專利名稱：非大腦組織中β-淀粉樣肽負(fù)載的改性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)通過(guò)非神經(jīng)(即周邊的)細(xì)胞、體液或組織表現(xiàn)的淀粉樣β 肽(Αβ)水平的方法和組合物。本發(fā)明還涉及通過(guò)選擇性調(diào)節(jié)(例如，抑制)周邊組織中 Y分泌酶活性調(diào)節(jié)大腦Aβ水平。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通過(guò)施用導(dǎo)致非神經(jīng)組織中Y-分泌酶的調(diào)節(jié)的化合物預(yù)防、治療或減輕包括但不限于Αβ相關(guān)障礙的障礙癥狀的方法，直接或間接地預(yù)防、治療或減輕大腦Αβ障礙(如阿爾茨海默氏癥)的癥狀。本發(fā)明還涉及通過(guò)周邊施用以預(yù)防、治療或減輕阿爾茨海默氏病癥狀的Y分泌酶活性調(diào)節(jié)劑的用途。
背景技術(shù)：
淀粉樣β (Αβ )肽是阿爾茨海默氏病相關(guān)前體蛋白(β -淀粉樣前體蛋白(APP)) 的代謝產(chǎn)物，并被認(rèn)為是阿爾茨海默氏病(AD)的主要病理因素。AD是一種以大腦脆弱區(qū) (尤其是額皮質(zhì)和海馬體)內(nèi)Αβ的年齡相關(guān)性沉積物為特點(diǎn)的神經(jīng)退化性疾病(Terry RD. J Geriatr Psychiatry Neurol 19 :125_128，2006)。Αβ 具有導(dǎo)致漸進(jìn)性神經(jīng)元缺失的致病作用，從而致使那些大腦區(qū)協(xié)調(diào)高級(jí)和基本神經(jīng)過(guò)程能力的惡化。由于惡化加劇， 受到影響的受試者面臨癡呆和生活質(zhì)量的日益惡化，最終的病癥是致命的(Brookmeyer R, Johnson Ε, Ziegler-Graham K, Arrighi HM. Alzheimer' s Dement 3 :186-191,2007 ； Powers JM. Neurobiol Aging 18 :S53-S54,1997)。據(jù)認(rèn)為，AD的發(fā)展是與老化有關(guān)的自然生化過(guò)程的結(jié)果，而且?guī)缀趺總€(gè)人最終顯示這種疾病的癥狀是他或她活得夠久了。年齡是AD發(fā)病率為25-50%的85歲或以上老人的最大已知風(fēng)險(xiǎn)因子(Giacobini E.Ann NY Acad Sci 920 :321-327,2000) 對(duì)于某一個(gè)人，所述障礙顯示的時(shí)間是其它系列風(fēng)險(xiǎn)因子的結(jié)果，而其中有些可能是由于環(huán)境原因， 但其中許多是由于受試者的遺傳因素受試者基因結(jié)構(gòu)和活性的自然變異產(chǎn)生的全體蛋白質(zhì)，相互作用的復(fù)合骨架網(wǎng)使受試者增加或減少易于具有AD的危險(xiǎn)。已鑒定出影響AD風(fēng)險(xiǎn)的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的一些基因。例如，有編碼稱為e2、e3和e4的血清蛋白載脂蛋白E的基因的三種常見變異。遺傳e4編碼等位基因的受試者比AD平均水平的受試者的風(fēng)險(xiǎn)高，而且往往比沒有e4等位基因的受試者更早產(chǎn)生疾病。從親本雙方遺傳e4等位基因的那些受試者比AD早期發(fā)病的受試者的風(fēng)險(xiǎn)高，而含有e2等位基因的受試者的風(fēng)險(xiǎn)非常低，一生中產(chǎn)生疾病比平均水平晚，如果真有的話(Cedazo-Minguez A. J Cell Mol Med. 11 :1227-38, 2007)。還發(fā)現(xiàn)，創(chuàng)傷性腦損傷和重復(fù)性腦創(chuàng)傷能加快大腦A β沉積和認(rèn)知障礙(toru et al. J. Neurosci. 22(2) :446(2002) 絕大部分(假如不是全部)的AD被認(rèn)為具有與每個(gè)受試者風(fēng)險(xiǎn)界限有關(guān)的一些遺傳成分。然而，人類AD的某些形式，特別是具有高度遺傳性的。這些遺傳形式是由編碼與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)的單個(gè)基因的罕見突變引起的，并在疾病進(jìn)程的起始中起著重要作用。這些基因的突變可以被遺傳或者可以偶爾出現(xiàn)。這些基因中的一種編碼淀粉樣前體蛋白(APP) (Tanzi RE. Ann Med. 21 =91-94, 1989)。APP是一種生化功能目前未知的膜蛋白。據(jù)了解，APP是由幾種內(nèi)源蛋白酶水解的底物，而且蛋白質(zhì)水解釋放出具有不同結(jié)構(gòu)的片段。兩種蛋白酶活性被稱為β分泌酶和Y分泌酶。通過(guò)β分泌酶的AP蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生可以隨后被γ分泌酶在多個(gè)位點(diǎn)切割的片段， 以產(chǎn)生Αβ肽。γ分泌酶是幾種蛋白質(zhì)(包括早老素1和早老素幻的復(fù)合物，通過(guò)Y分泌酶的APP切割產(chǎn)生A β的多種亞型，其范圍為37至43個(gè)氨基酸殘基(見，例如，Steiner H, Fluhrer R5Haass C.，J Biol Chem. 2008 Jul 23)。A β 的 42 殘基形式被認(rèn)為是最致病的(Wolfe MS. Biochemistry 45:7931-7939,2006)。除了形成 AD 感染大腦中的沉積斑塊， A β片段的42殘基形成低聚物結(jié)構(gòu)，被認(rèn)為導(dǎo)致認(rèn)知缺陷(Barten DM, Albright CF. Mol Neurobiol 37 171—186，2008)。易于具有蛋白切割位點(diǎn)附近AD群的APP變異影響了致病Αβ片段的產(chǎn)生率、其穩(wěn)定性以及其形成低聚物的能力(Selkoe DJ. Physiol Rev81 :741_766，2001)。遺傳這些APP 變異的受試者通常在他們50多歲時(shí)顯示AD的跡象，而突發(fā)的AD是不常見的，直到受試者達(dá)到 70 多歲(Waring SC, Rosenberg RN. Arch Neurol. 65 :329-34,2008)。y分泌酶的完整分子標(biāo)識(shí)仍是未知的。早老素1或密切相關(guān)的早老素2為Y分泌酶活性所需。Y分泌酶活性在早老素1基因刪除的胚胎培養(yǎng)細(xì)胞中降低80%。所有γ 分泌酶活性在同時(shí)缺乏早老素1和早老素2的細(xì)胞中失去。Y分泌酶活性的肽類抑制劑可與早老素1和早老素2交聯(lián)，表明這些蛋白質(zhì)是用于切割的催化亞基。然而，γ分泌酶活性是從細(xì)胞色譜分析中作為大于IM道爾頓的大復(fù)合物得到分離。最近的基因研究已鑒定出 Y分泌酶活性所需的三種以上的蛋白質(zhì)；呆蛋白、aph-Ι和pen-1 (Francis et al. ,2002, Developmental Cell 3(1) :85-97 ；Steiner et al. ,2002, J. Biol. Chemistry 277(42) 3906239065 ；和 Li et al. ,2002, J. Neurochem. 82 (6) :1540-1548) 累積入高分子量復(fù)合物的早老素在缺乏這些蛋白質(zhì)的細(xì)胞中發(fā)生改變。編碼Y分泌酶的早老素1和早老素 2成分的基因中的罕見變異還賦予早發(fā)性AD的高風(fēng)險(xiǎn)(Waring SC, Rosenberg RN. Arch Neurol. 65 :329-34,2008)。第三種酶(α-分泌酶)，切割β和Υ切割位點(diǎn)之間的前體蛋白，阻止Αβ產(chǎn)生， 并釋放約3kDa被稱為Ρ3的肽，其是非病理性的。β分泌酶和α分泌酶還都產(chǎn)生APP的可溶性分泌末端片段(被分別稱為sAPPii和sAPPa)。sAPP α片段被認(rèn)為是神經(jīng)保護(hù)性的。作為這些遺傳性觀察以及相當(dāng)?shù)纳蜕窠?jīng)解剖實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，模型已發(fā)現(xiàn)增加 A β (特別是A β-42)產(chǎn)生和累積的生化活動(dòng)，加速了 AD的發(fā)病和發(fā)展。因此，治療和預(yù)防方案都已針對(duì)減少Αβ的產(chǎn)生或降低其積累。目前AD治療的重點(diǎn)是降低大腦中A β的產(chǎn)生和/或累積。幾種方法目前仍在研究中(Rojas-Fernandez CH, Chen M, Fernandez HL. Pharmacotherapy 22 1547-1563,2002 ； Hardy J,Selkoe DJ. Science. 297 :353-356,2002) AD 素因性 APP 轉(zhuǎn)基因以及另外攜帶 β 分泌酶基因中失活敲除突變的小鼠顯示大腦中Αβ接近完全的減少(Luo Y,Bolon B,Kahn S, Bennett BD, Babu-Khan S, Denis P, Fan W, Kha H, Zhang J, Gong Y, Martin L, Louis JC, Yan Q, Richards WG, Citron M, Vassar R. Nat Neurosci 4 :231_232，2001) 。 M胃，β證明，這種小鼠仍然表現(xiàn)出認(rèn)知缺陷、過(guò)早死亡和髓磷脂形成減少(Ohno M,Chang L5Tseng W,Oakley H, Citron Μ,Klein WL,Vassar R,Disterhoft JF. Eur J Neurosci 23:251-260， 2006 ；Ohno Μ, Sametsky EA, Younkin LH, Oakley H, Younkin SG, Citron Μ, Vassar R, Disterhoft JF. Neuron 41:27-33,2004 ；Laird FM,Cai H,Savonenko AV,Farah ΜΗ,He K, Melnikova Τ, Wen H, Chiang H-C, Xu G, Koliatsos VE, Borchelt DR, Price DL, Lee H-K, Wong PC.J Neurosci 25 :11693-11709,2005 ；Dominguez D, Tournoy J, Hartmann D, Huth T,Cryns K,Deforce S,Serneels L,Camacho IE,Marjaux E,Craessaerts K,Roebroek AJ, Schwake M, D' Hooge R, Bach P, Kalinke U, Moechars D, Alzheimer C, Reiss K, Saftig P, De Strooper B. J Biol Chem 280 :30797-30806,2005 ；Hu X，Hicks Cff, He W, Wong P, Macklin WB，Trapp BD, Yan R.Nat Neurosci 9:1520_1525，2006)。這導(dǎo)致 β 分泌酶活性是大腦中健康神經(jīng)功能必需的結(jié)論，降低β分泌酶的大腦活性的治療可能產(chǎn)生不利的副作用。此外，很難設(shè)計(jì)有效的大腦滲透劑β分泌酶抑制劑(Barten DM, Albright CF. Mol Neurobiol 37 171-186，2008)，這一直是從事AD藥物治療工作的那些人的目標(biāo)。還對(duì)Y分泌酶抑制劑降低大腦中Αβ的效果進(jìn)行了研究。大腦滲透劑Y分泌酶抑制劑已被證明能減少Αβ合成，并減少對(duì)小鼠AD模型的學(xué)習(xí)記憶障礙(Barten DM, Meredith JE Jr, Zaczek R, Houston JG, Albright CF. Drugs R D 7 :87_97，2006)。資、 而，Y 分泌酶具有除 APP 之外的靴(Pollack SJ, Lewis H. Curr Opin Investig Drugs 6 :35-47, 2005)，其中之一是跨膜受體的Notch家族。通過(guò)、分泌酶抑制劑慢性配量的 Notch信號(hào)抑制能導(dǎo)致使用研究化合物達(dá)到體內(nèi)限制Αβ抑制范圍(胃腸道、脾臟和胸腺中)的變化(Searfoss GH, Jordan WH, Calligaro DO, Galbreath EJ, Schirtzinger LM, Berridge BR,Gao H,Higgins MA,May PC,Ryan TP. J Biol Chem 278 :46107-46116,2003 ； Wong GT,Manfra D,Poulet FM,Zhang Q,Josien H,Bara T,Engstrom L,Pinzon-Ortiz M, Fine JS,Lee HJ，Zhang L,Higgins GA,Parker EM. J Biol Chem 279 :12876-12882，2004 ; Milano J, McKay J, Dagenais C, Foster-BrownL, Pognan F, Gadient R, Jacobs RT,Zacco A, Greenberg B, Ciaccio PJ. Toxicol Sci 82 :341-358,2004)。第2002/0128319號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)指出，某些非留體抗炎藥(NSAIDs)降低了表達(dá) APP切割產(chǎn)生的Aβ 40和Αβ 42的細(xì)胞培養(yǎng)中Aβ 42的產(chǎn)生和/水平。由于有充分的證據(jù)證明，高Αβ42水平是AD的主要風(fēng)險(xiǎn)因子，所以這些藥物可用于預(yù)防、延緩或逆轉(zhuǎn)AD的發(fā)展。然而，使用這類藥物的缺點(diǎn)就是Αβ 42的顯著降低和明顯的胃腸道副作用(包括與長(zhǎng)期使用高劑量的NSAIDs藥物等有關(guān)的出血性潰瘍)需要大劑量的NSAIDs (Langman et al., 1994，Lancet 343 :1075-1078)。此外，仍存在由于不受A β 42降低劑影響的A β 40的淀粉樣肽形成以及其它形式的阿爾茨海默氏癥的未知風(fēng)險(xiǎn)。因此，本領(lǐng)域需要一種用于Αβ產(chǎn)生調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或障礙的發(fā)展療法。一類化合物已被發(fā)現(xiàn)能減少Aβ產(chǎn)生，而不影響Notch信號(hào)。這類化合物包括酪氨酸激酶抑制劑甲磺酸伊馬替尼(STI-571，商品名GLEEVEC)和相關(guān)化合物，6-(2，6-二氯苯基)-8-甲基-2-(甲基硫苯基-氨基)-8H-吡啶[2，3-d]嘧啶-7-酮，被稱為抑制劑 2 (Netzer WJ, et al.，Proc Natl Acad Sci USA. 100 12444-12449，2003)。另見第 2004/0028673號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公布和第WO 2004/032925號(hào)PCT專利申請(qǐng)公布，它們通過(guò)引用并入本文。目前STI-571被批準(zhǔn)用于骨髓性白血病和胃腸間質(zhì)瘤的治療。STI-571通過(guò)不需要Abl酪氨酸激酶(這種藥物在白血病細(xì)胞(Netzer，上文)中的重要靶之一)的機(jī)制有效地減少了 Αβ (APP轉(zhuǎn)染神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)染細(xì)胞的無(wú)細(xì)胞提取物兩者中)的產(chǎn)生。STI-571和名為“抑制劑2”的相關(guān)化合物被發(fā)現(xiàn)能降低胚齡18天大鼠(Netzer，上文)的腦皮質(zhì)制得的初級(jí)神經(jīng)元培養(yǎng)中Αβ的產(chǎn)生，表明這些藥物影響內(nèi)源性和轉(zhuǎn)染APP 基因的蛋白質(zhì)的水解過(guò)程。根據(jù)GLEEVEC的產(chǎn)物文獻(xiàn)，STI-571是口服的。所述藥物對(duì)大腦中Aβ累積的影響已被研究，所述藥物已被證明具有差的血腦屏障滲透性。在接受藥物的STI-571治療白血病患者中，所述藥物的腦脊髓液(CSF)水平比血液中低92倍(Takayama N, Sato N， 0' Brien SG, Ikeda Y, Okamoto S. Br J Haematol. 119 106-108，2002)。因此，它在作為 AD潛在治療的未改性形式中的效用已被摒棄(Netzer，上文)?？紤]到血腦屏障的差滲透性，研究STI-571對(duì)大腦Αβ影響的人員已使用植入滲透微型泵傳送STI-571或?qū)⒁种苿?鞘內(nèi)注射到豚鼠(Netzer，上文)的大腦中。雖然 Netzer, et al.觀察到大腦中Αβ累積的減少，但他們總結(jié)出“至于Gleevec和相關(guān)藥物， 實(shí)現(xiàn)對(duì)血腦屏障高滲透程度的能力對(duì)提高治療效果的可能性是有必要的”(Netzer，上文)。目前仍需要一種有效地降低大腦中Αβ水平的治療。發(fā)明概述本發(fā)明涉及通過(guò)測(cè)試和/或治療周邊(非大腦，非CNQ組織治療、預(yù)防或監(jiān)測(cè)大腦Αβ障礙的方法。在一些優(yōu)選實(shí)施例中，所述周邊組織包含肝臟，而在其它實(shí)施例中，所述周邊組織包含血液和/或血清。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明包含評(píng)價(jià)AD或易于具有AD存在的受試者，將調(diào)節(jié)A β產(chǎn)生或累積的化合物進(jìn)行周邊施用，并評(píng)價(jià)所述AD或AD發(fā)展的受試者。本發(fā)明提供了通過(guò)治療受試者的肝臟與AD治療或預(yù)防相關(guān)的方法、組合物及加工。特別是，本發(fā)明涉及通過(guò)對(duì)產(chǎn)生的直接抑制(例如，通過(guò)對(duì)APP表達(dá)的抑制)或通過(guò)依次調(diào)節(jié)肝臟中Αβ的產(chǎn)生、加工、累積或運(yùn)輸?shù)囊蜃诱{(diào)節(jié)改變受試者肝臟中Αβ的產(chǎn)生、 加工、累積或運(yùn)輸。這些因子包括但不限于Y分泌酶、早老素1、早老素2、載脂蛋白Ε、 calmyrin、neugrin、1，4，5-三磷酸肌醇受體(InsP3R)或Smad相互作用蛋白_1(SIP1，由 Zfhxlb編碼)、凝聚素(由CLU編碼，也被稱為ApoJ)、磷酸肌醇結(jié)合clatherin組裝蛋白 (由PICALM編碼)、補(bǔ)體受體1(由CRl編碼)及其調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明包括通過(guò)直接(例如， 通過(guò)對(duì)App產(chǎn)生或加工起作用)或間接(例如通過(guò)依次對(duì)App起作用的因子)調(diào)節(jié)受試者肝臟中A β產(chǎn)生的影響的任何因子的調(diào)節(jié)治療或預(yù)防AD。本發(fā)明并不受限于調(diào)節(jié)或鑒定的性質(zhì)或?qū)φ{(diào)節(jié)受試者肝臟中Aβ起作用的因子數(shù)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了被診斷為具有大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ 障礙的受試者的治療方法，其中包括周邊施用調(diào)節(jié)周邊組織中Αβ產(chǎn)生的化合物。在一些優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物抑制Aβ的產(chǎn)生。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，周邊施用化合物具有小于2. O的分配系數(shù)，較優(yōu)選為小于1. 5，更優(yōu)選為小于約1. O。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性地跨越血腦屏障。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙的受試者的治療方法，其中包括周邊施用調(diào)節(jié)所述受試者周邊組織中基因表達(dá)的化合物。在優(yōu)選實(shí)施例中，所述基因表達(dá)的調(diào)節(jié)導(dǎo)致所述周邊組織中Αβ產(chǎn)生或累積的調(diào)節(jié)。在某些優(yōu)選實(shí)施例中，所述周邊組織是受試者的肝臟。本發(fā)明包括影響肝臟中Αβ產(chǎn)生的任何方法，包括但不限于改變APP的表達(dá)和/ 或加工。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了包括周邊施用調(diào)節(jié)I^senl、Apo Ε, InsP3R, Psen2, APP、Cib 1、Ngrn、Zfhxlb、CLU(也被稱為ApoJ)、PICALM和CRl基因中一種或多種的化合物的方法。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明的方法包括周邊施用調(diào)節(jié)早老素2、calmyrin, neugrin, Zfhxlb、凝聚素、磷酸肌醇結(jié)合clatherin組裝蛋白、補(bǔ)體受體1或APP表達(dá)或活性中一種或多種活性的化合物。在一些實(shí)施例中，這些基因或活性的一種或多種是在受試者肝臟中被調(diào)節(jié)的。在一些實(shí)施例中，調(diào)節(jié)包括表達(dá)或活性的抑制，而在一些實(shí)施例中，調(diào)節(jié)包括表達(dá)或活性的刺激。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明包含(例如)治療大腦Αβ障礙的方法，其中包括評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Aβ障礙存在的受試者和周邊施用調(diào)節(jié)Aβ產(chǎn)生的化合物的步驟，其中所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性地跨越血腦屏障，并評(píng)價(jià)大腦Aβ障礙或大腦Aβ障礙發(fā)展的受試者。需要進(jìn)一步考慮的是，在一些實(shí)施例中，對(duì)治療前和治療后的評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行了比較，以確定(例如)對(duì)大腦A β障礙狀況的治療效果(例如，以確定對(duì)疾病發(fā)病或發(fā)展速度或減輕的影響)。Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)并不受任何特定的調(diào)節(jié)方法或途徑的限制。產(chǎn)生的調(diào)節(jié)可包括(例如)APP表達(dá)的改變(例如，減少)或APP加工為A β的改變。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明包括評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙存在的受試者和周邊施用調(diào)節(jié)A β產(chǎn)生的化合物的步驟，其中所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性地跨越血腦屏障，并評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或大腦Αβ障礙發(fā)展的受試者。Αβ累積的調(diào)節(jié)并不受任何特定方法的限制。累積的調(diào)節(jié)可包括(例如)降低Αβ產(chǎn)生和/或增加Αβ的降解或清除， 或改變?chǔ)ˇ乱援a(chǎn)生不同性質(zhì)的改性形式(例如，非致病性的形式)。需要考慮的是，在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，Αβ產(chǎn)生和/或累積的調(diào)節(jié)，所述施用化合物包含Y分泌酶活性的調(diào)節(jié)劑，而在一些優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物包含Y分泌酶活性的抑制劑。需要進(jìn)一步考慮的是，在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，Αβ產(chǎn)生和/或累積的調(diào)節(jié)，所述施用化合物包含早老素2的調(diào)節(jié)劑，在一些優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物包含早老素2的抑制劑。在一些實(shí)施例中，所述化合物包含淀粉樣肽前體蛋白切割的調(diào)節(jié)劑，而在一些實(shí)施例中，所述化合物包含淀粉樣肽前體蛋白切割的抑制劑。在一些實(shí)施例中，所述化合物包含選自由STI-571、化合物1、化合物2、LY450139、 GSI-953,Flurizan和E2012 (Eisei)化合物或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的組合物。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述組合物具有小于2.0的分配系數(shù)(例如，在辛醇/水系統(tǒng)中)，較優(yōu)選為小于1. 5，更優(yōu)選為小于約1. 0。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。在一些實(shí)施例中，所述化合物包含干擾寡核苷酸，而在優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物包含干擾RNA。在更優(yōu)選實(shí)施例中，所述干擾RNA選自由siRNA、shRNA和miRNA組成的組。 在一些實(shí)施例中，所述干擾RNA包含淀粉樣肽前體蛋白R(shí)NA針對(duì)的干擾RNA,而在其它實(shí)施例中，所述干擾RNA包含早老素2RNA針對(duì)的干擾RNA。需要考慮的是，在一些實(shí)施例中，所述化合物進(jìn)一步包含用于治療、改善或減少大腦Αβ相關(guān)障礙的風(fēng)險(xiǎn)或嚴(yán)重程度的已知治療劑。在某些優(yōu)選實(shí)施例中，所述已知治療劑選自由大麻素類、dimebom、強(qiáng)的松、布洛芬、naproxyn、消炎痛、他汀類藥物、選擇性雌激素受體分子、降壓藥、α-阻斷劑、β-阻斷劑、α-β阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑，鈣通道阻斷劑、利尿劑和抗氧化劑組成的組。本發(fā)明方法中所述化合物的周邊給藥并不局限于任何特定的路徑。給藥途徑包括但不限于通過(guò)眼睛(眼部給藥)、口( 口服)、皮膚(透皮給藥)、鼻(鼻部給藥)、肺(吸入)、口腔粘膜(口腔給藥)、耳、通過(guò)(例如，靜脈、皮下、腹腔等)注射等。在某些優(yōu)選實(shí)施例中，所述周邊給藥包含口服。在本發(fā)明方法的一些實(shí)施例中，所述評(píng)價(jià)包含精神狀態(tài)評(píng)價(jià)。在一些優(yōu)選實(shí)施例中，所述評(píng)價(jià)包含神經(jīng)心理測(cè)試和腦成像中的一種或多種。需要考慮的是，在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種評(píng)價(jià)受試者中大腦Αβ障礙風(fēng)險(xiǎn)或存在的方法，其中包括確定所述受試者的周邊組織中Αβ的水平。在其它一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種監(jiān)測(cè)受試者中大腦Αβ障礙的方法，其中包括確定所述受試者的周邊組織中Αβ的水平。在一些實(shí)施例中，所述周邊組織是血液，而在一些實(shí)施例中，所述周邊組織是血清。在一些特別優(yōu)選實(shí)施例中，監(jiān)測(cè)包含測(cè)量所述周邊組織在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的 Αβ。在上文公開方法的優(yōu)選實(shí)施例中，所述大腦Αβ障礙是阿爾茨海默氏病。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了監(jiān)測(cè)受試者中大腦Αβ障礙的方法，其中包括分析所述受試者的周邊組織中基因產(chǎn)物的表達(dá)或活性。在某些優(yōu)選實(shí)施例中，所述基因產(chǎn)物選自由Ι^θη2、APP、Cibl、Ngrn和Zfhxlb組成的組的基因的基因產(chǎn)物。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種方法，其中包括評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Aβ障礙存在的受試者和周邊施用抑制周邊Aβ跨血腦屏障運(yùn)輸?shù)幕衔锏牟襟E， 其中所述化合物不是抗Αβ抗體。在優(yōu)選實(shí)施例中，進(jìn)一步包含評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或大腦 Αβ障礙發(fā)展的受試者。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述大腦Αβ障礙是阿爾茨海默氏病。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種用于治療大腦Αβ障礙的基因靶的鑒定方法，其中包括將具有或易于具有所述Αβ障礙的第一親本與已減少所述Αβ障礙易患性的第二親本的后代肝基因表達(dá)譜進(jìn)行比較，以鑒定具有肝臟中表達(dá)水平的可遺傳的基因標(biāo)記，其中，相對(duì)于所述第一親本肝臟中的表達(dá)水平，所述后代肝臟中的基因標(biāo)記的增加或減少表達(dá)與所述第二親本的基因標(biāo)記的遺傳密切相關(guān)。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明包含用于調(diào)節(jié)具有或易于發(fā)展Αβ障礙的受試者周邊組織中A β產(chǎn)生的選自由STI-571、化合物1、化合物2、LY450139、GSI-953、Flurizan和Ε2012 化合物或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物。在一些實(shí)施例中，所述Αβ障礙是大腦Αβ障礙。在特別優(yōu)選的實(shí)施例中，所述化合物具有小于2.0的分配系數(shù)，較優(yōu)選為小于1. 5，更優(yōu)選為小于約1. 0。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)具有或易于發(fā)展Αβ障礙的受試者肝臟中 Αβ 產(chǎn)生的由 STI-571、化合物 1、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan和E2012化合物或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物。在一些實(shí)施例中，所述Αβ障礙是大腦Αβ障礙。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物具有小于2.0的分配系數(shù)，較優(yōu)選為小于 1.5，更優(yōu)選為小于約1.0。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。
在一些實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)具有或易于具有大腦Αβ障礙的受試者周邊組織中Αβ產(chǎn)生的藥劑制備的選自由伊馬替尼(STI-571)、WGB-BC-15、化合物1、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan和Ε2012化合物或其血腦屏障不滲透性變異體，和/或其藥學(xué)上可接受的鹽類組成的組的化合物的用途。在優(yōu)選實(shí)施例中，所述藥物被制成口服。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述周邊組織包含肝臟。在更優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物具有小于2. 0 的分配系數(shù)，較優(yōu)選為小于1. 5，更優(yōu)選為小于約1. 0。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物并沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。在一些優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明涉及用于抑制具有或易于具有大腦Αβ障礙的受試者周邊組織中Aβ產(chǎn)生的藥劑制備的伊馬替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽類的用途。本發(fā)明還提供了用于治療大腦Αβ障礙的包含第二治療劑的藥劑制備的上述化合物的用途。在一些實(shí)施例中，第二治療劑選自由伊馬替尼(STI-571)、WGB-BC-15、化合物 1、化合物2、LY450139、GSI-953、Flurizan和E2012化合物或其血腦屏障不滲透性變異體， 和/或其藥學(xué)上可接受的鹽類。在某些優(yōu)選實(shí)施例中，所述第二治療劑包含選自由大麻素類、dimebom、強(qiáng)的松、布洛芬、naproxyn、消炎痛、他汀類藥物、選擇性雌激素受體分子、降壓藥、α -阻斷劑、β -阻斷劑、α-β阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑，鈣通道阻斷劑、利尿劑和抗氧化劑組成的組的一種或多種藥劑。在上述方法和組合物的某些特別優(yōu)選實(shí)施例中，所述化合物包含甲磺酸鹽形式的伊馬替尼。附圖
簡(jiǎn)述圖IA顯示了相比于小鼠I3seM位點(diǎn)基因型，受試者小鼠的肝樣品的I3Ser^ mRNA 量比較曲線圖。圖IB顯示了繪制I^Sen2位點(diǎn)基因型(B6/B6或D2/D》與高達(dá)89個(gè)重組自交(RI) 系的6個(gè)組織(任意單位)中PSen2mRNA的濃度關(guān)系曲線。繪制了 RI系附近的親本C57和 DBA值。一些組織具有1^甜2位點(diǎn)上雜合的單RI系的數(shù)據(jù)這些都是以B6/D2的圖表示。 從 GeneNetwork. org 獲得數(shù)據(jù)(J. Wang, R. W. Williams, K. F. Manly KF, Neuroinformatics 1，四9(2003))。對(duì)于肝臟，表達(dá)數(shù)據(jù)最初表示為每個(gè)探針的標(biāo)準(zhǔn)mRNA樣品產(chǎn)生的肝臟熒光信號(hào)比率。采用校準(zhǔn)兩個(gè)通道中信號(hào)非線性的robust LOWESS平滑法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化。 然后，我們計(jì)算這些比率(中間值)的log基數(shù)2。-1的值表示肝臟中的表達(dá)大約是對(duì)照中的1/2 ；-2的值表示大約是對(duì)照中的1/4等。相反地，+2的值表示肝臟中的表達(dá)大約是對(duì)照中的4倍。來(lái)自40個(gè)重組自交系的肝臟數(shù)據(jù)集如D.feitti，et al.，Hepatology 46， 548(2007)所述。對(duì)于其它組織，表達(dá)值和替代正?；椒ㄈ缟?Wang，上文)。圖 2 是 STI-571、甲磺酸鹽(GLEEVECTM)、STI-571 變異(“WGB-BC-15")、化合物 1(PD173955，Moasser et al.，1999，Cancer Research 59 :6145-6152 ；Wisniewski et al. ,Cancer Research 2002,62(15) :4244-55)和化合物2 (PD166326 ；Wisniewski et al.， Cancer Research 2002,62(15) :4244-55)的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。圖3A-3F顯示了周邊施用的STI-571對(duì)血漿和全腦中Αβ水平的影響。對(duì)野生型 Β6和D2小鼠(年齡8-12周[A-F]或15-18個(gè)月[G，H])通過(guò)腹腔注射施用藥物或載體7 天(每天兩次)。圖3Α顯示了經(jīng)鹽水載體或三種劑量的STI-571治療的D2幼鼠的血漿中 A β六聚體水平的蛋白質(zhì)印跡(泳道1、2、9和10)，泳道3、4、11和12顯示lmg/kg的結(jié)果； 泳道5、6、13和14顯示10mg/kg的結(jié)果；以及泳道7、8、15和16顯示100mg/kg的結(jié)果；每組η = 4。圖:3Β顯示了圖3Α蛋白質(zhì)印跡圖像的柱狀圖量化。圖3C顯示了經(jīng)20mg/kg鹽水載體或STI-571治療的B6幼鼠的大腦提取物中的Αβ六聚體水平的蛋白質(zhì)印跡(每組共η = 10，僅η = 5顯示于蛋白質(zhì)印跡中)。圖3D顯示了圖3C蛋白質(zhì)印跡圖像的柱狀圖量化。圖3Ε和3F顯示了經(jīng)20mg/kg鹽水載體或STI-571治療的B6老齡鼠的大腦提取物 (E)或血漿(F)中的Aβ六聚體水平的柱狀圖(每組η = 4)。圖4顯示了相比于小鼠Ngrn位點(diǎn)基因型，受試者小鼠的肝樣品的NgrnmRNA量比較曲線圖。圖5 顯示了繪制 Cibl (圖 5Α)或 Zfhxlb (圖 5Β)基因型(B6/B6、B6/D2 或 D2/D2) 與40個(gè)重組自交系肝臟的calmyrin(Fig. 5A)或Zfhxlb (Fig5B)mRNA濃度(任意單位)的關(guān)系曲線，如圖IB所示。從GeneNetwork.org獲得數(shù)據(jù)(Wang，上文)；肝臟數(shù)據(jù)集如feitti， 上文所述。定義本文所用的術(shù)語(yǔ)“受試者”和“患者”可以互換使用。本文所用的術(shù)語(yǔ)“受試者”是指動(dòng)物，優(yōu)選為包括非靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，牛、豬、馬、驢、羊、駱駝、貓、狗、豚鼠、大鼠、小鼠、 羊)和靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，猴、如食蟹猴、大猩猩、黑猩猩和人類)的哺乳動(dòng)物，優(yōu)選為人類。 在一個(gè)實(shí)施例中，所述受試者是患有阿爾茨海默氏病(AD)的受試者。本文所用的術(shù)語(yǔ)“Αβ相關(guān)障礙”或“Αβ障礙”是一種涉及Αβ水平失常或失調(diào)的疾病(例如，阿爾茨海默氏病)或病癥(例如，老年性癡呆癥)。A β相關(guān)障礙包括，但不限于AD、腦創(chuàng)傷相關(guān)性淀粉樣肽疾病、唐氏綜合征和包涵體肌炎。本文所用的術(shù)語(yǔ)“疾病的風(fēng)險(xiǎn)”是指易于具有某種疾病的受試者(例如，人類)易于經(jīng)歷某一特定的疾病。這種傾向可能是遺傳的(例如，患所述疾病(如遺傳性障礙)的特定遺傳傾向)，或者由于其它因素(例如，年齡、體重、環(huán)境條件、接觸存在于環(huán)境中的有害化合物等)。因此，這并不意味著本發(fā)明限定于任何特定的風(fēng)險(xiǎn)，也不意味著本發(fā)明限定于任何特定的疾病。本文所用的術(shù)語(yǔ)“罹患疾病”是指經(jīng)歷某一特定疾病或被診斷已具有某一特定疾病的受試者(例如，人類)。這并不意味著本發(fā)明限定于任何特定的跡象或癥狀或疾病。 因此，這并不意味著本發(fā)明包括經(jīng)歷任何疾病范圍(例如，從亞臨床表現(xiàn)到全面發(fā)作的疾病)的受試者，其中所述受試者表現(xiàn)出與特定的疾病相關(guān)的至少一些標(biāo)記(例如，體征和癥狀)。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“疾病”和”病理狀況”是指互換地用來(lái)描述與活動(dòng)物或者其打斷或改性正常功能表現(xiàn)的任何器官或組織的正常狀態(tài)的任何損害相關(guān)的狀態(tài)、跡象和/或癥狀，并可能是對(duì)環(huán)境因素(如情緒創(chuàng)傷、物理創(chuàng)傷、營(yíng)養(yǎng)不良、工業(yè)危害或氣候)、特定的傳染物(如蠕蟲病毒、細(xì)菌或病毒)、有機(jī)體的固有缺陷(不同的基因異常)或這些和其它因素的組合的反應(yīng)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“具有AD的受試者”或“顯示AD的跡象或癥狀或病理指標(biāo)的受試者”或“懷疑顯示AD的跡象或癥狀或病理指標(biāo)的受試者”是指被鑒定或診斷為具有或可能具有基于A D的已知AD跡象、癥狀及病理指標(biāo)的受試者。本文所用的術(shù)語(yǔ)“處于顯示AD病理指標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)中的受試者”和“處于AD風(fēng)險(xiǎn)中的受試者”是指被鑒定為發(fā)展AD的風(fēng)險(xiǎn)的受試者。
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本文所用的術(shù)語(yǔ)“AD治療劑”是指用來(lái)治療或預(yù)防AD的藥劑。這類藥劑包括，但不限于，小分子、藥物、抗體和藥品等。本文所用的術(shù)語(yǔ)“認(rèn)知功能” 一般是指思考、推理、專心或記住的能力。因此，術(shù)語(yǔ) “認(rèn)知功能衰退”是指缺乏思考、推理、專心或記住的能力或能力的惡化。本文所用的術(shù)語(yǔ)“調(diào)節(jié)”、“已調(diào)的”或“調(diào)整”應(yīng)具有其通常的含義，并包括詞“提高”、“促進(jìn)”、“增加”、“折磨”、“抑制”、”減少”或“拮抗”的含義。例如，酶活性(如Y分泌酶的活性)的調(diào)節(jié)劑，可直接作用，即通過(guò)直接與具有已調(diào)活性的酶相互作用，或可間接作用，即沒有直接與酶相互作用，而是通過(guò)導(dǎo)致活性調(diào)節(jié)的途徑。本文所用的術(shù)語(yǔ)“評(píng)價(jià)AD的受試者”是指實(shí)施一種或多種測(cè)試，以確定(例如)受試者中AD的存在或發(fā)展，或受試者中AD發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)。評(píng)價(jià)AD和/或識(shí)別阿爾茨海默氏病與其它原因的失憶的受試者，可包括評(píng)價(jià)以下的一種或多種1.病史，其中包括評(píng)價(jià)受試者的基本健康狀況和過(guò)去的醫(yī)療問(wèn)題，受試者進(jìn)行日?；顒?dòng)可能具有的問(wèn)題。2.基本醫(yī)療測(cè)試，其中包括(例如)排除其它可能原因的癡呆癥(如甲狀腺障礙或維生素缺乏癥)的血液測(cè)試。3.心理狀態(tài)評(píng)價(jià)，因此，(例如)屏蔽記憶、解決問(wèn)題的能力、注意力、計(jì)算能力和表達(dá)能力。4.神經(jīng)心理測(cè)試，包括記憶、解決問(wèn)題的能力、注意力、計(jì)算能力和表達(dá)能力的更廣泛評(píng)價(jià)。5.腦部掃描或成像，使用(例如)電腦斷層掃描(CT磁共振成像(MRI)；和正電子放射斷層攝影術(shù)(PET)以尋找可見異常。本文所用的術(shù)語(yǔ)“激動(dòng)劑”是指直接或間接作用于分子以產(chǎn)生藥理功效的任何化合物，而“拮抗劑”是指直接或間接作用于分子以減少藥理功效的任何化合物。術(shù)語(yǔ)“樣品，，和“樣本”被用于其最廣泛的意義，包括樣品或從任何來(lái)源獲得的樣品或樣本。本文所用的術(shù)語(yǔ)“樣品”是指從動(dòng)物(包括人類)獲得的生物樣品，包括液體、 固體、組織和氣體。在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，生物樣品包括神經(jīng)組織(例如，大腦組織)、 腦脊液(CSF)、漿液、尿液、唾液、血液和血液制品(如血漿和血清等)。然而，這些例子不應(yīng)被解釋為限制發(fā)現(xiàn)用于本發(fā)明的樣品的類型。本文所用的術(shù)語(yǔ)“血腦屏障”是指中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中限制血液和神經(jīng)組織之間的各種化學(xué)物質(zhì)和微觀物體(例如，細(xì)菌)的結(jié)構(gòu)。涉及“里面”與“外面”血腦屏障分別是指血腦屏障的大腦/神經(jīng)組織側(cè)面上或血腦屏障的非大腦/神經(jīng)組織側(cè)面上的事物。本文所用的關(guān)于物質(zhì)或化合物(例如，藥物)的術(shù)語(yǔ)“血腦屏障不滲透性變異體” 是指，當(dāng)周邊施用給受試者時(shí)，具有降低能力以滲透血腦屏障的化合物，與親本或標(biāo)準(zhǔn)化合物的滲透性相比，這樣(例如)變異并不實(shí)質(zhì)性地滲透所施用的受試者的血腦屏障。如下文所述，化合物跨越血腦屏障的能力可能以本領(lǐng)域任何已知的方法為特點(diǎn)，例如，通過(guò)與血腦屏障遺傳性(例如，大小和電荷等)相關(guān)的特性的體內(nèi)或體外測(cè)試、計(jì)算模型或由化合物表征(例如，通過(guò)物理測(cè)試或計(jì)算模型)。測(cè)定或估計(jì)藥物的大腦/CNS吸收的方法包括體內(nèi)方法(例如，靜脈或頸動(dòng)脈注射，隨后腦部采樣或成像)、體外方法(使用(例如)分離腦血管或細(xì)胞培養(yǎng)模型)和計(jì)算(在硅片上)預(yù)測(cè)方法，通?；谌绶肿恿亢陀H油性的因素。見，例如，U. Bickel, NeuroRx. 2005 January ；2(1) 15-26，測(cè)量藥物運(yùn)輸跨越血腦屏障方法的評(píng)論和比較通過(guò)引用并入本文?；衔锏挠H油性/親水性通常與化合物進(jìn)入大腦的速度和范圍相關(guān)。當(dāng)被分區(qū)于水/有機(jī)溶劑系統(tǒng)中時(shí)，藥物的親油性/親水性通常被表示為代表藥物性能的分配系數(shù)。 1-辛醇/水分區(qū)系統(tǒng)已被廣泛用于評(píng)價(jià)化合物跨越血腦屏障的能力。1-辛醇/水分配系數(shù)"log P"已長(zhǎng)期用作親油性的描述符號(hào)和提供計(jì)算log P值(如Clog P和Mlog P)的計(jì)算機(jī)程序法，通常密切配合實(shí)驗(yàn)測(cè)量值(在約0.3個(gè)log單位之內(nèi)；Bickel，上文)。對(duì)于電離分子，采用分配系數(shù)，即采用已確定的PH值下的log P值(通常生理血漿的pH值為 7. 4)。如果log P和pKa值是已知的，log D (log分配系數(shù))，可使用Henderson-Hasselbalch 方程導(dǎo)出。PH7.4下的Log D經(jīng)常被引用，以產(chǎn)生血漿pH值下藥物親脂性的指示。Hansch和同事已測(cè)定了 log P約為2的藥物，并通常會(huì)發(fā)現(xiàn)其準(zhǔn)備進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Hansch et al. ,1987, J. Pharm. Sci. 76(9) :663_687，通過(guò)引用并入本文)，那些藥物是更親水的，使得它們具有低的log P值(例如，約1)，并通常降低進(jìn)入CNS的能力。這一觀察已應(yīng)用于藥物的改性，以減少作為控制方法(例如，CNS毒性或副作用)的CNS滲透。 例如，心臟病藥物ARL-57的CNS滲透。此藥被認(rèn)為是一個(gè)很好的強(qiáng)心藥物，但患者不能使用，因?yàn)樗斐扇祟惖摹皦延^亮麗的色彩視覺”。ARL-57在pH 8具有2. 59的log P值。產(chǎn)生物質(zhì)的一種更親水變異ARLl 15 (sulmazole ；在pH 8下IogP = 1. 17 ；計(jì)算為1.82)，并發(fā)現(xiàn)缺乏CNS副作用，這表明親油性/親水性的改性可用作為一種改變(例如，降低)血腦屏障的藥物滲透性的方法(Hansch, et al.，上文)。甲磺酸伊馬替尼的分配系數(shù)(log P)在25和37°C下已被分別計(jì)算為1. 198和 1. 267(Velpandian,et al. , Journal of Chromatography B,804 (2) :431-434(2004))。此 log P值與顯示沒有實(shí)質(zhì)性滲透血腦屏障的伊馬替尼的數(shù)據(jù)相一致。關(guān)于受試者的位點(diǎn)或組織所用的術(shù)語(yǔ)“周邊的”和“周邊”是指受試者的所有位點(diǎn)和組織是在血腦屏障之外。本文中所用的短語(yǔ)“不實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障”或“不實(shí)質(zhì)性滲透血腦屏障”涉及如果向周邊組織給藥或口服時(shí)的物質(zhì)或化合物，例如，GLEEVEC甲磺酸伊馬替尼(STI-571)， 在整個(gè)CNS采樣(例如，在腦組織、腦脊髓液)中保持不存在，或存在于周邊組織中發(fā)現(xiàn)的小濃度百分比的CNS采樣中，例如，周邊組織中發(fā)現(xiàn)的濃度小于約10%，優(yōu)選為小于約5%， 較優(yōu)選為小于約2%。例如，GLEEVEC/STI-571具有差滲透性的血腦屏障，如STI-571治療的白血病患者，其藥物的腦脊髓液(CSF)水平比血液中低92倍(Takayama N, Sato N， 0' Brien SG, Ikeda Y, Okamoto S. Br J Haematol. 119 106-108，2002)。因此，GLEEVEC/ STI-571甲磺酸伊馬替尼并沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。本文所用的術(shù)語(yǔ)“有效量”是指足以產(chǎn)生選擇性效果的量(例如，包含本發(fā)明Y分泌酶活性的調(diào)節(jié)劑的組合物)。有效量可以是一種或多種給藥、應(yīng)用或劑量，并不意味著限制于特定的配方或給藥途徑。本文所用的化合物的“足夠量”或“化合物的足夠量”是指要達(dá)到預(yù)期效果含有至少最低量的量。這種量通?？捎杀绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員使用本文所述分析方法的研究數(shù)據(jù)測(cè)定。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“約”是指在10至15%之內(nèi)，優(yōu)選為在5至10%之內(nèi)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“控制的”和“控制”是指來(lái)源于化合物(如降低通過(guò)細(xì)胞或組織顯示的A β水平的化合物)的受試者的有益效果，不會(huì)導(dǎo)致所述疾病的治愈。在某些實(shí)施例中，對(duì)受試者施用一種或多種這種藥劑，以“控制”障礙，從而阻止或減緩這種障礙的發(fā)展或惡化。本文所用的術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”、“預(yù)防的”和“防止”是指受試者的Αβ相關(guān)障礙的復(fù)發(fā)或發(fā)病或Aβ相關(guān)障礙的一種或多種癥狀。本文所用的“協(xié)議”包括給藥時(shí)間和劑量方案。本文的協(xié)議是使用方法，而且包括預(yù)防和治療協(xié)議。本文所用的術(shù)語(yǔ)“給藥”和“施用”是指向受試者(例如，受試者或體內(nèi)、體外或間接體內(nèi)的細(xì)胞、組織和器官)給予藥物、前藥或其它藥劑或治療方法(例如，本發(fā)明組合物) 的行為。人體的典型給藥路徑可以通過(guò)眼睛(眼部給藥)、口腔(口服)、皮膚(局部或經(jīng)皮給藥)、鼻(鼻部給藥)、肺(吸入)、口腔粘膜(口腔給藥)、耳、肛門、陰道、通過(guò)(例如， 靜脈、皮下、瘤內(nèi)、腹腔等)注射等?！爸苓吔M織”是指給予外血腦屏障的任何給藥途徑。本文所用的術(shù)語(yǔ)“共給藥”和“共施用”是指向受試者施用至少兩種藥劑(例如，包含STI-571和一種或多種其它藥劑的組合物，例如，Αβ相關(guān)疾病治療劑)或治療方法的給藥。在一些實(shí)施例中，兩種或多種藥劑或治療方法的共給藥是同時(shí)發(fā)生的。在其它實(shí)施例中，第一藥劑/治療方法在第二藥劑/治療方法前施用。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員理解，各種藥劑/治療方法的配方和/或給藥途徑可能會(huì)有所不同。共給藥的適當(dāng)劑量可通過(guò)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員較快地確定。在一些實(shí)施例中，當(dāng)藥劑/治療方法是共施用時(shí)，各自的藥劑 /治療方法以比適合于它們單獨(dú)給藥低的劑量施用。因此，實(shí)施例中的共給藥是特別可取的，其中藥劑或治療方法的共給藥降低了潛在有害的(例如，有毒的)藥劑的所需劑量和/ 或當(dāng)兩種或多種藥劑或治療方法施用時(shí)，通過(guò)其它藥劑的共給藥導(dǎo)致受試者產(chǎn)生藥劑之一的有益效果的敏化作用。本文所用的術(shù)語(yǔ)“治療”包括施用治療，以預(yù)防、治愈或減輕/防止與特定的障礙、 疾病、損傷或病癥相關(guān)的癥狀。本文所用的術(shù)語(yǔ)“治療”或語(yǔ)法對(duì)應(yīng)詞包括疾病癥狀的改善和/或逆轉(zhuǎn)(例如，Αβ 相關(guān)障礙，如阿爾茨海默氏病)。當(dāng)在本發(fā)明的篩選方法中使用時(shí)，從而引起與疾病相關(guān)的任何參數(shù)的改善化合物可被鑒定為治療化合物。術(shù)語(yǔ)“治療”是指治療方法和預(yù)防法或預(yù)防措施。例如，可得益于本發(fā)明的組合物和方法的治療的那些人，包括已經(jīng)患有疾病和/或障礙(例如，Αβ相關(guān)疾病或癥狀或與Αβ相關(guān)疾病一致的病理)以及要預(yù)防疾病和/或障礙的(例如，使用本發(fā)明的預(yù)防性治療)那些人。術(shù)語(yǔ)“化合物”是指可用于治療或預(yù)防疾病、病、或身體功能障礙的任何化學(xué)實(shí)體、 藥物和藥品等。本文所用的化合物可能是單一組合物(例如，化學(xué)品的純配方)或可能是包含多種化學(xué)品(例如，一種或多種有效藥劑和一種或多種惰性劑)的組合物?；衔锟砂阎臐撛谥委熃M合物?；衔锟梢酝ㄟ^(guò)使用本發(fā)明的篩選方法被確定為治療劑?！耙阎委煹摹被衔锘蛩巹┌ㄒ驯蛔C明(例如，通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)或之前向人類給藥)在治療中具有治療效果的治療性化合物。然而，已知的治療性化合物不僅限于疾病(例如，Αβ相關(guān)疾病)治療或預(yù)防中具有特定水平效果的化合物，包括，例如，其中數(shù)據(jù)表明有一些有利影響、很少或沒有負(fù)面影響的化合物(例如，一般被認(rèn)為安全的化合物， 如食品提取物和保健品化合物)。當(dāng)單獨(dú)使用或與其它化合物或療法組合使用時(shí)，用于治療、改善或減少風(fēng)險(xiǎn)或Αβ相關(guān)疾病(例如，阿爾茨海默氏病)嚴(yán)重程度的已知治療劑實(shí)例包括，但不限于大麻類(見，例如，Ramirez, et al, The Journal of Neuroscience, February 23，2005，25 (8) :1904-1913) ；dimebom(見，例如，RSDoody，et al.，The Lancet 372 :207-215(2008))；抗炎劑，如強(qiáng)的松(類固醇)和非甾體抗炎藥(NSAIDs)，包括但不限于布洛芬、naproxyn、消炎痛；降膽固醇和/或心臟保護(hù)藥物，如他汀類藥物，例如，阿托伐他汀(LIPIT0R )、西立伐他汀(BAYC0L)、氟伐他汀(例如，LESCOL )、美伐他汀、匹伐他汀(例如，LIVALO )、普伐他汀(例如，PRAVACHOL )、瑞舒伐他汀(例如，CREST0R ) 和辛伐他汀(例如，Z0C0R )；選擇性雌激素受體分子(SERMs)，例如，雷洛昔芬(EVISTA )；降壓藥，包括α-阻斷劑、受體阻斷劑、α 阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑(ARBs，如纈沙坦(例如，DI0VAN ))、鈣通道阻斷劑和利尿劑(見，例如，I Hajjar,et al,The Journals of Gerontology Series A:Biological Sciences and Medical Sciences 60 :67-73 ^00 )，以及抗氧化劑，如大蒜提取物、姜黃素、褪黑激素、白藜蘆醇、銀杏葉提取物、綠茶、維生素C和維生素E (見，例如，B Frank, et al. , Ann Clin Psychiatry 17(4) :269-86(2005)) 本文所用的術(shù)語(yǔ)“小分子” 一般是指分子量小于IOkDa的分子，包括但不限于天然或人工合成的有機(jī)或無(wú)機(jī)化合物、多肽、(聚)核苷酸和(寡)糖等。小分子特別包括小型非聚合(即不是肽或多肽)有機(jī)和無(wú)機(jī)分子。本文所用的術(shù)語(yǔ)“提取”和類似術(shù)語(yǔ)是指從它們的天然來(lái)源分離和/或純化一種或多種成分的過(guò)程，或當(dāng)用作名詞時(shí)，是指通過(guò)這樣一個(gè)過(guò)程中產(chǎn)生的組合物。本文所用的術(shù)語(yǔ)“試劑盒”是指任何運(yùn)送物質(zhì)的傳送系統(tǒng)。在激酶活性或抑制試驗(yàn)的情況下，這種傳送系統(tǒng)包括允許儲(chǔ)存、運(yùn)輸或?qū)⒎磻?yīng)試劑和/或輔助材料(例如，緩沖劑， 實(shí)施實(shí)驗(yàn)的書面指示)從一個(gè)位置傳送到另一個(gè)位置的系統(tǒng)。例如，試劑盒包括含有關(guān)反應(yīng)試劑和/或輔助材料的一個(gè)或多個(gè)外殼(例如，盒)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“分段式試劑盒”是指包含兩個(gè)或多個(gè)單獨(dú)容器的傳送系統(tǒng)，其中每個(gè)容器都含有總試劑盒組件的子部分。這些容器可被一起或分開傳送到接收者。例如，第一容器可含有用于實(shí)驗(yàn)的酶，而第二容器含有測(cè)試化合物的比較標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)語(yǔ)“分段式試劑盒”意欲包括含有聯(lián)邦食品、藥品和化妝品法第520章規(guī)定的分析物特定試劑(ASR’s)的試劑盒，但不限于此。事實(shí)上，包含兩個(gè)或多個(gè)單獨(dú)容器(其中每個(gè)容器都含有總試劑盒組件的子部分)的任何傳送系統(tǒng)，都被包括在術(shù)語(yǔ)“分段式試劑盒”之內(nèi)。相比之下，“組合式試劑盒”是指單一容器中含有反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的所有組件的輸送系統(tǒng)(例如，在容納有每個(gè)所需組件的單一盒中)。術(shù)語(yǔ)“試劑盒”包括分段式和組合式試劑盒兩種。本文所用的術(shù)語(yǔ)“有毒的”是指相比于有毒物施用前的相同細(xì)胞或組織，對(duì)受試者、細(xì)胞或組織的任何不利或有害的影響。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上的純化”是指藥用制劑的足夠純度或質(zhì)量的組合物。本文所用的術(shù)語(yǔ)“純化”是指起始組合物的處理，以除去至少一種其它成分(例如，起始組合物的另一種成分(例如，植物或動(dòng)物組織、環(huán)境樣品等)、污染物、合成前體或副產(chǎn)品等)，這樣純化成分與除去成分之間的比例大于其在起始組合物中的比例。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”是指活性劑(例如，包含Y分泌酶活性調(diào)節(jié)劑的組合物)與惰性或活性載體的組合，使所述組合物特別適用于體外、體內(nèi)或間接體內(nèi)的診斷或治療。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”或“藥理學(xué)上可接受的”是指當(dāng)向受試者施用時(shí)，實(shí)質(zhì)上不產(chǎn)生副作用(例如，毒性、過(guò)敏或免疫反應(yīng))的組合物。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”，是指任何標(biāo)準(zhǔn)的藥物載體，包括，但不限于，磷酸緩沖鹽溶液、水、乳劑(例如，油/水或水/油乳劑)、各種潤(rùn)濕劑、任何及所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、十二烷基硫酸鈉、等滲和吸收延緩劑，崩解劑(例如，馬鈴薯淀粉或羧基乙酸淀粉鈉)等。所述組合物還可以包括穩(wěn)定劑和防腐劑。例如，載體、穩(wěn)定劑和佐劑。 (見，例如，Martin,Remington' s Pharmaceutical Sciences, 15th Ed. . ,Mack Publ. Co., Easton，Pa. (1975)，通過(guò)引用并入本文)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指靶受試者(例如，哺乳動(dòng)物受試者和/ 或體內(nèi)或間接體內(nèi)的細(xì)胞、組織或器官)中生理學(xué)上可接受的本發(fā)明化合物的任何鹽(例如，通過(guò)酸或堿的反應(yīng)獲得)。本發(fā)明的化合物“鹽”可能來(lái)源于有機(jī)或無(wú)機(jī)酸和堿。酸的實(shí)例包括，但不限于，鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、磺酸、萘二磺酸和苯磺酸等。其它酸，如草酸，本身不是藥學(xué)上可接受的，可在獲得本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽中用作中間體的鹽制備。堿的實(shí)例包括，但不限于，堿金屬(例如，鈉)氫氧化物、堿土金屬(例如，鎂)氫氧化物、氨和NW4+形式的化合物，其中W是CV4烷基等。鹽的實(shí)例包括，但不限于醋酸鹽、己二酸鹽、藻朊酸鹽、天門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、 苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、氟庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、 己酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、苯丙酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽等。鹽的其它實(shí)例包括 本發(fā)明化合物的陰離子與合適的陽(yáng)離子(如Na+、NH4+和NW4+(其中W是為C^4烷基)等) 化合的鹽。對(duì)于治療使用，本發(fā)明的化合物鹽被設(shè)想為藥學(xué)上可接受的。然而，非藥學(xué)上可接受的酸和堿鹽還可發(fā)現(xiàn)用于(例如)藥學(xué)上可接受的化合物的制備或純化中。對(duì)于治療使用，本發(fā)明的化合物鹽被設(shè)想為藥學(xué)上可接受的。然而，非藥學(xué)上可接受的酸和堿鹽還可發(fā)現(xiàn)用于(例如)藥學(xué)上可接受的化合物的制備或純化中。在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，藥劑組合物包含選自粉末、溶液、乳劑、微團(tuán)、脂質(zhì)體、凝膠和膏組成的組的形式。在一些實(shí)施例中，藥劑組合物包含藥片或填充膠囊，其中所述藥片或填充膠囊可以選擇性地包含腸溶衣材料。本文所用的術(shù)語(yǔ)“輔料”是指添加到活性成分配方中的無(wú)效成分(即不具有藥學(xué)活性的)。術(shù)語(yǔ)“基因”是指包含多肽、前體或RNA(例如，rRNA、tRNA)產(chǎn)生所需的編碼序列的核酸(例如，DNA)序列。只要全長(zhǎng)或片段的所需活性或功能性質(zhì)(例如，酶的活性、配體結(jié)合、信號(hào)傳導(dǎo)和免疫原性等)被保留，多肽可由全長(zhǎng)編碼序列或由編碼序列的任何部分。所述術(shù)語(yǔ)還包括結(jié)構(gòu)基因編碼區(qū)和在鄰近編碼區(qū)5'和3'末端并與任一末端距離約11Λ或以上的序列，使所述基因?qū)?yīng)于全長(zhǎng)mRNA的長(zhǎng)度。位于編碼區(qū)5'末端和存在于mRNA的序列被稱為5'非翻譯序列。位于3'末端或編碼區(qū)下游的序列和存在于mRNA的序列被稱為 3'非翻譯序列。所述術(shù)語(yǔ)“基因”包括cDNA和基因的基因組形式?；虻幕蚪M形式或克隆含有采用非編碼區(qū)序列(術(shù)語(yǔ)為“內(nèi)含子”或“介入?yún)^(qū)”或“介入序列”)打斷的編碼區(qū)的基因。內(nèi)含子是被轉(zhuǎn)錄為核RNA(hnRNA)的基因片段；內(nèi)含子可能含有調(diào)控基序，如增強(qiáng)子。將內(nèi)含子從核或初級(jí)轉(zhuǎn)錄中移除或“拼接出”;因此，內(nèi)含子并不存在于信使RNA(mRNA) 的轉(zhuǎn)錄中。mRNA在翻譯為新生多肽中特定序列或氨基酸順序過(guò)程中起作用。本文所用的術(shù)語(yǔ)“基因表達(dá)”與“表達(dá)”是指通過(guò)基因“轉(zhuǎn)錄”(即通過(guò)RNA聚合酶的酶作用)基因編碼的遺傳信息轉(zhuǎn)換為RNA(例如，mRNA、rRNA、tRNA或snRNA)的過(guò)程，對(duì)于蛋白質(zhì)編碼基因，通過(guò)mRNA “翻譯”轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的過(guò)程?；虮磉_(dá)可在這個(gè)過(guò)程的許多階段進(jìn)行調(diào)控?！吧险{(diào)”或“激活”是指增加和/或提高基因表達(dá)產(chǎn)物(如RNA或蛋白質(zhì)) 產(chǎn)生的調(diào)控，而“下調(diào)”或“抑制”是指降低產(chǎn)生的調(diào)控。涉及上調(diào)或下調(diào)的分子(例如，轉(zhuǎn)錄因子)通常分別被稱為“激活劑”和“抑制劑”。除了含有內(nèi)含子，基因的基因組形式還可包括RNA轉(zhuǎn)錄存在的位于序列5'和3' 末端的序列。這些序列被稱為“側(cè)翼”序列或區(qū)(RNA轉(zhuǎn)錄存在于5'或3'非翻譯序列的這些側(cè)翼序列)。5'側(cè)翼區(qū)可含有調(diào)控序列，如控制或影響基因轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子。 3'側(cè)翼區(qū)可含有指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后切割和聚腺苷酸化終止的序列。術(shù)語(yǔ)“野生型”是指從自然來(lái)源分離得到的基因或基因產(chǎn)物。野生型基因是種群中最常觀察到的，因而被任意設(shè)計(jì)的“正?！被颉耙吧汀被蛐问健Ｏ啾戎?，術(shù)語(yǔ)“改性的”或“突變的”是指當(dāng)與野生型基因或基因產(chǎn)物相比時(shí)，序列和/或功能性質(zhì)(即改變特性)中顯示改性的基因或基因產(chǎn)物。值得注意的是，自然發(fā)生的突變可以被分離；當(dāng)與野生型基因或基因產(chǎn)物相比時(shí)，這些通過(guò)它們已經(jīng)改變特性(包括改變核酸序列)的事實(shí)被鑒定。本文所用的術(shù)語(yǔ)“核酸分子編碼”、“DNA序列編碼”和“DNA編碼”是指沿著脫氧核糖核酸一條鏈的脫氧核糖核苷酸順序和序列。這些脫氧核糖核苷酸的順序決定了沿著肽 (蛋白質(zhì))鏈的氨基酸順序。因此，DNA序列編碼氨基酸序列。本文所用的術(shù)語(yǔ)“真核生物”是指區(qū)別于“原核生物”的生物體。這意味著所述術(shù)語(yǔ)包括表現(xiàn)出真核生物通常特性(如在染色體中通過(guò)核膜結(jié)合真正細(xì)胞核的存在、膜結(jié)合細(xì)胞器和常見真核生物的其它特性的存在)的細(xì)胞的所有生物體。因此，所述術(shù)語(yǔ)包括，但不限于如真菌、原生動(dòng)物和動(dòng)物等生物體(例如，人類)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“體外”指的是人工環(huán)境以及在人造環(huán)境中發(fā)生的過(guò)程或反應(yīng)。體外環(huán)境可以包括，但不限于，試管和細(xì)胞培養(yǎng)。術(shù)語(yǔ)“體內(nèi)”是指自然環(huán)境(例如，動(dòng)物或細(xì)胞)以及在自然環(huán)境中發(fā)生的過(guò)程或反應(yīng)。術(shù)語(yǔ)“測(cè)試化合物”和“候選化合物”是指任何化學(xué)實(shí)體、藥物、藥品和用于治療或預(yù)防疾病、病或身體功能(例如，認(rèn)知功能、淀粉樣蛋白相關(guān)障礙、循環(huán)、高血壓和心臟病等)障礙的候選類似物。測(cè)試化合物包含已知的和潛在的治療化合物。測(cè)試化合物可以通過(guò)使用本發(fā)明的篩選方法進(jìn)行篩選被確定為治療劑。本文所用的術(shù)語(yǔ)“功能的”分子是通過(guò)其特點(diǎn)表現(xiàn)出其性質(zhì)的分子。舉例來(lái)說(shuō)，功能酶是通過(guò)酶的特點(diǎn)表現(xiàn)出其催化特性的酶。本文所用的術(shù)語(yǔ)“反義寡核苷酸”是指核酸，例如，與靶RNA(或其片段)序列互補(bǔ)的RNA或DNA片段。通常情況下，所述靶RNA是通過(guò)細(xì)胞表達(dá)的mRNA。本文所用的術(shù)語(yǔ)“干擾寡核苷酸”涉及能夠抑制靶基因產(chǎn)物功能的寡核苷酸，不管抑制機(jī)制。本文所用的干擾寡核苷酸包括但不限于反義寡核苷酸、寡核苷酸適配子、 微RNA(miRNAs)，短干擾RNA(siRNAs)和短發(fā)夾RNA(shRNA)。短干擾RNA通常組成為雙鏈RNA分子，一般為19-22nt，而短發(fā)夾RNA組成為通過(guò)循環(huán)序列連接的回文序列，一般為 19-29nt。干擾寡核苷酸的產(chǎn)生方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員眾所周知的，包括但不限于化學(xué)合成、重組DNA技術(shù)或較大的前體分子利用酶切割產(chǎn)生，例如，通過(guò)Dicer酶。本文所用的術(shù)語(yǔ)“抗體”是指包含抗原識(shí)別位點(diǎn)的免疫球蛋白或免疫球蛋白源性蛋白。抗體包括但不限于包含兩條重鏈和兩條輕鏈的天然或重組免疫球蛋白，以及改性形式，包括，例如，包含重鏈和輕鏈部分的不同組合的片段抗體和單鏈抗體。所述術(shù)語(yǔ)包括多克隆和單克隆抗體。發(fā)明詳述發(fā)明詳述和發(fā)明概述描述了本發(fā)明的特定實(shí)施例，它們的內(nèi)容通過(guò)引用并入本文。雖然已結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，應(yīng)要了解的是，所聲稱的本發(fā)明不應(yīng)受到具體實(shí)施例的不必要限制。例如，結(jié)合Y分泌酶活性的特定調(diào)節(jié)劑對(duì)本發(fā)明的方法和組合物進(jìn)行了描述，例如，GLEEVEC(STI-571)甲磺酸伊馬替尼和特定的大腦淀粉樣蛋白障礙 (例如，阿爾茨海默氏病)。應(yīng)要了解的是，本發(fā)明并不局限于使用或包含甲磺酸伊馬替尼的方法或組合物或AD。本發(fā)明在某種程度上是基于申請(qǐng)人的周邊組織中(例如，肝臟中)Αβ表達(dá)或累積的調(diào)節(jié)的驚人發(fā)現(xiàn)，提供大腦中Αβ相關(guān)疾病(例如，阿爾茨海默氏病)的治療效果。因此，本發(fā)明通常涉及通過(guò)在非神經(jīng)(即周邊)細(xì)胞、流體和/或組織中施用調(diào)節(jié)Aβ產(chǎn)生和 /或累積的化合物，預(yù)防或治療大腦A β相關(guān)障礙(如AD)的方法和組合物。如上所述，β淀粉樣肽(Αβ)是淀粉樣肽前體蛋白(APP)的代謝產(chǎn)物，并被認(rèn)為是阿爾茨海默氏病(AD)的主要病理因素。APP通過(guò)β和γ分泌酶蛋白水解產(chǎn)生Αβ肽， 含有被認(rèn)為最致病的42殘基形式的Aβ。β分泌酶為健康大腦功能所需，因而是降低Aβ 比較差的候選抑制劑。由于打斷Y分泌酶對(duì)其它靶(特別是跨膜受體的Notch家族)的作用，一些大腦滲透劑Y分泌酶抑制劑已表現(xiàn)出不良的副作用。一類化合物已被發(fā)現(xiàn)能降低Αβ的產(chǎn)生，而不影響Notch信號(hào)。這類化合物包括酪氨酸激酶抑制劑甲磺酸伊馬替尼 (STI-571，商品名為GLEEVEC)和相關(guān)化合物，6-(2，6-二氯苯基)-8-甲基_2_(甲基硫苯基-氨基)-8H—吡啶[2, 3-d]嘧啶-7-酮，被稱為抑制劑2(NetzerWJ，et al. ,Proc Natl Acad Sci U S Α. 100 :1M44-1M49，2003)。然而，這類化合物已從大腦Aβ障礙治療中被排除，因?yàn)樗⒉粚?shí)質(zhì)性跨越血腦屏障，從而使傳送給大腦組織過(guò)分地困難。如上所述，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，周邊組織中(例如，肝臟中)Αβ表達(dá)或累積的調(diào)節(jié)的驚人發(fā)現(xiàn)，提供大腦A β相關(guān)疾病(例如，阿爾茨海默氏病)的治療效果。本發(fā)明提供了通過(guò)治療受試者的肝臟與治療或預(yù)防AD相關(guān)的方法、組合物及過(guò)程。特別是，本發(fā)明涉及通過(guò)直接抑制產(chǎn)生(例如，通過(guò)抑制APP表達(dá))或通過(guò)依次調(diào)節(jié)肝臟中Αβ產(chǎn)生、加工、累積或運(yùn)輸?shù)囊蜃痈淖兪茉囌吒闻K中Aβ的產(chǎn)生、加工、累積或運(yùn)輸。在優(yōu)選實(shí)施例中，所述抑制是通過(guò)使用并不實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障的化合物。在特別優(yōu)選實(shí)施例中，治療的組合物和方法包括使用STI-571或其藥學(xué)上可接受的鹽，進(jìn)行周邊給藥(例如，口服)。藥劑制備中組合物的用途伊馬替尼是以下式I化合物4- -甲基哌嗪-1-甲基)-N44-甲基-3-(4-吡啶-3-基)嘧啶-2氨基)苯基]-苯甲酰胺的通用名稱[國(guó)際非專有名稱]
權(quán)利要求
1.伊馬替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽在藥劑制備中的用途，所述藥劑用于具有或易于發(fā)展大腦Aβ障礙的受試者的周邊組織中Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
2.伊馬替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽在藥劑制備中的用途，所述藥劑用于具有或易于發(fā)展大腦Aβ障礙的受試者的肝臟中Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其中所述大腦Aβ障礙是阿爾茨海默氏病。
4.如權(quán)利要求1-3所述的用途，其中所述藥劑配制用于口服。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥劑進(jìn)一步包含用于治療大腦Aβ 障礙的有效量的第二治療劑。
6.如權(quán)利要求5所述的用途，其中所述第二治療劑包含選自由大麻素類、dimebom、強(qiáng)的松、布洛芬、naproxyn、消炎痛、他汀類藥物、選擇性雌激素受體分子、降壓藥、α -阻斷劑、 β-阻斷劑、α 阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑、鈣通道阻斷齊U、利尿劑、NSAIDS和抗氧化劑組成的組的試劑。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述伊馬替尼是甲磺酸鹽的形式。
8.選自由WGB-BC-15、化合物 1、化合物 2、LY450139、GSI_953、Flurizan 和 E2012 化合物、其血腦屏障不滲透性變異體、和/或藥學(xué)上可接受的鹽組成的組的化合物在藥劑制備中的用途，所述藥劑用于具有或易于發(fā)展大腦Αβ障礙的受試者的周邊組織中Αβ產(chǎn)生的抑制。
9.選自由WGB-BC-15、化合物 1、化合物 2、LY450139、GSI_953、Flurizan 和 E2012 化合物、其血腦屏障不滲透性變異體、和/或藥學(xué)上可接受的鹽組成的組的化合物在藥劑制備中的用途，所述藥劑用于具有或易于發(fā)展大腦Αβ障礙的受試者的肝臟中Αβ產(chǎn)生的抑制。
10.如權(quán)利要求8或9所述的用途，其中所述大腦Aβ障礙是阿爾茨海默氏病。
11.如權(quán)利要求8-10中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥劑配制用于口服。
12.如權(quán)利要求8-11中任一項(xiàng)所述的用途，其中所述藥劑進(jìn)一步包含用于治療大腦 Aβ障礙的有效量的第二治療劑。
13.如權(quán)利要求12所述的用途，其中所述第二治療劑包含選自由大麻素類、dimebom、 強(qiáng)的松、布洛芬、naproxyn、消炎痛、他汀類藥物、選擇性雌激素受體分子、降壓藥、α -阻斷齊U、阻斷劑、α 阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑、NSAIDS和抗氧化劑組成的組的試劑。
14.一種受試者的大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙的治療方法，包括周邊施用調(diào)節(jié)周邊組織中Αβ產(chǎn)生的化合物。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述調(diào)節(jié)包括抑制。
16.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述化合物具有小于2.0的分配系數(shù)。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述分配系數(shù)小于1.5。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述分配系數(shù)小于約1.0。
19.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述化合物沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。
20.一種受試者的大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙的治療方法，包括周邊施用調(diào)節(jié)所述受試者的周邊組織中基因表達(dá)的化合物。
21.如權(quán)利要求14或20所述的方法，其中所述周邊組織是肝臟。
22.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述基因選自由Psen2、APP、Cibl、Ngrn和Zfhxlb組成的組。
23.如權(quán)利要求14或20所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括早老素2、 calmyrin、neugrin、Zfhxlb或APP表達(dá)或活性中一種或多種的調(diào)節(jié)。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述早老素2、calmyrin、neugrin、Zfhxlb或APP 表達(dá)或活性中的一種或多種的調(diào)節(jié)包括所述表達(dá)或活性的抑制。
25.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中早老素2表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
26.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 calmyrin表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
27.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 neugrin表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
28.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 Zfhxlb表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
29.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中淀粉樣前體蛋白(APP)表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
30.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中早老素2表達(dá)或活性的抑制。
31.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 calmyrin表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
32.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 neugrin表達(dá)或活性的刺激。
33.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中降低neugrin表達(dá)或活性的因素的抑制。
34.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 Zfhxlb表達(dá)或活性的抑制。
35.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中淀粉樣前體蛋白(APP)表達(dá)或活性的抑制。
36.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述Aβ的調(diào)節(jié)包括選自由早老素2、calmyrin、 neugrin, Zfhxlb和APP組成的組的至少兩種蛋白在肝臟中的表達(dá)或活性的調(diào)節(jié)。
37.一種方法，包括a)評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙存在的受試者；b)周邊施用調(diào)節(jié)Αβ產(chǎn)生的化合物，其中所述化合物沒有實(shí)質(zhì)性滲透血腦屏障；c)評(píng)價(jià)大腦Aβ障礙或大腦A β障礙發(fā)展的所述受試者。
38.如權(quán)利要求37所述的方法，其中所述Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 A β產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
39.如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述調(diào)節(jié)包括抑制。
40.一種方法，包括a)評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙存在的受試者；b)周邊施用調(diào)節(jié)Αβ的累積的化合物，其中所述化合物沒有實(shí)質(zhì)性滲透血腦屏障；C)評(píng)價(jià)大腦A β障礙或大腦A β障礙發(fā)展的所述受試者。
41.如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述Aβ的累積的調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中 Aβ的累積的調(diào)節(jié)。
42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中所述調(diào)節(jié)包括在所述受試者肝臟中降低Aβ的累積。
43.如權(quán)利要求14-42中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述大腦Αβ障礙是阿爾茨海默氏病。
44.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述化合物包含γ分泌酶活性的調(diào)節(jié)劑。
45.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述化合物是非γ分泌酶的蛋白調(diào)節(jié)劑。
46.如權(quán)利要求44所述的方法，其中所述化合物包含γ分泌酶活性的抑制劑。
47.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述化合物包含早老素2的調(diào)節(jié)劑。
48.如權(quán)利要求47所述的方法，其中所述化合物包含早老素2的抑制劑。
49.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述化合物包含淀粉樣前體蛋白切割的調(diào)節(jié)劑。
50.如權(quán)利要求49所述的方法，其中所述化合物包含淀粉樣前體蛋白切割的抑制劑。
51.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述評(píng)價(jià)包含精神狀態(tài)評(píng)價(jià)。
52.如權(quán)利要求37或40所述的方法，其中所述評(píng)價(jià)包含神經(jīng)心理測(cè)試。
53.如權(quán)利要求37或40所述的方法，其中所述評(píng)價(jià)包含腦成像。
54.如權(quán)利要求37或40所述的方法，其中所述化合物包含選自由STI-571、 WGB-BC-15、化合物1、化合物2、LY450139、GSI-953、Flurizan和Ε2012化合物組成的組的組成。
55.如權(quán)利要求14-42所述的方法，其中所述化合物包含干擾寡核苷酸。
56.如權(quán)利要求1-14-42所述的方法，其中所述化合物包含干擾RNA。
57.如權(quán)利要求56所述的方法，其中所述干擾RNA選自由siRNA、shRNA和miRNA組成的組。
58.如權(quán)利要求56所述的方法，其中所述干擾RNA包含針對(duì)淀粉樣前體蛋白R(shí)NA的干擾 RNA。
59.如權(quán)利要求56所述的方法，其中所述干擾RNA包含針對(duì)早老素2RNA的干擾RNA。
60.如權(quán)利要求14-59所述的方法，其中所述化合物進(jìn)一步包含用于治療、改善或減低大腦Αβ相關(guān)障礙的風(fēng)險(xiǎn)或嚴(yán)重程度的已知治療劑。
61.如權(quán)利要求60所述的方法，其中所述已知治療劑選自由大麻素類、dimebom、強(qiáng)的松、布洛芬、naproxyn、消炎痛、他汀類藥物、選擇性雌激素受體分子、降壓藥、α -阻斷劑、 β-阻斷劑、α 阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張肽受體阻斷劑，鈣通道阻斷齊U、利尿劑和抗氧化劑組成的組。
62.如權(quán)利要求14-61所述的方法，其中所述周邊施用包含口服。
63.一種評(píng)價(jià)受試者中大腦A β障礙的風(fēng)險(xiǎn)或存在的方法，包括測(cè)定所述受試者的周邊組織中Aβ的水平。
64.一種評(píng)價(jià)受試者中大腦A β障礙的風(fēng)險(xiǎn)或存在的方法，包括分析所述受試者的周邊組織中基因產(chǎn)物的表達(dá)或活性。
65.如權(quán)利要求64所述的方法，其中所述基因產(chǎn)物選自由PSen2、APP、Cibl、Ngrn和 Zfhxlb組成的組的基因。
66.如權(quán)利要求63-65所述的方法，其中所述周邊組織是肝臟。
67.如權(quán)利要求63-65所述的方法，其中所述周邊組織是血液。
68.如權(quán)利要求63-65所述的方法，其中所述周邊組織是血清。
69.一種監(jiān)測(cè)受試者中大腦Αβ障礙的方法，包括測(cè)定所述受試者的周邊組織中Aβ的水平。
70.一種監(jiān)測(cè)受試者中大腦A β障礙的方法，包括分析所述受試者的周邊組織中基因產(chǎn)物的表達(dá)或活性。
71.如權(quán)利要求70所述的方法，其中所述基因產(chǎn)物選自由Psen2、APP、CibUNgrn和 Zfhxlb組成的組的基因。
72.如權(quán)利要求69-71所述的方法，其中所述周邊組織是肝臟。
73.如權(quán)利要求69-71所述的方法，其中所述周邊組織是血液。
74.如權(quán)利要求69-71所述的方法，其中所述周邊組織是血清。
75.如權(quán)利要求69-71所述的方法，其中所述監(jiān)測(cè)包括在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)量所述周邊組織中的Aβ。
76.如權(quán)利要求63-75所述的方法，其中所述大腦Aβ障礙是阿爾茨海默氏病。
77.一種方法，包括a)評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或易于具有大腦Αβ障礙存在的受試者；b)周邊施用抑制周邊Aβ跨越血腦屏障運(yùn)輸?shù)幕衔?，其中所述化合物不是抗A β抗體。
78.如權(quán)利要求77所述的方法，進(jìn)一步包括c)在所述施用后，評(píng)價(jià)大腦Αβ障礙或大腦Αβ障礙發(fā)展的所述受試者。
79.如權(quán)利要求77所述的方法，其中所述大腦Aβ障礙是阿爾茨海默氏病。
80.一種用于治療大腦Αβ障礙的基因靶的鑒定方法，包括將具有或易于具有所述Αβ 障礙的第一親本與減少所述Aβ障礙易患性的第二親本的后代的肝基因表達(dá)譜進(jìn)行比較， 以鑒定在肝臟中具有表達(dá)水平的可遺傳的基因標(biāo)記，其中，相對(duì)于所述第一親本和所述第二親本的肝臟中的表達(dá)水平，所述后代肝臟中的所述可遺傳的基因標(biāo)記的增加或減少表達(dá)與來(lái)自所述第二親本的所述基因標(biāo)記的遺傳性相關(guān)。
81.選自由STI-571、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan 和 E2012 化合物、或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物，所述化合物用于具有或易于發(fā)展Αβ障礙的受試者的周邊組織中Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
82.選自由STI-571、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan 和 E2012 化合物、或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物，所述化合物用于具有或易于發(fā)展大腦A β障礙的受試者的周邊組織中Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
83.選自由STI-571、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan 和 E2012 化合物、或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物，所述化合物用于具有或易于發(fā)展A β障礙的受試者的肝臟中Aβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
84.選自由STI-571、化合物 2、LY450139、GSI-953、Flurizan 和 E2012 化合物、或其血腦屏障不滲透性變異體組成的組的化合物，所述化合物用于具有或易于發(fā)展大腦A β障礙的受試者的肝臟中Αβ產(chǎn)生的調(diào)節(jié)。
85.如權(quán)利要求81-84中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述化合物具有小于2.0的分配系數(shù)。
86.如權(quán)利要求81-84中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述分配系數(shù)小于1.5。
87.如權(quán)利要求81-84中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述分配系數(shù)小于約1.0。
88.如權(quán)利要求81-84中任一項(xiàng)所述的化合物，其中所述化合物沒有實(shí)質(zhì)性跨越血腦屏障。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)通過(guò)非神經(jīng)元(即周邊的)細(xì)胞、液體或組織表現(xiàn)的淀粉樣β肽(Aβ)水平的方法和組合物。本發(fā)明還涉及通過(guò)選擇性調(diào)節(jié)(如抑制)γ-分泌酶的活性來(lái)調(diào)節(jié)Aβ水平。本發(fā)明還涉及通過(guò)施用導(dǎo)致非神經(jīng)組織中γ-分泌酶的調(diào)節(jié)的化合物來(lái)預(yù)防、治療或減輕包括但不限于Aβ相關(guān)障礙的障礙癥狀的方法，以直接或間接地預(yù)防、治療或減輕大腦Aβ障礙(如阿爾茨海默氏癥)的癥狀。
文檔編號(hào)A61K31/506GK102271669SQ200980154347
公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2009年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月13日
發(fā)明者B·S·希爾布什, F·E·布盧姆, J·G·薩特克利夫 申請(qǐng)人:基因改造有限責(zé)任公司