專利名稱：：多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明述涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體的，本發(fā)明涉及一類多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：精神性疾病和神經(jīng)性疾病嚴(yán)重地影響著全球數(shù)百萬(wàn)人的健康。一些常見(jiàn)的精神性疾病和/或神經(jīng)性疾病如焦躁癥(anxietydisorders)、情感困繞癥(mooddisorders)、精神分裂癥(schizophrenia)、個(gè)性紊亂(personalitydisorders)，性心理紊亂(psychosexualdisorders)、藥物濫用和依賴(drugabuseanddependence)等影響著各年齡層的人們，這些疾病的持續(xù)時(shí)間從幾周到數(shù)十年不等。隨著神經(jīng)生物學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐漸了解引起精神性疾病和神經(jīng)性疾病的一些生化因子的作用。研究發(fā)現(xiàn)在精神性疾病和神經(jīng)性疾病中多巴胺(dopamine，DA)、去甲腎上腺素(norepinephrine)、五羥色胺(serotonin)這些重要的神經(jīng)遞質(zhì)起到了關(guān)鍵的生理作用。多巴胺是哺乳動(dòng)物大腦中主要的兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)，它控制著運(yùn)動(dòng)、認(rèn)知、情感、正性強(qiáng)化、攝食、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等許多功能。多巴胺占大腦中兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的80％，是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最重要的神經(jīng)遞質(zhì)之一，在人體的生理和心理健康方面發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。在正常生理狀態(tài)下，神經(jīng)沖動(dòng)傳遞過(guò)程如下神經(jīng)細(xì)胞傳遞神經(jīng)沖動(dòng)時(shí)，神經(jīng)遞質(zhì)從神經(jīng)元釋放到突觸間隙，神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后上相應(yīng)的受體結(jié)合，從而產(chǎn)生生理效應(yīng)，同時(shí)神經(jīng)遞質(zhì)通過(guò)不同機(jī)制失活。神經(jīng)遞質(zhì)失活的方式主要有兩種，一種是神經(jīng)遞質(zhì)迅速代謝為無(wú)活性的物質(zhì)；另一種方式則是通過(guò)突觸前膜或者膠質(zhì)細(xì)胞再攝取突觸間隙的神經(jīng)遞質(zhì)，而再攝取的神經(jīng)遞質(zhì)可以被神經(jīng)元反復(fù)使用。多巴胺能神經(jīng)元的方式屬于后者，多巴胺的主要失活機(jī)制在于突觸前膜上的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(dopaminetransporter，DAT)重新攝入多巴胺。DAT是位于突觸前膜具有鈉離子、氯離子依賴的十二跨膜區(qū)域結(jié)構(gòu)蛋白，是終止多巴胺作用和維持胞外多巴胺濃度平衡的基礎(chǔ)物質(zhì)。因此，多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白主要功能為介導(dǎo)多巴胺再攝取，降低突觸間隙多巴胺濃度，在時(shí)程上和強(qiáng)度上調(diào)節(jié)多巴胺神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)，是調(diào)節(jié)和維持多巴胺神經(jīng)功能穩(wěn)態(tài)的最重要的因子(Giros等，Nature1996，379，696)。多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)(多巴胺分泌過(guò)多或腦內(nèi)受體對(duì)多巴胺敏感性過(guò)高)導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)紊亂，是許多疾病主要發(fā)病機(jī)制和重要病理環(huán)節(jié)，如藥物成癮、精神分裂癥、焦躁癥、情感困繞癥、藥物濫用和依賴、Tourette’s綜合癥、肌無(wú)力、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙等。雖然近來(lái)治療精神性疾病和神經(jīng)性疾病有些進(jìn)展，但許多患者不能得到有效的治療，這部分是由于藥物對(duì)他們無(wú)效或藥物有嚴(yán)重的副作用如反副交感神經(jīng)作用、心肌毒性、體重減輕等(郝偉主編.精神病學(xué)，第四版，北京人民衛(wèi)生出版社，2001；Kapur，ShitijetalCurrentOpinioninPsychiatry.17(2)115-121，March2004.)。因此，迫切需要深入研究調(diào)節(jié)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)制以及開(kāi)發(fā)效果顯著且副作用小的治療相關(guān)精神性疾病或神經(jīng)性疾病的新型藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一類多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑，其可通過(guò)促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)功能而調(diào)節(jié)多巴胺的轉(zhuǎn)運(yùn)，維持胞外多巴胺濃度平衡，從而可用于制備精神性疾病和神經(jīng)性疾病的治療藥物。在本發(fā)明的第一方面，提供一種黃酮類化合物或其衍生物的用途，用于制備作為多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的藥物組合物，或用于制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的激動(dòng)劑為多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白再攝取的激動(dòng)劑。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病為由多巴胺能神經(jīng)亢進(jìn)導(dǎo)致的精神性疾病或神經(jīng)性疾病。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的黃酮類化合物選自芹菜素、木犀草素、槲皮素、楊梅黃酮、白楊黃素、大豆甙元、漢黃岑素、黃岑素、染料木素、桑色素、萬(wàn)壽菊素、橙皮素、鼠李金、鼠李素、或其組合。更優(yōu)選地，所述的黃酮類化合物選自木犀草素、芹菜素、槲皮素、大豆甙元、或其組合。更優(yōu)選地，所述的黃酮類化合物為木犀草素。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病為多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病選自成癮疾病、焦慮性障礙、Alzheimer’s綜合癥、神經(jīng)性厭食、精神分裂癥、Parkinson’s綜合癥、失眠癥、藥物濫用和依賴、嘔吐、腸易激綜合征、更年期綜合癥、Wilson’s癥、舞蹈癥、脫髓鞘疾病、狂躁癥、強(qiáng)迫癥、或Tourette’s綜合征。更優(yōu)選地，所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病選自成癮疾病，精神分裂癥、或藥物濫用和依賴。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的成癮疾病為阿片類藥物成癮。更優(yōu)選的，所述的阿片類藥物包括但不限于阿片、嗎啡、海洛因、可卡因、杜冷丁、美沙酮、安非他明，其中優(yōu)選嗎啡、或可卡因。在本發(fā)明的第二方面，提供一種確定可用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物的方法，所述的方法包括以下步驟(1)在測(cè)試組中，在候選物質(zhì)存在的情況下，在體外系統(tǒng)中測(cè)定多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的轉(zhuǎn)運(yùn)量；而在對(duì)照組中，在不存在候選物質(zhì)存在的情況下，在體外系統(tǒng)中測(cè)定多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的轉(zhuǎn)運(yùn)量；(2)將測(cè)試組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量與對(duì)照組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量作比較，如果測(cè)試組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量高于(優(yōu)選顯著高于，如高20％，更優(yōu)選高40％，更優(yōu)選高60％或更高)對(duì)照組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量，則表明該候選物質(zhì)是多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑，從而可作為用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述方法還包括以下步驟(3)將步驟(2)中獲得的、已表明是多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑的候選物質(zhì)施用于非人哺乳動(dòng)物的精神性疾病或神經(jīng)性疾病的模型動(dòng)物，并觀察所述模型動(dòng)物的行為，以確定其治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病癥狀是否得到改善，其中，顯著改善模型動(dòng)物的治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病癥狀的候選物質(zhì)就是可用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的動(dòng)物模型為小鼠、大鼠、猴。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，在步驟(3)中包括但不限于觀察模型動(dòng)物的以下行為或癥狀異常姿勢(shì)、激惹、咬牙、流淚、腹瀉、流涎或體重減輕、或其組合。在本發(fā)明的第三方面，提供一種多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑，其中所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑能夠特異性地促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取多巴胺并且所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑用作治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物。在本發(fā)明的第四方面，提供一種多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的用途，用于制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物組合物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的激動(dòng)劑是黃酮類化合物。更佳地，所述的激動(dòng)劑選自下組木犀草素。在本發(fā)明的第五方面，提供一種治療治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的方法，所述的方法包括給予需要治療的對(duì)象有效量的黃酮類化合物或其衍生物。另一方面，本發(fā)明還提供一種用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物組合物，所述的藥物組合物含有有效量的黃酮類化合物或其衍生物，以及藥學(xué)上可接受的載體。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物含有黃酮類化合物或其衍生物5-10重量份；藥學(xué)上可接受的載體80-150重量份；其中，黃酮類化合物或其衍生物的總含量為藥物組合物總重量的0.1-20％。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物中含有至少一種選自以下的黃酮類化合物芹菜素、木犀草素、槲皮素、楊梅黃酮、白楊黃素、大豆甙元、漢黃岑素、黃岑素、染料木素、桑色素、萬(wàn)壽菊素、橙皮素、鼠李金、或鼠李素。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開(kāi)內(nèi)容，對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。圖1顯示了將SZ乙醇提取物萃取分離，分成四個(gè)部位，即石油醚(SZ1)、氯仿(SZ2)、乙酸乙酯(SZ3)和正丁醇(SZ4)，它們?cè)?0μg/ml濃度下對(duì)多巴胺的攝取活力的影響。圖2顯示了經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠過(guò)柱，將SZ3分成多個(gè)部位，它們?cè)?0μg/ml濃度下對(duì)攝取多巴胺活力的影響。圖3顯示了芹菜素(SZ91)在1μg/ml和10μg/ml濃度下對(duì)多巴胺攝取的影響。圖4顯示了不同濃度木犀草素(SZ92)對(duì)多巴胺攝取的影響。圖5顯示了乙?；疭Z92在10μg/ml濃度下對(duì)多巴胺攝取的影響。圖6顯示了SZ92對(duì)多巴胺攝取的活力測(cè)定。圖7顯示了SZ91和SZ92對(duì)COS-7細(xì)胞的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活力的影響。圖8顯示了大豆甙元、槲皮素、染料木素、芹菜素對(duì)COS-7細(xì)胞的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的活力的影響。圖9顯示了大鼠嗎啡成癮建模中給藥處理時(shí)，戒斷癥狀的柳田知司評(píng)分情況。圖10顯示了大鼠嗎啡成癮建模后給藥處理時(shí)，戒斷癥狀的柳田知司評(píng)分情況。圖11顯示了各組小鼠在白側(cè)箱子偏愛(ài)時(shí)間的比較。圖12顯示了各組小鼠痛覺(jué)潛伏期(舔后肢時(shí)間)的比較。圖13顯示了各試驗(yàn)組動(dòng)物2小時(shí)內(nèi)穿越的總格子數(shù)的比較。具體實(shí)施例方式本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究和試驗(yàn)，首次提出多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)學(xué)說(shuō)，并證明了多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可以被激動(dòng)，該激動(dòng)效應(yīng)可作為治療精神性疾病和神經(jīng)性疾病的新的靶向。并且，體發(fā)明人通過(guò)藥物篩選，獲得了一類可明顯促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取多巴胺的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑?；谏鲜鲅芯砍晒瓿闪吮景l(fā)明。根據(jù)本發(fā)明人的研究，可通過(guò)刺激多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)，增強(qiáng)攝取突觸間隙多巴胺，調(diào)節(jié)細(xì)胞外多巴胺濃度，維持突觸間隙多巴胺穩(wěn)態(tài)，進(jìn)而降低突觸后多巴神經(jīng)元的興奮性。刺激多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)可采用多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。如本文所用，所述的“多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑”包括所有能增強(qiáng)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)功能的物質(zhì)，其能夠完全地或部分地激動(dòng)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取多巴胺。更優(yōu)選的，所述的“多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑”為黃酮類化合物以及它們的衍生物等。如本文所用，所述的“黃酮類化合物”是指兩個(gè)苯環(huán)中間通過(guò)三碳鏈連接形成C6-C3-C6基本骨架的一類化合物的總稱，其結(jié)構(gòu)通式如式(I)或式(II)所示或式中，R1-8為氫、羥基、烷氧基或鹵族元素。更優(yōu)選的，所述的黃酮類化合物包括但不限于芹菜素(apigenin，在本文中也稱為SZ91)、木犀草素(luteolin，在本文中也稱為SZ92)、槲皮素(quercetin)、楊梅黃酮(myricetin)、白楊黃素(chrysin)、大豆甙元(daidzein)、漢黃岑素(wogonin)、黃岑素(baicalein)、染料木素(genistein)、桑色素(morin)、萬(wàn)壽菊素(quercetagetin)、橙皮素(hesperetin)、鼠李金(rhamnazin)、鼠李素(rhamnetin)。更優(yōu)選的，所述的黃酮類化合物選自木犀草素、芹菜素、槲皮素、或大豆甙元；其中，所述的木犀草素具有式(III)所示的結(jié)構(gòu)；所述的芹菜素具有式(IV)所示的結(jié)構(gòu)最優(yōu)選的，所述的黃酮類化合物為木犀草素。本發(fā)明中，所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑可以以純凈的黃酮類化合物或其衍生物的形式存在；也可以以含有黃酮類化合物或其衍生物的混合物或提取物(比如可提取自中藥)的形式存在；或者，也可以以包含黃酮類化合物或其衍生物的中藥材或中藥活性部位的形式存在。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑能促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺攝取作用，而對(duì)其它轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(如γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)無(wú)作用或作用不明顯。這表明所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑對(duì)于促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取功能具有特異性。在本發(fā)明中，所述的精神性疾病和神經(jīng)性疾病包括但不限于以下疾病成癮疾病(addiction)、焦慮性障礙(anxiety)、Alzheimer’s綜合癥(Alzheimer’sdisease)、神經(jīng)性厭食(NervousAnorexia)、精神分裂癥(schizophrenia)、Parkinson’s綜合癥(Parkinson’sdisease)、失眠癥(sleepingdisorders)、藥物濫用和依賴(drugabuseanddependence)、嘔吐(emesis)、腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome)、更年期綜合癥(menstrualdysphoriasyndrome)、Wilson’s癥(Wilson’sdisease)、舞蹈癥(Chorea)、脫髓鞘疾病(Demyelinatingdisorders)、狂躁癥(mania)、強(qiáng)迫癥(obsessive-compulsivedisorder)或Tourette’s綜合征(Tourette’ssyndrome)；其中優(yōu)選成癮疾病，精神分裂癥和藥物濫用和依賴；最優(yōu)選成癮疾病。進(jìn)一步的，所述的成癮疾病為阿片類藥物成癮。更進(jìn)一步的，所述的阿片類藥物包括但不限于阿片、嗎啡、海洛因、可卡因、杜冷丁、美沙酮、安非他明，其中優(yōu)選嗎啡、或可卡因。在本發(fā)明的優(yōu)選例中，本發(fā)明所述的多巴胺蛋白激動(dòng)劑能使機(jī)體減少阿片類藥物成癮所產(chǎn)生的戒斷癥狀，從而達(dá)到治療阿片類藥物的成癮和濫用的良好效果。其作用機(jī)理是利用多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)突觸間隙多巴胺攝取作用，進(jìn)而降低多巴胺對(duì)突觸多巴胺受體激動(dòng)作用，減弱多巴胺神經(jīng)元興奮傳導(dǎo)。從而對(duì)阿片類成癮所引起的多巴胺神經(jīng)(獎(jiǎng)賞效應(yīng)系統(tǒng))功能異?？哼M(jìn)狀態(tài)具有糾正作用。在本發(fā)明的優(yōu)選例中，本發(fā)明所述的多巴胺蛋白激動(dòng)劑能使機(jī)體減少精神分裂癥的癥狀。精神分裂癥與大腦內(nèi)多巴胺功能的增強(qiáng)有關(guān)。多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)突觸間隙多巴胺攝取作用，進(jìn)而降低腦內(nèi)多巴胺功能的增強(qiáng)作用，從而減少精神分裂癥的癥狀。本發(fā)明所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑也可以以由藥學(xué)上或生理學(xué)可接受的酸或堿衍生的鹽形式使用。這些鹽包括(但不限于)與如下無(wú)機(jī)酸形成的鹽如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、以及與有機(jī)酸形成的鹽，而有機(jī)酸則指乙酸、草酸、丁二酸、酒石酸、甲磺酸和馬來(lái)酸。其他鹽包括與堿金屬或堿土金屬(如鈉、鉀、鈣或鎂)形成的鹽，以酯、氨基甲酸酯或其他常規(guī)的“前體藥物”的形式(當(dāng)以這種形式給藥時(shí)，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化成活性部分)。使用多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑在治療精神性疾病和神經(jīng)性疾病時(shí)，藥物的量取決于疾病的性質(zhì)和程度以及病人已接受治療的情況。最終由處方醫(yī)生決定給予病人多少劑量，臨床使用的劑量為每公斤體重每日可使用0.05-300mg的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑。本發(fā)明還提供了一種含有所述多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的組合物，優(yōu)選的，所述的組合物為藥物組合物。一般，合適的含量是多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑占藥物組合物總重量的0.01-99％，較佳地0.1-90％。除了作為活性成份的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑，所述的組合物中還可含有藥學(xué)上可接受的載體，包括但不限于填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助流劑、泡騰劑、矯味劑、包覆材料、膳食制品、或緩/控釋劑等。根據(jù)不同的給藥方式，所述的組合物可以制備成固體或凝膠等形式，如丸劑、片劑、膠囊等；或者是液體形式，如注射劑、懸浮液。它們適合口服給藥、直腸給藥、局部給藥或腸胃外給藥、或者靜脈內(nèi)給藥等。本發(fā)明中，“藥學(xué)上可接受的”成分是適用于人和/或動(dòng)物而無(wú)過(guò)度不良副反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))即有合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比的物質(zhì)?！八帉W(xué)上可接受的載體”是用于將所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑傳送給動(dòng)物或人的藥學(xué)上或食品上可接受的溶劑、懸浮劑或賦形劑。載體可以是液體或固體。本發(fā)明的經(jīng)口給藥的固體組合物可來(lái)用片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、滴劑等形式。這些固體組合物中混合了1種或1種以上的活性物質(zhì)和至少1種惰性稀釋劑，例如，乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯毗咯烷酮、瓊脂、果膠、硅鋁酸鎂、鋁酸鎂。還可按照常用方法使組合物中含有除了惰性稀釋劑之外的添加劑，例如，硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑、纖維素乙醇酸鈣等崩解劑、乳糖等穩(wěn)定劑、谷氨酸或天一氨酸等助溶劑。如是片劑或丸劑，還可根據(jù)需要，在其外部包裹上蔗糖、明膠、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、鄰苯二甲酸酯等糖衣或胃溶性、腸溶性薄膜。經(jīng)口給藥的液體組合物包括藥劑上允許的乳濁劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等，通常使用的惰性稀釋劑包括精制水、乙醇。該組合物中除了惰性稀釋劑之外，還可包含濕潤(rùn)劑、懸浮劑等助劑，甜味劑、矯味劑、芳香劑和防腐劑。非經(jīng)口給藥的注射劑包括無(wú)菌水性或非水性溶液劑、懸浮劑和乳濁劑。水性溶液劑和懸浮劑中包含注射劑用蒸餾水及生理鹽水。非水溶性溶液劑和懸浮劑中包含兩二醇，聚乙二醇，可可脂、橄攬油、蓖麻油等植物油，乙醇等醇類，阿拉伯膠、吐溫80等。這些組合物中還可包含等滲劑、防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑(例如，乳糖)、助溶劑(例如，谷氨酸、天冬氨酸)。用過(guò)濾除菌上述組合物，再配合使用滅菌劑就可達(dá)到無(wú)菌的目的。然后，利用上述組合物制得無(wú)菌的固體組合物，在使用前用水或無(wú)菌注射用溶劑溶解就可加以利用。可用于配制本發(fā)明口服劑型的、具體的藥學(xué)上可接受的載體和賦形劑例子，在美國(guó)專利No3,903,297(1975年9月2日授予Robert)中有描述。用于制造本發(fā)明的有用劑型的技術(shù)和組合物，在下列文獻(xiàn)中有描述7種現(xiàn)代制劑(7ModernPharmaceutics)第9和10章(Banker&Rhodes編輯，1979)Lieberman等人，藥物劑型片劑(PharmaceuticalDosageFormsTablets)(1981)；和Ansel，藥物劑型導(dǎo)論(IntroductiontoPharmaceuticalDosageForms)2版(1976)。根據(jù)不同的需要，本發(fā)明的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑或多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的組合物還可與其它療精神性疾病和神經(jīng)性疾病的藥物聯(lián)合應(yīng)用。此外，本發(fā)明的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑也可與具有一定成癮性的止痛或鎮(zhèn)痛類藥物聯(lián)合使用，從而在達(dá)到鎮(zhèn)痛效果的同時(shí)，防止動(dòng)物成癮。本發(fā)明還包括一種治療多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病的方法，所述的方法包括給予需要治療的對(duì)象有效量的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑。優(yōu)選的，所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑為黃酮類化合物或其衍生物。此外，本發(fā)明還包括一種篩選治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的疾病(如多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病)藥物的方法。所述方法包括篩選促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取多巴胺的物質(zhì)。所述篩選可通過(guò)建立可用于觀測(cè)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取情況的細(xì)胞模型或動(dòng)物模型來(lái)實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)在于(1)首次提出多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)學(xué)說(shuō)，并證明了多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可以被激動(dòng)，該激動(dòng)效應(yīng)可作為治療多巴胺神經(jīng)元功能亢進(jìn)類疾病的新的靶向。(2)首次篩選到一類多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑，為臨床上治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病，尤其是治療多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病提供了新的藥物。(3)所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑并不影響阿片類藥物的鎮(zhèn)痛作用，臨床上這將會(huì)具有廣闊的應(yīng)用前景。下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆實(shí)驗(yàn)室指南(NewYorkColdSpringHarborLaboratoryPress，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說(shuō)明，否則百分比和份數(shù)按重量計(jì)算。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語(yǔ)與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明中。以下實(shí)施例中所用藥品的來(lái)源如下木犀草素、芹菜素、大豆甙元、槲皮素和染料木素購(gòu)自中國(guó)藥品檢定所；1640培養(yǎng)基培養(yǎng)、小牛血清購(gòu)自GIBCO公司；3H-DA、3H-GABA、3H-谷氨酸(GlutamicAcid)購(gòu)自AmershamPharmaciaBiotech公司；鹽酸嗎啡(morphinehydrochloride，批號(hào)20030124)購(gòu)自沈陽(yáng)第一制藥廠；鹽酸納洛酮(naloxonehydrochloride，批號(hào)20040211)購(gòu)自北京四環(huán)制藥廠；中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)、COS-7細(xì)胞購(gòu)自美國(guó)ATCC公司；Balb/c小鼠和SD大鼠購(gòu)自中科院動(dòng)物中心，Sprague-Dawley大鼠購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；C57BL/6小鼠購(gòu)自中科院動(dòng)物中心。其它化學(xué)試劑購(gòu)自Sigma公司。實(shí)施例1DAT激動(dòng)劑的篩選和檢測(cè)1、DAT激動(dòng)劑體外篩選模型的建立建立以多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)、γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GAT-1)為靶標(biāo)的活性篩選細(xì)胞系。采用常規(guī)分子生物學(xué)方法將大鼠的DAT、GAT-1全長(zhǎng)cDNA編碼序列(DAT的GenBank登錄號(hào)為GI310097；GAT-1的GenBank登錄號(hào)為GI204221)克隆于pCDNA3載體(美國(guó)invitrogen公司)的多克隆位點(diǎn)中，用電穿孔方法轉(zhuǎn)染導(dǎo)入中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)，48小時(shí)后用含G418的1640培養(yǎng)基培養(yǎng)。10天后對(duì)照組細(xì)胞全部死亡，而實(shí)驗(yàn)組形成許多細(xì)胞克隆。挑取克隆培養(yǎng)一周后，待細(xì)胞鋪滿孔底，吸去培養(yǎng)基，同上用胰酶消化。每孔中的細(xì)胞分別接種于兩塊96孔平板的相應(yīng)的孔中。待細(xì)胞長(zhǎng)滿孔底后，其中一塊板用于同位素流量測(cè)定。將對(duì)應(yīng)的另一塊板中轉(zhuǎn)運(yùn)活性高的孔中的細(xì)胞逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，每一級(jí)都進(jìn)行同位素流量測(cè)定后選取轉(zhuǎn)運(yùn)活力較高細(xì)胞株培養(yǎng)，最后選取轉(zhuǎn)運(yùn)活力最高的細(xì)胞克隆(分別命名為D8，G1細(xì)胞)保種，建立永久表達(dá)多巴胺、γ-氨基丁酸2種神經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT、GAT-1)的CHO細(xì)胞系。結(jié)果通過(guò)同位素流量的測(cè)定，獲得了高表達(dá)DAT、GAT-1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的細(xì)胞系。建立了針對(duì)DAT激動(dòng)劑的細(xì)胞篩選平臺(tái)。COS-7細(xì)胞培養(yǎng)1640(GIBCO公司)培養(yǎng)基，10％FBS(PAA公司)，青霉素和鏈霉素分別為100IU/ml，37℃培養(yǎng)。細(xì)胞長(zhǎng)滿后，0.25％胰酶(上海生工生物工程公司)消化，接種于48孔板，數(shù)量達(dá)到105后進(jìn)行按進(jìn)行同位素?cái)z取實(shí)驗(yàn)。2、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑體外篩選及選擇專一性的測(cè)定培養(yǎng)D8細(xì)胞于48孔板(Costar)至平板鋪滿(大約每孔6萬(wàn)細(xì)胞)。棄培液。用PBS洗滌一次，吸去PBS溶液，每孔加入90ulHBS(10mMHepes，100mMNaCl，PH8.0)，25℃溫育10分鐘，每孔加入10ulHBS反應(yīng)液。實(shí)驗(yàn)組及陽(yáng)性對(duì)照藥加入80ulHBS，10ul不同濃度的藥物，及10ul3H-DA(AmershamPharmaciaBiotech)，100μM維生素C和100μM帕吉林。25℃溫育20分鐘，用冰浴的PBS溶液洗滌三遍，用裂解液裂解60分鐘，吸取各孔的裂解液加入到1.2ml的閃爍液中，放入液閃計(jì)數(shù)儀(BeckmanLS5000TA)中檢測(cè)同位素的含量(DMP值)，以此來(lái)衡量藥物對(duì)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)活性的影響。對(duì)于GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)，方法類似于多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，用G-1細(xì)胞替代D8細(xì)胞，50nM3H-GABA(AmershamPharmaciaBiotech)取代了反應(yīng)體系中的3H-DA，其他方法不變。對(duì)谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取活性的影響采用cos-7細(xì)胞為篩選模型，3H-谷氨酸和3H-天冬氨酸代替上述反應(yīng)中的同位素，以1mM谷氨酸和天冬氨酸為陰性對(duì)照，其他方法不變。結(jié)果1、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑體外篩選將蘇子(SZ，購(gòu)于徐匯中藥飲片廠)乙醇提取物萃取分離，分成四個(gè)部位，即石油醚(SZ1)、氯仿(SZ2)、乙酸乙酯(SZ3)和正丁醇(SZ4)，活性跟蹤表明在10μg/ml濃度下SZ3對(duì)多巴胺攝取活力最強(qiáng)，是對(duì)照組的8倍，見(jiàn)圖1。將SZ3經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠分離，分成多個(gè)部位(SZ2’、SZ3’、SZ4’、SZ5、SZ6、SZ8、SZ9)，活性跟蹤顯示，在10μg/ml濃度下，SZ9部位活力最強(qiáng)，約為對(duì)照組的8倍，見(jiàn)圖2。進(jìn)一步純化和分離SZ9，得純品SZ91(經(jīng)鑒定為芹菜素)和SZ92(經(jīng)鑒定為木犀草素)，同時(shí)將SZ92乙?；蟮靡阴；疭Z92，三者在10μg/ml濃度下攝取多巴胺活力分別為對(duì)照組2倍、5倍和2倍左右，見(jiàn)圖3、圖4、圖5。根據(jù)圖4，不同濃度的SZ92(0.03～10μg/ml)對(duì)DAT都有激動(dòng)作用，且在0.03μg/ml～1.00μg/ml濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性。藥物對(duì)DAT攝取活力提高到陰性對(duì)照組(未加藥物的D8細(xì)胞)的150％，即DAT活力增加50％時(shí)的濃度稱為EC50，用以評(píng)價(jià)DAT激動(dòng)劑生物活性。在細(xì)胞水平測(cè)得SZ92的EC50活力達(dá)到136.25nM，見(jiàn)圖6。2、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑選擇專一性的研究為了驗(yàn)證多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的選擇專一性，按照前述類似的方法，測(cè)定木犀草素(SZ92)、乙酰化SZ92、大豆甙元、槲皮素、染料木素、芹菜素在10μg/ml濃度下，對(duì)D8細(xì)胞DAT攝取活力和對(duì)G-1細(xì)胞的γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)活力的影響，以HBS組為對(duì)照。并且，采用分析軟件Origin6.0，分別以D8細(xì)胞和G-1細(xì)胞空白組(即HBS組)的DMP值為分母，進(jìn)行歸一化分析。結(jié)果見(jiàn)表1木犀草素(SZ92)、乙?；疭Z92、大豆甙元、槲皮素、染料木素、芹菜素在10μg/ml濃度下，D8細(xì)胞DAT攝取活力增加，而對(duì)G-1細(xì)胞的γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白沒(méi)有激動(dòng)作用。其中木犀草素(SZ92)的DAT激動(dòng)作用最強(qiáng)(P＜0.01)，為對(duì)照組(HBS組)的4倍多。表1并且，本發(fā)明人還檢測(cè)了不同濃度的各候選藥物對(duì)于COS-7細(xì)胞的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在不同濃度下，木犀草素(SZ92)、大豆甙元、槲皮素、染料木素、芹菜素對(duì)COS-7細(xì)胞的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白都沒(méi)有激動(dòng)作用，見(jiàn)圖7、圖8。因此，由本實(shí)施例可知，在候選的各種藥物中，黃酮類化合物木犀草素(SZ92)、大豆甙元、槲皮素、染料木素、芹菜素對(duì)多巴胺轉(zhuǎn)移蛋白有明顯的特異性的激動(dòng)作用，特別是SZ92的激動(dòng)作用最強(qiáng)。而各候選藥物對(duì)于COS-7細(xì)胞的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)、以及對(duì)于G-1細(xì)胞的γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)都沒(méi)有激動(dòng)作用。實(shí)施例2.木犀草素(SZ92)的分離和組合物制備1.中藥飲片有效成分的分離和純化A、水提取物的制備方法選取對(duì)精神和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有治療作用部分中藥飲片蘇子(SZ)50-100g，水煎至沸騰，40分鐘后，將水煎液過(guò)濾，經(jīng)冷凍干燥機(jī)(LyoPro3000，丹麥Jouan公司)制成干粉，留樣待體外實(shí)驗(yàn)用。B、中藥飲片SZ有效成分的分離純化和活性追蹤取中藥飲片SZ4公斤，加5L95％工業(yè)酒精在室溫下浸提4次，每次3天。合并濾液，減壓濃縮。所得浸膏213g，用500ml水溶解。用石油醚萃取三次每次500ml，分出石油醚層，合并后減壓濃縮，抽干得石油醚部位115g。剩余水層，用氯仿萃取三次，每次450ml，分出氯仿層，合并后減壓濃縮，抽干，得氯仿層9g。剩余水層，用乙酸乙脂萃取三次，每次450ml，分出乙酸乙脂層，合并后減壓濃縮，抽干，得乙酸乙脂部位4.53g。合并氯仿，乙酸乙脂部位共得浸膏8g?；钚愿欙@示，SZ3活方最強(qiáng)；經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠過(guò)柱，將SZ3分成9個(gè)部位，活性跟蹤顯示，SZ9活力最強(qiáng)；繼續(xù)分離SZ-9部位10ml丙酮溶解樣品后用3g200-300目硅膠拌樣；50g200-300目硅膠裝柱；洗脫劑氯仿∶甲醇＝30∶1；展開(kāi)劑氯仿∶甲醇＝10∶1；合并相同的兩個(gè)組分，得SZ91200mg；SZ921.1g；SZ91用氯仿溶解再滴入少許甲醇，放置過(guò)夜后析出沉淀，沉淀用丙酮洗數(shù)次，溶解后取樣點(diǎn)板，展開(kāi)劑氯仿∶甲醇＝10∶1，得SZ91純品。進(jìn)一步存化SZ92部位取樣品重1.1g，100ml丙酮溶解樣品，2.5g200-300目硅膠拌樣，30g200-300目硅膠裝柱；洗脫劑氯仿∶甲醇＝50∶1，展開(kāi)劑氯仿∶甲醇＝10∶1；取SZ92，用20ml甲醇溶解，分多次上LH-20凝膠，分得SZ92純品，展開(kāi)劑氯仿∶甲醇＝10∶1。稱取SZ91和SZ92各10mg，用5mlDMSO溶解，400HZ氫譜檢測(cè)。以上各部位的分離配合D8、G-1、N1、S6等細(xì)胞活性跟蹤(如實(shí)施例1)，最終確定化合物純品SZ91(芹菜素)和SZ92(木犀草素)為多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑。2.木犀草素注射液的制備用5000mg木犀草素溶于1000mg水中制成水溶液，加熱溶解?；旌暇鶆颍盅b成10mg/2ml/支濃度的注射液裝入藥瓶中密封，消毒制成產(chǎn)品。3.木犀草素片劑的制備按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備木犀草素片劑，其中所述的片劑中按實(shí)際需要制備含5-10％木犀草素(質(zhì)量百分比)，也可加大或減少木犀草素的含量。取100g木犀草素、560g微晶纖維素、380g無(wú)水乳糖、200g硬脂酸鎂、30g氧化硅，按公知的制片技術(shù)和裝備制成片劑，及取上述配方中除硬脂酸鎂外所有成分混合25-30分鐘，再篩入硬脂酸鎂，繼續(xù)混勻，然后沖壓成片。4.乙?；疭Z92的制備稱取SZ92250mg放入干燥器內(nèi)干燥，以保證反應(yīng)在無(wú)水環(huán)境中進(jìn)行；用5ml無(wú)水吡啶溶解樣品，加入5ml醋酐混勻，常溫?cái)嚢?5分鐘后，薄層層析檢測(cè)反應(yīng)完成；加入0.7％的生理鹽水100ml與少許氯仿萃取三次，每次250ml，氯仿萃取液用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮；加入100ml乙醇溶解，濾出白色不溶物，濾去溶液；加氯仿溶解不溶物，加入少量乙醇，放置過(guò)夜析出結(jié)晶。5.木犀草素脂質(zhì)體的制備1.磷脂酰膽堿(PC)400mg，膽固醇(Chol)40mg，維生素E4mg，木犀草素2mg，溶解于20ml無(wú)水乙醇中，超聲使木犀草素全部溶解，配成1mg/ml的含藥乙醇溶液。2.薄層蒸發(fā)法制備木犀草素脂質(zhì)體。配比同1，不加木犀草素，制備空白脂質(zhì)體。木犀草素脂質(zhì)體包裹率的測(cè)試10ug/ml的木犀草素乙醇溶液，200-500nm紫外可見(jiàn)掃描，木犀草素在353nm有強(qiáng)吸收峰，以此波長(zhǎng)定量分別取空白脂質(zhì)體和含藥脂質(zhì)體5ml，加NaCl015M溶液5ml，混勻，3000rpm，20min離心，去上清，沉淀以無(wú)水乙醇溶解并重新定容于100ml的容量瓶中，以空白脂質(zhì)體的沉淀作參比，353nm測(cè)定含藥脂質(zhì)體的吸光光度值A(chǔ)沉淀。分別取空白脂質(zhì)體和含藥脂質(zhì)體5ml以無(wú)水乙醇定容于100ml容量瓶中，以空白作參比，353nm測(cè)含藥脂質(zhì)體的吸光度值A(chǔ)總，包裹率＝A沉淀/A總×100％。本實(shí)驗(yàn)?zāi)鞠菟刂|(zhì)體包裹率為98％。實(shí)施例4.木犀草素治療大鼠嗎啡成癮一、成癮建模中給藥處理取清潔級(jí)Sprague-Dawley大鼠30只，體重為200±10g，雌雄各半。飼養(yǎng)于室溫22-24℃，濕度50-70％，常壓環(huán)境，自然晝夜，給予基礎(chǔ)大鼠Chow飼料，自由進(jìn)水(除菌純凈水)。一周后，大鼠隨機(jī)分成3組生理鹽水組、空脂質(zhì)體組和木犀草素(SZ92)脂質(zhì)體包埋組。腹腔注射鹽酸嗎啡，首日6次(8:00，9:3012:00，15:00，19:00，22:00)，嗎啡劑量依次為2，4，6，8，8，8mg·kg-1，次日2次(8:00，11:00)，嗎啡劑量為8mg·kg-1，于末次注射鹽酸嗎啡3h后腹腔注射(ip)鹽酸納洛酮(4mg·kg-1)，觀察其30min內(nèi)全部戒斷癥狀并記分?？罩|(zhì)體和木犀草素(SZ92)脂質(zhì)體包埋采用腹腔注射，注射時(shí)間每次早于嗎啡半個(gè)小時(shí)，注射劑量與每次嗎啡注射劑量一樣。大鼠納絡(luò)酮催促戒斷出現(xiàn)的各種戒斷癥狀分別按改進(jìn)的柳田知司評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(表2)評(píng)分。表2**每15分鐘評(píng)分一次，記錄1小時(shí)內(nèi)累計(jì)積分*只評(píng)分一次(一小時(shí)觀察期)(高度激惹、異常姿勢(shì)如扭體反應(yīng)、站立、伸展、舔毛、洗臉等癥狀，個(gè)別大鼠異常暴躁，不斷撞擊鐵楚，出籠欲望強(qiáng)烈，尤其是雄性大鼠反應(yīng)較雌性大鼠強(qiáng)烈。)結(jié)果納絡(luò)酮催癮后，各組大鼠嗎啡戒斷癥狀柳田知司評(píng)分情況生理鹽水組(對(duì)照1)為19.1，空脂質(zhì)體組(組)為15.25，脂質(zhì)體包埋SZ92組為11.4。與對(duì)照組1比較，脂質(zhì)體包埋SZ92組嗎啡戒斷癥狀柳田知司評(píng)分顯著降低(P＜0.01)，減少幅度為對(duì)照組59％(圖9)。上述結(jié)果表明，SZ92可明顯減少嗎啡戒斷癥狀。二、成癮建模后給藥處理參照一中的方法，嗎啡劑量遞增法建立成癮模型后，在納絡(luò)酮催癮前30min用不同劑量脂質(zhì)體包埋SZ92處理動(dòng)物，記錄納絡(luò)酮誘發(fā)各組大鼠嗎啡戒斷癥狀按改進(jìn)的柳田知司評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分。結(jié)果納絡(luò)酮催癮后，脂質(zhì)體包埋SZ92在0.53mg/Kg、1.67mg/Kg劑量下，對(duì)嗎啡成癮有明顯抑制作用(與對(duì)照組比較，P＜0.05和P＜0.01)，1.67mg/Kg組動(dòng)物戒斷柳田知司評(píng)分分值最低(圖10)。這表明在嗎啡成癮后，SZ92也可明顯減少嗎啡戒斷癥狀。實(shí)施例5.木犀草素治療小鼠可卡因成癮(1)穿梭箱的制備用黑色有機(jī)玻璃板制成頂部開(kāi)口的32cm×16cm×30cm長(zhǎng)方形盒子，中間用擋板隔離成體積相等兩部分，在擋板中間有10cm×10cm正方形通道，可供動(dòng)物自由通過(guò)。箱子兩側(cè)分別涂成白色和黑色，上面蓋有透明玻璃。將穿梭箱放入大的隔離箱內(nèi)，頂部裝有5W白熾燈和射像監(jiān)視系統(tǒng)。(2)預(yù)適應(yīng)階段實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Bl/c57小鼠，雄性，20-25g，8周齡，70只。第一個(gè)半天在箱內(nèi)穿梭10分鐘，第二個(gè)半天20分鐘，第三個(gè)半天20分鐘，并檢測(cè)偏好側(cè)停留時(shí)間，篩選偏愛(ài)分值相近小鼠50只供造模用。(3)造模階段將小鼠隨機(jī)分組，分別為正常組、模型組、SZ92治療組(劑量分別為1.67mg/Kg、3.33mg/Kg、6.67mg/Kg)，每組10只。治療組于第1、2、3、4天上午，注射治療藥物SZ92，正常組和模型組注射同體積溶劑；30分鐘后模型組和治療組腹腔注射可卡因(購(gòu)于中國(guó)藥品檢驗(yàn)中心)20mg/Kg，正常組注射同體積生理鹽水，動(dòng)物置于非偏好側(cè)(白)；各組動(dòng)物于第1、2、3、4天下午注射等劑量溶劑30分鐘后注射生理鹽水，動(dòng)物置于偏好側(cè)。(4)檢測(cè)于第四天造模12小時(shí)后，經(jīng)Pico2000視頻系統(tǒng)記錄動(dòng)物20分鐘內(nèi)在白色方箱內(nèi)的停留時(shí)間。經(jīng)過(guò)20分鐘觀察記錄，結(jié)果表明模型組在白側(cè)箱子偏愛(ài)時(shí)間為654.9秒，正常對(duì)照組在白側(cè)箱子偏愛(ài)時(shí)間469秒，明顯低于模型組(P＜0.001)，可卡因依賴模型成功。脂質(zhì)體包埋SZ92治療各組(1.7mg/Kg、3.3mg/Kg、6.7mg/Kg)偏愛(ài)時(shí)間分別為535.1秒、516.9秒、616.3秒，均明顯低于模型組(P＜0.05和P＜0.001)(圖11)。以上結(jié)果表明脂質(zhì)體包埋SZ92對(duì)可卡因成癮有明顯抑制作用，在3.3mg/Kg劑量下可完全阻斷動(dòng)物對(duì)可卡因的依賴。實(shí)施例6.木犀草素對(duì)嗎啡鎮(zhèn)痛作用的影響取昆明小鼠，雌性，20-25g30只。隨機(jī)分成3組生理鹽水組、空脂質(zhì)體組和木犀草素(SZ92)脂質(zhì)體包埋組。皮下注射木犀草素(SZ92)脂質(zhì)體(5mgSZ92/kg體重/天)或同體積溶劑(脂質(zhì)體)后30min，皮下注射嗎啡(5mg/kg體重/天)。對(duì)照組以同體積脂質(zhì)體和生理鹽皮下注射。嗎啡注射后20min，開(kāi)始將動(dòng)物置于55℃的熱板上，舔后足的時(shí)間范圍在10-30s，間隔15min再測(cè)試一遍，平均兩次測(cè)試結(jié)果作為最終結(jié)果。測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)是動(dòng)物舔后足的時(shí)間(痛覺(jué)的潛伏期)。結(jié)果各組動(dòng)物痛覺(jué)潛伏期(舔后肢時(shí)間)分別為生理鹽水組13.381秒，空脂質(zhì)體組47.244秒，木犀草素脂質(zhì)體包埋組(SZ92)46.181秒。空脂質(zhì)體組舔后肢時(shí)間明顯大于生理鹽水組(P＜0.01)，空脂質(zhì)體組和SZ92組痛覺(jué)潛伏期沒(méi)有明顯差異(P＞0.05)，表明嗎啡具有明顯鎮(zhèn)痛作用(圖12)。以上結(jié)果表明，SZ92在阻止動(dòng)物對(duì)嗎啡成癮的同時(shí)，并不影響嗎啡的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)施例7.木犀草素治療小鼠精神分裂癥模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組參照文獻(xiàn)(吳金華等用不同實(shí)驗(yàn)小鼠品系建立精神分裂癥的動(dòng)物模型。生理學(xué)報(bào)，2003，55381-387)。將近交系C57BL/6小鼠，雄性，體重(20±2g)。隨機(jī)分為正常組、模型組、治療組。治療組(SZ)用脂質(zhì)體包埋SZ92腹腔注射，正常組和模型組用同體積脂質(zhì)體替代治療藥物，隨即將小鼠放置于頂部開(kāi)口的48cm×24cm×20cm長(zhǎng)方形實(shí)驗(yàn)盒內(nèi)，盒上覆蓋玻璃，預(yù)適應(yīng)30min。預(yù)適應(yīng)結(jié)束后，模型組、不同濃度治療組分別用0.6mg/kg地卓西平馬來(lái)酸鹽(簡(jiǎn)稱MK801，Sigma)溶液腹腔注射實(shí)驗(yàn)小鼠，正常組用同體積生理鹽水替代MK801。檢測(cè)10分鐘后記錄動(dòng)物活動(dòng)情況。實(shí)驗(yàn)盒底部虛擬劃分為8個(gè)大小相同的區(qū)域，將小鼠活動(dòng)情況經(jīng)Pico2000視頻系統(tǒng)錄象，由技術(shù)人員檢測(cè)記錄每單位時(shí)間(15min)內(nèi)小鼠進(jìn)入各個(gè)區(qū)域的次數(shù)，分別記出整個(gè)檢測(cè)期間(2h)移動(dòng)行為的穿越的總格子數(shù)。結(jié)果，模型組動(dòng)物2小時(shí)內(nèi)穿越的總格子數(shù)為3600左右，脂質(zhì)體包埋SZ92各個(gè)劑量組動(dòng)物總格子數(shù)均低于模型組動(dòng)物，在0.17mg/Kg到16.7mg/Kg劑量范圍內(nèi)動(dòng)物2小時(shí)內(nèi)穿越的總格子數(shù)呈濃度依賴式減少，16.7mg/Kg組動(dòng)物總格子數(shù)最低，是模型組的50％左右(圖13)。以上結(jié)果表明，脂質(zhì)體包埋SZ92具有抗精神分裂作用。在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。權(quán)利要求1.一種黃酮類化合物或其衍生物的用途，其特征在于，用于制備作為多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的藥物組合物，或用于制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物。2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的黃酮類化合物選自芹菜素、木犀草素、槲皮素、楊梅黃酮、白楊黃素、大豆甙元、漢黃岑素、黃岑素、染料木素、桑色素、萬(wàn)壽菊素、橙皮素、鼠李金、鼠李素、或其組合。3.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述的黃酮類化合物選自木犀草素、芹菜素、槲皮素、大豆甙元、或其組合。4.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病為多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病。5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述的精神性疾病或神經(jīng)性疾病選自成癮疾病、焦慮性障礙、Alzheimer’s綜合癥、神經(jīng)性厭食、精神分裂癥、Parkinson’s綜合癥、失眠癥、藥物濫用和依賴、嘔吐、腸易激綜合征、更年期綜合癥、Wilson’s癥、舞蹈癥、脫髓鞘疾病、狂躁癥、強(qiáng)迫癥、或Tourette’s綜合征。6.一種確定可用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟(1)在測(cè)試組中，在候選物質(zhì)存在的情況下，在體外系統(tǒng)中測(cè)定多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的轉(zhuǎn)運(yùn)量；而在對(duì)照組中，在不存在候選物質(zhì)存在的情況下，在體外系統(tǒng)中測(cè)定多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)多巴胺的轉(zhuǎn)運(yùn)量；(2)將測(cè)定組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量與對(duì)照組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量，如果測(cè)試組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量顯著高于對(duì)照組的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)量，則表明該候選物質(zhì)是多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑，從而可作為用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物。7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法還包括以下步驟(3)將步驟(2)中獲得的、已表明是多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑的候選物質(zhì)施用于非人哺乳動(dòng)物的精神性疾病或神經(jīng)性疾病的模型動(dòng)物，并觀察所述模型動(dòng)物的行為，以確定其治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病癥狀是否得到改善，其中，顯著改善模型動(dòng)物的治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病癥狀的候選物質(zhì)就是可用于治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的候選藥物。8.一種多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑，其中所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑能夠特異性地促進(jìn)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取多巴胺，并且所述的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑用作制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物。9.一種多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白激動(dòng)劑的用途，其特征在于，用于制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物組合物。10.一種治療治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的方法，其特征在于，所述的方法包括給予需要治療的對(duì)象有效量的黃酮類化合物或其衍生物。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種黃酮類化合物或其衍生物的用途，用于制備治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物。本發(fā)明還公開(kāi)了所述黃酮類化合物或其衍生物的藥物組合物。本發(fā)明首次提出并證明了多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可以被激動(dòng)，并提供了一類多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激動(dòng)劑，為臨床上治療精神性疾病或神經(jīng)性疾病，尤其是多巴胺能神經(jīng)功能亢進(jìn)性疾病提供了新的藥物。文檔編號(hào)A61P25/00GK101091706SQ200610028068公開(kāi)日2007年12月26日申請(qǐng)日期2006年6月23日優(yōu)先權(quán)日2006年6月23日發(fā)明者郭禮和,趙剛,許明敏,王雪松,臧紹云申請(qǐng)人:和泓生物技術(shù)(上海)有限公司