專利名稱：：唑來磷酸用于制備預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松癥的藥物的制作方法唑來磷酸用于制備預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松癥的藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
骨質(zhì)疏松癥是以骨組織顯微結(jié)構(gòu)受損，骨礦成分和骨基質(zhì)等比例不斷減少，骨質(zhì)變薄，骨小梁數(shù)量減少，骨脆性增加和骨折危險度升高的一種全身骨代謝障礙的疾病。骨質(zhì)疏松是老年人最常見的疾病。本發(fā)明涉及唑來磷酸在防治骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用。唑來磷酸是第一個被批準(zhǔn)用于治療多發(fā)性骨髓瘤、乳腺癌、前列腺癌、肺癌及其它實體瘤的各種腫瘤骨轉(zhuǎn)移相關(guān)并發(fā)癥的雙磷酸鹽。它通過與骨結(jié)合來阻斷破骨細(xì)胞對骨和軟骨的吸收，抑制破骨細(xì)胞活性，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤釋放的各種刺激因子所誘發(fā)的骨骼的鈣釋放，從而降低血清鈣水平，達(dá)到減少骨破壞，緩解骨痛和降低血鈣的目的。本課題組研究發(fā)現(xiàn)口服嗶來磷酸對骨質(zhì)疏松具有較好的預(yù)防及治療作用。技術(shù)背景骨質(zhì)疏松是老年人最常見的疾病。一般來說，骨頭因疏松而變薄、變脆弱、容易造成骨折，特別是腕骨、股骨及脊椎骨。而骨質(zhì)疏癥最明顯的癥狀，就是脊椎壓迫性骨折，它會引起背部酸痛、身高變矮及駝背現(xiàn)象。在美國和西方國家中，在年齡超過55歲絕經(jīng)后的女性中，有一半的人患程度不同的骨質(zhì)疏松癥。據(jù)統(tǒng)計我國目前65歲以上的老年人已達(dá)1.2億，而患有骨質(zhì)疏松的患者在這些人群中約占90%。產(chǎn)生骨質(zhì)疏松的根本原因就是骨吸收與骨形成作用失衡，大量的骨吸收使骨量減少、質(zhì)量下降。目前所用治療骨質(zhì)疏松癥的療法(如維生素D、激素替代)都只能防止骨被吸收而不能促使骨形成。雌激素替代療法，因其具有潛在的致癌危險性及不良反應(yīng)，故臨床應(yīng)用受到限制；甲狀旁腺激素雖能刺激骨形成，但缺點之一是必須注射給藥；降鈣素可以短期改善骨質(zhì)疏松患者的疼痛，但在預(yù)防密質(zhì)骨的丟失和骸部骨折效果不好。隨著科學(xué)的發(fā)展和人類的進(jìn)步，人均壽命不斷延長，老年人口迅速增加，骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也隨著出現(xiàn)迅速的增加。因此防治骨質(zhì)疏松是保證人民生活質(zhì)量的一個十分迫切的研究課題。唑來磷酸是繼骨鱗、博寧后新一代(第三代)的雙磷酸鹽類藥物。骨轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤常見并發(fā)癥之一，它大多以溶骨性破壞為主，主要表現(xiàn)為骨痛、高鈣血癥、脊髓壓縮及病理性骨折等，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。有研究表明，唑來磷酸比同類傳統(tǒng)藥物博寧有更高的安全性。本課題組研究發(fā)現(xiàn)口服唑來磷酸對骨質(zhì)疏松具有較好的預(yù)防及治療作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供了口服唑來磷酸在治療骨質(zhì)疏松癥中的預(yù)防及治療作用。唑來磷酸分子式C5H1()N207P2H20;英文名Zoledronicacid;分子量290.10;熔點230°C;化學(xué)結(jié)構(gòu)式:具體實施例方式實例1:嘩來磷酸對維甲酸造成骨質(zhì)疏松的大鼠骨密度的影響大鼠(250-320g)，雌雄各半，共50只。隨機分為5組正常對照組，模型對照組，唑來磷酸0.4932mg/kg、1.5364mg/kg、4.8761mg/kg三個劑量組。除正常對照組外，其他各組均灌服維甲酸65mg/kg，每日一次，連續(xù)2周。造模同時各給藥組依所設(shè)劑量灌胃給藥0.15ml/kg，每日一次，對照組給予等量溶媒，模型對照組正常飼養(yǎng)，連續(xù)4周。最后一次給藥后次日，以10%水合氯醛(350mg/kg,i.p.)麻醉大鼠，置于雙能線骨密度測定儀探頭下，仰位固定于檢測臺上，頭與身體呈直線，線球管對準(zhǔn)身體縱軸中點，選擇大鼠骨質(zhì)疏松敏感區(qū)域單側(cè)(左側(cè))股骨中點的皮質(zhì)骨和第三腰椎骨測定骨密度。實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，作t檢驗判斷顯著性，結(jié)果見表l。表1唑來磷酸對骨質(zhì)疏松大鼠骨密度的影響(11=10，x土SD)組別劑量(mg/kg)股骨密度(g/cm2)椎骨密度(g/cm2)正常組NS0.69±0.050.67土0.01模型組NS0.48±0.08"0.44士0.07"唑來磷酸低劑量0.49320.53±0.06A0.50±0.03A唑來磷酸中劑量1.53640.62±0.04AA0.59±0.04AA唑來磷酸高劑量4,87610.64±0.01AA0.62±0.05AA模M組與正常組比較:><0.05，**P<0.01樣品組與模型組比較:AP<0.05，AAP<0.01由表1可見，與正常組相比模型組大鼠股骨密度和椎骨密度顯著下降(PO.Ol)，唑來磷酸高、中、低劑量組均能顯著提高骨質(zhì)疏松大鼠股骨密度和椎骨密度(PO.Ol)。實例2:唑來磷酸對維甲酸造成骨質(zhì)疏松大鼠的股骨長度、重量和骨鈣含量的影響大鼠(250-320g)，雌雄各半，共50只。隨機分為5組正常對照組，模型對照組，唑來磷酸0.4932mg/kg、1.5364mg/kg、4.8761mg/kg三個劑量組。除正常對照組外，其他各組均灌服維甲酸65mg/kg，每日一次，連續(xù)2周。造模同時各給藥組依所設(shè)劑量灌胃給藥0.15ml/kg,每日一次，對照組給予等量溶媒，模型對照組正常飼養(yǎng)，連續(xù)4周。最后一次給藥后次日處死并解剖大鼠，剝離左側(cè)股骨，用游標(biāo)卡尺測量股骨的長度，將股骨烤干至恒重，稱量骨干重。骨鈣測定依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB12398_90進(jìn)行測定。稱取樣品于小三角燒瓶中，加5mlHN03;HCL04(4:1)，加上漏斗，置于電熱板上加熱消化，如消化不完全，補加硝酸繼續(xù)加熱至無色透明為止，加2ml去離子水，加熱以除去多余的硝酸。取下冷卻，用2%氧化鑭溶液定容至100ml容量瓶中。實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，作t檢驗判斷顯著性，結(jié)果見表2。表2唑來磷酸對骨質(zhì)疏松大鼠股骨長度、重量和骨鈣的影響(11=10，x士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>模型組與正常組比較P<0.05，P<0.01樣品組與模型組比較:AP0.05，AAP<0.01由表2可見，各組大鼠的股骨長度均無顯著差異，與正常組相比模型組大鼠股骨重量和骨鈣含量顯著下降(PO.Ol)，唑來磷酸高、中、低劑量組均能顯著提高骨質(zhì)疏松大鼠股骨重量和骨鈣含量(PO.Ol)。實例3:唑來磷酸對卵巢切除大鼠的股骨長度、重量和骨鈣含量的影響絕經(jīng)伴隨骨質(zhì)疏松的發(fā)生已為許多流行病學(xué)研究所證實。絕經(jīng)可引起糖代謝紊亂，產(chǎn)生胰島素抵抗，而糖代謝紊亂是引起晚期糖化終末產(chǎn)物增加的主要原因。高水平的晚期糖化終末產(chǎn)物可導(dǎo)致成骨細(xì)胞數(shù)量減少，活性降低，骨形成降低，最終造成骨質(zhì)疏松癥。目前，對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的治療主要采用激素替代療法，雖然對骨質(zhì)疏松有一定的療效，但可引起乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生。本發(fā)明采用卵巢切除方法制作大鼠骨質(zhì)疏松模型，證明唑來磷酸對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的防治作用。大鼠(250-320g)，雌雄各半，共50只。隨機分為5組假手術(shù)組，模型對照組，樣品高、中、低三個劑量組。在無菌條件下，將大鼠腹腔注射1%戊巴比妥鈉溶液，模型對照組和樣品組麻醉后進(jìn)行經(jīng)背部切口，切除雙側(cè)卵巢。假手術(shù)組打開腹腔后切除少量脂防。手術(shù)后一周，將高、中、低三個劑量的唑來磷酸組樣品稀釋后供大鼠每日飲用。其它組飲用自來水，常規(guī)喂養(yǎng)3個月后，最后一次給藥后次日處死并解剖大鼠，剝離左側(cè)股骨，用游標(biāo)卡尺測量股骨的長度，將股骨烤干至恒重，稱量骨干重。骨鈣測定依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB12398—90進(jìn)行測定。稱取樣品于小三角燒瓶中，加5mlHN03;HCL04(4:1)，加上漏斗，置于電熱板上加熱消化，如消化不完全，補加硝酸繼續(xù)加熱至無色透明為止，加2ml去離子水，加熱以除去多余的硝酸。取下冷卻，用2%氧化鑭溶液定容至100ml容量瓶中。實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，作t檢驗判斷顯著性，結(jié)果見表3。表3唑來磷酸對卵巢切除大鼠的股骨長度、重量和骨鈣含量的影響(n-lO，x士SD)組別股骨長度(cm)股骨重量(g)骨鈣含量(mg/g)假手術(shù)組3.56±0.170.82±0.04284.6±20.7模型組2.94±0.25"0.67土0.01"204.1±24.5**低劑量組3.18±029A0.71±0.04A225.4±18.6A中劑量組3.32±0.29AA0.76±0.01AA255.3±25.9AA高劑量組3.50±0.26AA0.82i0.05AA280.4±16.7AA模型組與正常組比較><0.05，"PO.01樣品組與模型組比較:AP0.05，AAP<0.01由表3可知大鼠切除卵巢后三個月股骨長度、重量和骨鈣含量均明顯降低，與假手術(shù)組比較有顯著性差異(PO.Ol)，經(jīng)唑來磷酸治療3個月，股骨長度、重量和骨鈣含量明顯增加，中、高劑量組與卵巢切除組比較有顯著差異(PO.01)。實例4:唑來磷酸對卵巢切除大鼠的骨密度的影響大鼠(250-320g)，雌雄各半，共50只。隨機分為5組假手術(shù)組，模型對照組，樣品高、中、低三個劑量組。在無菌條件下，將大鼠腹腔注射1%戊巴比妥鈉溶液，模型對照組和樣品組麻醉后進(jìn)行經(jīng)背部切口，切除雙側(cè)卵巢。假手術(shù)組打開腹腔后切除少量脂防。手術(shù)后一周，將高、中、低三個劑量的唑來磷酸組樣品稀釋后供大鼠每日飲用。其它組飲用自來水，常規(guī)喂養(yǎng)3個月后，最后一次給藥后次日，以10%水合氯醛(350mg/kg,i.p.)麻醉大鼠，置于雙能線骨密度測定儀探頭下，仰位固定于檢測臺上，頭與身體呈直線，線球管對準(zhǔn)身體縱軸中點，選擇大鼠骨質(zhì)疏松敏感區(qū)域單側(cè)(左側(cè))股骨中點的皮質(zhì)骨和第三腰椎骨測定骨密度。實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，作t檢驗判斷顯著性，結(jié)果見表4。表4唑來磷酸對卵巢切除大鼠骨密度的影響(11=10，x士SD)組別股骨密度(g/cm2)椎骨密度(g/cm2)假手術(shù)組0.64±0.060.65±0.02模型組0.49土0.03"*承0.43±0.06低劑量組0.52±0.01A0.51±0.02A中劑量組0.58±0.08AA0.59±0.04A高劑量組0.64±0.01AA0.65±0,04AA模型組與正常組比較*P<0.05，"P<0.01樣品組與模型組比較AP0.05，AAP<0.01由表4可見，與假手術(shù)組相比模型組大鼠股骨密度和椎骨密度顯著下降，唑來磷酸小、中、高劑量組均能提高卵巢切除大鼠股骨密度和椎骨密度。中、高劑量組與卵巢切除組比較有顯著差異(PO.Ol)。權(quán)利要求1.唑來磷酸用于制備預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松癥的藥物，其特征在于唑來磷酸可以制備成臨床上治療骨質(zhì)疏松癥的藥物制劑。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于口服唑來磷酸的使用劑量范圍為0.1mg50mg。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于包括含有唑來磷酸的用于治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松的口服藥物組合物。4、根據(jù)權(quán)利要求l所述的唑來磷酸作為預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征是唑來磷酸與臨床上接受的藥物載體或輔料配合制成治療骨質(zhì)疏松的片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、干混懸劑、口服液等口服制劑形式。5、唑來磷酸作為藥物治療骨質(zhì)疏松的適應(yīng)癥。全文摘要本發(fā)明公開了唑來磷酸在防治骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用，動物實驗研究發(fā)現(xiàn)唑來磷酸對骨質(zhì)疏松癥具有較好的預(yù)防及治療作用。唑來磷酸可制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、干混懸劑、口服液等口服制劑中的任何一種，供臨床預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥。文檔編號A61K31/675GK101259133SQ20081001078公開日2008年9月10日申請日期2008年3月28日優(yōu)先權(quán)日2008年3月28日發(fā)明者洪王,靜韓申請人:王洪;韓靜