專(zhuān)利名稱(chēng)：青藤堿的抗腫瘤作用及用于抗腫瘤藥物的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于抗腫瘤的藥物組合物及其制備方法和用途。更具體地，本發(fā)明涉及青藤堿以及含青藤堿的復(fù)方藥物組合物的抗腫瘤作用，及其在制備抗腫瘤藥物中的用途。
背景技術(shù)：
腫瘤是一種嚴(yán)重威脅人民身體健康的疾病，為了有效地治療腫瘤，人們?cè)趯ふ腋鞣N具有腫瘤抑制或殺滅作用的物質(zhì)。
青藤堿(Sinomenime)是從中藥青風(fēng)藤(Sinomenium acutum Rehd.et.wils.)中提取的生物堿。其化學(xué)名為7，8-二去氫-4-羥基-3.7-二甲氫基-17-甲基-9a、13a、14a-嗎啡烷-6-酮，其分子式為C19H23NO4，分子量為329.38。青藤堿具有抗炎、鎮(zhèn)痛、降血壓、抗心律失常等藥理作用，其制劑在臨床上已用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
然而，迄今為止沒(méi)有報(bào)道過(guò)青藤堿的抗腫瘤的作用，更沒(méi)有以青藤堿作為主要有效成分的抗腫瘤藥物。
綜上所述，為了治療腫瘤，本領(lǐng)域迫切需要開(kāi)發(fā)新的抑制腫瘤的藥物，尤其是活性成分來(lái)源于中藥材的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種來(lái)源于中藥的抗腫瘤活性成分-青藤堿。
本發(fā)明的另一目的是提供含青藤堿的純中藥提取物的藥物和/或飲食補(bǔ)充劑。
在本發(fā)明的第一方面，提供了一種青藤堿的用途，它被用于制備抑制腫瘤的藥物組合物。
在另一優(yōu)選例中，按組合物的總重量計(jì)，所述的藥物組合物含有以下活性成分青藤堿 30-75mg/g；芍藥甙 8-15mg/g；阿魏酸 1.5-3mg/g；以及藥學(xué)上可接受的載體。
在另一優(yōu)選例中，所述的組合物中青藤堿的含量為40-60mg/g，芍藥甙為10-15mg/g。
在另一優(yōu)選例中，所述的組合物中青藤堿的含量為20mg/劑或30mg/劑。
在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物含有選自下組的必要組份45-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；8-20重量份數(shù)的白芍；3-10重量份數(shù)的當(dāng)歸；且青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的30-99％，以及余量的藥學(xué)上可接受的載體。
在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物含有55-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；10-20重量份數(shù)的白芍；4-10重量份數(shù)的當(dāng)歸；且青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的50-99％。
在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物含有60-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；12-15重量份數(shù)的白芍；5-8重量份數(shù)的當(dāng)歸。
在另一優(yōu)選例中，所述的腫瘤選自下組肺癌、肝癌、乳房癌、或前列腺癌。
在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物是片劑或膠囊制劑。
在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物還含有選自下組的物質(zhì)順鉑、紫杉醇、TNF-α、IFN-γ、血管他丁(Angiostatin)、內(nèi)皮他丁(Endostatin)、依托泊甙、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡波鉑、或異環(huán)磷酰胺。
在本發(fā)明的第二方面，提供了一種混合物的用途，所述的混合物由45-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；8-20重量份數(shù)的白芍；和3-10重量份數(shù)的當(dāng)歸構(gòu)成，或者所述的混合物含有青藤堿30-75mg/g；芍藥甙8-15mg/g；和阿魏酸1.5-3mg/g，其中，所述的混合物用于制備抑制腫瘤的藥物。
在本發(fā)明的第三方面，提供了一種青藤堿的用途，用于制備抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性的組合物。
在本發(fā)明的第四方面，提供了制備本發(fā)明藥物組合物或飲食補(bǔ)充劑的方法，它包括步驟(1).選取青藤堿含量較高的青風(fēng)藤粗粉以在0.1-0.5％硫酸液浸潤(rùn)后在滲漉缶中提取得到含青藤堿的水溶液，然后以石灰乳調(diào)pH＝12±0.5，得沉淀，再以90-95％乙醇回流提取，然后減壓濃縮，得青藤堿粗粉。在粗粉中再加鹽酸得鹽酸青藤堿，然后重結(jié)晶，最后將此結(jié)晶溶于沸騰的60-70％(如65％)乙醇和加氨水調(diào)pH至9±0.2，即可得到純度為大于95％(如98％)的青藤堿。
(2).用醇提法取得當(dāng)歸和白芍浸膏；(3).將青風(fēng)藤浸膏與當(dāng)歸和白芍浸膏配在一起，獲得具有上述濃度的活性組份的藥物組合物，其中步驟(1)和(2)的次序可互換。
較佳地，所用的青風(fēng)藤藥材是青藤堿含量較高的青風(fēng)藤粗粉。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明人經(jīng)過(guò)廣泛而深入的研究，意外地發(fā)現(xiàn)青風(fēng)藤的活性成分青藤堿具有優(yōu)良的抑制腫瘤生長(zhǎng)的效果。不論是單獨(dú)使用青藤堿，還是使用青風(fēng)藤與白芍和當(dāng)歸三者按一定比例形成的組合物，都可獲得較好的抗腫瘤作用。具體地，青藤堿對(duì)小鼠Lewis肺癌模型可出現(xiàn)60％的抑制率，量效關(guān)系明顯。實(shí)驗(yàn)提示，該作用與青藤堿抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性有關(guān)。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的抗腫瘤組合物，是一種以青風(fēng)藤為必要組份或相應(yīng)的有效成分(即青藤堿)為必要成分的組合物。本發(fā)明的組合物可以是藥物組合物或飲食補(bǔ)充劑。
一種優(yōu)選的藥物組合物是含青藤堿的復(fù)方藥物組合物，尤其是含青藤堿的純中藥提取物的藥物。
一種優(yōu)選的復(fù)方組合物是以青風(fēng)藤為必要組份或相應(yīng)的有效成分(即青藤堿)為必要成分同時(shí)以白芍和當(dāng)歸為輔助性必要組份或相應(yīng)的有效成分(即白芍總甙和阿魏酸)為輔助性必要成分的組合物。本發(fā)明的組合物可以是藥物組合物或飲食補(bǔ)充劑。一種優(yōu)選的組合物公開(kāi)于題為“用于治療或改善關(guān)節(jié)炎的藥物組合物和飲食補(bǔ)充劑”的中國(guó)專(zhuān)利ZL01819981.X中，該文獻(xiàn)全部引入本文作為參考。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“必要組份”指必要的中藥藥材，即青風(fēng)藤(Sinomemiumacutum)。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“輔助性必要組份”指輔助性的必要中藥藥材，即白芍(Paeomia lactiflora)和當(dāng)歸(Angelica sinensis)。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“必要成分”指作為活性成分的必要的化學(xué)物質(zhì)，即青藤堿(Sinomemine)。在本發(fā)明中，除了使用青藤堿之外，還可以使用青藤堿的鹽，例如藥學(xué)上可接受的鹽酸鹽、硫酸鹽、乙酸鹽、甲磺酸鹽等。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“輔助性必要成分”指作為活性成分的輔助性必要化學(xué)物質(zhì)，即白芍總甙(total glucosides of paecony，TGP)和阿魏酸(Ferolic acid)。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“白芍總甙”和“芍藥甙”可互換使用，都指白芍中的葡糖苷類(lèi)物質(zhì)。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“包括”包括了“含有”、“基本上由......構(gòu)成”和“由......構(gòu)成”。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“基本上由......構(gòu)成”指在組合物中，除了含有必要成分或必要組份之外，還可含有少量的且不影響有效成分的次要成分和/或雜質(zhì)。例如，可以含有甜味劑以改善口味、抗氧化劑以防止氧化，以及其他本領(lǐng)域常用的添加劑。通常青風(fēng)藤(Sinomemium acutum)、白芍(Paeomia lactiflora)和當(dāng)歸(Angelica sinensis)占全部中藥藥材重量的至少70％，較佳地至少80％，更佳地至少90％。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種賦形劑和稀釋劑。該術(shù)語(yǔ)指這樣一些藥劑載體它們本身并不是必要的活性成分，且施用后沒(méi)有過(guò)分的毒性。合適的載體是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。在Remington′s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到關(guān)于藥學(xué)上可接受的賦形劑的充分討論。在組合物中藥學(xué)上可接受的載體可含有液體，如水、鹽水、甘油和乙醇。另外，這些載體中還可能存在輔助性的物質(zhì)，如潤(rùn)濕劑或乳化劑、pH緩沖物質(zhì)等。來(lái)自于青風(fēng)藤、白芍、當(dāng)歸的除必要成分(即青藤堿(Sinomemine)、白芍總甙(Total glucosides ofpaecony，TGP)和阿魏酸(Ferolic acid)。)之外的非必要成分，以及其他非必要成分(例如其他輔助性藥材)，也包括在藥學(xué)上可接受的載體的定義中。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“本發(fā)明的組合物”包括藥物組合物和飲食補(bǔ)充劑，只要它們含有或基本上由(1)青風(fēng)藤或青藤堿；(2)白芍或白芍總甙；和(3)當(dāng)歸或阿魏酸構(gòu)成。通常，青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的30-99％，較佳地50-99％，更佳地60-90％。
此外，本發(fā)明組合物可含有治療腫瘤的其他物質(zhì)，例如順鉑、紫杉醇、TNF-α、IFN-γ、Angiostatin、Endostatin、依托泊甙、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡波鉑、異環(huán)磷酰胺或其組合。
在本發(fā)明的復(fù)方藥物組合物中，作為必要組份的三種中藥藥材是(1)青風(fēng)藤(Sinomemium acutum)，其中的活性成分是青藤堿(Sinomemine)；(2)白芍(Paeomia lactiflora)；其中的活性成分是白芍總甙(Total glucosides of paecony，TGP)；和(3)當(dāng)歸(Angelica sinensis)，其中的活性成分是阿魏酸(Ferolic acid)。
本發(fā)明藥物對(duì)腫瘤的抑制效果與必要活性成分的含量密切相關(guān)。研究表明，為了取得穩(wěn)定的抑制腫瘤效果，應(yīng)使該藥物中青藤堿成分含量達(dá)到一定的范圍，如約20mg/劑，30mg/劑或40mg/劑。
另外，在優(yōu)選的復(fù)方藥物中，各成分的合理含量的范圍是青藤堿30-75mg/g，較佳地40-60mg/g，芍藥甙8-15mg/g，較佳地，10-15mg/g，阿魏酸1.5-3mg/g。
除了按必要活性成分來(lái)限定本發(fā)明的組合物之外，還可用必要組份(藥材)的配比來(lái)限定本發(fā)明的復(fù)方藥物組合物。
在本發(fā)明組合物中，按重量計(jì)，三種必要藥材的合適配比是45-85重量份數(shù)，較佳地55-85重量份數(shù)，更佳地60-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；8-20重量份數(shù)，較佳地10-20重量份數(shù)，更佳地12-15重量份數(shù)的白芍；3-10重量份數(shù)，較佳地4-10重量份數(shù)，更佳地5-8重量份數(shù)的當(dāng)歸，且青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的30-99％，較佳地50-99％，更佳地60-95％。余量的物質(zhì)是藥學(xué)上可接受的載體，例如淀粉、麥芽糊精等。
為了使制劑有好的治療效果，制劑中的有效活性成分含量是關(guān)鍵。為此本發(fā)明人還建立了一套檢測(cè)該制劑中各中藥材中活性成分的高效液相(HPLC)測(cè)定方法，來(lái)監(jiān)控原料和制劑中的各種活性成分。
本發(fā)明的藥物組合物或飲食補(bǔ)充劑，可以通過(guò)常規(guī)方法制成任何常規(guī)的制劑形式，優(yōu)選的是片劑、膠囊制劑、顆粒劑、丸劑、口服液、注射劑等。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種制備本發(fā)明藥物組合物或飲食補(bǔ)充劑的方法。
常規(guī)的中藥提取方法難以使提取物中的活性成分達(dá)到較高的濃度來(lái)保證該制劑的療效。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，根據(jù)藥理研究用青風(fēng)藤抑制腫瘤時(shí)，成年人有效劑量宜為40-80mg/天，這樣每克制劑中應(yīng)含青藤堿40-60mg，而這種濃度是一般提取方法難以達(dá)到的。為此試驗(yàn)了一種提取青藤堿的有效方法。
在該提取法中，首先選取青藤堿含量較高的青風(fēng)藤粗粉以在0.1-0.5％硫酸液浸潤(rùn)后在滲漉缶中提取得到含青藤堿的水溶液，然后以石灰乳調(diào)pH＝12±0.5，得沉淀，再以90-95％乙醇回流提取，然后減壓濃縮，得青藤堿粗粉。在粗粉中再加鹽酸得鹽酸青藤堿，然后重結(jié)晶，最后將此結(jié)晶溶于沸騰的60-70％(如65％)乙醇和加氨水調(diào)pH至9±0.2，即可得到純度為大于95％(如98％)的青藤堿。
同時(shí)用常規(guī)的醇提法，取得當(dāng)歸和白芍的浸膏。例如，將當(dāng)歸以70％乙醇水溶液回流，然后對(duì)獲得的溶液進(jìn)行濃縮，從而獲得當(dāng)歸濃縮物(如浸膏)。此外，經(jīng)噴干后，還可獲得當(dāng)歸濃縮物粉末。類(lèi)似地，可獲得白芍的浸膏。當(dāng)然，較佳地，可獲得同時(shí)含有當(dāng)歸和白芍兩種有效組份的濃縮物(如浸膏)。
最后，根據(jù)制劑的需要，再將一定比例的這些浸膏配在一起，這樣就可達(dá)到需要的濃度。
在一個(gè)優(yōu)選例中，制備本發(fā)明復(fù)方藥物的方法包括步驟(1)、用上述優(yōu)選方法制得純度為大于95％的青藤堿。
(2)、用常規(guī)的醇提法取得當(dāng)歸和白芍浸膏。
(3)、根據(jù)制劑需要，再將這兩種浸膏和青藤堿配在一起，這樣就可達(dá)到需要的濃度，其中步驟(1)和(2)的次序可互換。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于(1)組份簡(jiǎn)單、活性成分明確且針對(duì)性強(qiáng)；(2)對(duì)活性成分可進(jìn)行定量控制，從而保證質(zhì)量；(3)成本低廉；(4)對(duì)腫瘤的抑制作用明顯。
下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于闡述本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明。在實(shí)施例中，百分比為重量百分比，份數(shù)為重量份數(shù)，除非特別說(shuō)明。
實(shí)施例1藥物組合物A的制備在該實(shí)施例中，提供了一種藥物組合物(組合物A)，其中，三種中藥的配比為青風(fēng)藤 82重量份數(shù)(820克)白芍 12重量份數(shù)(120克)當(dāng)歸 6重量份數(shù)(60克)在本實(shí)施例中所用的三種中藥皆經(jīng)HPLC測(cè)試，質(zhì)量符合要求。
首先選取青藤堿含量較高的青風(fēng)藤粗粉以在0.4％硫酸液浸潤(rùn)后在滲漉缶中提取得到含青藤堿的水溶液，然后以石灰乳調(diào)pH＝12，得沉淀，再以95％乙醇回流提取，然后減壓濃縮，得青藤堿粗粉。在粗粉中再加鹽酸得鹽酸青藤堿，然后重結(jié)晶，最后將此結(jié)晶溶于沸騰的65％乙醇和加氨水調(diào)pH至9，即可得到純度為98％的青藤堿。
稱(chēng)取當(dāng)歸或白芍，加70％乙醇回流，提取液減壓濃縮成浸膏狀，1克當(dāng)歸浸膏相當(dāng)于1.6克原藥材，1克白芍浸膏相當(dāng)于4.4克原藥材。
將青藤堿與當(dāng)歸、白芍醇提浸膏充分混勻，進(jìn)行真空干燥(60～70℃)3.5-4.0小時(shí)，制成干浸膏，將干浸膏粉碎，60目過(guò)篩，裝入膠囊。在該實(shí)施例中，青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸占組合物總重量的約80％。
實(shí)施例2藥物組合物B的制備按實(shí)施例1中所述的提取方法，分別制得青藤堿，白芍和當(dāng)歸制成濃縮提取物。各提取物經(jīng)含量測(cè)定后，按下表A配方稱(chēng)取后與輔料(微晶纖維和硬脂酸鎂)充分混合，并用干法制粒后灌膠囊，制成膠囊制劑共1000粒，每粒膠囊的內(nèi)含物為300mg或250mg。
表A每粒膠囊含各種成分?jǐn)?shù)量

實(shí)施例3青藤堿鹽酸鹽轉(zhuǎn)化為青藤堿目前我國(guó)工業(yè)上生產(chǎn)的青藤堿是青藤堿的鹽酸鹽，但在國(guó)際上，其單體更容易接受。因此在本實(shí)施例中，把青藤堿鹽酸鹽轉(zhuǎn)化為青藤堿。方法如下取購(gòu)買(mǎi)的青藤堿鹽酸鹽溶于65％沸騰乙醇，加氨水調(diào)PH至9-10，放置并過(guò)濾，過(guò)濾物在40℃真空干燥，所得白色結(jié)晶粉為青藤堿單體。
經(jīng)HPLC測(cè)定，青藤堿含量在98％以上。
由于紅外光譜具有高度特征性，因此可用于藥物的鑒別和化學(xué)結(jié)構(gòu)的確定。用Bruker VECTORZZ傳立葉變換紅外分光光度計(jì)測(cè)定如上制備的青藤堿單體的紅外光譜，并與購(gòu)自國(guó)家藥品生物制品檢定的青藤堿標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)0774-200105)進(jìn)行比較，結(jié)果兩者完全相同。
實(shí)施例4青藤堿及其復(fù)方對(duì)腫瘤的抑制作用取實(shí)施例2和3中制備的青藤堿復(fù)方膠囊或青藤堿單體(純度98％)，測(cè)試其對(duì)腫瘤的抑制作用。
試驗(yàn)方法如下動(dòng)物常規(guī)C57BL/6小鼠，體重18-20克/只，每組動(dòng)物10只瘤源小鼠Lewis肺癌劑量設(shè)置青藤堿140、70、35mg/kg，灌胃給藥青藤堿復(fù)方800、400、200mg/kg，灌胃給藥試驗(yàn)步驟小鼠Lewis足趾皮下接種模型無(wú)菌條件下取生長(zhǎng)旺盛的常規(guī)的Lewis肺癌，以勻漿制備成約2×107/ml細(xì)胞懸液，于C57BL/6小鼠的右足趾皮下接種0.05ml/鼠(約1×106個(gè)腫瘤細(xì)胞)，次日按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案給藥，原發(fā)灶抑瘤率連續(xù)給藥10天，并用卡尺體外動(dòng)態(tài)檢測(cè)荷瘤趾長(zhǎng)a、寬b、厚c直徑，以π/6×(a×b×c)公式計(jì)算各荷瘤趾體積，得均值及標(biāo)準(zhǔn)差，作曲線圖。十天以后手術(shù)截取荷瘤趾，荷瘤足趾稱(chēng)重，按下列公式計(jì)算接種原發(fā)腫瘤的抑制率腫瘤抑制率％＝[(對(duì)照組平均荷瘤足趾重—給藥組平均荷瘤足趾重)/對(duì)照組平均荷瘤足趾重—空白平均荷瘤足趾重]×100％結(jié)果青藤堿140、70、35mg/kg，ig×10的方案治療，對(duì)足趾皮下接種的小鼠Lewis肺癌的療效分別為57.08％、46.22％、32.19％。
青藤堿復(fù)方800、400、200mg/kg，ig×10的方案治療，對(duì)足趾皮下接種的小鼠Lewis肺癌的療效分別為59.97％、52.13％、38.24％，詳見(jiàn)表1。
表1.青藤堿及青藤堿復(fù)方對(duì)小鼠Lewis肺癌(足趾皮下接種)原發(fā)灶療效試驗(yàn)結(jié)果

與陰性對(duì)照組相比***P＜0.01，CTX為環(huán)磷酰胺，空白足趾平均重0.10g。
另外，抑制瘤試驗(yàn)表明復(fù)方優(yōu)于單方結(jié)果(見(jiàn)表1)。因此，可以在復(fù)方中加入對(duì)青風(fēng)藤有加強(qiáng)和協(xié)同作用的藥材，尤其是白芍和當(dāng)歸(或其活性成分或其提取物)，從而組成復(fù)方藥物。
實(shí)施例5青藤堿單方藥物的制備取實(shí)施例3中制備的青藤堿，并加入適量輔料，干法制粒后并裝入膠囊作為口服劑或制成片劑。以下為每粒膠囊中青藤堿和輔料的含量。
青藤堿40mg輔料260mg輔料是微晶纖維素、硬脂酸鎂。
實(shí)施例6必要組份或活性成分含量與治療效果的關(guān)系在該實(shí)施例中，測(cè)試了本發(fā)明復(fù)方藥物組合物中各藥材或其活性成分的含量與抑制功效方面的效果之間的關(guān)系。
按類(lèi)似于實(shí)施例1所述的方法，制備如下配比的組合物，其中青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸總量和賦形劑的含量為占組合物總重量的百分比。并且按實(shí)施例4所述的方法測(cè)試其在小鼠Lewis足趾皮下接種模型中對(duì)腫瘤的抑制作用。

結(jié)果表明，與對(duì)照相比，這些組合物均可具有抑制腫瘤作用，且抑制率基本上與青藤堿的用量成比例。
組合物1-4及實(shí)施例1中的組合物A和實(shí)施例2中的組合物B，經(jīng)高效液相(HPLC)測(cè)定，青藤堿的含量為30-75mg/g；芍藥甙含量為8-15mg/g；阿魏酸含量為1.5-3mg/g。
實(shí)施例7飲食補(bǔ)充劑的制備按類(lèi)似于實(shí)施例1的方法，制備飲食補(bǔ)充劑，其中，三種中藥的配比為青風(fēng)藤 60重量份數(shù)(600克)白芍10重量份數(shù)(100克)當(dāng)歸5重量份數(shù)(50克)將制得的干浸膏粉碎，60目過(guò)篩，裝入膠囊。在該實(shí)施例中，青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸占組合物總重量的約70％。
實(shí)施例8
青藤堿對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性的抑制作用核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB在腫瘤的抗凋亡機(jī)制中起著關(guān)鍵性的作用，所以抑制腫瘤細(xì)胞NF-κB的活性將引起腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。
本實(shí)施例中用常規(guī)方法測(cè)試了青藤堿對(duì)BALB/C小鼠腹腔巨噬細(xì)胞NF-κB活化的影響，具體如下將青藤堿(20μmol/L)和對(duì)照樣品(不含青藤堿)處理得小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，2小時(shí)后在激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞的NF-KB活性程度(通過(guò)測(cè)定熒光強(qiáng)度進(jìn)行表示)。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以青藤堿處理后NF-κB的活性(以熒光強(qiáng)度比值表示，其值為2.01，明顯低于對(duì)照(熒光強(qiáng)度比值為5.20)上述結(jié)果提示，青藤堿對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性有抑制作用，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。
在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
權(quán)利要求
1.一種青藤堿的用途，其特征在于，用于制備抑制腫瘤的藥物組合物。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，按組合物的總重量計(jì)，所述的藥物組合物含有以下活性成分青藤堿 30-75mg/g；芍藥甙 8-15mg/g；阿魏酸 1.5-3mg/g；以及藥學(xué)上可接受的載體。
3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的組合物中青藤堿的含量為40-60mg/g，芍藥甙為10-15mg/g；或者，所述的組合物中青藤堿的含量為20mg/劑或30mg/劑。
4.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物含有選自下組的必要組份45-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；8-20重量份數(shù)的白芍；3-10重量份數(shù)的當(dāng)歸；且青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的30-99％，以及余量的藥學(xué)上可接受的載體。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物含有55-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；10-20重量份數(shù)的白芍；4-10重量份數(shù)的當(dāng)歸；且青風(fēng)藤+白芍+當(dāng)歸的重量占組合物總重量的50-99％。
6.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物含有60-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；12-15重量份數(shù)的白芍；5-8重量份數(shù)的當(dāng)歸。
7.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述的腫瘤選自下組肺癌、肝癌、乳房癌、或前列腺癌。
8.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物還含有選自下組的物質(zhì)順鉑、紫杉醇、TNF-α、IFN-γ、血管他丁(Angiostatin)、內(nèi)皮他丁(Endostatin)、依托泊甙、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡波鉑、或異環(huán)磷酰胺。
9.一種混合物的用途，所述的混合物由45-85重量份數(shù)的青風(fēng)藤；8-20重量份數(shù)的白芍；和3-10重量份數(shù)的當(dāng)歸構(gòu)成，或者所述的混合物含有青藤堿30-75mg/g；芍藥甙8-15mg/g；和阿魏酸1.5-3mg/g，其特征在于，所述的混合物用于制備抑制腫瘤的藥物。
10.一種青藤堿的用途，其特征在于，用于制備抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性的組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了青藤堿以及含青藤堿的復(fù)方藥物組合物的抗腫瘤作用，以及青藤堿在制備治療抗腫瘤藥物中的用途。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)表明，青藤堿以及含青藤堿的復(fù)方藥物組合物可以有效地抑制腫瘤。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK1981763SQ20051013460
公開(kāi)日2007年6月20日 申請(qǐng)日期2005年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月16日
發(fā)明者陸德如 申請(qǐng)人:杏林科技有限公司, 陸德如