉精油對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的MIC分別為10、20、 20ml/L;蒲公英中綠原酸對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、痢疾桿菌等有較強(qiáng)的抑制作用，其 MIC分別為0. 0250g/ml、0. 0063g/mL、0. 0125g/mL，黑石耳粗提物對金黃色葡萄球菌、大腸 桿菌、枯草芽孢桿菌有一定抑制作用（王斌，2013)。
[0004] 中藥具有無污染、不產(chǎn)生耐藥菌等特點(diǎn)，但其成分復(fù)雜，具有抑菌作用的成分較 少。不同中藥的抑菌成分不盡相同，一般歸納有黃酮、生物堿、醌類等成分。大豆異黃酮對 革蘭氏陽性菌的抑制作用好于革蘭氏陰性菌，對金黃色葡萄球菌MIC為0. 2mg/mL野生軟棗 獼猴桃總黃酮對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、根霉等都有抑制作用。
[0005] 本發(fā)明通過精選對研發(fā)出的復(fù)方姬松茸多糖組合物含有姬松茸、黃芪、香菇、板藍(lán) 根、金銀花、黃芩、甘草，對他們的組成提取物進(jìn)行了沙門氏菌、大腸桿菌、豬鏈球菌的抑制 試驗(yàn)研究，以期為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明公開了一種復(fù)方姬松茸多糖組合物，其特征在于它是由下述重量份數(shù)的中 藥材組成： 姬松茸1-20 黃芪 1-50 黃芩 2-20 香菇 1-50 板藍(lán)根5-30 金銀花2-25 甘草 1-40。 本發(fā)明一個優(yōu)選的中藥材組成： 姬松茸1-15 黃芪 1-45 黃芩2-18 香菇 1-38 板藍(lán)根5-30 金銀花2-20 甘草 1-35。 本發(fā)明另一個優(yōu)選的中藥材組成： 姬松茸5-15 黃芪 15-45 黃芩 5-18 香菇 10-38 板藍(lán)根10-30 金銀花10-20 甘草 10-35。 本發(fā)明進(jìn)一步公開了復(fù)方姬松茸多糖組合物，其中的組合物它是由復(fù)方姬松茸多糖提 取物及藥學(xué)上可接受的藥用載體組成。所述的組合物為口服制劑為或注射劑。其中的口服 制劑為片劑、丸劑、口服液、膠囊劑、散劑或顆粒劑；注射劑為無菌注射液或液體噴霧劑、滴 齊U、針劑、自動注射器裝置或栓劑。
[0007] 本發(fā)明更進(jìn)一步公開了復(fù)方姬松茸多糖組合物的制備方法，其特征在于按如下 的步驟進(jìn)行： (1)姬松茸多糖的提取 稱取姬松茸蘑菇l〇kg，粉碎粒度為40目，粉碎后500g留樣，9. 5kg干粉用做提取多糖。 料水比為1 :20,即3. 5kg姬松茸干粉比70kg水，浸提溫度為100°C，浸提時間為3h ;2500r/ min離心lOmin，減壓濃縮；95%乙醇醇沉濃縮液，醇沉比為1:3,醇沉?xí)r間為24h ;多糖沉淀 進(jìn)行干燥。
[0008] (2)黃芪多糖的提取 稱取黃芪50g，粉碎粒度為40目，干粉加入8倍量水浸泡12h，回流提取2h，濾出溶 液，藥材再加入5倍量的水回流提取2h，棄去濾渣合并濾液，濃縮得到濃縮液50mL;濃縮 液進(jìn)行超速離心，分離過濾的濾液并進(jìn)行75%乙醇醇沉，室溫靜置12h ;沉淀干燥。
[0009] (3)香菇多糖的提取 稱取香菇50g，粉碎粒度為40目，干香菇粉按1:25料液比，于95°C水浴浸提3h，提取兩 次；抽濾，上清液加入3倍95%乙醇，醇析；離心醇析液，將所得沉淀于50°C鼓風(fēng)干燥箱中 干燥。
[0010] (4)復(fù)方姬松茸多糖提取物： 按處方量將黃芩、板藍(lán)根、甘草加水煎煮1. 5h，過濾，濾液另器收集；金銀花與上述藥 渣加水煎煮二次，每次〇. 5h，合并煎液，靜置過濾；濾液減壓濃縮至約800mL，濃縮液加入姬 松茸粗多糖lg，香菇粗多糖2g，黃芪粗多糖2g，既得到復(fù)方姬松茸多糖提取物； (5)將復(fù)方姬松茸多糖提取物藥學(xué)上可接受的藥用載體混合制成口服制劑為或注射 劑。
[0011] 本發(fā)明選擇的姬松茸是產(chǎn)于南美巴西的一類藥用和食用真菌，其口感好，味道鮮 美。姬松茸水提物多糖具有抑菌、抗腫瘤、抗氧化、降血糖、提高機(jī)體免疫力等功效。姬松茸 多糖與1，6-二磷酸果糖結(jié)合對小鼠體內(nèi)乳酸脫氫酶有顯著增強(qiáng)作用，能夠提高機(jī)體抗疲 勞能力。
[0012] 黃芪多糖是從草藥黃芪中提取的水溶性雜多糖，具有抗腫瘤、抗氧化、提高機(jī)體免 疫力等功效。黃芪多糖能夠增加特異性乙型肝炎病毒抗體和T細(xì)胞增殖活性，同時，可以刺 激樹突狀細(xì)胞的成熟，是乙型肝炎病毒DNA疫苗潛在佐劑。黃芪多糖能夠顯著抑制BALB/ C小鼠體內(nèi)H22肝癌的固體腫瘤增長，脾臟、胸腺指數(shù)和巨噬細(xì)胞吞噬能力也顯著提高，同 時，能夠促進(jìn)血清中IL-2、IL-12、TNF-a的分泌，從而抑制腫瘤的惡化。黃芪多糖在體內(nèi)抑 制CD4+C和D25+T細(xì)胞增殖與其濃度和時間呈梯度關(guān)系，黃芪多糖可能通過恢復(fù)細(xì)胞因子平 衡和人肝癌微環(huán)境中F0Xp3的表達(dá)。
[0013] 香菇是擔(dān)子菌綱香菇菌屬香菇菌，為藥用兼食用菌。古籍中對香菇已有記載：益 氣不饑、治風(fēng)破血和益胃助食?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明，香菇多糖在提高機(jī)體免疫力和抗癌方面有顯 著功效。香菇多糖與s-l聯(lián)合使用能夠顯著誘導(dǎo)人口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的凋亡，降低TS和 DPDmRNA的表達(dá)，升高OPRTmRNA的表達(dá)，具有明顯抑癌效果。
[0014] 金銀花為植物忍冬的花蕾部分，其味甘性寒，中醫(yī)上用于清熱解毒，疏風(fēng)散熱?，F(xiàn) 代醫(yī)學(xué)則用于抑菌消炎、抗過敏、調(diào)節(jié)糖代謝等。金銀花花蕾及其醇提物有抗過敏特性。
[0015] 傳統(tǒng)中藥板藍(lán)根屬十字花科植物菘藍(lán)的根，最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》中，具有清 熱解毒，涼血利咽的作用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，板藍(lán)根的活性成分留醇類物質(zhì)、生物堿和多糖，具 有抗病毒、抑菌、抗炎、抗內(nèi)毒素、抗氧化等作用。
[0016] 甘草又名甜草，為豆科植物、光果和脹果甘草的根莖。其最早記載于《神農(nóng)本草 經(jīng)》中性味甘平，歸心、肺、脾經(jīng)，具有清熱解毒、止咳祛痰、補(bǔ)脾益氣等作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究 表明，甘草的活性成分主要為黃酮類和皂苷類化合物，具有抗病毒、抗炎、抑菌、降血糖等作 用。
[0017] 黃芩，又名山茶根，唇形科黃芩屬，其味苦性寒，具有清熱燥濕、止血、瀉火解毒的 作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，黃芩具有抗癌、抑菌、抗氧化、抗溶血等作用。黃芩醇提取物能夠抑 制金黃色葡萄球菌生長，其MIC > 2048 μ g/mL，并且能夠抑制金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物上的 a HL溶血活性，呈濃度依賴關(guān)系，但不能抑制a HL的表達(dá)。其還具有對金黃色葡萄球菌誘 導(dǎo)的A549細(xì)胞損傷的緩解作用。
[0018] 試驗(yàn)的療效情況如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種復(fù)方姬松茸多糖組合物，其特征在于它是由下述重量份數(shù)的中藥材組成： 姬松茸1-20 黃芪 1-50 黃芩 2-20 香菇 1-50 板藍(lán)根5-30 金銀花2-25 甘草 1-40。
2. 權(quán)利要求1所述的復(fù)方姬松茸多糖組合物，其特征在于它是由下述重量份數(shù)的中藥 材組成： 姬松茸1-15 黃芪 1-45 黃芩2-18 香菇 1-38 板藍(lán)根5-30 金銀花2-20 甘草 1-35。
3. 權(quán)利要求1所述的復(fù)方姬松茸多糖組合物，其特征在于它是由下述重量份數(shù)的中藥 材組成： 姬松茸5-15 黃芪 15-45 黃芩 5-18 香菇 10-38 板藍(lán)根10-30 金銀花10-20 甘草 10-35。
4. 權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述復(fù)方姬松茸多糖組合物，其中的組合物它是由復(fù)方姬松茸 多糖提取物及藥學(xué)上可接受的藥用載體組成。
5. 權(quán)利要求4所述復(fù)方姬松茸多糖組合物，其中的組合物為口服制劑為或注射劑。
6. 權(quán)利要求5所述復(fù)方姬松茸多糖組合物，其中的口服制劑為片劑、丸劑、口服液、膠 囊劑、散劑或顆粒劑；注射劑為無菌注射液或液體噴霧劑、滴劑、針劑、自動注射器裝置或栓 劑。
7. 權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述復(fù)方姬松茸多糖組合物的制備方法，其特征在于按如下的 步驟進(jìn)行： (1) 姬松茸多糖的提取 稱取姬松茸蘑菇l〇kg，粉碎粒度為40目，粉碎后500g留樣，9. 5kg干粉用做提取多糖， 料水比為1 :20,即3. 5kg姬松茸干粉比70kg水，浸提溫度為100°C，浸提時間為3h ;2500r/ min離心lOmin，減壓濃縮；95%乙醇醇沉濃縮液，醇沉比為1:3,醇沉?xí)r間為24h ;多糖沉淀 進(jìn)行干燥； (2) 黃芪多糖的提取 稱取黃芪50g，粉碎粒度為40目，干粉加入8倍量水浸泡12h，回流提取2h，濾出溶 液，藥材再加入5倍量的水回流提取2h，棄去濾渣合并濾液，濃縮得到濃縮液50mL ;濃縮 液進(jìn)行超速離心，分離過濾的濾液并進(jìn)行75%乙醇醇沉，室溫靜置12h ;沉淀干燥； (3) 香菇多糖的提取 稱取香菇50g，粉碎粒度為40目，干香菇粉按1:25料液比，于95°C水浴浸提3h，提取兩 次；抽濾，上清液加入3倍95%乙醇，醇析；離心醇析液，將所得沉淀于50°C鼓風(fēng)干燥箱中 干燥； (4) 復(fù)方姬松茸多糖提取物： 按處方量將黃芩、板藍(lán)根、甘草加水煎煮1. 5h，過濾，濾液另器收集；金銀花與上述藥 渣加水煎煮二次，每次〇. 5h，合并煎液，靜置過濾；濾液減壓濃縮至約800mL，濃縮液加入姬 松茸粗多糖lg，香菇粗多糖2g，黃芪粗多糖2g，既得到復(fù)方姬松茸多糖提取物； (5)將復(fù)方姬松茸多糖提取物藥學(xué)上可接受的藥用載體混合制成口服制劑為或注射 劑。
8.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述復(fù)方姬松茸多糖組合物在制備抑制細(xì)菌提高機(jī)體免疫力 藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K31/715GK104042675SQ201410317140
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年7月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月7日
【發(fā)明者】馬吉飛, 郜鵬云, 馬彥娜, 范惠章, 秦文安, 葛秀國 申請人:天津農(nóng)學(xué)院