專利名稱：醒腦靜凍干粉針劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有“清熱瀉火、涼血解毒、開竅醒腦”功效的醒腦靜凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于它含有如下成分麝香、冰片、姜黃揮發(fā)油、姜黃素、梔子總甙，與市售的醒腦靜注射劑相比，具有功效成分明確，質(zhì)量可控，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
背景技術(shù)：
醒腦靜注射液是由麝香、冰片、梔子、郁金4味中藥提取精制而成的一種新型中藥制劑。它是由傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)名方-安宮牛黃丸經(jīng)減味而成，具有醒神止痙，清熱涼血，行氣活血，介毒止痛的作用。臨床用于治療腦血管意外，乙型腦炎，肺性腦病，心絞痛，酒精或藥物中毒療效較好。由于其療效確切，目前已被衛(wèi)生部確定為臨床急救常用中成藥品之一。
郁金含揮發(fā)油4.05-6.1％，含姜黃素0.3％，初步研究表明，姜黃屬中藥的活性成分還具有明確的抗血栓生成作用。姜黃色素是郁金的主要活性成分，屬二苯基庚烴類物質(zhì)，其中主要含有酚性色素單體，名為姜黃素、脫甲氧基姜黃素和雙脫甲氧基姜黃素。
姜黃素具有多種藥理作用，包括抗炎、抗氧化、抗凝、降血脂及抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤作用。這些藥理活性已經(jīng)在動物和人體實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，醒腦靜注射液采用的工藝僅將郁金用水蒸氣蒸餾，姜黃素幾乎完全損失。
梔子為茜草科植物梔子GardeniajasmionidesEills的干燥成熟果實(shí)，性味苦寒，入心、肝、肺、胃、三焦，具有瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒，消腫止痛之功效。梔子的化學(xué)成分復(fù)雜，其中含有11種環(huán)烯醚萜苷類化合物，包括梔子苷、羥異梔子苷、京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷酸、京尼平等。梔子苷是主要的環(huán)烯醚萜苷化合物，是梔子的重要有效成分。醒腦靜注射液采用的工藝僅將梔子用水蒸氣蒸餾，梔子苷幾乎完全損失。
冰片主要含有龍腦、異龍腦、樟腦等成分有改善血腦屏障通透性的作用。
麝香是鹿科動物林麝、馬麝和原麝成熟雄體香囊分泌物的干燥品。麝香是盛譽(yù)國內(nèi)外的特產(chǎn)珍貴中藥材和香料，療效顯著，香氣芳烈，在我國已有兩千多年的應(yīng)用歷史?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》列為上品，《本草綱目》列于獸部第五十一卷，歷代醫(yī)藥文獻(xiàn)均有記載。《中華人民共和國藥典》第一部收載。麝香具有開竅、醒神、活血通絡(luò)、消腫止痛之功效，主治熱病神昏、中風(fēng)痰厥、氣郁暴厥、中惡昏迷、經(jīng)閉、心腹暴痛、癰腫瘰疬、痹痛麻木，療一切虛損惡病。現(xiàn)代研究表明，麝香對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心腦血管系統(tǒng)等均有顯著地影響。
醒腦靜注射液的制備方法為麝香7.5g、冰片1.0g、郁金30g、梔子30g，取郁金、梔子加水約1500ml進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液1000ml；將麝香加入上述蒸餾液中，并加蒸餾水250ml進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液1000ml，備用；取冰片，加入8g聚山梨酯80，研勻，加入蒸餾液中，混勻，加入注射用氯化鈉8g，攪拌使溶解，混勻，放置，冷藏過夜，濾過，灌封，滅菌，既得。

發(fā)明內(nèi)容
隨著中藥有效成分研究的深入，發(fā)現(xiàn)醒腦靜注射液采用的工藝存在嚴(yán)重的缺陷，本發(fā)明經(jīng)過工藝優(yōu)選，選用了最佳的提取方法，將有效成分盡可能提取完全，與傳統(tǒng)的醒腦靜注射劑相比，具有功效成分明確，質(zhì)量可控，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
用本發(fā)明的的制備方法制得的凍干粉針劑，含有如下成分麝香、冰片、姜黃揮發(fā)油、姜黃素、梔子總甙，重量比例為麝香5.0～15.0、冰片1.0～2.0、姜黃揮發(fā)油1.0～3.0、姜黃素0.05～0.25、梔子總甙0.5～3.0。
醒腦靜凍干粉針制備方法包括有效部位的提取和包合物的制備兩個主要步驟姜黃揮發(fā)油和姜黃素的提取步驟為a.將郁金粉碎成粗粉(過20目篩)，用0.5～2.0倍50～90％的乙醇浸潤0.5～2.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡4h～8h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。
b.減壓回收乙醇，得姜黃素粗提物。
c.將粗提物放入超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中，用萃取壓力7～50Mpa，萃取溫度30～80℃的超臨界二氧化碳進(jìn)行萃取干燥，萃取時間為1～5hr。萃取出來的揮發(fā)油在分離釜中，在解析壓力1.5～8.0Mpa，解析溫度20～80℃下，解析時間1～5hr進(jìn)行收集，干燥后，獲得姜黃素粉末。
梔子總甙的提取步驟為a.取處方量的梔子粉碎成粗粉(過20目篩)，用1.0～4.0倍50～90％的乙醇浸潤0.5～2.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡4h～8h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。
b.減壓回收乙醇，濃縮液至無醇味，加入水分至藥材量的2～4倍，冷藏24～48小時，吸取上清液，下層濾過。
c.將所得濾液上樹脂柱層析，先用水洗脫，用液相檢測，待有梔子甙流出時，改用稀乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干既得梔子總甙。
包合物的制備先將麝香溶于適量沸乙醇溶液中，依次按比例加入姜黃揮發(fā)油、姜黃素以及冰片，完全溶解后，微孔濾膜過濾備用。
取包合物敷料(環(huán)糊精及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、泊洛沙姆以及磷脂中的一種或兩種以上)加適量水溶解，于40～60℃邊攪拌邊加入上述備用乙醇液，加完后，繼續(xù)攪拌至無醇味，溶液澄明；處方量的梔子總甙用適量水溶解，兩者混合均勻，除菌過濾，灌裝，冷凍干燥，封口既得本發(fā)明的凍干粉針。
實(shí)施例1郁金揮發(fā)油和姜黃素的提取a.將郁金3kg粉碎成粗粉(過20目篩)，用1.0倍70％的乙醇浸潤1.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡6h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。
b.減壓回收乙醇，得姜黃素粗提物。
c.將粗提物放入超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中，用萃取壓力30Mpa，萃取溫度60℃的超臨界二氧化碳進(jìn)行萃取，萃取時間為1～5hr。萃取出來的揮發(fā)油在分離釜中，在解析壓力16.0Mpa，解析溫度60℃下，解析時間5hr進(jìn)行收集，得郁金揮發(fā)油120ml，其它萃取物干燥后，獲得姜黃素粉末9g。
實(shí)施例2梔子總甙的提取a.取3kg的梔子粉碎成粗粉(過20目篩)，用2.0倍70％的乙醇浸潤2.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡4h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。
b.減壓回收乙醇，濃縮液至無醇味，加入水分至藥材量的4倍，冷藏24～48小時，吸取上清液，下層濾過。
c.將所得濾液上樹脂柱層析，先用水洗脫，用液相檢測，待有梔子甙流出時，改用50％稀乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干既得梔子總甙150g。
實(shí)施例3包合物及凍干粉針的制備先將麝香750g溶于1000ml沸乙醇溶液中，依次按比例加入姜黃揮發(fā)油、姜黃素以及100g冰片，完全溶解后，微孔濾膜過濾備用。
取7.5kg羥丙基β環(huán)糊精和0.375kg卵磷脂加22.5L水溶解，于50℃邊攪拌邊加入上述備用乙醇液，加完后，繼續(xù)攪拌至無醇味，溶液澄明；將梔子總甙150.0g用7.5L注射用水溶解，兩者混合均勻，除菌過濾，灌裝，冷凍干燥，壓蓋既得本發(fā)明的凍干粉針。
醒腦靜凍干粉針劑與水針穩(wěn)定性考察醒腦靜凍干粉針劑及未經(jīng)凍干的注射液，用加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方法考察比較兩者的穩(wěn)定性，條件溫度40℃，相對濕度75％，時間三個月，每隔一個月抽樣檢測一次。結(jié)果見下表

醒腦靜凍干粉針劑的穩(wěn)定性(色澤、澄明度、PH值)優(yōu)于水針，穩(wěn)定性好，可延長有效期，提高療效，減少對人體的刺激，便于運(yùn)輸和儲存，具有較大的實(shí)施價值。
取上述醒腦靜凍干粉針劑按《中國藥典》規(guī)定的方法進(jìn)行安全試驗(yàn)，熱源檢查，無菌檢查，結(jié)果均符合規(guī)定。
本發(fā)明的醒腦靜凍干粉針劑，經(jīng)檢測，各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定，與醒腦靜水針的制備方法相比具有質(zhì)量可控、有效成分基本清楚，符合現(xiàn)代中藥制劑的要求。
醒腦靜凍干粉針劑中各主要成分的含量測定方法取醒腦靜凍干粉針劑10mg，用甲醇稀釋至含固形物0.2mg/ml的溶液，作為供試品溶液，進(jìn)樣量20μL。
1、麝香酮的含量測定方法1.1色譜條件C18反相柱(10μm)46mm×150mm，流動相乙腈水(90∶10)，流速0.8mL·min-1，檢測波長254nm，靈敏度0.1AUFS1.2衍生物的制備取2，4二硝基苯肼1g，加入無水乙醇15mL、醋酸乙酯15mL和濃鹽酸1mL，加熱至澄清。稱取麝香酮100mg，加入上述2，4二硝基苯肼鹽酸溶液5mL，于60℃水浴加熱30min，抽去溶劑，用乙醇重結(jié)晶兩次，得2，4二硝基苯腙衍生物標(biāo)準(zhǔn)品。
1.3對照品溶液的制備精密稱取2，4二硝基苯腙衍生物標(biāo)準(zhǔn)品0.01026g置10mL量瓶中，加乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻。2.1.4供試品溶液制備精密移取醒腦靜注射液20mL，置于分液漏斗中，用石油醚20mL分4次提取，合并提取液，較低溫度下自然揮干，向揮干后的殘?jiān)屑尤脒^量的2，4二硝基苯肼鹽酸溶液1.0mL，水浴60℃加熱30min，至反應(yīng)完全后，抽干溶劑，將殘?jiān)苡?0mL乙腈中即得。
2、梔子甙的含量測定方法2.1色譜條件C18反相柱(10μm)46mm×150mm，流動相乙腈01％磷酸(13∶87)，流速1.0ml/min，λs＝230nm，柱溫30℃，柱壓6860kPa，檢測靈敏度01AUFS。
2.2對照品溶液的制備分別取干燥至恒重的梔子甙約2mg，精密稱定，同置10ml容量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，使成含梔子甙0.196mg/ml。
3、冰片的含量測定3.1色譜條件PEG 20MChromosorb WHP2m×2m(ID)不銹鋼柱，氫火焰檢測器，柱溫140℃，汽化室溫度210℃，檢測室溫度200℃，進(jìn)樣量1μL，載氣氮?dú)?0mL·min-1；燃?xì)鈿錃?0mL·min-1；助燃?xì)饪諝?00mL·min-1。
3.2制備內(nèi)標(biāo)溶液精密稱取內(nèi)標(biāo)萘50mg，置于25mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即成為內(nèi)標(biāo)溶液。
3.3制備標(biāo)準(zhǔn)品溶液精密稱取冰片對照品37.5mg，置于25mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即成為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
權(quán)利要求
1.一種具有“清熱瀉火、涼血解毒、開竅醒腦”功效的醒腦靜凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于它含有如下成分麝香、冰片、姜黃揮發(fā)油、姜黃素和梔子總甙。各成分的重量比為5.0～15.0∶1.0～2.0∶1.0～3.0∶0.05～0.25∶0.5～3.0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中的姜黃揮發(fā)油和姜黃素，提取方法為a.將郁金粉碎成粗粉，用0.5～2.0倍50～90％的乙醇浸潤0.5～2.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡4h～8h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。b.減壓回收乙醇，得姜黃素粗提物。c.將粗提物放入超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中，用萃取壓力7～50Mpa，萃取溫度30～80℃的超臨界二氧化碳進(jìn)行萃取，萃取時間為1～5hr。萃取出來的揮發(fā)油在分離釜中，在解析壓力1.5～8.0Mpa，解析溫度20～80℃下，解析時間1～5hr進(jìn)行收集，干燥后，獲得姜黃素粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中的梔子總甙，提取方法為a.取處方量的梔子粉碎成粗粉，用1.0～4.0倍50～90％的乙醇浸潤0.5～2.0小時后，均勻地裝入滲漉器中，注入足量的乙醇，浸泡4h～8h后，開始進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，直至流出液接近無色為止。b.減壓回收乙醇，濃縮液至無醇味，加入水分至藥材量的2～4倍，冷藏24～48小時，吸取上清液，下層濾過。c.將所得濾液上樹脂柱層析，先用水洗脫，用液相檢測，待有梔子甙流出時，改用稀乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干既得梔子總甙。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中的姜黃揮發(fā)油、姜黃素、麝香以及冰片，按比例配制，用適量輔料制成包合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4中制得的包合物，按比例與梔子總甙水溶解混合，除菌過濾，冷凍干燥既得。
6.根據(jù)權(quán)利要求3中的樹脂，是指以苯乙烯為骨架的大孔樹脂，型號包括D101、AB-8、D301R、D296以及D396型。
7.根據(jù)權(quán)利要求4中用于制備包合物的輔料，包括環(huán)糊精及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、泊洛沙姆以及磷脂中的一種或兩種以上。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有“清熱瀉火、涼血解毒、開竅醒腦”功效的醒腦靜凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于它含有一定比例的如下成分麝香、冰片、姜黃揮發(fā)油、姜黃素和梔子總甙，與傳統(tǒng)的醒腦靜注射劑相比，具有功效成分明確，質(zhì)量可控，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A61P39/02GK1634454SQ200410091188
公開日2005年7月6日 申請日期2004年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月23日
發(fā)明者張文芳 申請人:張文芳