專利名稱：一種治療心腦血管疾病的人參皂苷組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，具體涉及一種由人參皂苷單體恥工與人參皂苷單體Rb1組成的治療心腦血管疾病的藥物組合物。
背景技術：
心腦血管疾病是威脅人類健康的首要疾病，是導致死亡和致殘最多的疾病，已被世界衛(wèi)生組織(WHO)認定為危害人類健康的“頭號殺手”，全世界每年約有1500萬人死于心腦血管病，占死亡人數(shù)的50%以上。我國每年約有400萬人死于此病，每M秒就有一個人死于此病，每13秒就有一位人因此而致殘，已占我國總死因的40%。根據(jù)世界衛(wèi)生組織預測，至2020年，非傳染性疾病將占我國死亡原因的79%，其中心血管疾病占首位。心腦血管疾病有三高一低的特點發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、治愈率低。全世界心腦血管病發(fā)病率最高的國家地區(qū)就在中國，中國以北方為高發(fā)病區(qū)。由此導致的家庭、醫(yī)療和經(jīng)濟負擔已成為不可小覷的社會問題。社會需要更多療效顯著、安全的心腦血管疾病治療藥物。心腦血管系統(tǒng)疾病用藥一直是世界范圍內(nèi)藥物研究開發(fā)、生產(chǎn)應用的熱點。因此，開發(fā)生產(chǎn)心腦血管系統(tǒng)疾病用藥并實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化具有極其重要的社會意義和經(jīng)濟意義。三七總皂苷具有活血祛瘀，通脈活絡作用，目前三七總皂苷及其制劑血塞通系列產(chǎn)品臨床上廣泛用于中風偏癱、瘀血阻絡及腦血管疾病后遺癥、胸痹心痛，視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞屬瘀血阻滯證者。三七總皂苷中成分復雜，目前已知并且作為質量控制指標的成分主要有人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl、人參皂苷Re、人參皂苷Rd和三七皂苷R1，其他稀有皂苷因含量較低，很難測定其含量，并且因三七藥材的差異及各廠家制備工藝的不同導致不同批次三七總皂苷中人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl、人參皂苷Re、人參皂苷Rd、三七皂苷Rl和其他稀有皂苷含量均有不同程度的差異和比例的不同。在臨床用藥過程中因不良反應發(fā)生率在逐年上升，隨著用量不斷增加和擴大，安全性問題已成為重要的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種更加安全的治療心腦血管疾病的藥物組合物，具有藥效確切，安全性高，不良反應低的優(yōu)點。本發(fā)明提供的治療心腦血管疾病的藥物組合物，包含人參皂苷單體與人參皂苷單體M3l，其中M3l重量比例為1 4 4 1。作為優(yōu)選，所述藥物組合物由人參皂苷單體與人參皂苷單體Rb1組成，其中Rg1 與Rb1重量比例為1 4 4 1 ；所述心腦血管疾病為出血性疾病或缺血性疾病。更優(yōu)選地，所述藥物組合物中與Rb1重量比例為1 4。本發(fā)明還提供一種治療心腦血管疾病的藥物制劑，包含人參皂苷單體和人參皂苷單體M3l以及藥學上可接受的輔料，其中M3l重量比例為1 4 4 1。更優(yōu)選地，所述藥物制劑中與Rb1重量比例為1 4。
作為優(yōu)選，所述藥物制劑為注射液、注射用凍干粉針劑或口服制劑。有文獻報道，人參皂苷Rbl、人參皂苷Rgl在實驗性心肌缺血、對血管平滑肌作用等方面與三七總皂苷相似，且兩者都為擴張血管平滑肌的有效成分。因此在前期研究中，發(fā)明人利用心腦血管疾病模型，反復篩選驗證由人參皂苷Rgl和人參皂苷Rbl組成的配比組合。隨著研究的深入，發(fā)明人在以抗血小板聚集、抗血栓和抗耐缺氧為指標的心腦血管疾病模型中發(fā)現(xiàn)了更具治療活性的人參皂苷Rgl和人參皂苷Rbl的配比組合。傳統(tǒng)三七中人參皂苷Rgl 人參皂苷Rbl配比約1 1，傳統(tǒng)知識認為Rgl是活血化淤的主要成分，Rbl活血化瘀的活性很弱，因此，現(xiàn)有技術中人參皂苷Rgl和人參皂苷Rbl配比與傳統(tǒng)三七相符，人參皂苷Rgl 人參皂苷Rbl配比約1 1，且認為三七中人參皂苷Rgl具有較強的溶血作用， 人參皂苷Rbl則無溶血作用。在三七皂苷注射劑標準中，溶血試驗一直是安全性評價的重要指標。發(fā)明人深入研究意外發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所述新配比人參皂苷Rgl比例大幅降低，而人參皂苷Rbl比例升高， 尺^與！^^重量比例為1 4，其安全性比三七及三七總皂苷制劑更優(yōu)。按照本發(fā)明，所述藥物組合物具有顯著的抗血小板聚集作用，可預防血栓形成；特異性心肌耐缺氧模型顯示所述藥物組合物有非常顯著的耐心肌缺氧作用，且小鼠的存活時間Rgl Rbl(l 4)組較三七總皂苷組高出近10%。對膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)小鼠體內(nèi)血栓形成的影響研究顯示，本發(fā)明所述藥物組合物組具非常顯著的保護作用(P <0.01)，且Rgl Rbld 4)組和Rgl Rbl (1 1) 組與三七總皂苷組比較死亡率遠低于三七總皂苷組，提示可能三七總皂苷中其他成分影響而導致死亡率升高，而Rbl比例的增高使其對抗膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)小鼠體內(nèi)血栓的能力加強。對斷頭法小鼠急性腦缺血的影響研究顯示，本發(fā)明所述藥物組合物可顯著延長斷頭小鼠的喘息時間，Rgl RbKl 4、1 5)組的延長率較三七總皂苷組長，而 Rgl RbKl 4)組的延長率較Rgl RbKl 5)組的延長率高。本發(fā)明所述藥物組合物能明顯延長小鼠的凝血時間，其中，Rgl RbKl 4)組的延長率較三七總皂苷組高20 %。溶血實驗顯示，相同濃度的Rgl Rbl(l 4)組、Rgl Rbl (1 1)組與 Rgl Rbl (4 1)組晚于Rgl Rbl (5 1)組和三七總皂苷組發(fā)生溶血反應。本發(fā)明所述藥物組合物中的人參皂苷或Rb1來源于生藥三七、人參、西洋參或半合成，可以從市場上購得，純度要求為90%以上。本發(fā)明所述藥物組合物具有活血祛瘀，通脈活絡功效，用于瘀血阻絡，中風偏癱， 胸痹心痛及視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞癥，藥效確切，不良反應發(fā)生率明顯降低，Rgl與Rbl重量比例為1 4時，其LD5tl大于1000mg/kg，顯著高于三七總皂苷的LD5(^455mg/kg)；可明顯抑制血栓形成作用和抗凝作用，能從根本改善缺血性心腦疾病患者因缺血產(chǎn)生的各種損傷。本發(fā)明所述藥物組合物具有明顯的抗血栓、抗血小板聚集和抗耐缺氧作用，并且通過不同比例的配比實驗研究發(fā)現(xiàn)，其藥理活性較三七總皂苷作用強。傳統(tǒng)認為三七中人參皂苷Rgl是活血的主要成分，并且具有較強的溶血作用，而人參皂苷Rbl活血作用較弱， 但是本發(fā)明證實在復方時，傳統(tǒng)認為活血的成分Rgl所占比例少，反而具有更好的活血功效。并且從急性毒性試驗和溶血試驗看，本發(fā)明在安全性方面有明顯的改善，本發(fā)明與三七總皂苷相比，溶血性明顯降低，從而更能保障制劑的安全性。
具體實施例方式本發(fā)明公開了一種治療心腦血管疾病的包含人參皂苷單體Rgl與人參皂苷單體 Rbl的藥物組合物，本領域技術人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應用已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應用本發(fā)明技術。本發(fā)明治療心腦血管疾病的人參皂苷單體Rgl和人參皂苷單體Rbl組合物與其他三七總皂苷注射制劑相比具有藥效相當，成分清楚固定，質量可控等優(yōu)勢，通過下列藥效學實驗證明。本發(fā)明的更詳細情況可在實施例中找到，而不是將保護范圍限制到該實施例。下面結合實施例，進一步闡述本發(fā)明試驗樣品人參皂苷Rgl，昆明制藥集團股份有限公司提供，純度99.3%，批號20091011 ；人參皂苷Rbl，昆明制藥集團股份有限公司提供，純度98.6%，批號20091109;三七總皂苷，昆明制藥集團股份有限公司提供，含量93%，批號20080115。實施例1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl及其配比對ADP誘導家兔體外血小板聚集的影響1 藥品1. 1受試藥物配制實驗前用蒸餾水配制成高濃度為3. 5700mg/ml、中濃度為1. 7850mg/ml、低濃度為 0. 8925mg/ml作為終濃度的溶液，人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的不同配比溶液配制均按人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl上述濃度的不同體積配比混勻而成。正常對照組選用生理鹽水，其中各劑量的受試藥物及生理鹽水中每IOml中加入吐溫30 μ 1。以上受試藥物在體外給藥前均配制成澄明溶液。1. 2 試齊[J二磷酸腺苷(ADP) =Sigma公司產(chǎn)品；枸櫞酸鈉天津市化學試劑三廠，批號 061107 ；氯化鈉注射液昆明南疆制藥有限公司，批號Α08070412 ；水合氯醛(分析純)天津市瑞金特化學品有限公司，批號20060917 ；吐溫-80(化學純CP)國藥集團化學試劑有限公司，批號:F20050324o2 動物健康家兔，早兼用，體重2-2. 5kg,四川省醫(yī)學科學研究院動物研究所提供，生產(chǎn)批號Dossy-2009-10。3 儀器LBY-NJ2血液凝聚儀北京普利生儀器有限公司；LG10-2. 4A高速離心機北京高速離心機廠。4統(tǒng)計方法
計量資料用單因素方差分析，多組間比較采用Durmett檢驗。試驗方法1試驗原理富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP)具有一定的濁度，PRP中所含血小板數(shù)目直接影響到濁度高度。當誘導劑加入PRP后，在攪拌的條件下，血小板聚集成聚集物， PRP濁度下降，透光率增加，因此通過測定PRP的濁度變化來表示血小板的聚集程度。由于血小板聚集儀中的光電系統(tǒng)可將PRP的濁度變化裝換為電訊號變化，并用記錄儀進行描記。2藥物濃度設置及依據(jù)2. 1人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl及三七總皂苷高濃度終濃度為3. 57mg/ml而設置。本試驗高、中、低濃度組劑量設置按等比級數(shù)設置為(1)A藥人參皂苷Rgl、B藥人參皂苷Rbl及三七總皂苷高劑量組3. 5700mg/ml ； (2)人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl及三七總皂苷中濃度組1. 7850mg/ml ； (3)人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl及三七總皂苷低濃度組 0.8925mg/ml。2. 2給藥途徑各藥均為體外給予。2. 3觀察指標血小板最大聚集率及血小板聚集抑制率。3試驗步驟3. 1 取血用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉家兔，自頸總動脈取血，收集于一次性塑料試管中，采用3. 2%枸櫞酸鈉抗凝，血液與抗凝劑容積比為9 1，取后立即顛倒混勻(不可用力晃動)。3.2 富血小板血漿(platelet rich plasma, PRP)和貧血小板血漿(platelet poorplasma, PPP)的制備血液于室溫分別采用800r/min離心6min，所得上層血漿即為不同轉速PRP。剩余血液再以3000r/min離心15min，上層液即為PPP。試驗過程中，PRP中的血小板數(shù)控制在約為50萬個· mm-3。。3. 3血小板最大聚集率(MaxRate)的測定按Born氏比濁法原理采用血小板聚集儀進行測定。分別取不同轉速PPP300 μ 1 于比濁杯中調(diào)零，取PRP 270 μ 1于另一比濁杯中加溶媒或受試藥液30 μ 1，在37°C預熱孔中溫育5min。測定時將PPP杯插到測試孔中調(diào)零，取出PPP杯插入PRP杯，并在PRP中加入攪拌子，然后在儀器操作提示下加入終濃度為15ymol/L的誘導劑ADP 10μ1，誘導血小板聚集，測定5min內(nèi)血小板最大聚集率。血小板聚集抑制率按下式計算聚集抑制率(％ ) =(1-給藥組聚集率/對照組聚集率)X 100%。4試驗結果人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl三七總皂苷各濃度和人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl 各配比對ADP誘導家兔體外血小板聚集作用的影響，結果見表1，從表1可以看出與正常對照組比較，人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl高、中劑量組及三七總皂苷高、中、低劑量組與正常對照組比較，差異均具有顯著性意義(P < 0. 05、P < 0. 01或？ < 0. 001) ；Rgl Rbl = 1 1,4 1,1 4,2 1,1 2的高濃度及Rgl Rbl = 1 4的中濃度與正常對照組比較，差異均具有顯著性意義(P < 0. 05、P < 0. 01或P < 0. 001)。5.結論人參皂苷Rgl，人參皂苷Rbl高、中濃度及三七總皂苷高、中、低濃度，及Rgl Rbl =1 1，4 1,1 4,2 1,1 2的高濃度及Rgl Rbl = 1 4的中濃度具有顯著的抗血小板聚集作用。實驗結果可見在高中劑量時，Rgl Rbl = I 4對血小板的抑制率與三七總皂苷的相同，提示該配比有預防血栓形成的作用。表1A、B藥及三七總皂苷和A B不同配比對ADP誘導家兔體外血小板聚集率的影響(X 士S，n = 6)
權利要求
1.一種治療心腦血管疾病的藥物組合物，包含人參皂苷單體Rg1與人參皂苷單體Rb1, 其中!^與！^重量比例為1 4 4 1。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，由人參皂苷單體Rg1與人參皂苷單體Rb1組成，其中與Rb1重量比例為1 4 4 1。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于，其中與Rb1重量比例為 1 4。
4.根據(jù)權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，所述心腦血管疾病為出血性疾病或缺血性疾病。
5.一種治療心腦血管疾病的藥物制劑，包含人參皂苷單體恥工和人參皂苷單體Rb1以及藥學上可接受的輔料，其中與I^b1重量比例為1 4 4 1。
6.根據(jù)權利要求5所述的藥物制劑，其特征在于，收工與Rb1重量比例為1 4。
7.根據(jù)權利要求5所述的藥物制劑，其特征在于，其為注射液或注射用凍干粉針劑。
8.根據(jù)權利要求5所述藥物制劑，其特征在于，其為口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，公開了一種用于治療心腦血管疾病的藥物組合物，包含重量比例為1∶4～4∶1的人參皂苷單體Rg1和人參皂苷單體Rb1。本發(fā)明所述藥物組合物具有活血祛瘀，通脈活絡功效，用于瘀血阻絡，中風偏癱，胸痹心痛及視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞癥，藥效確切，不良反應發(fā)生率明顯降低，Rg1與Rb1重量比例為1∶4時，其LD50大于1000mg/kg，顯著高于三七總皂苷LD50，可明顯抑制血栓形成作用和抗凝作用，從根本改善缺血性心腦疾病患者因缺血產(chǎn)生的各種損傷。
文檔編號A61P9/00GK102397281SQ20101028027
公開日2012年4月4日 申請日期2010年9月9日 優(yōu)先權日2010年9月9日
發(fā)明者劉一丹, 劉國光, 楊旭娟, 高宏濤, 龔云麒 申請人:昆明制藥集團股份有限公司