專利名稱：一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學領域，具體涉及一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法。
背景技術：
烏頭具有祛風除濕，溫經(jīng)止痛的作用，在治療疑難雜癥方面一直發(fā)揮著獨特的作用。因其毒性較大，從古至今人們都很重視對它的炮制、配伍。通過炮制、配伍降低其毒性，而存其藥效活性。但由于目前缺乏快捷、靈敏的對炮制、配伍過程的質量控制與評價的方法，導致炮制品及相關配伍中藥的質量無法保證，直接影響到該類藥物臨床應用的安全性和有效性，每年都有大量烏頭中毒的病例發(fā)生。據(jù)報道，人口服烏頭堿0. 2mg^l. Omg即可引起中毒，口服2mg 3mg或肌肉注射0. 2mg^0. 3mg即可引起死亡。故必須嚴格控制烏頭類中·藥的質量與用藥劑量，使藥物既達到治療目的，又不致發(fā)生中毒。但目前，中藥質量檢測方法無法滿足臨床醫(yī)學對中藥烏頭飲片質量檢測的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有中藥質量檢測方法無法滿足臨床醫(yī)學對中藥烏頭飲片質量檢測要求的問題，而提供了一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法。該方法實現(xiàn)了對中藥烏頭飲片的原位快速鑒別，保證了質量檢測的準確性，進而也保證了中醫(yī)臨床用藥的安全性。為了解決上述問題，本發(fā)明提供的一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法，其具體的技術方案如下一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法，該方法的步驟和條件如下步驟(I):供試樣品的制備以生川烏為原料，用炮制法制備制川烏飲片，得到供試樣品；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜供試樣品的質譜指紋圖譜通過如下步驟得到取步驟(I)中制備的供試樣品做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為3-6kV，格柵電壓為+250-+400V，調節(jié)工作氣體壓力0. 1-0. 8kPa，氣體溫度為150-500°c ;在正離子模式下，設定毛細管溫度150-300°C，毛細管電壓10-50V，透鏡電壓50-150V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa，在m/z300 1000掃描范圍內(nèi)，存在 m/z330、m/z358、m/z408、m/z454、m/z556、m/z572、m/z586、m/z590、m/z604、m/z616 離子。在上述技術方案中，所述步驟(2)中的工作氣體為高純氮氣、高純氦氣或高純氬氣。所述的高純氣體是指利用現(xiàn)代提純技術能達到的某個等級純度的氣體，例如對于氮，氬，氦而言，通常指純度等于或高于99. 999%的為高純氣體。
在上述技術方案中，所述步驟(2)中的格柵電壓為+25(T+350V。在上述技術方案中，所述步驟(2)中的氣體壓力為0. 5^0. SkPa0在上述技術方案中，所述步驟(2)中的氣體溫度為35(T500°C。本發(fā)明提供的中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法的有益效果是(I)本方法對中藥烏頭飲片做質譜分析，根據(jù)得到的質譜指紋圖譜中的特征指紋峰及其相對強度，對中藥烏頭飲片的質量進行初步評價；(2)本方法通過對不同的影響離子化效率的離子源參數(shù)進行優(yōu)化，從而獲得了中藥烏頭飲片最優(yōu)的質譜響應信號，實現(xiàn)了中藥烏頭飲片的原位快速鑒別，保證了質量檢測方法的準確性和質量檢測標準的先進性；(3)本方法整個過程在大氣壓條件下進行，對樣品進行低損耗定性分析且無需任何樣品前處理過程，大大縮短了分析時間，可實現(xiàn)原位、快速、準確且高通量的檢測；(4)附圖2是實施例3制備的供試樣品3的質譜指紋圖譜，該圖說明了此制川烏飲片已經(jīng)過了充分的炮制，有毒成分雙酯型烏頭堿(m/z 616)種類和含量都有了大幅減少，可安全使用，為合格的制川烏；即使用本發(fā)明的方法可以對中藥烏頭飲片的質量進行快速、準確的評價，以滿足臨床醫(yī)學對中藥烏頭飲片質量檢測要求；(5)附圖4是實施例6制備的供試樣品6的質譜指紋圖譜，該圖說明了此制川烏飲片未經(jīng)過充分炮制，可以觀察多種有毒的雙酯型烏頭堿(m/z616、m/z632、m/z646和m/z662)，含量也均剩余較多，尚有一定的毒性，應謹慎使用，為不合格的制川烏；這就需要在用炮制方法制備中藥烏頭飲片必須充分的炮制，降低其毒性，而存其藥效活性。


圖I是實施例2制備的供試樣品2的質譜指紋圖譜；圖2是實施例3制備的供試樣品3的質譜指紋圖譜；圖3是實施例5制備的供試樣品5的質譜指紋圖譜；圖4是實施例6制備的供試樣品6的質譜指紋圖譜。
具體實施例方式實施例I步驟(I):供試樣品的制備市售制早烏，稱為供試樣品I ;步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品I做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為3kV，格柵電壓為+300V，工作氣體為高純氮氣，調節(jié)氣體壓力0. IkPa,氣體溫度為500°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度200°C，毛細管電壓35V，透鏡電壓50V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa，在m/z300 1000掃描范圍內(nèi)，存在m/z422，m/z 438，m/z 454，m/z 486，m/z 556，m/z 572，m/z 590，m/z 604，m/z 616，m/z 632離子，只能觀察到少數(shù)的有毒雙酯型烏頭堿(m/z 616, m/z 632)，為合格的制草烏。實施例2步驟(I):供試樣品的制備
以生川烏為原料，川烏，大小個分開，用水浸泡至內(nèi)無干心，取出，加水煮沸4h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供試樣品2 ；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品2做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為6kV，格柵電壓為+250V，工作氣體為高純氦氣，調節(jié)氣體的壓力為0. 5kPa，氣體溫度為350°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度150°C，毛細管電壓50V，透鏡電壓150V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa。圖I為實施例2制備的供試樣品2的質譜指紋圖譜。圖中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分別代表查曼寧,尼奧靈,附子靈，中烏頭胺，次烏頭堿碎片[M-60]+，中烏頭堿碎片[M-60]+，苯甲酰中烏頭原堿，苯甲酰烏頭原堿，次烏頭堿。該圖說明了此制川烏飲片已經(jīng)過了充分的炮制，有毒成分雙酯型烏頭堿(m/z 616)種類和含量都有了大幅減少，可安全使用，為合格的制川烏?！嵤├?步驟(I):供試樣品的制備以生川烏為原料,川烏，大小個分開，用水浸泡至內(nèi)無干心，取出，蒸制6h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供試樣品3 ；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品3做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為3kV，格柵電壓為+400V，工作氣體為高純氬氣，調節(jié)氣體的壓力為0. 7kPa，氣體溫度為350°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度250°C，毛細管電壓35V，透鏡電壓110V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa。圖2是實施例3制備的供試樣品3的質譜指紋圖譜。圖中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分別代表查曼寧,尼奧靈,附子靈，中烏頭胺，次烏頭堿碎片[M-60]+，中烏頭堿碎片[M-60]+，苯甲酰中烏頭原堿，次烏頭堿。該圖說明了此制川烏飲片已經(jīng)過了充分的炮制，有毒成分雙酯型烏頭堿(m/z 616)種類和含量都有了大幅減少，可安全使用，為合格的制川烏。實施例4步驟(I):供試樣品的制備以生川烏為原料，川烏，大小個分開，用水浸泡至內(nèi)無干心，取出，加水煮沸5h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供試樣品4 ；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品4做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為6kV，格柵電壓為+350V，工作氣體為高純氮氣，調節(jié)氣體的壓力為0. 8kPa，氣體溫度為150°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度200°C，毛細管電壓30V，透鏡電壓150V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa，在m/z300 1000掃描范圍內(nèi)存在 m/z 422, m/z 438, m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616離子，只能觀察到少數(shù)的有毒雙酯型烏頭堿(m/z 616)，為合格的制川烏。實施例5步驟(I):供試樣品的制備
市售制草烏,稱為供試樣品5 ；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品5做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為6kV，格柵電壓為+250V，工作氣體為高純氦氣，調節(jié)氣體壓力0. 6kPa，氣體溫度為350°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度300°C，毛細管電壓35V，透鏡電壓110V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa。附圖3實施例5制備的供試樣品5的質譜指紋圖譜。圖中，m/z 422，m/z 438，m/z 454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 604, m/z 616 分別代表查曼寧,尼奧靈,附子靈，中烏頭胺，次烏頭堿碎片[M-60]+，中烏頭堿碎片[M-60]+，苯甲酰中烏頭原堿，次烏頭堿。說明了此制草烏飲片已經(jīng)過了充分的炮制，有毒成分雙酯型烏頭堿(m/z 616)種類
和含量都有了大幅減少，可安全使用，為合格的制草烏。實施例6步驟(I):供試樣品的制備以生川烏為原料，大小個分開，用水浸泡至內(nèi)無干心，取出，加水煮沸2h后取出，晾至六成干，切片，干燥，得到供試樣品6 ；步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜取步驟(I)中制備的供試樣品6做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為3kV，格柵電壓為+250V，工作氣體為高純氬氣，調節(jié)氣體壓力0. 5kPa，氣體溫度為350°C;在正離子模式下，設定毛細管溫度250°C，毛細管電壓10V，透鏡電壓100V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa。圖4是實施例6制備的供試樣品6的質譜指紋圖譜。圖中，m/z 422,m/z 438,m/z454, m/z 486, m/z 556, m/z 572, m/z 590, m/z 616、m/z 632、m/z 646 和 m/z 662 分別代表查曼寧，尼奧靈，附子靈，中烏頭胺，次烏頭堿碎片[M-60]+，中烏頭堿碎片[M-60]+，苯甲酰中烏頭原堿，次烏頭堿，中烏頭堿，烏頭堿，10-0H-烏頭堿。該圖說明了此制川烏飲片未經(jīng)過充分炮制，可以觀察多種有毒的雙酯型烏頭堿(m/z 616>m/z 632、m/z 646和m/z 662),含量也均剩余較多，尚有一定的毒性，應謹慎使用，為不合格的制川烏。
權利要求
1.一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法，其特征在于，該方法的步驟和條件如下 步驟(I):供試樣品的制備 以生川烏為原料，用炮制法制備制川烏飲片，得到供試樣品； 步驟(2):供試樣品的質譜指紋圖譜 供試樣品的質譜指紋圖譜通過如下步驟得到 取步驟(I)中制備的供試樣品做質譜分析；質譜實驗條件如下正離子電離方式，設定離子源的放電針電壓為3-6kV，格柵電壓為+250-+400V，調節(jié)工作氣體壓力O. 1-0. 8kPa，氣體溫度為150-500°C ;在正離子模式下，設定毛細管溫度150-300°C，毛細管電壓10-50V，透鏡電壓50-150V，掃描范圍m/z質荷比為300 lOOODa，在m/z300 1000掃描范圍內(nèi)，存在m/z330、m/z358、m/z408、m/z454、m/z556、m/z572、m/z586、m/z590、m/z604、m/z616 離子。
2.如權利要求I所述的原位質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中的工作氣體為高純氮氣、高純氦氣或高純氬氣。
3.如權利要求I所述的原位質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中的格柵電壓為+250 +350V。
4.如權利要求I所述的原位質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中的氣體壓力為O. 5^0. 8kPa。
5.如權利要求I所述的原位質量檢測方法，其特征在于，所述步驟(2)中的氣體溫度為350^500 0C ο
全文摘要
本發(fā)明提供了一種中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法。解決現(xiàn)有中藥質量檢測方法無法滿足臨床醫(yī)學對中藥烏頭飲片質量檢測要求的問題。該中藥烏頭飲片的原位質量檢測方法以生川烏為原料，用炮制法制備制川烏飲片樣品；樣品不經(jīng)任何處理，對樣品進行質譜分析得到質譜指紋圖譜，根據(jù)得到的質譜指紋圖譜中的特征指紋峰及其相對強度，對中藥烏頭飲片的質量進行初步評價，實現(xiàn)了中藥烏頭飲片的原位快速鑒別，保證了質量檢測方法的準確性和質量檢測標準的先進性。
文檔編號G01N27/68GK102788835SQ20121027707
公開日2012年11月21日 申請日期2012年8月6日 優(yōu)先權日2012年8月6日
發(fā)明者劉志強, 劉淑瑩, 劉舒, 宋鳳瑞, 朱洪彬, 王春艷 申請人:中國科學院長春應用化學研究所