專利名稱:新城疫病毒感染性基因組的用途的制作方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種物質(zhì)的新用途,尤其是新城疫病毒感染性基因組在制備治療新城疫藥物中的應用。
背景技術:
新城疫是由新城疫病毒引起的接觸性傳染病,可引起急性敗血,死亡率極高。目前,由于沒有有效治療新城疫的藥物,只能免疫預防。常規(guī)弱毒疫苗免疫常發(fā)生免疫不全或免疫失敗等現(xiàn)象;而中等毒力活疫苗在雛雞上免疫??墒故荏w發(fā)病甚至死亡?,F(xiàn)有疫苗所存在的問題,導致新城疫疾病仍然時有發(fā)生,嚴重威脅著養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。
新城疫病毒感染性基因組是所屬領域技術人員所公知的已有物質(zhì),迄今為止,只在教學或科研中得以應用,未在制藥領域中應用,尤其是未在制備治療新城疫藥物中的應用。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術中所存在疫苗免疫效果較差、沒有治療新城疫藥物的技術問題,發(fā)現(xiàn)了新城疫病毒感染性基因組具有在進入機體之后,利用匹配的酶系統(tǒng),可以指導合成和包裝成具有感染性基因組序列特異性的完整病毒粒子,誘導機體產(chǎn)生病毒特異的中和抗體的功能,從而發(fā)明了新城疫病毒感染性基因組在制備治療新城疫藥中的應用這一用途。
本發(fā)明的方案是新城疫病毒感染性基因組的用途,其特征在于新城疫病毒感染性基因組在制備治療新城疫藥物中的應用。
新城疫病毒感染性基因組屬負極單股RNA,為感染性核酸。當進入機體后,在病毒RNA指導的RNA聚合酶(轉錄酶)的作用下可產(chǎn)生互補的正鏈,由此翻譯成病毒蛋白質(zhì)和基因組,進而合成和包裝成完整的新城疫病毒粒子。完整的病毒粒子F蛋白作為無活性的前體蛋白F0,在匹配的蛋白酶作用下,分解成F1和F2兩個亞單位,使病毒粒子大量繁殖。用新城疫病毒感染性基因組制備的藥物對新城疫疾病有積極的治療作用,有助于養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展,具有較高的經(jīng)濟效益和社會效益。
具體實施例方式用常規(guī)方法提純及檢驗新城疫病毒感染性基因組。
以新城疫病毒感染性基因組為A相,配置萬分之五的活性蛋白酶(胰蛋白酶活力單位數(shù)υ/mg≥2500)作為B相。A相、B相分別過濾除菌。
新城疫病毒感染性基因組除具有對新城疫疾病的治療作用之外,還可作為疫苗的免疫佐劑。
使用方法臨床使用方法是(A相每瓶為4ml100ug,B相每瓶為5ml2.5mg)預防每只雞注射A相4ul(含核酸5ug,取A相4ul稀釋成0.1ml),使用A相后24小時飲用核酸B相5ul(含胰蛋白酶0.5ug)。
治療服藥方法同預防方法,每次服用劑量加倍,且連用2~3次。
臨床實驗選取100日齡新城疫非免疫雞60只,肌肉注射A相4ul。24小時后將試驗雞分成兩組,每組30只,一組口服胰蛋白酶5ul,另一組作為對照。分別于不同試驗后24、48、72、96、120、144小時采集試驗和對照組雞血清及肝、脾、腎、法氏囊等十多種組織臟器,采用Dot-ELISA、Westernblot和Southern blot方法分別檢測試驗雞新城疫病毒抗體、抗原和新城疫病毒N基因。
結果表明1.新城疫病毒感染性基因組進入機體后可產(chǎn)生互補的正鏈,翻譯出病毒蛋白質(zhì)和基因組,組裝成完整的新城疫病毒粒子。新城疫病毒感染性基因組進入機體后120小時可產(chǎn)生病毒特異的血清抗體,但抗體水平較低,Dot-ELISA檢測抗體的水平僅有1∶16。
2.體外給予適當?shù)腂相,可加快新城疫病毒感染性基因組進入機體后產(chǎn)生互補的正鏈,翻譯出病毒蛋白質(zhì)和基因組并組裝成完整的新城疫病毒粒子的速度;檢測結果為新城疫病毒感染性基因組注射后24小時,口服活性蛋白酶,48小時后出現(xiàn)新城疫病毒特異性抗體,96小時抗體達最高峰,Dot-ELISA血清抗體價可達1∶1024。
3.Western blot和Southern blot的檢測結果證明新城疫感染性基因組進入機體后24小時,在特定活性蛋白酶的作用下120小時之后可分別在多個組織臟器中檢測到新城疫病毒抗原及N基因。
4.Dot-ELISA、Western blot和Southern blot分別對新城疫病毒抗體、抗原和N基因的檢測表明感染性基因組核酸完全可在機體內(nèi)合成完整的病毒粒子。這種病毒粒子在特異活性蛋白酶的裂解作用下可迅速復制并刺激機體產(chǎn)生病毒特異的血清抗體。完全可以預防(佐劑)及治療新城疫疾病。
權利要求
1.新城疫病毒感染性基因組的用途,其特征在于新城疫病毒感染性基因組在制備治療新城疫藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開新城疫病毒感染性基因組的一種新的用途,是在制備治療新城疫藥物中的應用。以新城疫病毒感染性基因組制備的藥物進入機體之后,利用匹配的酶系統(tǒng),可以指導合成和包裝成具有感染性基因組序列特異性的完整病毒粒子,誘導機體產(chǎn)生病毒特異的中和抗體。對新城疫疾病有積極的治療作用,有助于養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展,具有較高的經(jīng)濟效益和社會效益。
文檔編號A61P31/00GK1762498SQ20051004720
公開日2006年4月26日 申請日期2005年9月12日 優(yōu)先權日2005年9月12日
發(fā)明者江國托 申請人:大連三儀動物藥品有限公司