專利名稱：卡氮芥粉針劑及制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種卡氮芥為藥物，形成前體脂質(zhì)體形式的粉針劑組方及制備工藝。
背景技術(shù)：
卡氮芥(Canmustin)，也稱卡莫司汀(分子式為C5H9Cl2N3O2)，簡稱CBNU，是廣普抗癌藥，具有高脂溶性，易通過血腦屏障，是腦瘤的首選藥，對于惡性腦瘤，惡性腫瘤的腦脊髓轉(zhuǎn)移，白血病伴有侵犯中樞神經(jīng)的患者療效較好，其抗癌機制是與DNA聚合酶作用，抑制 RNA和DNA的合成，對腦瘤細(xì)胞有較強的殺傷作用，其作用與烷化劑類似。BCNU在抑制腦瘤細(xì)胞的同時也殺傷正常細(xì)胞，主要是作用于骨髓造血系統(tǒng)，對白細(xì)胞、血小板的抑制比較明顯。通常在用藥后3—5周內(nèi)出現(xiàn)，給藥期間有惡心、嘔吐、食欲減退等消化道反應(yīng)，大劑量時也可產(chǎn)生肝胃毒性反應(yīng)，與皮膚接觸可出現(xiàn)色素沉著或皮炎。通常的卡氮芥注射液是無菌聚乙二醇水溶液，卡氮芥的穩(wěn)定性較差，在水溶液中長時間儲存易于分解。為了降低BCNU的毒副作用，增強穩(wěn)定性，提高療效，采用脂質(zhì)體作為 BCNU的載體。脂質(zhì)體(Liposomem縮寫L)是一種人工類生物膜，是由一層或多層類脂質(zhì)雙分子層所組成的封閉微囊。其膜為脂相，可包裹脂溶性藥物；其余部分為水相，可包裹水溶性藥物。脂質(zhì)體具有很大的包被藥物的潛能，脂溶性強或水溶性強的兩類藥物為脂質(zhì)體包被的最適宜藥物。BCNU是強親脂性物質(zhì)，可包裹于脂質(zhì)雙分子層中，并可能獲得高包封率，故脂質(zhì)體可能是BCNU最佳的載體。組成脂質(zhì)體的膜材(磷脂類和固醇類)與哺乳動物細(xì)胞的膜物質(zhì)相似，在機體內(nèi)易于被降解，具有生物相容性，無免疫原性和毒性?？ǖ姘谥|(zhì)體的雙層膜內(nèi)，大大減小了其對人體的毒副作用，可以對病人連續(xù)用藥。但是卡氮芥脂質(zhì)體在溶液狀態(tài)下仍存在著不穩(wěn)定性，如藥物的滲漏、粒子的聚集以及磷脂在液態(tài)下的氧化、 水解等問題，使其實際應(yīng)用受到影響。前體脂質(zhì)體是以某種結(jié)晶性粉末為支持劑，將脂質(zhì)膜以適當(dāng)?shù)姆绞桨苍诖私Y(jié)晶性粉末上，以此固態(tài)形式貯存，只是在臨用前加入分散介質(zhì)，即可再分散形成脂質(zhì)體。這種辦法解決了脂質(zhì)體分散系的物理不穩(wěn)定性，如藥物的滲漏、粒子的聚集以及磷脂在液態(tài)下的氧化、水解等。而且便于運輸、貯存，也適用于工業(yè)生產(chǎn)?？ǖ娣坩槃┘词菍⒖ǖ姘庠谥|(zhì)體的雙層膜內(nèi)，然后將此脂質(zhì)膜包覆在一種結(jié)晶性粉末上，從而形成毒性低、穩(wěn)定性好、易于貯存運輸?shù)男聞┬汀１景l(fā)明的作者曾在專利《卡氮芥粉針劑及制備方法》，專利號為CN98113958. 2中介紹了卡氮芥前體脂質(zhì)體粉針劑的組方及制備方法，該方法的特點是先將卡氮芥包封到磷脂與固醇所形成的脂質(zhì)雙層膜中，再將此脂質(zhì)膜包覆到甘露醇結(jié)晶性粉末上，形成了卡氮芥粉針劑，使用時用水與粉針劑混合，形成卡氮芥脂質(zhì)體注射液。由于卡氮芥包封在脂質(zhì)體層膜里，大大減小了卡氮芥對人體的毒副作用，可以對病人連續(xù)用藥，保證了療效。同時，因為此劑型為固體粉末，可有效避免卡氮芥的水解，大大提高了產(chǎn)品穩(wěn)定性并方便運輸。在專利CN98113958. 2中，BCNU在脂質(zhì)體中的包封率通常為90%左右，體系中仍有10%左右游離BCNU。其在水中分散形成脂質(zhì)體，99%以上的粒徑小于5μπι。為進一步提高產(chǎn)品的安全性與穩(wěn)定性，我們對產(chǎn)品進行了改進。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明在以前工作基礎(chǔ)上，對組方及工藝進一步改進，提供一種降低脂質(zhì)體的粒徑，提高BCNU包封率的前體脂質(zhì)體卡氮芥粉針劑的組方及其制備方法，使卡氮芥粉針劑產(chǎn)品更穩(wěn)定更安全。本發(fā)明的卡氮芥粉針劑組方及其制備方法其組方中包含有BCNU、大豆磷脂、膽固醇、甘露結(jié)晶性粉末。該發(fā)明的組方中，各組份的重量百分比是按如下方式實現(xiàn)的卡氮芥1.5-3%;大豆磷脂15-20%;膽固醇4-6%;甘露醇71.1-79. 5%。該發(fā)明中所用的大豆磷脂是以磷脂酰膽堿(也稱卵磷脂)與磷脂酰乙醇胺(也稱腦磷脂)為主要成份的混合物，這是經(jīng)過一定工藝分離提純而成的主要用于靜脈注射的精制大豆磷脂，要求其中的磷脂酰膽堿重量含量為65% 70%，磷脂酰乙醇胺重量含量為 14%-20%。在組方中精制大豆磷脂與膽固醇形成具有封閉微囊的脂質(zhì)體膜，與其他單一磷脂(如卵磷脂)同膽固醇形成的脂質(zhì)體相比，該脂質(zhì)體膜具有更好的膜強度與包覆性，可有效提高卡氮芥的包封率，并使脂質(zhì)體更易于均勻分散，形成粒徑更小的分散體。實驗證明， 在脂質(zhì)體的形成過程中，在卵磷脂中加入一定量的腦磷脂，比單獨使用卵磷脂所形成的脂質(zhì)體膜更堅韌，孔隙更小，且其在水中分散性更好。這種以卵磷脂和腦磷脂為主要成份的精制大豆磷脂要優(yōu)于其他磷脂。該發(fā)明中的結(jié)晶性粉末主要起支持劑作用，脂質(zhì)膜能夠包覆在該結(jié)晶性粉末表面，使之能在固態(tài)下保存，防止藥物的滲漏、氧化、水解等，提高藥物的穩(wěn)定性與安全性。該結(jié)晶性粉末以甘露醇的效果為最佳。在CN98113958.2中，結(jié)晶性粉末的含量為55-71% ； 但，在以精制大豆磷脂與膽固醇為脂質(zhì)體主要組份的體系中，甘露醇的含量以71. 1-79. 5% 為佳。所形成的卡氮芥脂質(zhì)體前體，其包封率可達(dá)100%，且此粉針劑極易分散于水，通?？稍?分鐘左右溶于水中，所形成的脂質(zhì)體顆粒更細(xì)小，更均勻，99%以上的粒徑都小于 2 μ m0本發(fā)明的卡氮芥粉針劑的制備方法是將卡氮芥、精制大豆磷脂、膽固醇等成份用溶劑溶解成溶液。溶劑一般采用乙醚、乙醇。該溶解過程要求按同一個方向搖動混合使溶解。將溶解所得溶液分次加入到不斷攪拌的甘露醇結(jié)晶性粉末中，混合均勻后，經(jīng)真空干燥回收溶劑，制成松散的卡氮芥粉針劑。將產(chǎn)品分裝并充氮，封口。本發(fā)明的所有操作均需在 4-6 °C和無菌條件下操作。我們用庫爾特法(Coulter)研究了其粒度及其分布，使用TA-II型庫爾特 (Coulter)儀進行測定，結(jié)果表明卡氮芥粉針劑分散于水中所形成脂質(zhì)體，最大粒徑不超過10 μ m，粒徑大于5 μ m的粒子不超過0. 2%。，99%以上的粒徑小于2 μ m。符合中國2000 年藥典有關(guān)脂質(zhì)體粒度的規(guī)定。采用紫外線分光光度法測定BCNU的含量，用凝膠色譜柱(型號kphadex G_50)篩分法除掉游離的BCNU，測定包封率。結(jié)果表明，體系中未檢出游離的BCNU，BCNU的包封率為100%。產(chǎn)品經(jīng)4_6°C貯存18個月，定時檢測，觀察產(chǎn)品的外觀色澤、含量及包封率的變化，分散時間的變化，形成的脂質(zhì)體粒度及其分布的變化。結(jié)果表明，在18個月的貯存中， 含量基本沒變化，包封率仍然為100%，將卡氮芥粉針劑分散到水中形成的脂質(zhì)體的粒度基本為5μπι以內(nèi)，2μπι以內(nèi)的粒度仍為99 %以上，外觀色澤仍為淡黃色，顆粒有結(jié)塊現(xiàn)象，但不影響在水中分散，分散時間通常在5-8分鐘。表明這種卡氮芥粉針劑是比較穩(wěn)定的。動物急性毒性試驗研究結(jié)果卡氮芥粉針劑的LD50 = 188. 15士27. 48mg/kg,而普通的BCNU注射液的LD50 = 45. 20士8. 47mg/kg，其毒性降低4. 2倍。用本發(fā)明所制的卡氮芥粉針劑，對腦內(nèi)惡性腫瘤化療進行了臨床研究，實施病例 66例，總有效率64%，顯效21%。在6個月的治療中，CT跟蹤檢查結(jié)果，腫瘤縮小明顯，未出現(xiàn)骨髓抑制等毒副作用，與普通的水溶性脂質(zhì)體相比較，療效更好。但因臨床使用時間短，臨床病例數(shù)據(jù)統(tǒng)計尚不完全。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明。實施例中所有操作均在4_6°C和無菌條件下操作。實施例1、稱量精制大豆磷脂100g、膽固醇25g、卡氮芥12. 5g、甘露醇412. 5g，以乙醚為溶劑，同一方向搖動使溶解至澄明，放置，過濾，分次噴灑于不斷攪拌的甘露醇結(jié)晶粉末上，混勻。以0.75-0. IMpa真空干燥，回收乙醚。所得產(chǎn)品中乙醚含量不得檢出。分裝成100支并充入99. 99 %高純氮氣，封口。其中在精制大豆磷脂中，磷脂酰膽堿重量含量為66 %，磷脂酰乙醇胺重量含量為20%。實施例2稱量精制大豆磷脂108g、膽固醇30.5g、卡氮芥14. 6g、甘露醇396. 9g，以乙醚為溶劑，同一方向搖動使完全溶解，放置，過濾，分次噴灑于不斷攪拌的甘露醇結(jié)晶粉末上，混勻。以0.75-0. IMpa真空干燥，回收乙醚。對產(chǎn)品進行檢測，合格后分裝，并充入99. 99%高純氮氣，封口。其中在精制大豆磷脂中，磷脂酰膽堿重量含量為70%，磷脂酰乙醇胺重量含量為14. 3%。實施例3稱量精制大豆磷脂91. 6g、膽固醇22. 9g、卡氮芥10. 5g、甘露醇425g，以乙醚為溶劑，同一方向搖動使完全溶解，放置，過濾，分次噴灑于不斷攪拌的甘露醇結(jié)晶粉末上，混勻。真空干燥，回收乙醚。所得產(chǎn)品檢測合格后分裝成100瓶，并充入99. 99%高純氮氣， 封口。其中在精制大豆磷脂中，磷脂酰膽堿重量含量為67.6%，磷脂酰乙醇胺重量含量為 17. 1%。取一定量上述實施例所得產(chǎn)品，溶于水中得到卡氮芥注射液，檢測其中游離的 BCNU含量、包封率，粒徑及分散時間等，檢測結(jié)果如下卡氮芥粉針劑檢測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種卡氮芥粉針劑，各組份的重量百分比如下卡氮芥1. 5-3% ；大豆磷脂:15-20% ；膽固醇4-6% ；甘露醇71. 1-79. 5%。
2.如權(quán)利要求1所說的卡氮芥粉針劑，其特征在大豆磷脂為磷脂酰膽堿重量含量為 65% 70%、磷脂酰乙醇胺重量含量為14% -20%的精制大豆磷脂。
3.一種卡氮芥粉針劑的制備方法，是將卡氮芥、大豆磷脂、膽固醇等成份用溶劑溶解成溶液，該溶解過程要求按同一個方向搖動混合使其溶解；各組份的重量百分比為卡氮芥 1.5-3%，用大豆磷脂15-20%，膽固醇4-6%，甘露醇71. 1-79.5% ；溶劑采用乙醚或乙醇； 將溶解所得溶液分次噴灑到甘露醇結(jié)晶性粉末上，混合均勻后，經(jīng)真空干燥回收溶劑，制成松散的卡氮芥粉針劑。
4.如權(quán)利要求3所說的卡氮芥粉針劑的制備方法，其特征在大豆磷脂為磷脂酰膽堿重量含量為65% 70%、磷脂酰乙醇胺重量含量為14% -20%的精制大豆磷脂。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種前體脂質(zhì)體形式的卡氮芥粉針劑及制備工藝。該卡氮芥粉針劑是由卡氮芥、大豆磷脂、膽固醇及甘露醇結(jié)晶性粉末為主要成份。其中各組份的重量百分比范圍為，卡氮芥1.5-3％；大豆磷脂15-20％；膽固醇4-6％；甘露醇71.1-79.5％。所用的大豆磷脂中，磷脂酰膽堿重量含量為65％～70％，磷脂酰乙醇胺重量含量為14％-20％。該工藝所制的卡氮芥粉針劑特點是包封率可達(dá)100％，易于分散于水，粒徑小，穩(wěn)定性更好，毒副作用小，更安全，貯存也更方便。
文檔編號A61K47/28GK102198100SQ20111013021
公開日2011年9月28日 申請日期2011年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月19日
發(fā)明者馬淑賢 申請人:周洪海, 馬淑賢