專利名稱：蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的用途，特別涉及一種蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
自2003年，我國(guó)對(duì)艾滋病患者開展了 “四免一關(guān)懷政策”，抗病毒藥物在全國(guó)范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用?？共《局委煼桨赣善鸪醯膯我缓塑疹惸孓D(zhuǎn)錄酶抑制劑發(fā)展到2種核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑以及2種核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑與1種非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑或蛋白酶抑制劑的聯(lián)合應(yīng)用，極大地降低了艾滋病的發(fā)病率和死亡率。但由于抗HIV藥物引起的不良反應(yīng)以及耐藥毒株的迅速產(chǎn)生，使得許多抗HIV藥物應(yīng)用受到限制。因此發(fā)現(xiàn)和發(fā)展選擇性好、安全有效的HIV抑制劑仍然是目前HIV藥物治療的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。天然產(chǎn)物為研發(fā)新型抗HIV藥物提供了廣闊的資源空間。1 Liying Ma, Yanfang Guo, Lin Yuan，et al. Phenotypic and Genotypic Characterization of Human Immunodeficiency Virus Type 1(HIV-I)CRFO7_B’ /C Circulating in China. Retrovirology, 2009,6 452展鵬，劉新永.核苷(酸)類HIV-I逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的耐藥性機(jī)制.中國(guó)藥學(xué)雜志，2007,42(15) :1125-11313杉菜編譯.英國(guó)艾滋病患者的耐藥性居世界之首.國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào)，2001，27 (10) 444李鈺，李敬云.HIV耐藥性研究進(jìn)展.中國(guó)艾滋病性病，2004，1(K4) :309-3115Trachtenberg JD，李春元.非核苷類似物逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的耐藥性.國(guó)外醫(yī)學(xué) 流行病學(xué).傳染病學(xué)分冊(cè)，2003，30(1) 576呂乃達(dá)，王綠林.艾滋病中醫(yī)藥治療研究.中醫(yī)藥臨床，2005，17 ) =409-410蕨麻(Potentilla anserina L.)為薔薇科委陵菜屬植物鵝絨委陵菜的地下塊根， 素有“人參果”之美稱，藏醫(yī)稱為“卓老灑曾”。其主要生長(zhǎng)于青藏高原海拔^K)0m-4750m 的草甸、河渠旁邊，是一種分布廣泛、蘊(yùn)藏量大、天然優(yōu)質(zhì)的野生植物資源?！吨兴幋筠o典》、 《西藏常用中草藥》等書中記載“蕨麻性平味甘、健脾益胃、生津止渴、益氣補(bǔ)血，既可食用， 又可入藥，主治脾虛腹瀉、營(yíng)養(yǎng)不良、貧血等病癥；其全草入藥，有收斂止血、止咳利痰之功效?！毖芯勘砻鬓楦缓罅康牡矸邸⒅舅峒叭梭w所需的十八種氨基酸和各種微量元素， 其維生素C、維生素E含量明顯高于其它塊根類食物，具有較高的醫(yī)藥和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，具有廣闊的開發(fā)利用前景。7王晉，張堅(jiān)，康勝利，等.青海產(chǎn)蕨麻營(yíng)養(yǎng)成分的研究.青海醫(yī)藥雜志，1998， 28(2) 52-538尚德靜，回晶，李慶偉.西藏人參果營(yíng)養(yǎng)成分分析及評(píng)價(jià).營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2002， 24(1) 93-95現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明蕨麻具有提高免疫力、抗氧化、抗缺血缺氧、抗疲勞、抗衰老、補(bǔ)血及保肝降脂等藥理活性。蕨麻中含有大量多糖成分，在體外能明顯促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖，提高脾指數(shù)；對(duì)免疫功能低下網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能具有明顯的激活作用，同時(shí)可拮抗環(huán)磷酰胺(CY)所致的遲發(fā)性超敏反應(yīng)抑制，升高血中IL-6、INF-i^PTNF-a的水平，對(duì)非特異性免疫和細(xì)胞免疫均具有明顯增強(qiáng)作用。蕨麻提取液具有較強(qiáng)的抗氧化作用，能明顯對(duì)抗氧自由基導(dǎo)致的紅細(xì)胞老化；蕨麻多糖對(duì)羥自由基、超氧陰離子均具有良好的清除作用，對(duì)調(diào)理酵母聚糖誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞釋放的H2A具有抑制作用。對(duì)CC14誘導(dǎo)的肝損傷具有保護(hù)作用。蕨麻可顯著降低小鼠血液中的乳酸含量，延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，提高小鼠體能，從而具有抗疲勞功能。蕨麻可以提高小鼠血中紅細(xì)胞數(shù)量，降低脾/體比值，具有一定補(bǔ)血作用。蕨麻可減輕肥胖小鼠體重，降低膽固醇和甘油三酯的含量，。袁海龍等從蕨麻中提取和分離出主要成分為三萜類化合物的“蕨麻素”，對(duì)病毒性肝炎和化學(xué)性肝損傷均有較好療效。9陳炅然，胡庭俊，程富勝，等.蕨麻多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞增殖和一氧化氮分泌的影響.中國(guó)獸醫(yī)科技，2005，；35(9) =735-73810陳炅然，胡庭俊，張瑞孝，等.蕨麻多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2005，2 14-1611李靈芝，張麗，龔海英，等.蕨麻醇提物抗缺氧及抗氧化機(jī)制研究.中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2005，17 ) :306-30912陳炅然，王琴.蕨麻多糖的提取及其清除自由基的作用.中國(guó)獸醫(yī)科技，2004， 34(4) 59-6213回晶，尚德靜，李慶偉.西藏人參果對(duì)小鼠抗疲勞及抗缺氧能力的影響.營(yíng)養(yǎng)學(xué) 2003,25(2) :218-21914賈守寧，楊卉.蕨麻抗缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，1999，5(1) 3715袁海龍，肖小河，蔡光明，等.肝靶向蕨麻素毫微粒的制備工藝研究.中國(guó)中藥雜志，2004，四(6) :589-59016張新全，趙艷玲，山麗梅，等.蕨麻素對(duì)化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用機(jī)制的研究.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2004，2(K4) =259-26117李園媛，袁勤生.青藏高原蕨麻植物抗氧化作用的研究.藥物生物技術(shù)，2004， 11(1) :25-2818謝學(xué)淵，王強(qiáng).蕨麻提取物抗衰老作用研究.重慶醫(yī)學(xué)，2007，36 ) :734-73619李靈芝，張麗，龔海英，等.蕨麻石油醚部位的抗氧化活性研究.中草藥，2007， 38(6) :889-891.20李建宇，李怡，龔海英，等.蕨麻正丁醇部位對(duì)小鼠急性缺血心肌損傷的保護(hù)作用·中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2009，7(1) 48-5221回晶.西藏蕨麻補(bǔ)血機(jī)能及有效成分的研究.遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文， 200322張勇.西藏蕨麻降血脂減肥有效部位及減肥機(jī)理初探.遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文，2005提高機(jī)體免疫力使艾滋病防治的的重要手段。在艾滋病治療中結(jié)合使用中藥可以改善患者癥狀體征，提高免疫功能，使病毒VL處于穩(wěn)定狀態(tài)，提高生存質(zhì)量，延長(zhǎng)壽命，使患者長(zhǎng)期帶毒生存。蕨麻兼具抗病毒作用和增強(qiáng)免疫功能的作用，從而使得蕨麻提取物具備了用于抗HIV治療的可能性，但是迄今為止尚未有此方面的研究報(bào)道。23楊泉海，王霞.抗艾滋病病毒藥物研究進(jìn)展.首都醫(yī)藥，2004 (8) :41-43M呂乃達(dá)，王綠林.艾滋病中醫(yī)藥治療研究.中醫(yī)藥臨床，2005，17 ) =409-410

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。通過體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)及HIV病毒體外抑制試驗(yàn)，觀察蕨麻提取物的抗艾滋病毒作用，結(jié)果表明該蕨麻提取物對(duì)HIV-I標(biāo)準(zhǔn)株、臨床株、假病毒均有一定的抑制作用，具有抑制HIV病毒復(fù)制的活性。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1蕨麻提取物的制備過程取蕨麻干燥塊根，粉碎，以體積濃度為70%的乙醇水溶液回流提取，減壓濃縮后以熱水分散，石油醚萃取脫脂；水層過濾得澄清液，上D-101大孔樹脂，先以3倍量的水洗，然后以3倍量體積濃度為30%乙醇水溶液洗脫，收集此流份，減壓濃縮，冷凍干燥即得棕色粉末為蕨麻提取物。以下是該蕨麻提取物抗HIV-I作用的實(shí)驗(yàn)說明實(shí)驗(yàn)一基于TZM-bl的病毒抑制實(shí)驗(yàn)。1 方法根據(jù)參考文獻(xiàn)滴定病毒，用200TCID50病毒做藥物活性檢測(cè)。第一天TZM-bl細(xì)胞接種到96孔平板(1 X 104/孔)培養(yǎng)，24h后棄培養(yǎng)上清，加入200TCID-50病毒，并加入系列稀釋的蕨麻提取物，并設(shè)立細(xì)胞對(duì)照與病毒對(duì)照，4 后用 Luciferase Assay kit (PR0MEGA)檢測(cè) TZM-bl 細(xì)胞中的熒光強(qiáng)度。2 結(jié)果本實(shí)驗(yàn)使用實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)株觀察了蕨麻提取物對(duì)SF33和臨床分離株XJDC257和 02010068復(fù)制的抑制作用，從結(jié)果可知，提取物對(duì)SF33的平均IC50為5. 42μ g/ml，對(duì)兩株臨床分離株抑制的平均IC50為2. 00 μ g/ml。(表1)表1蕨麻提取物對(duì)HIV實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)株SF33及臨床株的抑制作用
權(quán)利要求
1.蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蕨麻提取物在制備抗艾滋病藥物中的應(yīng)用，通過體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)及HIV病毒體外抑制試驗(yàn)，觀察蕨麻提取物的抗艾滋病毒作用，結(jié)果表明該蕨麻提取物對(duì)HIV-1標(biāo)準(zhǔn)株、臨床株、假病毒均有一定的抑制作用，具有抑制HIV病毒復(fù)制的活性。
文檔編號(hào)A61K36/73GK102204970SQ20111013071
公開日2011年10月5日 申請(qǐng)日期2011年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月19日
發(fā)明者劉鐵軍, 張永亮, 李靈芝, 王舒, 馬麗英 申請(qǐng)人:中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)醫(yī)學(xué)院, 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心