專利名稱：一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是現(xiàn)代社會(huì)嚴(yán)重威脅人類健康，嚴(yán)重者引起死亡的主要疾病。為臨床常見多發(fā)病，以氣滯血瘀，痰濁阻絡(luò)癥候多見，癥見心悸不寧，胸悶不適，胸部刺痛、絞痛，固定不移，入夜更甚，頭昏頭痛，冠心病、心肌梗塞、腦動(dòng)脈硬化、腦血栓等多見上述證候，因此，探索一種治療該類疾病的藥物非常必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備治療氣滯血瘀，痰濁阻絡(luò)證藥物中應(yīng)用的中藥組合物及其制備方法；本發(fā)明的目的還在于提供一種中藥組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的首先，發(fā)明人創(chuàng)制了一種中藥組合物，該組合物是由如下重量份的原料藥制成的丹參 30-50份 川芎 20-40份 葛根20-40份 地龍20-40份赤芍 20-40份 紅花 10-30份 郁金 2-4份 何首烏 20-40份澤瀉 20-40份 枸杞 20-40份 酸棗仁 20-40份 遠(yuǎn)志20-40份九節(jié)菖蒲 20-40份 牛膝 20-40份 甘草10-30份確切地，各原料藥的重量比為丹參 40份川芎 30份 葛根 30份 地龍30份赤芍 30份紅花 20份 郁金3份 何首烏 30份澤瀉 30份枸杞 30份 酸棗仁 30份 遠(yuǎn)志30份九節(jié)菖蒲 30份牛膝 30份 甘草 20份并且，處方中的何首烏、酸棗仁優(yōu)選為制何首烏和炒酸棗仁。
根據(jù)處方特點(diǎn)，發(fā)明人認(rèn)為可將該原料藥制成現(xiàn)代固體制劑，優(yōu)選為片劑和丸劑；為此，發(fā)明人制定了制備工藝，其中包括提取精制和制劑成型兩部分。
提取精制部分，發(fā)明人設(shè)計(jì)了三種方案，均能達(dá)到發(fā)明目的，分別敘述如下
1)將處方中丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加水煎煮三次，分次濾過，合并濾液，濃縮成稠膏，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，加入流浸膏中，攪拌均勻，干燥，干膏粉碎成細(xì)粉；2)將處方中川芎、紅花、郁金、澤瀉、九節(jié)菖蒲粉碎成細(xì)粉，備用；其余藥材加水煎煮三次，分次濾過，合并濾液，濃縮稠膏狀，備用；取上述藥物細(xì)粉，加入稠膏中，攪拌均勻，干燥，干膏粉碎成細(xì)粉；3)將處方中丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加水煎煮三次，每次分別為3小時(shí)、2小時(shí)和1小時(shí)，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮成流浸膏狀，低溫干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，加入干膏粉中，混合均勻，得提取物細(xì)粉。
制劑成型部分，相對(duì)比較簡(jiǎn)單，即需選取適當(dāng)?shù)妮o料，與提取所得細(xì)粉混合，制成相應(yīng)劑型，包括片劑和丸劑。
為了有效控制本發(fā)明所得制劑的質(zhì)量，發(fā)明人還制定了質(zhì)量控制方法，包括定性鑒別和含量測(cè)定兩部分，其中的定性鑒別可以如下的一種或幾種a.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，棄去，乙醚液揮干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加乙醚20ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過，揮干乙醚液，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl、對(duì)照藥材溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(12∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.05mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(7∶2∶0.25)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
c.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取二苯乙烯苷對(duì)照品，加甲醇制成每ml含0.2mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-丙酮-甲醇(6∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
d.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，分別以乙醚、醋酸乙酯萃取三次，乙醚液、醋酸乙酯液棄去，余水液以水飽和的正丁醇萃取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌三次，每次20ml，棄去氨洗液，正丁醇液蒸干， 殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取對(duì)照品溶液3μl、供試品溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
e.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，乙醚萃取二次，每次20ml，棄去乙醚液，水液加鹽酸2ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，用5％碳酸氫鈉洗滌三次，每次30ml，棄去，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(20∶4∶4∶2∶1)上層為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，80℃下烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)f.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，水液加鹽酸2ml，氯仿20ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，棄去氯仿液，水液用氯仿洗滌二次，每次20ml，棄去氯仿液；水液用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并，用5％碳酸鈉溶液萃取三次，每次20ml，合并碳酸鈉液，用鹽酸調(diào)pH2～3，再用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)鼰o水乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材2g，按照供試品溶液的制備方法，制的對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(10∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹干。置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定方法可以是如下的一種或二種a.丹參中丹參素鈉的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.5％冰醋酸溶液(5∶95)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論塔板數(shù)按丹參素峰計(jì)應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取丹參素鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入1％鹽酸水溶液50ml，稱定重量，超聲提取30分鐘(100W，50kHz)，冷卻至室溫，稱定重量，用1％鹽酸水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入氯化鈉1g溶解，用醋酸乙酯萃取四次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
b.葛根中葛根素的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(12∶88)為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，柱溫40℃。檢測(cè)波長(zhǎng)250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取適量以五氧化二磷干燥至恒重的葛根素對(duì)照品，用甲醇制成每1ml含20μg的溶液，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑約0.5g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲(250W，50kHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，靜置，取上清夜，以微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明藥物制劑具有補(bǔ)氣行滯，活血化瘀，平肝潛陽(yáng)，攻補(bǔ)兼施的功能。發(fā)明人根據(jù)其功能主治，從增加冠脈血流量、抗凝等方面對(duì)其藥效學(xué)進(jìn)行了研究。
受試藥物按照本發(fā)明三種制備方法分別制得的利腦心片1-3號(hào)，含0.55g生藥/片。
益脈康片昆明賽諾制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20040101。
儀器電腦血小板聚集儀(KD-200A)，PB303-N電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司，離心機(jī)。
動(dòng)物WistarSD大鼠雌雄各半，200～250g；白色家兔雌雄各半，1.9～2.0kg，均由中國(guó)藥科大學(xué)新藥研究中心動(dòng)物室提供。
試驗(yàn)1對(duì)冠脈血流量的影響取Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，經(jīng)戊巴比妥鈉按30mg/kg劑量麻醉后，取出心臟置4℃灌流液中，心臟停止跳動(dòng)后，立即制成Blangendorff標(biāo)本。待心跳恢復(fù)平衡后，從主動(dòng)脈側(cè)支給藥0.2ml，記錄給藥前后1、3、10min的冠脈血流量和心率。見表1。

注與模型對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
(下同)表1結(jié)果表明，對(duì)離體大鼠主動(dòng)脈側(cè)支給藥可明顯增加冠脈血流量。
實(shí)驗(yàn)2對(duì)ADP誘導(dǎo)的家兔血小板聚集及凝血時(shí)間影響2.1對(duì)家兔體外血小板聚集影響取家兔2只，♂，清醒狀態(tài)下心臟取血，3.8％枸櫞酸鈉溶液(9∶1)抗凝。離心(600r/min)8min，取上濁液富血小板血漿(PRP)，剩余部分再離心〔3000r/min〕15min，取上清液貧血小板血漿(PPP)。精密稱定ADP，用pH7.4磷酸鹽緩沖溶液配制成40μm，作為誘導(dǎo)劑。在比濁管中加入PRP 25μl，再準(zhǔn)確加入受試藥物50μl，37℃水浴中孵育10min。精確加入ADP 40μm(使ADP終濃度為5μm)，在KD-200A電腦血小板聚集儀上測(cè)定家兔血血小板聚集率(1min聚集率和5min最大聚集率)。見表2。
表2對(duì)家兔體外血小板聚集影響(X±s，n＝10)

表2結(jié)果表明，各給藥組與模型對(duì)照組相比，均對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集功能有顯著的抑制作用。
2.2對(duì)體外凝血酶時(shí)間(TT)的影響取家兔1只，♂，清醒狀態(tài)下頸動(dòng)脈放血，3.8％枸櫞酸鈉溶液(9∶1)抗凝。離心(3000r/min)1Omin，取上清血漿待用。取硅化過的干凈試管，分別加入200μl藥物和0.5ml血漿，37℃水浴中孵育2min，迅速加入已預(yù)溫37。C的凝血酶溶液1ml，混勻后立即放入37℃水浴中溫育，同時(shí)開始計(jì)時(shí)。每隔2～3s傾斜試管1次，記錄纖維蛋白凝固、液面不動(dòng)所得時(shí)間，求出每管平均值。見表3。
表3對(duì)體外TT的影響(X±s，n＝10)

表3結(jié)果表明，各給薊組與模型對(duì)照組相比，均能延長(zhǎng)家兔TT時(shí)間。
試驗(yàn)3急性毒性試驗(yàn)一日內(nèi)給小鼠灌胃本發(fā)明藥物浸膏50g/kg，相當(dāng)于臨床70kg人每公斤體重日用量的700倍以上，連續(xù)觀察七天，小鼠一般狀況良好，無一死亡，說明本品低毒、安全。
以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。
實(shí)施例一處方丹參 30g 川芎 20g 葛根 20g地龍20g赤芍 20g 紅花 10g 郁金 2g 制何首烏 20g澤瀉 20g 枸杞 20g 酸棗仁(炒)20g 遠(yuǎn)志 20g九節(jié)菖蒲 20g 牛膝 20g 甘草 10g制法以上十五味，將丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加水煎煮三次，分次濾過，合并濾液，濃縮成稠膏，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，加入流浸膏中，攪拌均勻，干燥，干膏粉碎成細(xì)粉，加1％的羧甲淀粉鈉及微晶纖維素適量調(diào)整總量至500g，混勻，加30％乙醇作潤(rùn)濕劑，混合均勻，合坨20分鐘，制丸條、分粒與搓圓，丸劑打光，低溫干燥，分裝，即得。
實(shí)施例二處方丹參 40g 川芎 30g 葛根30g 地龍30g
赤芍 30g 紅花 20g 郁金 3g 制何首烏 30g澤瀉 30g 枸杞 30g 酸棗仁(炒)30g 遠(yuǎn)志 30g九節(jié)菖蒲 30g 牛膝 30g 甘草 20g制法以上十五味，將丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加8倍量水煎煮三次(3小時(shí)、2小時(shí)、1小時(shí))，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度的流浸膏，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，過100目篩，加入流浸膏中，攪拌均勻，減壓干燥，干膏粉碎成細(xì)粉，加入羧甲淀粉鈉5g，微晶纖維素30g，以60％的乙醇潤(rùn)濕，過16目篩制顆粒，60℃以下干燥，加入硬脂酸鎂2g，淀粉適量調(diào)節(jié)總量至290g，壓制成750片，包薄膜衣，包裝，即得。
實(shí)施例三處方丹參50g 川芎40g 葛根 40g 地龍 40g赤芍40g 紅花 30g 郁金 4g 制何首烏 40g澤瀉40g 枸杞 40g 酸棗仁(炒)40g 遠(yuǎn)志 40g九節(jié)菖蒲40g 牛膝 40g 甘草 30g制法以上十五味，將丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加8倍量水煎煮三次(3小時(shí)、2小時(shí)、1小時(shí))，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度的流浸膏，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，過100目篩，加入流浸膏中，攪拌均勻，減壓干燥，干膏粉碎成細(xì)粉，加入羧甲淀粉鈉5g，微晶纖維素30g，以60％的乙醇潤(rùn)濕，過16目篩制顆粒，60℃以下干燥，加入硬脂酸鎂2g，淀粉適量調(diào)節(jié)總量至290g，壓制成750片，包薄膜衣，包裝，即得。
對(duì)上述片劑的質(zhì)量控制方法鑒別a.取本發(fā)明組合物制劑4g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，棄去，乙醚液揮于，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加乙醚20ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過，揮干乙醚液，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl、對(duì)照藥材溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(12∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b.取本發(fā)明組合物制劑4g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.05mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(7∶2∶0.25)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
c.取本發(fā)明組合物制劑4g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取二苯乙烯苷對(duì)照品，加甲醇制成每ml含0.2mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-丙酮-甲醇(6∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
d.取本發(fā)明組合物制劑4g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，分別以乙醚、醋酸乙酯萃取三次，乙醚液、醋酸乙酯液棄去，余水液以水飽和的正丁醇萃取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌三次，每次20ml，棄去氨洗液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取對(duì)照品溶液3μl、供試品溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
e.取本發(fā)明組合物制劑4g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，乙醚萃取二次，每次20ml，棄去乙醚液，水液加鹽酸2ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，用5％碳酸氫鈉洗滌三次，每次30ml，棄去，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(20∶4∶4∶2∶1)上層為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，80℃下烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
f.取本發(fā)明組合物制劑4g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，水液加鹽酸2ml，氯仿20ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，棄去氯仿液，水液用氯仿洗滌二次，每次20ml，棄去氯仿液；水液用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并，用5％碳酸鈉溶液萃取三次，每次20ml，合并碳酸鈉液，用鹽酸調(diào)pH2~3，再用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)鼰o水乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材2g，按照供試品溶液的制備方法，制的對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(10∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹干。置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定a.丹參中丹參素鈉的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.5％冰醋酸溶液(5∶95)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論塔板數(shù)按丹參素峰計(jì)應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取丹參素鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本發(fā)明組合物制劑2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入1％鹽酸水溶液50ml，稱定重量，超聲提取30分鐘(100W，50kHz)，冷卻至室溫，稱定重量，用1％鹽酸水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入氯化鈉1g溶解，用醋酸乙酯萃取四次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每片含丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，不得少于0.10mg。
b.葛根中葛根素的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(12∶88)為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，柱溫40℃。檢測(cè)波長(zhǎng)250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取適量以五氧化二磷干燥至恒重的葛根素對(duì)照品，用甲醇制成每1ml含20μg的溶液，搖勻，即得。
供試品溶液的制備取本發(fā)明組合物制劑約0.5g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲(250W，50kHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，靜置，取上清夜，以微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于0.58mg。
權(quán)利要求
1.一種中藥組合物，其特征在于該組合物是由如下重量份的原料制成的丹參 30-50份 川芎20-40份葛根20-40份 地龍20-40份赤芍 20-40份 紅花10-30份郁金2-4份何首烏 20-40份澤瀉 20-40份枸杞 20-40份酸棗仁 20-40份 遠(yuǎn)志20-40份九節(jié)菖蒲 20-40份 牛膝20-40份甘草10-30份
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物是由如下重量份的原料制成的丹參 40份川芎30份葛根30份地龍30份赤芍 30份紅花20份郁金3份 何首烏 30份澤瀉 30份枸杞30份酸棗仁 30份遠(yuǎn)志30份九節(jié)菖蒲 30份牛膝30份甘草20份
3.如權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物，其特征在于原料藥中的酸棗仁為炒酸棗仁，何首烏為制何首烏。
4.如權(quán)利要求3所述的中藥組合物，其特征在于該組合物可制備成丸劑和片劑。
5.權(quán)利要求4所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法包含以下步驟中的任一種1)將處方中丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加水煎煮三次，分次濾過，合并濾液，濃縮成稠膏，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，加入流浸膏中，攪拌均勻，干燥，干膏粉碎成細(xì)粉；2)將處方中川芎、紅花、郁金、澤瀉、九節(jié)菖蒲粉碎成細(xì)粉，備用；其余藥材加水煎煮三次，分次濾過，合并濾液，濃縮稠膏狀，備用；取上述藥物細(xì)粉，加入稠膏中，攪拌均勻，干燥，干膏粉碎成細(xì)粉；3)將處方中丹參、何首烏、枸杞、赤芍、葛根、地龍加水煎煮三次，每次分別為3小時(shí)、2小時(shí)和1小時(shí)，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮成流浸膏狀，低溫干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；取川芎等九味粉碎成細(xì)粉，加入干膏粉中，混合均勻，得提取物細(xì)粉。
6.如權(quán)利要求5所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于將任一種方法得到的細(xì)粉加入常規(guī)輔料，制成片劑或丸劑。
7.權(quán)利要求3所述的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的定性鑒別方法包括如下的一種或幾種a.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，棄去，乙醚液揮干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加乙醚20ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過，揮干乙醚液，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl、對(duì)照藥材溶液2μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以12∶1的環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.05mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7∶2∶0.25的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；c.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，乙醚萃取三次，每次20ml，取乙醚萃取后的水液，以醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，加5％碳酸氫鈉20ml洗滌一次，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取二苯乙烯苷對(duì)照品，加甲醇制成每ml含0.2mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6∶1∶2的苯-丙酮-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；d.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，分別以乙醚、醋酸乙酯萃取三次，乙醚液、醋酸乙酯液棄去，余水液以水飽和的正丁醇萃取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌三次，每次20ml，棄去氨洗液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取對(duì)照品溶液3μl、供試品溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以40∶5∶10∶0.2的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；e.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，乙醚萃取二次，每次20ml，棄去乙醚液，水液加鹽酸2ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，乙醚萃取三次，每次20ml，合并乙醚液，用5％碳酸氫鈉洗滌三次，每次30ml，棄去，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20∶4∶4∶2∶1的環(huán)己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸上層為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，80℃下烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；f.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，水液加鹽酸2ml，氯仿20ml，沸水浴回流1小時(shí)，放冷，棄去氯仿液，水液用氯仿洗滌二次，每次20ml，棄去氯仿液；水液用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并，用5％碳酸鈉溶液萃取三次，每次20ml，合并碳酸鈉液，用鹽酸調(diào)pH 2～3，再用醋酸乙酯萃取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)鼰o水乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材2g，按照供試品溶液的制備方法，制的對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10∶1∶0.1的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包含以下定量方法的一種或幾種a.丹參中丹參素鈉的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；5∶95的甲醇-0.5％冰醋酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論塔板數(shù)按丹參素峰計(jì)應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備 取丹參素鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1ml含50μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入1％鹽酸水溶液50ml，稱定重量，超聲提取30分鐘，冷卻至室溫，稱定重量，用1％鹽酸水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入氯化鈉1g溶解，用醋酸乙酯萃取四次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，揮干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得；b.葛根中葛根素的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；12∶88的甲醇-水為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，柱溫40℃。檢測(cè)波長(zhǎng)250nm；理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備 精密稱取適量以五氧化二磷干燥至恒重的葛根素對(duì)照品，用甲醇制成每1ml含20μg的溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑約0.5g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補(bǔ)足損失的重量，搖勻，靜置，取上清夜，以微孔濾膜濾過，作為供試品溶液；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
9.如權(quán)利要求1、2或3所述的中藥組合物在制備治療冠心病、心肌梗塞、腦動(dòng)脈硬化及腦血栓等病癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥組合物，該組合物是由丹參、川芎、葛根、地龍、赤芍、紅花、郁金、何首烏、澤瀉、枸杞、酸棗仁、遠(yuǎn)志、九節(jié)菖蒲、牛膝和甘草等原料藥制成，對(duì)于心腦血管疾病的治療有著較好的療效。同時(shí)本發(fā)明還公開了該藥物組合物的制備方法和質(zhì)量控制方法。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1806846SQ20051020004
公開日2006年7月26日 申請(qǐng)日期2005年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月18日
發(fā)明者高淑英 申請(qǐng)人:北京凱瑞創(chuàng)新醫(yī)藥科技有限公司