專利名稱：酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及在一種適合實(shí)驗(yàn)室外大樣本量篩査的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒。
技術(shù)背景疫苗是預(yù)防和控制傳染性疾病的有效工具，接種疫苗后，機(jī)體的免疫細(xì)胞被激活并產(chǎn)生 免疫應(yīng)答，產(chǎn)生相應(yīng)保護(hù)性抗體(主要是IgG抗體)，從而增強(qiáng)抗體的抗病能力。疫苗的質(zhì)量、 運(yùn)輸方式、保存條件、接種程序以及受種者的個體差異等諸多因素都可能會影響疫苗的免疫 效果。因此，對疫苗免疫效果的監(jiān)測具有重要意義，對特異性IgG抗體的檢測是評價(jià)疫苗免 疫效果的重要手段。 一直以來，疫苗接種后的免疫效果監(jiān)測國內(nèi)較少實(shí)施，主要原因是缺乏 簡便有效的實(shí)驗(yàn)方法，傳統(tǒng)的檢測人血清中抗體的方法有血凝抑制試驗(yàn)(需要大量新鮮敏感 的猴紅細(xì)胞)、中和試驗(yàn)(需要專門組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室和專業(yè)技術(shù)人員，而且費(fèi)時，費(fèi)力)，因 此，傳統(tǒng)的檢測方法有多種弊端難以普及，現(xiàn)有的檢驗(yàn)器材都是互相分離開的，且效果亦不 理想，更主要的困難是靜脈采血分離血清的方法使檢測更難于推廣應(yīng)用。 發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，其配置齊全， 攜帶方便、無需輔助性采購、采樣方便，檢測靈活，能夠通過肉眼目測快速獲得結(jié)果。本實(shí)用新型解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，包括有 試劑箱，其特征在于所述的試劑箱內(nèi)包含有采血附件和核心試劑盒。按上述方案，所述的采血附件包括有采血針，毛細(xì)采血管，帶蓋離心管、橡皮吸頭和離 心管托架。按上述方案，所述的核心試劑盒包括有包被有抗原的預(yù)包被酶標(biāo)板、酶標(biāo)抗體、輔助檢 測液和顯色系統(tǒng)，所述的顯色系統(tǒng)包括有底物A和底物B，所述的輔助檢測液包括有濃縮洗 滌液，陰性血清，終止液，陽性血清，血清樣本稀釋液。所述的包被有抗原的預(yù)包被酶標(biāo)板包括有包被有脊灰病毒的預(yù)包被板，包被有流腦病毒 的預(yù)包被板，包被有甲肝病毒的預(yù)包被板或包被有乙腦病毒的預(yù)包被板。本實(shí)用新型的使用方法是通過采血針收集手指血、耳垂血等末梢血，將所取末梢血置 于帶蓋離心管中，血球自然沉降，取上清血漿到檢測試劑盒內(nèi)，檢測血清中是否產(chǎn)生抗體。 預(yù)包被酶標(biāo)板上的抗原與人體血清中抗體產(chǎn)生特異性結(jié)合，酶標(biāo)抗體又與血清中的抗體產(chǎn)生 特異性的結(jié)合，最后通過酶標(biāo)抗體上的酶的催化作用使顯色系統(tǒng)顯色，根據(jù)顏色的有無來判 斷產(chǎn)生抗體與否，根據(jù)顏色的深淺來判斷產(chǎn)生抗體的多少。本實(shí)用新型利用免疫學(xué)方法在體外以末梢血作樣本篩查接種人群是否產(chǎn)生抗體，適于實(shí) 驗(yàn)室外大樣本量的接種后抗體篩査。本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)1、 配置齊，采用集成技術(shù)，產(chǎn)品融核心試劑與采樣附件于一體，不需要其他的輔助性采 購，減短血清收集時間。利用抗原抗體之間的特異性的反應(yīng)，通過他們之間免疫親和力進(jìn)行 快速結(jié)合，快速出結(jié)果，全程檢測90分鐘即可報(bào)告免疫抗體產(chǎn)生結(jié)果；2、 采樣方便，檢測靈活，直接采取人體末梢血(耳垂血或手指血)檢測；.3、 能滿足廣泛的篩查，操作簡便，能夠通過目測法獲得最后最終的結(jié)果，適于基層和缺 乏實(shí)驗(yàn)室條件的大規(guī)模普査用。


圖1為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。 具體實(shí)施方案
以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對本實(shí)用新型做進(jìn)一步的說明，但是此說明不能構(gòu)成對本實(shí)用新 型的限制。一種適合實(shí)驗(yàn)室外大樣本量篩查的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，如圖1所示，其組成結(jié)構(gòu) 如下包括有試劑箱，所述的試劑箱內(nèi)包含有采血附件、核心試劑盒，所述的采血附件包括有采血針2，毛細(xì)采血管l，帶蓋離心管4、橡皮吸頭5和離心管托架，所述的核心試劑盒包 括有包被有抗原的預(yù)包被酶標(biāo)板3、酶標(biāo)抗體12、輔助檢測液和顯色系統(tǒng)，所述的顯色系統(tǒng) 包括有底物A8和底物B11，所述的輔助檢測液包括有濃縮洗滌液6，陰性血清7，終止液9， 陽性血清10,血清樣本稀釋液13，所述的包被有抗原的預(yù)包被酶標(biāo)板可以為包被有脊灰病毒 的預(yù)包被板，包被有流腦病毒的預(yù)包被板，包被有甲肝病毒的預(yù)包被板或包被有乙腦病毒的 預(yù)包被板。具體檢測步驟A:用一次性采血針采集末梢血(手指血或耳垂血)，用一次性定量采血管取20ul，加到預(yù) 先盛有180 ul生理鹽水的0.5ml帶蓋離心管中，待血球全部自然沉降到管底后，便可直接取 上清液檢測。B:血清樣本應(yīng)新鮮、無污染、無溶血、無血脂。檢驗(yàn)方法1. 實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒從冰箱取出，室溫放置30分鐘后使用。2. 將濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍后使用。3. 每次試驗(yàn)設(shè)陽性對照、陰性對照各1孔，每孔加對照液100ul;空白1孔(不加血清酶標(biāo)抗體，只加底物A、 B和終止液)；其余為樣品孔，每孔加血清樣品 稀釋液2滴(50ul/滴，下同)和樣品10ul，貼上封口膜置37。C溫育30分鐘。4. 棄去孔中液體，拍干，每孔加洗滌液300ul，靜置1分鐘后棄去，拍干，重復(fù)洗滌5 次，拍干。5. 加入酶標(biāo)抗體2滴，貼上封口膜，置37'C溫育30分鐘。6. 棄去孔中液體，拍干，每孔加洗滌液300ul，靜置1分鐘后棄去，拍干，重復(fù)洗滌5 次，拍干。7. 每孔滴加底物A、底物B各1滴，37"C避光顯色15分鐘。檢驗(yàn)結(jié)果的解釋目測在白色背景下，觀察各孔顯色情況，藍(lán)色者為陽性，無色或微藍(lán)色者為陰性。
權(quán)利要求1、酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，包括有試劑箱，其特征在于所述的試劑箱內(nèi)包含有采血附件和核心試劑盒。
2、 按權(quán)利要求1所述的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，其特征在于所述的采血附件包括有采 血針(2)，毛細(xì)采血管(1)，帶蓋離心管(4)、橡皮吸頭(5)和離心管托架。
3、 按權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，其特征在于所述的核心試劑盒包 括有包被有抗原的預(yù)包被酶標(biāo)板(3)、酶標(biāo)抗體(12)、輔助檢測液和顯色系統(tǒng)，所述的顯色 系統(tǒng)包括有底物A (8)和底物B (11)，所述的輔助檢測液包括有濃縮洗滌液(6)，陰性血清(7),終止液(9)，陽性血清(10),血清樣本稀釋液(13)。
4、 按權(quán)利要求3所述的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，其特征在T所述的包被有抗原的預(yù)包 被酶標(biāo)板包括有包被有脊灰病毒的預(yù)包被板，包被有流腦病毒的預(yù)包被板，包被有甲肝病毒 的預(yù)包被板或包被有乙腦病毒的預(yù)包被板。
專利摘要本實(shí)用新型涉及在一種適合實(shí)驗(yàn)室外大樣本量篩查的酶聯(lián)免疫效果檢測試劑盒，包括有試劑箱，其特征在于所述的試劑箱內(nèi)包含有采血附件和核心試劑盒。本實(shí)用新型相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)1.配置齊，采用集成技術(shù)，產(chǎn)品融核心試劑與采樣附件于一體，不需要其他的輔助性采購，減短血清收集時間。利用抗原抗體之間的特異性的反應(yīng)，通過他們之間免疫親和力進(jìn)行快速結(jié)合，快速出結(jié)果，全程檢測90分鐘即可報(bào)告免疫抗體產(chǎn)生結(jié)果；2.采樣方便，檢測靈活，直接采取人體末梢血(耳垂血或手指血)檢測；3.能滿足廣泛的篩查，操作簡便，能夠通過目測法獲得最后最終的結(jié)果，適于基層和缺乏實(shí)驗(yàn)室條件的大規(guī)模普查用。
文檔編號A61B5/15GK201316269SQ200820192419
公開日2009年9月30日 申請日期2008年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月13日
發(fā)明者慧 孫, 軍 安, 燕 王, 王幫洲, 蔡圣明, 琰 陳, 龔鎮(zhèn)奎 申請人:湖北楚冠生物藥業(yè)有限公司