專利名稱：多價糖肽構建體及其用途的制作方法
多價糖肽構建體及其用途相關申請的交叉引用本申請要求2010年6月11日提交的美國臨時專利申請序列號61/353，722的優(yōu)先權，該專利申請的全部內容在此通過弓I用并入本文。政府支持本發(fā)明在美國政府支持下根據美國國立衛(wèi)生研究院授予的資助項目CA28824和P01CA052477進行。美國政府享有本發(fā)明的某些權利。
背景技術：
眾所周知，惡性轉化細胞通常顯示異常水平和類型的表面糖基化，這是一個區(qū)分腫瘤細胞和正常、健康細胞的典型特征。腫瘤細胞表面上的這種異常糖基化模式為腫瘤免疫學家開發(fā)用于癌癥治療性治療的基于糖類的抗癌疫苗提供了潛在機會。含腫瘤相關糖類抗原的疫苗構建體與免疫系統的適當接觸將刺激形成相應的抗體。這些抗體反過來將選擇性地結合和幫助消滅過度表達那些糖類表位的腫瘤細胞。為此，合成化學家和癌癥免疫學家一直努力開發(fā)用于癌癥免疫治療的基于糖類的有效抗癌疫苗。近年來，其他人(Ingale, S.；ffolfert, M.A.；Gaekwad, J.；Buskas, T.；Boons, G.-J.Nat.Chem.Biol.2007，3，663 ;Buskas，T.；Ingale, S.;Boons，G.-J.Angew.Chem.，Int.Ed.2005，44，5985 ；Kunz, H.；Dziadek, S.；Wittrock, S.；Becker, T.ACSSymposium Series2008,989 (Carbohydrate-Based Vaccines)，293 ；Westerlind, U.；Hobelj A.；Gaidzik, N.;Schmitt，E.；Kunz, H.Angew.Chem.，Int.Ed.2008，47，7551 ；Wittrockj S.；Becker,T.；Kunz,H.Angew.Chem.，Int.Ed.2007，46，5226-5230 ；Dziadekj S.;Brocke，C.；Kunz, H.Chem.Eur.J.2004，10，4150 ;Hermans，1.F.;Silk，J.D.；Gileadi, U.；Salio, M.；Mathew, B.；Ritter, G.；Schmidt, R.;Harris，Adrian L.；Old, L.;Cerundolo，V.J.1mmunol.2003，171，5140 ;Schmidt，R.R.；Castro-Palominoj J.C.；Retz, 0.Pure Appl.Chem.1999，71，729)以及申請人(Danishefsky，S.J.;Bilodeau，M.T.Angew.Chem.1nt.Ed.Engl.1996，35，1380 ；Danishefsky, S.J.;Allen，J.R.Angew.Chem.1nt.Ed.Engl.2000，39，836 ;Keding，S.J.；Danishefsky, S.J.Carbohydrate-BasedDrug Discovery2003, 1，381 ;Warren，J.D.;Geng，X.；Danishefsky, S.J.Top.Curr.Chem.2007，267，109)報道了該領域重要的進展。雖然近些年已經開發(fā)了幾種合成構建體，如上文所述及本申請中描述的參考文獻所述，但是仍然需要進行進一步研究，以開發(fā)能夠誘導更持久或更高效(和優(yōu)選具有選擇性)的免疫響應的新型構建體。顯然，為了實現這個目標，開發(fā)用于誘導免疫響應的新的組合物和方法及用于治療癌癥的改進方法和/或新方法是有用的。


圖1說明了來自用實施例1中所示五價-KLH構建體2免疫的小鼠的ELISA效價數據。小鼠產生了可觀的與所有糖類抗原(包括Globo-H神經酰胺、GM2神經酰胺、STn (OSM)、TF(dPSM)和Tn(dOSM))對應的抗體效價。圖2描述了 Gb5糖化氨基酸的合成方案。圖3描述了 Gb5_脂類化合物4-4的合成方案。圖4A-C描述了五價GloboH-Gb5-STn-TF-Tn化合物的合成方案。圖5 是五價 GloboH-Gb5-STn-TF-Tn 化合物 G-1 的 1H NMR 譜。
具體實施例方式定義本公開的某些化合物及特定官能團的定義將在下文中進行更詳細的描述。對于本公開的目的，化學元素按照第75版《化學和物理手冊》CAS版本封面內頁的元素周期表標識，并且特定官能團通常按照其中所述定義。此外，有機化學的一般原理，以及特定的官能部分和反應性描述在” Organic Chemistry” Thomas Sorrell, University ScienceBooks, Sausalito: 1999,其全部內容通過引用并入本文。如本文所用，除非另外指明，否則下述定義應適用。如本文所用的術語“脂族的”或“脂族基團”指的是完全飽和的或含一個或多個不飽和單元的直鏈(即，無支鏈的)或支鏈取代或未取代的烴鏈，或完全飽和的或含一個或多個不飽和單元但其是非芳族的(此處亦稱為“碳環(huán)”，“脂環(huán)”或“環(huán)烷基”)、有一個與分子的其它部分連接的連接點的單環(huán)烴或雙環(huán)烴。除非另外規(guī)定，否則脂族基團含1-12個脂族碳原子。在一些實施方案中，脂族基團含1`-6個脂族碳原子。在一些實施方案中，脂族基團含1-5個脂族碳原子。在其它實施方案中，脂族基團含1-4個脂族碳原子。在另外其它實施方案中，脂族基團含1-3個脂族碳原子，并在其它實施方案中，脂族基團含1-2個碳原子。在一些實施方案中，“脂環(huán)”(或“碳環(huán)”或“環(huán)烷基”)指的是完全飽和的或含一個或多個不飽和單元(但其是非芳族的)、有一個與分子的其它部分連接的連接點的非芳香單環(huán)(:3-(:6烴。合適的脂族基團包括但不限于直鏈或支鏈的取代或未取代的烷基、烯基、炔基及它們的混合，如(環(huán)燒基)燒基、(環(huán)稀基)燒基或(環(huán)燒基)稀基。術語“低級烷基”指的是Q_4直鏈或支鏈烷基。示例性的低級烷基為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基。術語“低級鹵代烷基”指的是被一個或多個鹵素原子取代的Cy直鏈或支鏈烷基。術語“雜原子”指的是氧、硫、氮、磷或硅中的一種或多種(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式；任何堿性氮的季銨化形式；或雜環(huán)的可取代氮，例如N (如3，4- 二氫-2H-吡咯基中所示)、NH (如卩比咯燒基中所示)或NR+ (如N-取代卩比咯燒基中所示))。如本文所用的術語“不飽和”指的是具有一個或多個不飽和單元的部分。如本文所用的術語“二價飽和或不飽和的直鏈或支鏈烴鏈”指的是如本文定義的直鏈或支鏈的二價亞烴基、亞烯基和亞炔基鏈。術語“亞烴基”指的是二價烷基?！皝啛N基鏈”是聚亞甲基，即-(CH2)n-，其中η是正整數，優(yōu)選是I至6、1至4、1至3、1至2或2至3。取代的亞烴基鏈是其中一個或多個亞甲基氫原子被取代基取代的聚亞甲基。合適的取代基包括下文對取代的脂族基團中所述的那些基團。術語“亞烯基”指的是二價烯基。取代的亞烯基鏈是含至少一個雙鍵、其中一個或多個氫原子被取代基替換的聚亞甲基。合適的取代基包括下文對取代的脂族基團中所述的那些基團。術語“亞炔基”指的是二價炔基。取代的亞炔基鏈是含至少一個雙鍵、其中一個或多個氫原子被取代基取代的聚亞甲基。合適的取代基包括下文對取代的脂族基團中所述的那些基團。
單獨使用或作為更大部分的一部分使用的術語“?；?，指的是通過從羧酸去除羥基后形成的基團。術語“鹵素”指的是F、Cl、fc或I。術語“芳烷基(aralkyl)”和“芳基烷基(arylalkyl) ”可交換使用，并且指的是其中氫原子被芳基取代的烷基。此類基團包括但不限于芐基、肉桂基和二氫肉桂基。單獨使用或作為“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中更大的部分的一部分使用的術語“芳基”，指的是具有總共5至14個環(huán)成員的單環(huán)或雙環(huán)環(huán)體系，其中所述體系中至少一個環(huán)是芳族的，且其中所述體系中每個環(huán)包含3至7個環(huán)成員。術語“芳基”可與術語“芳環(huán)”互換使用。在本公開的某些實施方案中，“芳基”指的是可以帶一個或多個取代基的芳族環(huán)體系，其包括但不限于苯基、聯苯基、萘基、蒽基等。如本發(fā)明使用的，還包括在術語“芳基”的范圍內的是其中芳族環(huán)稠合到一個或多個非芳族環(huán)上的基團，如茚滿基、鄰苯二甲酰亞胺基、萘酰亞胺基、菲啶基或四氫萘基等。單獨使用或作為例如“雜芳烷基”或“雜芳烷氧基”等更大部分的一部分使用的術語“雜芳基”和“雜芳_”，指的是具有5至10個環(huán)原子，優(yōu)選5、6或9個環(huán)原子；在環(huán)狀陣列(cyclic array)中共享6、10或14個π電子；并且除碳原子外，具有I至5個雜原子的基團。術語“雜原子”指的是氮、氧或硫，并且包括氮或硫的任何氧化形式及堿性氮的任何季銨化形式。雜芳基包括但不限于噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚嗪基、嘌呤基、萘啶基和蝶啶基。如本文所用的術語“雜芳基”和“雜芳_”，還包括其中雜芳族環(huán)稠合到一個或多個芳基環(huán)、脂環(huán)族環(huán)或雜環(huán)基環(huán)上的基團，其中所述基團或連接點位于雜芳族環(huán)上。非限制性的實例包括但不限于吲哚基、異吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、4Η -喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基及吡啶并[2，3-b] -1，4-噁嗪-3(4Η)-酮。雜芳基可以是單環(huán)或雙環(huán)的。術語“雜芳基”可與術語“雜芳環(huán)”、“雜芳基團”或“雜芳族的”互換使用，它們中的任一個術語都包括任選取代的環(huán)。術語“雜芳烷基”和“雜芳基烷基”指的是被雜芳基部分取代的烷基，其中烷基和雜芳基部分可獨立地任選被取代。如本文所用的術語“雜脂族的”指的是其中一個或兩個碳原子獨立地被氧、硫、氮或磷中的一個或多個取代的脂族基團。雜脂族基團可以是取代的或未取代的、支鏈的或非支鏈的、環(huán)狀或非環(huán)狀的，并且包括“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)脂族的”或“雜環(huán)的”基團。如本文所用的術語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)基團”及“雜環(huán)環(huán)”可以互換使用，指的是穩(wěn)定的5至7元單環(huán)或7-10元雙環(huán)雜環(huán)部分，所述基團可以是飽和的或部分不飽和的，并且除碳原子外，還具有一個或多個，優(yōu)選I至4個如上文定義的雜原子。當在涉及到雜環(huán)環(huán)原子中使用時，術語“氮”包括取代的氮。例如，在具有0-3個選自氧、硫或氮的雜原子的飽和或部分不飽和環(huán)中，氮可以是N (如3，4- 二氫-2H-吡咯基中所示)、NH (如吡咯烷基中所示)或+NR (如N -取代吡咯烷基)。雜環(huán)環(huán)可以連接到其任何雜原子或碳原子的側基，形成穩(wěn)定的結構，且任何環(huán)原子可以任選被取代。此類飽和或部分不飽和雜環(huán)基團的實例包括但不限于四氫呋喃基、四氫苯硫基、吡咯烷基、哌啶基、吡咯啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、噁唑烷
基、哌嗪基、二噁烷基、二氧雜環(huán)戊基、二氮雜苯基、氧氮雜:^基、硫氮雜求基、嗎啉基和喹
啉環(huán)基。術語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)基環(huán)”、“雜環(huán)基團”、“雜環(huán)部分”及“雜環(huán)基”在本文可以互換使用，并且還包括其中雜環(huán)基環(huán)稠合到一個或多個芳基、雜芳基或環(huán)脂族環(huán)上的基團，如二氫吲哚基、3H-吲哚基、苯并二氫吡喃基、菲啶基或四氫喹啉基，其中連接的基團或點位于雜環(huán)基環(huán)上。雜環(huán)基團可以是單環(huán)或雙環(huán)的。術語“雜環(huán)基烷基”指的是被雜環(huán)基取代的燒基，其中所述燒基和雜環(huán)基部分獨立地任選被取代。如本文所用的術語“部分不飽和的”指的是包括至少一個雙鍵或叁鍵的環(huán)部分。術語“部分不飽和的”旨在包括具有多個不飽和位點的環(huán)，但是并不旨在包括如本文定義的芳
基或雜芳基。另一方面，本公開提供“藥學上可接受的”組合物，包括治療有效量的本文所述的一種或多種化合物，所述化合物與一種或多種藥學上可接受的載體(添加劑)和/或稀釋劑一起配制。正如詳細描述的那樣，本公開的所述藥物組合物可專門配制成以固體或液體形式施用，包括那些適用于下述的形式:口服施用，例如，浸液(drench)(水性或非水性溶液或懸浮液))、片劑(如旨在用于頰、舌下和全身吸收的片劑)、丸劑、粉劑、粒劑、施用于舌頭上的糊劑；胃腸外施用，例如，皮下施用、肌內注射、靜脈內注射或硬膜外注射，例如，滅菌溶液或懸浮液形式，或持續(xù)釋放制劑；局部施用，例如，以霜劑、軟膏劑或控釋貼劑或噴霧的形式施用到皮膚、肺或口腔；陰道內或直腸內施用，例如，以陰道栓劑、霜劑或泡沫的形式施用；舌下施用；眼睛施用；經皮施用；或鼻部施用、肺部施用或其它粘膜表面施用。如本文所用的詞語“藥學上可接受的”指的是那些在合理的醫(yī)學判斷范圍之內，適用于與人類和動物組織接觸、不會帶來過度毒性、刺激性、過敏反應或其它問題或并發(fā)癥且具有合理的益處/風險比的化合物、材料、組合物和/或劑型。如本文所用 的詞語“藥學上可接受的載體”指的是涉及將主題化合物從一個器官或身體的一部分攜帶或輸送到另一個器官或身體的一部分的藥學上可接受的材料、組合物或媒介物，如液體或固體填料、稀釋劑、賦形劑或溶劑封裝材料。每種載體在與制劑的其它成分相容方面及不會傷害患者方面必須是“可接受的”?？勺鳛樗帉W上可接受的載體的一些材料實例包括:糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；黃蓍膠粉；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，如可可脂和栓劑蠟；油，如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；藻酸；無致熱源的水；生理鹽水；林格溶液；乙醇；PH緩沖溶液；聚酯，聚碳酸酯和/或聚酐；及藥物制劑中使用的其它無毒的相容物質。除非另外聲明，本文所描述的結構還包括所述結構的所有同分異構體形式(如對映體、非對映體和幾何學(或構象)形式；例如，每個立體中心的R構型和S構型、Z和E雙鍵異構體及Z和E構象異構體。因此，本發(fā)明化合物的單一立體異構體以及對映體、非對映體和幾何學(或構象)混合物均屬于本公開的范圍。除非另外聲明，本公開的化合物的所有互變異構體形式都屬于本公開的范圍。提供的化合物可包括一個或多個糖部分。除非特別規(guī)定，D-和L-構型及其混合物均屬于本公開的范圍。除非另外規(guī)定，否則α-和β_連接的實施方案及其混合物，均屬于本公開設想的范圍。例如，如果需要本公開化合物的特殊對映體，則可通過不對稱合成法、手性色譜法或通過手性助劑衍生法制備，其中，將所得到的非對映體混合物分離，并使輔助基團分解而提供所需的純對映體。或者，當分子包含堿性官能團(如氨基)或酸性官能團(如羧基)時，采用合適的光學活性的酸或堿，形成非對映體的鹽，然后通過本領域熟悉的分步結晶或色譜手段拆分所形成的非對映體，隨后回收純的對映體。此外，除非另外聲明，否則本文所描述的結構還意在包括僅在存在一個或多個同位素富集原子方面不同的化合物。例如，具有本發(fā)明結構的化合物，包括采用氘或氚取代氫，或13C-或14C-富集碳取代碳的化合物，均屬于本公開的范圍。根據本公開，此類化合物可作為，例如，分析工具、作為生物檢定中的探針或作為治療劑。本領域技術人員將理解的是，本文所述的合成方法利用各種保護基團。如本文所用的術語“保護基團”，指的是特殊的官能部分，如O、S或N被掩蔽或封閉，如果需要的話，使反應在多官能團化合物的另一個反應位點選擇性地進行。在優(yōu)選的實施方案中，保護基團以良好的產率選擇性地反應，得到對于預期反應穩(wěn)定的受保護底物；保護基團采用不會攻擊其它官能團的容易獲得且優(yōu)選無毒的試劑選擇性地脫除；保護基團形成可以分離的衍生物(更優(yōu)選不產生新的立體中心)；并且保護基團優(yōu)選具有最低的其它官能度，以避免其它反應部位。正如本文詳細描述，可以利用氧、硫、氮和碳保護基團。作為非限制性實例，羥基保護基團包括甲基、甲氧基甲基(Μ0Μ)、甲基硫甲基(MTM)、叔-丁基硫甲基、(苯基二甲基硅烷)甲氧基甲基(SMOM)、芐氧基甲基(BOM)、對-甲氧基芐氧基甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基 (p-AOM)、愈創(chuàng)木酹甲基(guaiacolmethyl) (GUM)、叔-丁氧基甲基、4-戍烯氧基甲基(POM)、硅烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2，2，2-三氯乙氧基甲基、雙(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基(SEMOR)、四氫吡喃基(THP)、3_溴四氫吡喃基、四氫噻喃基、1-甲氧基環(huán)己基、4-甲氧基四氫吡喃基(MTHP)、4-甲氧基四氫噻喃基、4-甲氧基四氫噻喃基-S，S-二氧化物、1-[(2_氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基(CTMP)、1，4- 二噁烷-2-基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、2，3，3a, 4，5，6，7，7a-八氫-7，8，8-三甲基-4，7-亞甲基苯并呋喃-2-基、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、
1-甲基-1-甲氧乙基、1-甲基-1-芐氧基乙基、1-甲基-1-芐氧基-2-氟乙基、2，2，2-三氣乙基、2- 二甲基娃燒基乙基、2-(苯基氧砸基)乙基、叔_ 丁基、稀丙基、對_氣苯基、對-甲氧基苯基、2，4- 二硝基苯基、芐基、對-甲氧基芐基、3，4- 二甲氧基芐基、鄰-硝基芐基、對-硝基芐基、對-鹵代芐基、2，6- 二氯芐基、對-氰基芐基、對-苯基芐基、2-吡啶甲基、4_卩比淀甲基、3-甲基~2~卩比淀甲基-N-氧代(oxido)、_■苯基甲基、p, p’ - _-硝基_-苯甲基、5- 二苯并環(huán)庚基、三苯基甲基、α -萘基二苯基甲基、對-甲氧基苯基二苯基甲基、二(對-甲氧基苯基)苯基甲基、三(對-甲氧基苯基)甲基、4-(4’-溴苯酰氧基苯基)二苯基甲基、4，4’，4’’_三(4，5-二氯鄰苯二甲酰亞胺基苯基)甲基、4，4’，4’’_三(乙酰丙氧基苯基)甲基、4，4’，4’’_三(苯甲酰基氧基苯基)甲基、3-(咪唑-1-基)雙(4’，4’’_ 二甲氧基苯基)甲基、1，1-雙(4-甲氧基苯基)-1’ -芘基甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)氧雜恩基、9- (9-苯基-10-氧代)恩基、I, 3-苯并_■硫雜環(huán)戍燒~2~基、苯并異卩基卩坐-S, S- _.氧代、三甲基硅烷基(TMS)、三乙基硅烷基(TES)、三異丙基硅烷基(TIPS)、二甲基異丙基硅烷基(IPDMS)、二乙基異丙基硅烷基(DEIPS)、二甲基己基硅烷基、叔-丁基二甲基硅烷基(TBDMS)、叔-丁基二苯基硅烷基(TBDPS)、三芐基硅烷基、三-對-二甲苯基硅烷基、三苯基硅烷基、二苯基甲基硅烷基(DPMS)、叔-丁基甲氧基苯基硅烷基(TBMPS)、甲酸酯、苯甲酰甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、對-氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯(乙酰丙酸酯)、4，4-(亞乙基二硫代)戊酸酯(乙酰丙酸基二硫代縮醛)、特戊酸酯、金剛酸酯(adamantoate)、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、對_苯基苯甲酸酯、2，4，6_三甲基苯甲酸酯(菜酸酯)、烷基甲基碳酸酯、9-芴基甲基碳酸酯(Fmoc)、烷基乙基碳酸酯、烷基2，2，2-三氯乙基碳酸酯(Tioc)、2-(三甲基硅烷基)乙基碳酸酯(TMSEC)、2-(苯磺酰)乙基碳酸酷(Psec)、2_ ( 二苯基憐鐵基)乙基碳酸酷(Peoc)、燒基異丁基碳酸酷、燒基乙稀基碳酸酷、燒基稀丙基碳酸酷、燒基對_硝基苯基碳酸酷、燒基節(jié)基碳酸酷、燒基對_甲氧基芐基碳酸酯、烷基3，4- 二甲氧基碳酸酯、烷基鄰-硝基芐基碳酸酯、烷基對-硝基芐基碳酸酯、烷基S-芐基硫代碳酸酯、4-乙氧基-1-萘基碳酸酯、甲基二硫代碳酸酯、2-碘苯甲酸酯、4-疊氮丁酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、鄰_( 二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰苯磺酸酯、
2-(甲基硫代甲氧基)乙基、4-(甲基硫代甲氧基)丁酸酯、2-(甲基硫代甲氧基甲基)苯甲酸酯、2，6- 二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2，6- 二氯-4-(1，I, 3，3-四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2，4-雙(1，1-二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基乙酸酯、異丁酸酯、單琥珀酸酯(monosuccinoate), (E)-2-甲基_2_ 丁烯酸酯、鄰-(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α-萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N，N，N’，N’ -四甲基磷二酰胺、烷基N-苯基氨基甲酸酯、硼酸酯、二甲基硫膦基、烷基2，4-二硝基苯基次磺酸酯、硫酸酯、甲烷磺酸酯(甲磺酸酯)、芐基磺酸酯和甲苯磺酸酯(Ts)。為了保護1，2-或1，3-二醇，`所述保護基團包括亞甲基縮醛、亞乙基縮醛、
1-叔-丁基亞乙基縮酮、1-苯基亞乙基縮酮、(4-甲氧基苯基)亞乙基縮醛、2，2，2-三氯亞乙基縮醛、丙酮化合物(acetonide)、環(huán)亞戊基縮酮、環(huán)亞己基縮酮、環(huán)亞庚基縮酮、苯亞甲基縮醛、對-甲氧基苯亞甲基縮醛、2，4-二甲氧基苯亞甲基縮酮、3，4-二甲氧基苯亞甲基縮醛、2-硝基苯亞甲基縮醛、甲氧基亞甲基縮醛、乙氧基亞甲基縮醛、二甲氧基亞甲基原酸酯、
1-甲氧基亞乙基原酸酯、1-乙氧基亞乙基原酸酯、1，2-二甲氧基亞乙基原酸酯、α -甲氧基苯亞甲基原酸酯、1-(N，N-二甲基氨基)亞乙基衍生物、α-(N，N’ - 二甲基氨基)苯亞甲基衍生物、2-氧雜亞環(huán)戊基原酸酯、二-叔-丁基亞硅基(DTBS)、1，3-(1，1,3, 3-四異丙基二亞硅氧烷基衍生物(TITOS)、四-叔-丁氧基二硅氧烷-1，3- 二亞基衍生物(TBDS)、環(huán)狀碳酸酯、環(huán)狀硼酸酯、硼酸乙酯和硼酸苯酯，但是并不限于以上這些基團。氨基保護基團包括氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、9-芴基甲基氨基甲酸酯(Fmoc)、9-(2-磺基)芴基甲基氨基甲酸酯、9-(2，7- 二溴)芴基甲基氨基甲酸酯、2，7- 二-叔-丁基-[9-(10，10-二氧代-10，10，10，10-四氫硫雜蒽基)]甲基氨基甲酸酯(DBD-Tmoc)、4-甲氧基苯甲酰甲基氨基甲酸酯(Phenoc)、2，2，2_三氯乙基氨基甲酸酯(Tioc)、2_三甲硅烷基乙基氨基甲酸酯(Teoc)、2_苯乙基氨基甲酸酯(hZ)、l-(l-金剛烷基)-1-甲基乙基氨基甲酸酯(Adpoc)、l，1-二甲基-2-鹵乙基氨基甲酸酯、1，1-二甲基-2，2-二溴乙基氨基甲酸酯(DB-t-BOC)、1，1__■甲基-2，2, 2-二氣乙基氣基甲酸酷(TCBOC) > 1-甲基-1- (4-聯苯基)乙基氨基甲酸酯(Bpoc)、1-(3，5-二-叔-丁基苯基)-1-甲基乙基氨基甲酸酯(t-Bumeoc)、
2-(2’_和4’-卩比啶基)乙基氨基甲酸酯(Pyoc)、2-(N，N-二環(huán)己基羧酰氨基)乙基氨基甲酸酯、叔-丁基氨基甲酸酯(BOC)U-金剛烷基氨基甲酸酯(Adoc)、乙烯基氨基甲酸酯(Voc)、烯丙基氨基甲酸酯(All0C)U-異丙基烯丙基氨基甲酸酯(Ipaoc)、肉桂基氨基甲酸酯(Coc)、4_硝基肉桂基氨基甲酸酯(Noc)、8_喹啉基氨基甲酸酯、N-羥基哌啶基氨基甲酸酯、烷基二硫代氨基甲酸酯、芐基氨基甲酸酯(Cbz)、對-甲氧芐基氨基甲酸酯(Moz)、對-硝基芐基氨基甲酸酯、對-溴芐基氨基甲酸酯、對-氯芐基氨基甲酸酯、2，4- 二氯芐基氨基甲酸酯、4-甲基亞硫酰基芐基氨基甲酸酯(Msz)、9_蒽基甲基氨基甲酸酯、二苯基甲基氨基甲酸酯、2-甲基硫代乙基氨基甲酸酯、2-甲基磺?；一被姿狨ァ?-(對-甲苯磺?；?乙基氨基甲酸酯、[2-(1，3_ 二噻烷基)]甲基氨基甲酸酯(Dmoc)、4-甲基苯硫基氨基甲酸酯(Mtpc)、2，4-二甲基苯硫基氨基甲酸酯(Bmpc)、2-磷基乙基氨基甲酸酯(Peoc)、2-三苯基磷基異丙基氨基甲酸酯(Ppoc)、1，1- 二甲基-2-氰乙基氨基甲酸酯、間-氯-對-酰氧基芐基氨基甲酸酯、對_( 二羥基硼基)芐基氨基甲酸酯、5-苯并異噁唑基甲基氨基甲酸酯、
2-(三氟甲基)-6-色酮基甲基氨基甲酸酯(Tctoc)、間-硝基苯基氨基甲酸酯、3，5-二甲氧基芐基氨基甲酸酯、鄰-硝基芐基氨基甲酸酯、3，4- 二甲氧基-6-硝基芐基氨基甲酸酯、苯基(鄰-硝基苯基)甲基氨基甲酸酯、吩噻嗪基-(10)-羰基衍生物、N’ -對-甲苯磺酰氨基羰基衍生物、N’ -苯基氨基硫代羰基衍生物、叔-戊基氨基甲酸酯、S-芐基硫代氨基甲酸酯、對-氰基芐基氨基甲酸酯、環(huán)丁基氨基甲酸酯、環(huán)己基氨基甲酸酯、環(huán)戊基氨基甲酸酯、環(huán)丙基甲基氨基甲酸酯、對-癸氧基芐基氨基甲酸酯、2，2- 二甲氧基羰基乙烯基氨基甲酸酯、鄰-(N，N- 二甲基羧酰氨基)芐基氨基甲酸酯、1，1- 二甲基-3- (N, N- 二甲基羧酰氨基)丙基氨基甲酸酯、 1，1-二甲基丙炔基氨基甲酸酯、二(2-吡啶基)甲基氨基甲酸酯、2-呋喃基甲基氨基甲酸酯、2-碘乙基氨基甲酸酯、異硼基氨基甲酸酯、異丁基氨基甲酸酯、異煙?；被姿狨?、P-(P’-甲氧基苯偶氮基)芐基氨基甲酸酯、1-甲基環(huán)丁基氨基甲酸酯、1-甲基環(huán)己基氨基甲酸酯、1-甲基-1-環(huán)丙基甲基氨基甲酸酯、1-甲基_1-(3，5-二甲氧基苯基)乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(對-苯偶氮基苯基)乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-苯乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(4-吡啶基)乙基氨基甲酸酯、氨基甲酸苯酯、對_(苯偶氮基)芐基氨基甲酸酯、2，4，6-三-叔-丁基苯基氨基甲酸酯、4-(三甲基銨基)芐基氨基甲酸酯、2，4，6-三甲基芐基氨基甲酸酯、甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3-苯基丙酰胺、吡啶酰胺、3-吡啶甲酰胺、N-苯甲酰基苯基丙氨?；苌?、苯甲酰胺、對-苯基苯甲酰胺、鄰-硝基苯乙酰胺、鄰-硝基苯氧基乙酰胺、乙酰乙酰胺、(N’- 二硫代芐氧基羰基氨基)乙酰胺、3_(對-羥苯基)丙酰胺、3-(鄰-硝基苯基)丙酰胺、2-甲基_2_(鄰-硝基苯氧基)丙酰胺、2-甲基_2_(鄰-苯偶氮基苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、
3-甲基-3-硝基丁酰胺、鄰-硝基肉桂酰胺、N-乙?；鞍彼嵫苌铩⑧?硝基苯甲酰胺、鄰_(苯酰氧基甲基)苯甲酰胺、4，5- 二苯基-3-噁唑啉-2-酮、N-鄰苯二甲酰亞胺、N- 二硫雜琥珀酰亞胺(Dts)、N-2，3-二苯基馬來酰亞胺、N-2，5-二甲基吡咯、N-1，I, 4，4-四甲基二硅烷基氮雜環(huán)戊烷加合物(STABASE)、5_取代的1，3-二甲基-1，3，5-三氮雜環(huán)己-2-酮、5-取代的1，3-二芐基-1，3，5-三氮雜環(huán)己-2-酮、1-取代的3，5-二硝基-4-吡啶酮、N-甲胺、N-烯丙基胺、N-[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲胺(SEM)、N-3-乙酰氧基丙胺、N-(1-異丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)胺、季銨鹽、N-芐胺、N- 二(4-甲氧基苯基)甲胺、N-5-二苯并環(huán)庚胺、N-三苯基甲胺(Tr)、N-[(4-甲氧基苯基)二苯甲基]胺(MMTr)、N-9-苯基芴胺(PhF)、N-2，7-二氯-9-芴基亞甲胺、N-二茂鐵基甲胺(Fcm)、N_2_吡啶甲基氨基N ’ -氧化物、N-1，1- 二甲基硫代亞甲胺、N-亞節(jié)基胺(N-benzyl i deneamine )、N-對-甲氧基亞芐基胺、N-二苯基亞甲胺、N-[ (2-吡啶基)均三甲苯基]亞甲胺、N-(N’，N’-二甲基氨基亞甲基)胺、N，N’ -異亞丙基二胺、N-對-硝基亞芐基胺、N-亞水楊基胺、N-5-氯亞水楊基胺、N- (5-氯-2-羥苯基)苯基亞甲胺、N-環(huán)亞己胺、N- (5，5- 二甲基-3-氧代-1-環(huán)己烯基)胺、N-硼烷衍生物、N- 二苯基硼酸衍生物、N-[苯基(五羰基鉻-或鎢)羰基]胺、N-銅螯合物、N-鋅螯合物、N-硝胺、N-亞硝胺、胺N-氧化物、二苯基膦酰胺(Dpp)、二甲基硫代膦酰胺(Mpt)、二苯基硫代膦酰胺(Ppt)、二烷基氨基磷酸酯、二芐基氨基磷酸酯、二苯基氨基磷酸酯、苯基亞磺酰胺、鄰-硝基苯基亞磺酰胺(Nps)、2，4-二硝基苯基亞磺酰胺、五氯苯亞磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯基亞磺酰胺、三苯基甲基亞磺酰胺、3-硝基吡啶亞磺酰胺(Npys)、對-甲苯磺酰胺(Ts)、苯磺酰胺、2，3，6，-三甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mtr)、2，4, 6-三甲氧基苯磺酰胺(Mtb)、2，6- 二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Pme)、2，3, 5，6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mte)、4_甲氧基苯磺酰胺(Mbs)、2，4，6-三甲基苯磺酰胺(Mts)、2，6- 二甲氧基-4-甲基苯磺酰胺(iMds)、2，2，5，7，8-五甲基色滿-6-磺酰胺(Pmc)、甲烷磺酰胺(Ms)、β-三甲基硅烷基乙烷磺酰胺(SES)、9-蒽磺酰胺、4-(4’，8’ - 二甲氧基萘甲基)苯磺酰胺(DNMBS)、芐磺酰胺、三氟甲基磺酰胺及苯甲酰甲基磺酰胺。本文詳細說明了保護基團，但是，應該理解的是，本公開并不旨在限制這些保護基團；相反，采用上述標準及本公開中采用的方法，很容易辨別各種其它等同的保護基團。此外，各種保護基團是所屬領域技術人員所熟悉的，并且包括 Protecting Groups in Organic Synthesis, T.ff.Greene和P.G.M.ffuts,第3版，John ffiley&Sons, 1999中詳細說明的那些基團，該文獻的全部內容通過引用并入本文。如本文所述，本公開的化合物可能包含“任選取代的”部分。一般來說，術語“取代的”，不管是在術語“任選地”后面或不在其后面，都指的是指定部分的一個或多個氫被合適的取代基取代。除非另外說明，否`則“任選取代的”基團在基團的每個可取代位置有一個合適的取代基，而且，當任何給定結構中不止一個位置被一個以上選自規(guī)定基團的取代基取代時，每個位置的所述取代基可以相同或不同。本公開設想的取代基的組合優(yōu)選是那些形成穩(wěn)定的或化學上可行的化合物的基團。如本文所用的術語“穩(wěn)定的”指的是當經歷允許其制備、檢測、以及在某些實施方案中，其回收、純化及用于一種或多種本文公開的目的的用途的條件時基本上不改變的化合物。“任選取代的”基團的可取代的碳原子上合適的一價取代基獨立地是鹵素；_(CH2)0^4Ro ； - (CH2)0^4ORo ；-O(CH2)0^4Ro、-O - (CH2)0_4C(0)0R° (CH2)0_4CH(OR。)2 ；-(CH2)0^4SRo ;可被 R° 取代的-(CH2)Q_4Ph ;可被 R° 取代的 _ (CH2) Q _ 40 (CH2) Q _ 種；可被 R。取代的-CH=CHPh ;可被 R ° 取代的-(CH2)tl_40(CH2)Q_「吡啶基；-NO25-CNN3;-(CH2) 0_4N(R° )2 (CH2) 0_4N(R° ) C(O)Rd ;_N(R ° )C(S)R°「(CH2) 0_4N(R ° )C(0)NR° 2;-N(R° )C(S)NR° 2 (CH2)q_4N(R° )C(0)0R° ;_N(R° )N(R° )C(0)R° ;-N(R° )N(R。)C(0)NR° 2;-N(R° )N(R。)C(0)0R° (CH2) q_4C (O) R。；-C(S)R° ；-(CH2) 0_4C (0)OR。(CH2)ch4C (O) SR ° (CH2)ch4C (O) OSiR。3 ； - (CH2)0^4OC(O)R ° OC (O) (CH2) 0 _4SR- , SC(S) SR ° ; - (CH2)0_4SC(0)R ° (CH2) 0_4C (O) NR ° 2 ;-C (S) NR ° 2 ;_C(S)SR。；-SC(S) SR°，-(CH2)ch4OC(O)NR° 2 ;-C(0)N(0R。)R° ；-C(O)C(O)R0 ； - C(O)CH2C(O)R。；-C(NOR。)R。；-(CH2)0_4SSR。；- (CH2)0_4S(O)2R。；- (CH2)0_4S(O)2OR。；_ (CH2)0_40S (O)2R0 ； -S(O)2NR0 2 (CH2)0_4S (O) R。；-N(R° ) S(0)2NR。2 ； -N(R° ) S (O)2Rd ；-N(OR。)R。；-C(NH)NR。2;-P(O)2R。；_P(0)R。2;_0P(0)R。2;-OP(O) (OR。)2 ;SiR0 3 ; - (Ci_4直鏈或支鏈亞烷基)0-N(R° )2 ;或-(Ci_4直鏈或支鏈亞烷基)C(O)0_N(R° )2，其中每個R°可如下文所述被取代，并獨立地是氫；(^_6脂族基團；-CH2Ph ；-O(CH2)0^1Ph ;-CH2-(5-6-元雜芳環(huán))、或5 _ 6元飽和、部分不飽和的基團；或具有0_4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的芳環(huán)；或不受上述定義束縛，兩個獨立出現的R°，連同它們的插入原子一起形成3 - 12元飽和、部分不飽和的基團；或具有0-4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的芳基單環(huán)或雙環(huán)，其如以下所定義的那樣可被取代。R0 (或通過兩個獨立出現的R°連同它們的插入原子一起形成的環(huán))上合適的一價取代基獨立地是鹵素、—(CH2)0_2R.、-(鹵代 R.)、— (CH2)0^2OH, - (CH2)0_20R.、-(CH2)0_2CH(0R*)2、-0(鹵代R.)、-CN、-N3、- (CH2)0_2C(0)R.、- (CH2)0^2C(O)OH, - (CH2)0-2C(0)0R.、- (CH2) q_2SR.、- (CH2) q_2SH、- (CH2)0^2NH2, - (CH2)0^2NHR*, - (CH2)0^2NRe2,-NO2, -SiRe3, -OSiRe3^-C(O) SR*.- (C1 _4 直鏈或支鏈亞烷基)C(0) OR.或-SSR.，其中每個Re是未取代的或在前面是“鹵代”時僅被一個或多個鹵素取代，并且是獨立地選自Ci_4脂族基團、-CH2PK -O(CH2)c^1Ph或5-6元飽和、部分不飽和的基團，或具有0-4個選自氮、氧或硫的雜原子的芳環(huán)。R°的飽和碳原子上合適的二價取代基包括=0和=S。“任選取代的”基團的飽和碳原子上合適的二價取代基包括下述基團:=0、=S、=NNR*2、=NNHC(O)R' =NNHC(O)OR' =NNHS(O)2R' =NR*, =nor% - o(c(r*2))2_3o-或-5((:0^2))2_35-，其中每個獨立出現的1^選自氫；如以下所定義的那樣可被取代的C1I脂族基團；或未取代的5-6元飽和、部分不飽和的基團；或具有0-4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的芳環(huán)。連接到“任選取代的”基團的鄰位可取代碳原子上的合適的二價取代基包括:-0(Clf2)2_30-，其中每個獨立出現的R*選自氫；如以下所定義的那樣可被取代的C1I脂族基團；或未取代的5-6元飽和、部分不飽和的基團；或具有0-4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的芳環(huán)。R*的脂族基團上合適的取代基包括鹵素、-RV-(鹵代Re)、_0H、-OR.、_0(鹵代 R.)、- CN,-C(O) OH, -C (O) OR.、-NH2、-NHR 、-NR.2 或-NO2，其中每個 R 是未取代的或在前面是“鹵代”時僅被一個或多個鹵素取代，并且獨立地是CV4脂族基團、-CH2PK -O (CH2) ^ _ fh或5 - 6元飽和、部分不飽和的基團，或具有0-4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的芳環(huán)?！叭芜x取代的”基團的可取代氮原子上合適的取代基包括
權利要求
1.一種治療患有癌癥的受試者中的癌癥的方法，包括對所述受試者施用治療有效量的免疫原性糖綴合物，其中所述免疫原性糖綴合物包含具有由至少五個氨基酸殘基組成的肽骨架的多抗原糖肽，其中五個或更多個所述氨基酸獨立地具有以下結構:
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖肽出現5至7次A。
3.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖肽出現7次A。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖肽出現6次A。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖肽出現5次A。
6.根據權利要求5所述的方法，其中每次出現的A都不同。
7.根據權利要求1所述的方法，其中每個LI獨立地是-CH2(CH2)nO-,以提供具有下述結構的氨基酸:
8.根據權利要求7所述的方法，其中每個η獨立地是3-5。
9.根據權利要求8所述的方法，其中每個η獨立地是3或5。
10.根據權利要求1所述的方法，其中L1不是-O-(CHMe)-或-0_CH2_。
11.根據權利要求1所述的方法，其中所述治療有效量包括有效抑制腫瘤生長的量。
12.根據權利要求1所述的方法，其中所述治療有效量包括有效誘發(fā)識別至少一種所述糖類決定子的抗體的量。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述治療有效量包括有效誘發(fā)識別每種所述糖類抗原的抗體的量。
14.根據權利要求1所述的方法，其中所述治療有效量是有效治療一種或多種實體腫瘤的量。
15.根據權利要求14所述的方法，其中所述癌癥是乳腺癌或前列腺癌。
16.根據權利要求14所述的方法，其中所述癌癥是卵巢癌。
17.根據權利要求16所述的方法，其中所述癌癥是腹膜癌。
18.根據權利要求16所述的方法，其中所述癌癥是輸卵管癌。
19.根據權利要求14所述的方法，其中所述癌癥是上皮癌。
20.根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者處于臨床緩解期，或者其中所述受試者已通過手術進行治療，具有有限的未切除的疾病。
21.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖肽直接或間接與免疫原性載體蛋白、肽或脂質連接。
22.根據權利要求21所述的方法，其中所述免疫原性載體是牛血清白蛋白、聚賴氨酸、鑰孔血藍蛋白或三棕櫚酰-S- 甘油基半胱氨酰絲氨酸。
23.根據權利要求1-22中任一項所述的方法，其中所述方法進一步包括同時施用一種或多種免疫佐劑。
24.根據權利要求23所述的方法，其中所述一種或多種免疫佐劑中至少一種是皂苷佐劑。
25.根據權利要求23所述的方法，其中所述佐劑是QS-21。
26.根據權利要求23所述的方法，其中所述一種或多種免疫佐劑中至少一種是細菌或脂質體。
27.根據權利要求26所述的方法，其中所述佐劑是明尼蘇達沙門氏菌細胞或卡介苗。
28.根據權利要求1-22中任一項所述的方法，其中所述方法進一步包括同時施用藥學上合適的載體。
29.根據權利要求1所述的方法，其中所述糖綴合物具有下述結構:
30.根據權利要求29所述的方法，其中m是5-7。
31.根據權利要求30所述的方法，其中m是5。
32.根據權利要求29所述的方法，其中P是O。
33.根據權利要求29所述的方法，其中t是50至1200。
34.根據權利要求33所述的方法，其中t是200至800。
35.根據權利要求33所述的方法，其中t至少是300。
36.根據權利要求35所述的方法，其中t至少是400。
37.根據權利要求36所述的方法，其中t至少是500。
38.根據權利要求37所述的方法，其中t是500至800。
39.根據權利要求29所述的方法，其中每次出現的A都不同。
40.根據權利要求29所述的方法，其中所述糖綴合物具有下述結構:
41.根據權利要求40所述的方法，其中m是5。
42.根據權利要求40所述的方法，其中η是3至5。
43.根據權利要求40所述的方法，其中每個A是選自由Globo-H、STN、Tn、TF和GM2所組成的組的糖類決定子，并且其中每次出現的A都不同。
44.根據權利要求40所述的方法，其中每個A是選自由Globo-H、STN、Tn、TF和Gb5所組成的組的糖類決定子，并且其中每次出現的A都不同。
45.根據權利要求29所述的方法，其中所述交聯劑是源自能夠將載體的表面胺和所述接頭的硫醇綴合的雙官能團交聯劑的部分。
46.根據權利要求45所述 的方法，其中所述交聯劑是具有下述結構的部分:
47.根據權利要求45所述的方法，其中所述接頭是直鏈或支鏈烷基羧酸酯或芳基羧酸酯，或任選取代的二價C1,飽和或不飽和直鏈或支鏈烴鏈，其中所述鏈的I至6個亞甲基單元獨立地被- S-、- NR-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-O-或-C(O)-替換。
48.根據權利要求47所述的方法，其中所述接頭是-NH(CH2)2_5NHC (O) CH2S-。
49.根據權利要求48所述的方法，其中所述接頭是-NH(CH2) 3NHC (O) CH2S_。
50.根據權利要求1或40所述的方法，其中所述糖綴合物具有下述結構:
51.根據權利要求1或40所述的方法，其中所述糖綴合物具有下述結構:
52.—種在受試者中誘導抗體的方法，其中所述抗體能夠與人腫瘤細胞特異性結合，所述方法包括對所述受試者施用免疫原性糖綴合物，其中所述免疫原性糖綴合物包含具有由至少五個氨基酸殘基組成的肽骨架的多抗原糖肽，其中五個或更多個所述氨基酸獨立地是:
53.根據權利要求52所述的方法，其中所述誘導的抗體識別選自由Globo-H、STN、Τη、TF、Gb5和GM2組成的組的糖類決定子中的至少一種。
54.根據權利要求52所述的方法，其中所述產生的抗體識別所述糖肽上存在的每種所述糖類決定子。
55.一種方法，包括以下步驟: (a)使免疫原性載體蛋白與交聯劑孵育以提供待交聯的免疫原性載體蛋白； (b)用合適的二硫化物還原劑處理含硫醇生物分子'及 (c)將待交聯的免疫原性載體蛋白與含硫醇生物分子在合適的條件下結合以提供免疫原性載體蛋白-生物分子綴 合物。
56.根據權利要求55所述的方法，進一步包括在與待交聯的免疫原性載體蛋白綴合之前，新鮮制備含硫醇生物分子的步驟。
57.一種方法，包括以下步驟: (a)用合適的二硫化物還原劑處理含硫醇生物分子； (b)使含硫醇生物分子與交聯劑孵育以提供待交聯的生物分子；及 (c)將待交聯的生物分子與免疫原性載體蛋白在合適的條件下結合以提供免疫原性載體蛋白-生物分子綴合物。
58.根據權利要求57所述的方法，進一步包括在用合適的二硫化物還原劑處理之前，新鮮制備含硫醇生物分子的步驟。
59.根據權利要求55或57的方法，其中所述生物分子是糖肽。
60.根據權利要求55所述的方法，進一步包括在步驟(a)中去除未反應的交聯劑的步驟。
61.根據權利要求55所述的方法，進一步包括在綴合步驟(c)后去除未反應的生物分子的步驟。
62.根據權利要求55所述的方法，其中所述免疫原性載體蛋白是KLH。
63.根據權利要求55所述的方法，其中所述含硫醇生物分子是糖肽。
64.根據權利要求55所述的方法，其中所述交聯劑是間-馬來酰亞胺苯甲?；?N-羥基琥珀酰亞胺。
65.根據權利要求55所述的方法，其中所述用合適的二硫化物還原劑處理含硫醇生物分子的步驟包括TCEP。
66.根據權利要求55或57所述的方法，其中所述方法的綴合效率是每種免疫原性載體蛋白至少200個生物分子。
67.根據權利要求66所述的方法，其中所述方法的綴合效率是每種免疫原性載體蛋白至少400個生物分子。
68.根據權利要求67所述的方法，其中所述方法的綴合效率是每種免疫原性載體蛋白至少500個生物分子。
69.根據權利要求66所述的方法，其中所述方法的綴合效率是每種免疫原性載體蛋白200至800個生物分子。
70.一種糖綴合物，具有下述結構:
71.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A選自Globo-H、STN、Tn、TF、Gb5 或 GM2。
72.根據權利要求70所述的綴合物，其中每次出現的A都選自Globo-H、STN、Τη、TF、Gb5 或 GM2。
73.根據權利要求70所述的綴合物，其中每次出現的A都不同。
74.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A包括二糖或更大的糖類。
75.根據權利要求70所述的綴合物，其中每次出現的A都包括二糖或更大的糖類。
76.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A包括三糖或更大的糖類。
77.根據權利要求70所述的綴合物，其中每次出現的A都包括三糖或更大的糖類。
78.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A包括分子量大于350道爾頓的糖類。
79.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A包括分子量大于500道爾頓的糖類。
80.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A包括分子量大于750道爾頓的糖類。
81.根據權利要求70所述的綴合物，其中至少一次出現的A是Globo-H、Gb5或GM2。`
82.根據權利要求70所述的綴合物，其中t大于400。
83.根據權利要求82所述的綴`合物，其中t大于500。
84.根據權利要求70所述的綴合物，其中t是200-1200。
85.一種糖肽，具有下述結構:
86.根據權利要求85所述的糖肽或糖綴合物，其中m是5-7。
87.根據權利要求85所述的糖肽或糖綴合物，其中P是0。
88.根據權利要求85所述的糖肽或糖綴合物，其中每個A是選自由Gb5、Globo-H、STN、Tn和TF組成的組的糖類決定子。
89.根據權利要求88所述的糖肽或糖綴合物，其中每次出現的A都不同。
90.根據權利要求88所述的糖肽，具有下述結構:
91.一種藥物組合物，其包含根據權利要求70-90中任一項所述的糖肽或糖綴合物，其中所述藥物組合物包含藥學上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了包含GM2和/或Gb5糖類決定子的糖肽綴合物以及制備和使用此類綴合物的方法。證明了選擇的糖肽綴合物的免疫原性。包含GM2抗原的疫苗組合物會使患者的臨床前景惡化而不是改善，在本發(fā)明的糖肽和/或糖綴合物的情況中包含GM2的疫苗組合物在模型系統中顯示出顯著的生物益處。因此，本發(fā)明的糖肽綴合物提供通過施用包含GM2聚糖(如，在糖肽和/或糖綴合物的情況中)的疫苗組合物治療患有或易患某些癌癥的個體的方法。
文檔編號A61K39/00GK103108654SQ201180039259
公開日2013年5月15日 申請日期2011年6月10日 優(yōu)先權日2010年6月11日
發(fā)明者賽繆爾·J·達尼謝夫斯凱, 戈文德·拉古帕蒂, 菲利普·O·利文斯頓, 朱江龍, 卡爾蒂克·耶爾, 楊廣斌 申請人:索隆-基特林癌癥研究協會