專利名稱：一種假環(huán)多肽及其合成方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗菌藥物領(lǐng)域，具體涉及一種具有抗菌功能的假環(huán)多肽及其合成方法 和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
抗菌肽是生物體經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽。傳統(tǒng)抗生素類藥 物一般而言，其抗菌譜一般較窄且通常只對細(xì)菌有效，對真菌、病毒等病原體無效且易產(chǎn)生 耐藥性；抗菌肽則不僅具有高效、廣譜的抗菌活性，而且具有潛在的抗病毒、抗腫瘤活性、不 易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)。因此抗菌肽在生物醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、免疫學(xué)等許多方面有著可觀的發(fā)展前 景。迄今為止，已經(jīng)從動物、植物、微生物和人體上發(fā)現(xiàn)超過300多種抗菌肽。Loloatins抗菌肽家族包含4個成員，即Loloatin A、B、C和D，它們是在實驗室 條件下由采集于巴布亞新幾內(nèi)亞南部海灘沿岸大堡礁上的海洋微生物的發(fā)酵液中分離出 來的一類環(huán)十肽抗菌素。研究發(fā)現(xiàn)，該家族中的Loloatin C[結(jié)構(gòu)式為CyCl0-(-L-Val-L -Orn-L-Leu-D-Tyr-L-Pro-L-Trp-D-Phe-L-Asn-L-Asp-L-Trp)]不僅對革蘭氏陽性菌(G+) 表現(xiàn)出和tyrocidine C—致甚至更好的抗菌活性，還對革蘭氏陰性菌(G)Escherichia coli 表現(xiàn)出明顯的抗菌活性(Gerard, J. Μ.，etal. J. Nat. Prod. 1999，62，80-85)。Chen 隨 后的研究發(fā)現(xiàn)Loloatin C的藥核結(jié)構(gòu)為-D-Tyr-Pro-Trp-D-Phe-，即該四肽序列結(jié)構(gòu)對 Loloatin C抑菌活性的發(fā)揮起著關(guān)鍵的作用(Chen H. Preparation and Evaluation of the Loloatins and Their Analogues. Ann Arbor, Mich :UMI,2003)。
研究結(jié)果表明，抗菌肽是通過破壞細(xì)菌細(xì)胞膜的完整性從而使得膜的穿透性增加而殺死細(xì)菌(Ghadiri，M. R. et al. ，Nature, 2001,412 452-455 ；Zasloff, M. ，Nature, 2002,415 :389-395)。因此，以Loloatin C的藥核結(jié)構(gòu)作為模板，設(shè)計不同邊鏈環(huán)化的假環(huán) 多肽化合物，以此調(diào)控環(huán)的三維結(jié)構(gòu)，使其具有更剛性的α-螺旋結(jié)構(gòu)特征或納米管狀結(jié) 構(gòu)，將是構(gòu)建具有更強(qiáng)抗菌活性的抗菌肽的有效途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有的抗菌素類藥物中存在的抗菌譜較窄且通常只對細(xì) 菌有效，對真菌、病毒等病原體無效，易產(chǎn)生耐藥性的缺點(diǎn)，提供一種高效、廣譜、不易產(chǎn)生 耐藥性的抗菌假環(huán)多肽。本發(fā)明另一目的在于提供上述假環(huán)多肽的合成方法。本發(fā)明還有一個目的在于提供上述假環(huán)多肽的應(yīng)用。本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)本發(fā)明假環(huán)多肽是在對來自海洋微生物代謝物L(fēng)oloatin C抗菌藥核結(jié)構(gòu)研究的 基礎(chǔ)上設(shè)計合成的，該假環(huán)多肽包含Loloatin C的藥核序列結(jié)構(gòu)-Α1-Α2-Α3-Α4-。作為一種優(yōu)選方案，所述Al為L-酪氨酸或D-酪氨酸；所述Α2為L-脯氨酸或 D-脯氨酸；所述A3為L-色氨酸或D-色氨酸；所述Α4為L-苯丙氨酸或D-苯丙氨酸。
作為一種最優(yōu)選方案，本發(fā)明假環(huán)多肽對邊鏈骨架進(jìn)行環(huán)化，Loloatin C的藥核 結(jié)構(gòu)具體序列為-D-Tyr-Pro-Trp-D-Phe-，如式(I)所示，其中，m可以是2、3、或4 ;n可以 是 2、3、4 或 6 ； 式(I)。本發(fā)明假環(huán)多肽的合成方法是采用液相法合成結(jié)構(gòu)構(gòu)件，固相法合成線性假多 肽，最后經(jīng)稀溶液環(huán)化法合成得到假環(huán)多肽。式⑴所示的假環(huán)多肽的合成途徑如下1 · H2N (CH2) nNH2 — Cbz-HN (CH2) nNH2 作為一種優(yōu)選方案，本發(fā)明假環(huán)多肽的具體合成步驟如下所示(1)構(gòu)件Cbz-NH (CH2) n_NH2的合成室溫下將二胺H2N (CH2) nNH2溶解于二氯甲 烷中，冷至0°C，滴加氯甲酸芐酯(CbZ-Cl)進(jìn)行反應(yīng)。二胺和氯甲酸芐酯的摩爾比為 1.0 (0.5 0.3)，最好為1.0 0.33，保持0°C反應(yīng)過夜，然后撤去冰浴，升至室溫反 應(yīng)1 3h。反應(yīng)完成后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、洗滌、干燥、減壓蒸餾，最后快速柱層析純化，制得 Cbz-NH (CH2)n-NH2，產(chǎn)率見表 1 ；表1構(gòu)件Cbz-NH (CH2) n_NH2的合成產(chǎn)率 (2)構(gòu)件HOOC(CH2)m-CO2BzI的合成將相應(yīng)的酸酐加熱至熔融狀態(tài)，逐滴滴加芐 醇，酸酐與芐醇的摩爾比為1.0 (1.0 3.0)，最后為1.0 1.5。滴加完畢，繼續(xù)攪拌反 應(yīng)lh，冷卻，加入飽和氯化鈉溶液，二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，經(jīng)水洗、干燥、減壓蒸餾除溶 劑，快速柱層析純化，制得目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率見表2 ；表2構(gòu)件HOOC (CH2) m_C02Bzl的合成產(chǎn)率 (3)線性假多肽的合成氨基酸的裝配從C端到N端逐個進(jìn)行，由人工控制或合成 儀(美國應(yīng)用系統(tǒng)生物公司生產(chǎn)的Pioneer多肽合成儀)設(shè)定自動控制。首先稱取0. Immol 結(jié)合了第一個氨基酸即D-Phe的Wang樹脂(購自吉爾生化(上海)有限公司)，裝于多肽反 應(yīng)器中，用20%體積比的二氯甲烷(DCM) 二甲基甲酰胺(DMF)溶液溶脹30min，然后用30% 體積比的哌啶二甲基甲酰胺溶液脫保護(hù)基(Fmoc)，DMF清洗3次。將9-芴甲氧羰基(Fmoc) 保護(hù)的氨基酸溶于三吡咯基膦氧苯駢三氮唑六氟合磷鹽(PyBOP)，羥基苯駢三唑(HOBt)和 二異丙基乙基胺(DIPEA)，溶解后的溶液加于反應(yīng)器中偶合反應(yīng)60 120min，DMF清洗3 次；重復(fù)以上脫保護(hù)、偶合反應(yīng)、清洗等步驟直到制備結(jié)束，制備完成后，線性假多肽經(jīng)如下 步驟從樹脂上剪切取下反應(yīng)后的肽樹脂，加入切肽試劑(其組成為95%三氟醋酸，2.5% 二氯甲烷，2. 5%三乙基硅烷)，室溫反應(yīng)2h，過濾，濾液在室溫下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸除易揮發(fā) 溶劑，加適量冷乙醚洗滌，殘留物加少量水，冷凍干燥得線性假多肽粗品；線性假多肽的純 化采用反相高效液相法(RP-HPLC)，洗脫液為甲醇-0. 三氟醋酸水溶液，收集洗脫峰，冷 凍干燥，產(chǎn)品經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定，線性假多肽的序列結(jié)果及產(chǎn)率見表3 ；表3線性假多肽的結(jié)構(gòu)及產(chǎn)率 (4)抗菌假環(huán)多肽的合成準(zhǔn)確稱取線性假多肽溶解于干燥的乙腈中，使得溶液 濃度在10_2 10_4mol/L之間，分批加入4 6倍量、一般為5倍量的環(huán)合試劑，環(huán)合試劑一 般為0-苯駢三氮唑基-N，N，N' ,N'-四甲基脲四氟合硼鹽(TBTU)/羥基苯駢三唑(HOBt)/ 二異丙基乙胺(DIPEA)。旋轉(zhuǎn)蒸除溶劑，粗品用反向高效液相(RP-HPLC)分離純化，假環(huán)多 肽的結(jié)構(gòu)及產(chǎn)率見表4。表4抗菌假環(huán)多肽的結(jié)構(gòu)及產(chǎn)率
本發(fā)明假環(huán)多肽可以用于制備抗菌藥物，特別是用于制備治療革蘭氏陽性菌或革 蘭氏陰性菌感染的藥物。利用96孔板法檢測抗菌肽的抗菌活性，并以預(yù)先合成的天然抗菌 肽Loloatin C為對照，進(jìn)行抗菌活性檢測。結(jié)果表明，本發(fā)明所設(shè)計合成的抗菌假環(huán)多肽 CHR-2、CHR-5、CHR-9保留了 Loloatin C的抗菌活性，抗菌假環(huán)多肽CHR-6比Loloatin C 具有更好的抗菌活性。此外，本發(fā)明還檢測了合成抗菌假環(huán)多肽對人體紅細(xì)胞的溶血活性，實驗表明，抗 菌假環(huán)多肽的溶血率值很低，證實本發(fā)明所涉及的合成抗菌假環(huán)多肽的溶血毒性很小。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果(1)本發(fā)明假環(huán)多肽用于制備抗菌藥時，具有高效、廣譜、不易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)， 其中假環(huán)多肽CHR-6的抗菌活性比Loloatin C更好；(2)實驗證實，本發(fā)明假環(huán)多肽的溶血毒性很小，用于抗菌藥時，對人體的毒副作 用小，適合推廣應(yīng)用；(3)本發(fā)明假環(huán)多肽的制備方法反應(yīng)條件溫和，操作簡便安全，產(chǎn)品純度高，容易 自動化，總收率穩(wěn)定。


圖1為線性假多肽L的質(zhì)譜圖；圖2為假環(huán)多肽CHR-2的質(zhì)譜圖。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。實施例1抗菌假環(huán)多肽CHR-2的制備及分離純化抗菌假環(huán)多肽CHR-2的結(jié)構(gòu)見通式I和表4，經(jīng)4個步驟合成。(I)Cbz-NH(CH2)2NH2 的制備將 1. 8g(30mmol)乙二胺溶解在 250mL 的二氯甲烷 中，充分?jǐn)嚢瑁±鋮s至0°c，隨后向此溶液中緩慢滴加溶有IOmmol芐氧羰基氯的IOmL 二氯甲烷溶液，約需要lh，滴加完后，繼續(xù)保持在0°C下反應(yīng)過夜。撤去冰浴，反應(yīng)液升至 室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。反應(yīng)結(jié)束后，將白色懸浮物過濾除去，濾液用飽和氯化鈉水溶液洗 滌(3X50mL)，無水硫酸鈉干燥后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，快速柱層析純化，得3. 92g N-芐氧 羰基乙二胺，產(chǎn)率為67. 2%。產(chǎn)物經(jīng)NMR和MS譜鑒定。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7. 34 (m, 5H)，5. 18 (br, 1H, -C0NH-)，5. 08 (s, 2H)，3. 25 (d, J = 6. OHz, 1H)，3. 20 (d, J = 6. OHz, 1H)， 2. 80 (t, J = 6. 0Hz, 2H)，1. 48(s，2H，-NH2) ；ESI-MS m/z :calc fOrC10H14N2O2 194. 1 ；found for [M+H]+ 195.3。(2)HOOC(CH2)2CO2Bzl 的制備將 1. 5g(15mmol) 丁二酸酐加入到 50mL 的圓底燒 瓶中，油浴加熱到120°C讓其剛好熔解，保持120°C，攪拌下逐滴滴加1.08g(10mmOl)芐醇， 15min內(nèi)滴完，繼續(xù)反應(yīng)lh。隨后加入50mL飽和氯化鈉水溶液終止反應(yīng)，并用二氯甲烷萃取 (3X50mL)，合并有機(jī)相，有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌(3X50mL)、無水硫酸鈉干燥后， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，快速柱層析純化，得丁二酸單芐酯2. 84g，產(chǎn)率為91.3%。產(chǎn)物經(jīng)匪R和 MS 鑒定。1H NMR(400MHz, CDCl3) δ :7· 37-7. 34 (m，5Η)，5· 15 (s，2Η)，2· 74-2. 66 (m，4Η) ； 13C NMR (400MHz, CDCl3) δ :178· 4，172. 0，135. 6，128. 5，128. 2，128. 1,66. 6,28. 9,28. 8 ； ESI-MS m/z :calc for C11H13O4 208. 2 ；found for [M+Na]+231. 7。(3)線性假多肽 HOOC (CH2) 2C0-D-Tyr-Pro_Trp-D-Phe-NH (CH2) 2NH2 (L)的制備采 用固相多肽合成法，氨基酸的裝配從C端到N端逐個進(jìn)行，由人工控制。首先稱取0. Immol 結(jié)合了第一個氨基酸即D-Phe的Wang樹脂(購自吉爾生化(上海)有限公司)，加到多肽 合成反應(yīng)器中，用20%體積比的二氯甲烷(DCM) 二甲基甲酰胺(DMF)溶液溶脹30min，然后 用30%體積比的哌啶二甲基甲酰胺溶液脫保護(hù)基(Fmoc)，DMF清洗3次。將9-芴甲氧羰基 (Fmoc)保護(hù)的氨基酸即Fmoc-Trp-OH溶于三吡咯基膦氧苯駢三唑六氟合磷鹽(PyBOP)Ji 基苯駢三唑(HOBt)和二異丙基乙基胺(DIPEA)，溶解后的溶液加入多肽反應(yīng)器中偶合反應(yīng) 60 120min，DMF清洗3次；重復(fù)以上脫保護(hù)、偶合反應(yīng)、清洗等步驟，依次偶合Pro，D-Tyr， 丁二酸單芐酯，得肽樹脂。取下反應(yīng)后的肽樹脂，加入切肽試劑(其成分為95%三氟醋酸，2. 5%二氯甲烷， 2. 5%三乙基硅烷)，室溫反應(yīng)2h，過濾，濾液在室溫下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸除易揮發(fā)溶劑，加少 量水，冷凍干燥得中間體化合物Δ。稱取80. 2mg (0. Immol)中 間 # A, 57. 2mg PyBOP (0. 1 Immo 1)及13. 5mgH0Bt (0. llmmol)，分別加到IOmL的西林瓶中，同時加入5mL新鮮干燥的DCM/DMF混 合溶液和0.06mL DIEA，避光攪拌反應(yīng)15min。用滴管將所生成的活潑酯溶液轉(zhuǎn)移至溶有 64. Img (0. 33mmol) I-N-芐氧羰基_1，2_乙二胺的5mL 二氯甲烷溶液，避光偶合反應(yīng)2h，旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶劑盡量除去，然后將其溶解在IOmL甲醇中，加入0. 2g 5% Pd/C，并通入氫氣，進(jìn) 行脫芐氧羰基保護(hù)基及脫芐酯保護(hù)基，攪拌反應(yīng)8h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶劑除去，得線性假多肽L 粗品。線性假多肽粗品的純化采用反相高效液相法(RP-HPLC)，洗脫液為甲醇-0. 三 氟醋酸水溶液，采用梯度洗脫，收集各洗脫峰餾分，室溫下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去甲醇，水溶液經(jīng)冷 凍干燥，得 44. Img 線性假多肽 HOOC (CH2) 2CO-D-Tyr-Pro-Trp-D-Phe_NH (CH2) 2NH2 純品 L， 產(chǎn)率為58. 4%。產(chǎn)品經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定目標(biāo)線性假多肽的理論分子量M值為753. 84，質(zhì)譜 圖1中顯示的分子量為754. 5，為[M+H]+峰。(4)抗菌假環(huán)多肽CHR-2的合成準(zhǔn)確稱取75. 4mg (0. lmmol)線性假多肽樣品L， 溶解在IOOmL無水乙腈，室溫攪拌下分批加入環(huán)化劑0. 6mmolTBTU/H0BT/DIPEA,攪拌環(huán)化 24h。室溫下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶劑除去，得相應(yīng)的假環(huán)多肽粗品。粗品的純化采用反相高效液相 法(RP-HPLC)，洗脫液為甲醇-0. 三氟醋酸水溶液，采用梯度洗脫，收集各洗脫峰餾分， 室溫下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去甲醇，水溶液經(jīng)冷凍干燥，得4. 5mg抗菌假環(huán)多肽CHR-2，產(chǎn)率6. 1 %。 產(chǎn)品經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定目標(biāo)假環(huán)多肽的理論分子量M值為735. 93，質(zhì)譜圖2中顯示的分子 量為735. 7和736. 6，分別為[M]+和[M+H]+峰。實施例2合成抗菌假環(huán)多肽的抗菌活性檢測以下實施例中所使用的各種菌株購于中國生物制品鑒定所。采用96孔板法對合成的抗菌肽的抗菌活性進(jìn)行檢測，具體步驟是將菌種復(fù)蘇， 接種斜面37°C培養(yǎng)過夜，挑菌體于MH培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)過夜，稀釋菌液使其濃度為IO4 105CFU/ml，按每孔100 μ 1菌液接種于96孔板中，隨后將多肽按一定比例稀釋后，每孔中加 入10 μ 1，將96孔板置于37°C培養(yǎng)過夜，酶標(biāo)儀檢測OD57tl值。檢測結(jié)果列于表5。含有抗菌肽的細(xì)菌的生長濃度(OD57tl)與不加抗菌肽的細(xì)菌的生長濃度(OD57tl)的 差值相比于后者的比值若大于90%時，其抗菌肽濃度即近似等同于最小抑制濃度(MIC)。 MIC被定義為顯著抑制細(xì)菌生長的最低濃度。表5中，MIC值越小，表示抗菌假環(huán)多肽的抗菌能力越強(qiáng)。表5五種抗菌環(huán)肽對不同細(xì)菌的最小抑菌濃度(MIC) 實施例3體外溶血活性檢測本實施例用于檢測合成抗菌假環(huán)肽對人體紅細(xì)胞的溶血活性，使用的血樣取于正 常人血。具體的檢測步驟是人血紅細(xì)胞經(jīng)PBS緩沖溶液(35mM磷酸緩沖液/0. 15mol/L NaCl, pH 7.0)洗滌，取100 μ 1的8%人血紅細(xì)胞懸液于96孔板中，每孔中加入100 μ 1抗 菌肽溶液，37°C搖蕩Ih后，1500rpm離心5min，轉(zhuǎn)移100 μ 1上清液于新的96孔板中，通過 酶標(biāo)儀檢測414nm波長下的吸收。陽性對照采用0. 1% Triton X-100,陰性對照采用PBS。 檢測結(jié)果列于表6。表6中抗菌肽的溶血率值越小，表示其溶血毒性越小。表6五種抗菌環(huán)肽的溶血活性
權(quán)利要求
一種假環(huán)多肽，其特征在于該假環(huán)多肽包含Loloatin C的藥核序列結(jié)構(gòu) A1 A2 A3 A4 。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的假環(huán)多肽，其特征在于所述Al為L-酪氨酸或D-酪氨酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的假環(huán)多肽，其特征在于所述A2為L-脯氨酸或D-脯氨酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的假環(huán)多肽，其特征在于所述A3為L-色氨酸或D-色氨酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的假環(huán)多肽，其特征在于所述A4為L-苯丙氨酸或D-苯丙氨酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的假環(huán)多肽，其特征在于所述假環(huán)多肽對邊鏈骨架進(jìn)行環(huán)化， 其結(jié)構(gòu)如式(I)所示，其中，m= 2、3、或4 ;n = 2、3、4或6 ； 式⑴。
7.權(quán)利要求1 6中任意一條權(quán)利要求所述假環(huán)多肽的合成方法，其特征在于所述方 法是采用液相法合成結(jié)構(gòu)構(gòu)件，固相法合成線性假多肽，最后經(jīng)稀溶液環(huán)化法合成得到假 環(huán)多肽。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述假環(huán)多肽的合成方法，其特征在于所述方法包括如下步驟(1)構(gòu)件Cbz-NH(CH2)n-NH2的合成室溫下將二胺H2N(CH2)nNH2溶解于二氯甲烷中，冷 至0°C，滴加氯甲酸芐酯進(jìn)行反應(yīng)，保持0°C反應(yīng)過夜，撤去冰浴，升至室溫反應(yīng)1 3h，反 應(yīng)完成后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、洗滌、干燥、減壓蒸餾，最后快速柱層析純化，制得Cbz-NH(CH2)n-NH2 ；(2)構(gòu)件HOOC(CH2)m-CO2BzI的合成將相應(yīng)的酸酐加熱至熔融狀態(tài)，逐滴滴加芐醇，滴 加完畢，繼續(xù)攪拌反應(yīng)lh，冷卻，加入飽和氯化鈉溶液，二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，經(jīng)水洗、 干燥、減壓蒸餾除溶劑，快速柱層析純化，制得HOOC (CH2)ffl-C02Bzl ；(3)線性假多肽的合成氨基酸的裝配從C端到N端逐個進(jìn)行，將結(jié)合了第一個氨基酸 的Wang樹脂裝于多肽反應(yīng)器中，用二氯甲烷二甲基甲酰胺溶液溶脹30min，再用哌啶二甲 基甲酰胺溶液脫保護(hù)基，二甲基甲酰胺清洗3次，將9-芴甲氧羰基保護(hù)的氨基酸溶于三吡 咯基膦氧苯駢三氮唑六氟合磷鹽、羥基苯駢三唑和二異丙基乙基胺，溶解后的溶液加于反 應(yīng)器中偶合反應(yīng)60 120min，二甲基甲酰胺清洗3次，重復(fù)以上步驟直到合成結(jié)束；合成 完成后，從樹脂上剪切線性假多肽，過濾、蒸除易揮發(fā)溶劑、洗滌、冷凍干燥，得線性假多肽 粗品；將線性假多肽粗品進(jìn)行純化，得到線性假多肽；(4)假環(huán)多肽的合成將線性假多肽溶解于乙腈中，加入環(huán)合試劑，旋轉(zhuǎn)蒸除溶劑，所 得粗品經(jīng)分離純化，得到假環(huán)多肽。
9.權(quán)利要求1 6中任意一條權(quán)利要求所述假環(huán)多肽在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述假環(huán)多肽的應(yīng)用，其特征在于所述假環(huán)多肽用于制備治療革 蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌感染的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種假環(huán)多肽及其合成方法和應(yīng)用。本發(fā)明假環(huán)多肽為包含了Loloatin C藥核序列結(jié)構(gòu)-A1-A2-A3-A4-，即包含了Tyr、Pro、Trp和Phe的序列片段，四個氨基酸殘基為L-或D-構(gòu)型。本發(fā)明假環(huán)多肽的合成方法是采用液相法合成結(jié)構(gòu)構(gòu)件，固相法合成線性假多肽，最后經(jīng)稀溶液環(huán)化法合成得到假環(huán)多肽，總收率5～12％。本發(fā)明假環(huán)多肽的制備方法具有反應(yīng)條件溫和、操作簡便安全、產(chǎn)品純度高、容易自動化、總收率穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)，合成的假環(huán)多肽可以用于制備治療革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌感染的藥物。
文檔編號A61K38/07GK101906138SQ20101022652
公開日2010年12月8日 申請日期2010年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月13日
發(fā)明者江振友, 陳河如, 陳道煌 申請人:暨南大學(xué)