專利名稱：：非布索坦在制備治療心力衰竭藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及非布索坦的新用途，具體地說是其在制備治療心力衰竭藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：心力衰竭(即充血性心力衰竭)是臨床上極為常見的心血管綜合癥，據(jù)WHO統(tǒng)計全球心力衰竭發(fā)病率為0.52%，特別是心力衰竭的患病率呈日益上升趨勢，成為住院、病殘及死亡的主要原因。心臟病人一旦出現(xiàn)心力衰竭，五年死亡率達50%。由于現(xiàn)代社會下的工作壓力和人口的老齡化，導致心血管疾病發(fā)病日益增加，心衰的發(fā)生也隨之越來越多，心衰的治療已成為心血管疾病中搶救的難題。心力衰竭是指心臟病發(fā)展到一定程度，即使充分發(fā)揮代償能力仍然不能泵出足夠的血液以適應(yīng)機體所需而產(chǎn)生的一種綜合癥。臨床表現(xiàn)多為疲勞、水腫、呼吸困難和運動耐力下降等。引起心力衰竭的病因有多種，主要與缺血性心臟病、高血壓、心肌肥厚、特發(fā)性擴張性心肌病、慢性心臟瓣膜病或先天性心臟病等有關(guān)。傳統(tǒng)的抗心衰藥物有強心甙類、13腎上腺受體激動劑、磷酸二酯酶抑制劑等，一般都通過非特異地增加心肌興奮收縮耦聯(lián)，增加細胞鈣濃度而發(fā)揮強心作用，因而不可避免地引起胞內(nèi)Ca2+過多，從而繼發(fā)心律失常、細胞損傷甚至壞死。目前，治療癥狀性心力衰竭多采用聯(lián)合用藥。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激與心力衰竭的形成有密切關(guān)系。氧化應(yīng)激是指細胞中促氧化與抗氧化體系之間的平衡失調(diào)而傾向于前者，導致的一種細胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂。氧化應(yīng)激而導致的細胞內(nèi)環(huán)境紊亂而引起不可逆的細胞損傷和死亡，從而導致心力衰竭和死亡。氧化應(yīng)激作為心血管疾病的發(fā)病機制之一，影響心功能的多個階段進程，包括心肌肥大、離子流和鈣通道、興奮_收縮偶聯(lián)、細胞外基質(zhì)配體、血管舒縮功能、新陳代謝、基因表達、多種生長因子和細胞活素的下游信號作用。近來有許多關(guān)于黃嘌呤氧化酶抑制劑通過抑制氧化應(yīng)激，能夠增強心力衰竭心肌收縮力的報道。例如，別嘌呤醇是一種活化的黃嘌呤氧化酶抑制劑。最近有報道別嘌呤醇已開始用于心力衰竭的臨床治療。黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase)是催化三磷酸腺苷(ATP)分解代謝中最后兩步不可逆反應(yīng)中的關(guān)鍵酶，大量研究表明，黃嘌呤氧化酶的表達和活性的增加可導致心衰的發(fā)生。其原因可能是l)黃嘌呤氧化酶活性增加導致心衰時ATP等高能磷酸化合物(Highenergyphosphate，HEP)的缺失，心肌能量供給受限；2)黃嘌呤氧化酶活性的增加導致超氧離子(02—)的增加而誘發(fā)的氧化應(yīng)激加重心肌的損害。進一步的動物和臨床實驗表明，黃嘌呤氧化酶抑制劑治療可以明顯改善心衰癥狀，達到治療心衰的目的。因此，黃嘌呤氧化酶被認為是近年來發(fā)現(xiàn)的新的抗心衰藥物作用的分子靶點。非布索坦(Febuxostat)是一種選擇性黃嘌呤氧化酶，其化學名為2_[3_氰基_4_異丁氧基苯基]_4_甲基噻唑-5-甲酸，其化學結(jié)構(gòu)式如式(I)所示。3(式I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>2008年4月在歐洲批準上市，用于治療高尿酸癥和痛風。然而，目前為止，還有沒有有關(guān)使用非布索坦(Febuxostat)作為治療藥物用于心衰治療的報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的主要目的在于提供非布索坦的一種新用途，具體地說是其在制備治療心力衰竭藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明人率先采用腹主動脈狹窄法制作的慢性心衰大鼠模型和家兔模型，對非布索坦作為治療心力衰竭藥物進行了研究，發(fā)現(xiàn)大鼠心衰模型組左室后壁運動明顯減弱。非布索坦能顯著改善左室功能，減小左室半徑，增加室壁厚度和增加室壁運動幅度。非布索坦也能顯著改善右室功能，與模型組相比較差異有顯著性意義(P<0.05.)。非布索坦在高劑量12，中劑量6，和低劑量3mg/kg連續(xù)灌胃給藥3周后對家兔腹主動脈狹窄誘發(fā)的心衰模型有明顯的改善作用。上述研究表明，非布索坦可以作為治療心力衰竭的藥物應(yīng)用。本發(fā)明提供的藥物可以是片劑、丸劑或膠囊等常規(guī)制劑。藥物的制備方法可按目前常規(guī)的方法制備。圖1顯示的是收縮期和舒張期心肌收縮力與細胞外鈣的關(guān)系。具體實施方法以下實施例進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實質(zhì)的情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。實施例1:非布索坦對心力衰竭大鼠心臟功能的影響試驗動物取36只雄性SD大鼠，體質(zhì)量160220g，清潔級，鼠齡68周。飼養(yǎng)環(huán)境室內(nèi)，自然光照，通風條件良好，溫度2025°C，濕度65%，分籠飼養(yǎng)，用標準大鼠飼料喂養(yǎng)，飲用自來水。設(shè)計隨機對照動物實驗。實驗方法實驗分組和心力衰竭動物模型制備將36只大鼠單純隨機分成3組①對照組12只只做開胸手術(shù)，不結(jié)扎動脈。②模型組12只結(jié)扎左冠狀動脈的前降支，制備大面積心肌梗死后心力衰竭動物模型。③非布索坦組12只結(jié)扎冠狀動脈后當天灌胃給予非布索坦20mg/(kg.d)(此劑量能夠有效抑制黃嘌呤氧化酶活性)。梗死4周后，用超聲評價左心室功能。吸入乙氟醚麻醉后，觀察左室半徑，室壁厚度，射血分數(shù)指標以及室壁運動。然后處死大鼠稱量大鼠心臟和左右心室重量作為評價右心功能的指標肌小梁的分離腹腔內(nèi)注射O.10.2ml苯巴比妥鈉。迅速開胸剪下心臟，用含有2，3-丁二酮單肟(BDM)的Krebs-Henseleit(K-H)冷停搏液逆行灌注心臟，使其停止跳動。在顯微鏡下小心分離完整的肌小梁。測量肌肉的長度、寬度、厚度。然后將其轉(zhuǎn)移到充滿循環(huán)K-H灌流液的測量力與鈣的特殊裝置中，輕掛在力傳感器上。給予肌肉0.5Hz的電剌激20min，使其恢復收縮。灌流速度為10ml/min，灌流溫度為2022°C。通過力傳感器測定肌肉收縮力，所有測得的數(shù)據(jù)均用該肌肉的橫截面積(寬X厚XJi/4)校正。力的單位為mN/mm2。測定不同細胞外鈣濃度時心肌的收縮分別測定在不同細胞外鈣濃度時(0.5，1.0，1.5和2.Ommol/L)心肌收縮期與舒張期心肌張力變化情況(剌激頻率為0.5Hz)。統(tǒng)計學分析采用SPSS11.5軟件進行ANOVA方差檢驗。數(shù)據(jù)均表示為^±s。實驗結(jié)果(1)實驗動物數(shù)量分析36只大鼠中，在開胸、造模過程中死亡5只，繼發(fā)心力衰竭死亡4只(模型組2只，非布索坦組2只)，最終進入結(jié)果分析大鼠27只，其中心肌梗死對照組11只，模型組8只，非布索坦組8只。(2)大鼠心臟功能的評價結(jié)果模型組左室后壁運動明顯減弱，甚至出現(xiàn)矛盾運動。非布索坦能顯著改善左室功能。它能減小左室半徑，增加室壁厚度，增加室壁運動的幅度。非布索坦也能顯著改善右室功能，與模型組相比較差異有顯著性意義(P<0.05.)。左室、右室功能指標參數(shù)參見表1。表1各組大鼠的左室功能參數(shù)比較(；±s)組別n射血分數(shù)左室長軸縮短率(％)收縮期/舒張期室壁厚度變化率(％)右室/左室+室間隔(％)對照組1175.3±6.838.3±4,160.3±4.10.26±0.03模型組854.9±4.3a20.1±2.3a24.9±2.1a0.38±0.04a非布索坦組867.9±7.1b28.7±2.8b34.8±3.4b0.28±0.03b與對照組比較，aP<0.05;與模型組比較，bP<0.05[OO34](3)心肌收縮力與細胞外鈣的關(guān)系在正常情況下，隨著細胞外鈣濃度的增加(在一定范圍內(nèi))，心肌細胞收縮期的細胞內(nèi)鈣增加，心肌的收縮力也增加，收縮期心肌的收縮力和細胞外鈣成正比。而在心力衰竭時，細胞外鈣濃度增加，細胞收縮期的細胞內(nèi)鈣增幅很小，心肌收縮力較正常組明顯下降(P<0.05)。非布索坦使細胞內(nèi)鈣恢復至正常水平，心肌收縮力得到顯著改善。非布索坦只增加心肌收縮力，并不增加舒張力。結(jié)果見圖l。實施例2:非布索坦對心力衰竭家兔心臟功能的影響采用腹主動脈狹窄法制作慢性心衰家兔模型。先用戊巴比妥麻醉家兔，腹部正中切口，分離腹主動脈后，用線結(jié)扎，使腹主動脈狹窄程度達到約50%，術(shù)后觀察三周。實驗分為五組，即正常組、模型組、非布索坦高劑量組(12mg/kg)，中劑量組(6mg/kg)和低劑量組5(3mg/kg)。連續(xù)灌胃給藥三周，每天一次。三周后用16導生理記錄儀測定和記錄心率(HR)，主動脈收縮壓(SBP)，主動脈舒張壓(DBP)，左心室收縮壓(LVSP)，左心室舒張壓(LVDP)，左心室內(nèi)壓最大升速率(+dp/dtmJ，左心室壓最大下降速率(-dp/dtmax)。結(jié)果見表2。表2結(jié)果表明，經(jīng)腹主動脈造模3周后，模型組心率有輕度增加，非布索坦以12、6、3連續(xù)3周給藥后心率無明顯改變，接近正常水平。表2非布索坦對心衰家兔模型心率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3結(jié)果表明，經(jīng)腹主動脈狹窄造模3周后，在模型組LVDP有顯著升高，SBP、DBP和LVSP無明顯變化。非布索坦給藥后，與模型組比較能顯著降低LVDP。說明有改善心功能的作用。表3非布索坦對心衰家兔模型SBP，DBP，LVSP，LVDP的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表4結(jié)果表明，經(jīng)腹主動脈狹窄連續(xù)三周后+dp/dtmax和_dp/dtmax值明顯下降，非布索坦高劑量和中劑量組給藥3周后，能顯著增加+dp/dtmax和-dp/dtmax，說明非布索坦對心衰有明顯的改善作用。表4非布索坦對心衰家兔模型+dp/dtmax和_dp/dtmax的影響分組+dp/dt.-dp/dt腿mmHgmmHg正常組4123±4903501±361模型組2836±3022352±401非布索坦12mg/kg3718±3403104±312非布索坦6mg/kg3211±3032948±290_非布索坦3mg/kg_2922±412_2655±343結(jié)論非布索坦在高劑量12，中劑量6，和低劑量3mg/kg連續(xù)灌胃給藥3周后對家兔腹主動脈狹窄誘發(fā)的心衰模型有明顯的改善作用。實施例3本發(fā)明藥物制劑的制備1、非布索坦片處方1000片用量非布索坦120g微晶纖維20g低取代羥丙基纖維素10g制備稱取非布索坦、微晶纖維、低取代羥丙基纖維素分別粉碎過80目篩，按處方量稱量、混合，用2%羥丙基甲基纖維素的乙醇水溶液(80%)適量，制軟材過16目篩，制粒，506(TC干燥，用18目篩整粒。測定顆粒含量，壓片，包薄膜衣，即得。每片重150mg，含非布索坦120mg。2、非布索坦膠囊處方1000粒用量非布索坦120g淀粉20g低取代羥丙基纖維素10g5%糊精水溶液10ml制備稱取非布索坦、淀粉、低取代羥丙基纖維素分別粉碎過80目篩，按處方量稱量、混合，用2%羥丙基甲基纖維素的乙醇水溶液(80%)和5%糊精水溶液適量，制軟材過16目篩，制粒，506(TC干燥，用10目整粒和用16目篩篩選。測定顆粒含量，裝于膠囊殼中。每粒重150mg，含非布索坦120mg。3、非布索坦滴丸處方1000粒用量非布索坦20g聚乙二醇6000(PEG6000)60g聚乙二醇400(PEG400)5g甘油5g制備稱取非布索坦，5ml無水乙醇溶解(37°C)，備用。另取PEG6000于8(TC水浴溶解后混入PEG400，攪勻，保溫，緩慢加入備好的化合物乙醇溶液，邊加邊攪，使其充分混勻并無醇味，加入甘油，趁熱采用紗布過濾，置貯液瓶中，8(TC保溫下，用管口內(nèi)、外徑分別為9.0mm、9.8mm的滴管滴制，滴速80滴/min，滴入液體石蠟(外層為冰水浴)冷卻液中，冷凝成丸，用毛邊紙吸去粘附的液體石蠟，即得，每粒含非布索坦20mg，丸重為90mg。權(quán)利要求非布索坦在制備治療心力衰竭藥物中的應(yīng)用。2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為片劑、丸劑或膠囊。3.—種用于治療心力衰竭的藥物，其特征在于，該藥物的藥效成分包括非布索坦。4.如權(quán)利要求1所述的藥物，其為片劑、膠囊劑或滴丸。全文摘要本發(fā)明提供了非布索坦在制備治療心力衰竭藥物中的新用途。本發(fā)明通過研究表明，非布索坦能顯著改善左室功能，減小左室半徑，增加室壁厚度和增加室壁運動幅度，非布索坦也能顯著改善右室功能，與模型組相比較差異有顯著性意義(P＜0.05.)。本發(fā)明為心力衰竭的治療提供了一種新的有效的途徑。文檔編號A61P9/00GK101721409SQ20081022378公開日2010年6月9日申請日期2008年10月13日優(yōu)先權(quán)日2008年10月13日發(fā)明者王錫娟申請人:北京方策方程醫(yī)藥科技有限公司