專利名稱：：注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法，屬于中藥制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。技術(shù)背景清開(kāi)靈制劑由我國(guó)傳統(tǒng)名貴中成藥"安宮牛黃丸"改劑而得，由膽酸、珍珠母、豬去氧膽酸、梔子、水牛角、板藍(lán)根、黃芩苷和金銀花共八味中藥材的提取物制成；具有清熱解毒、避穢通竅、鎮(zhèn)靜安神的功能，主治熱邪內(nèi)陷、神昏澹語(yǔ)、身熱煩躁、抽搐驚劂及小兒急驚風(fēng)等癥；現(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要用于治療上呼吸道感染、多種熱病和急性病等，取得了比較滿意的治療效果。其中"清開(kāi)靈注射液"、"清開(kāi)靈口服液"收載于中國(guó)藥典2005版一部。本申請(qǐng)人于2005年7月4日提交了申請(qǐng)?zhí)枮?00510003126.5的發(fā)明專利申請(qǐng)，公開(kāi)了一種清開(kāi)靈凍干粉制劑的制備方法，并已經(jīng)授權(quán)。隨后，申請(qǐng)人又于2005年8月29日提交了申請(qǐng)?zhí)枮?00510200500.O的發(fā)明專利申請(qǐng)，公開(kāi)了一種清開(kāi)靈制劑的制備方法，對(duì)前一專利進(jìn)行了改良，也已經(jīng)授權(quán)。申請(qǐng)人從注射用清開(kāi)靈(凍干粉針)上市以來(lái)就一直對(duì)該品種的質(zhì)量進(jìn)行跟蹤，不間斷地進(jìn)行工藝和質(zhì)量方面的研究。發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，原產(chǎn)品工藝中對(duì)金銀花藥材的提取純化不夠好，使得藥物有效成分含量偏低，雜質(zhì)量較多；水牛角用酸水解存在含氮量偏低的問(wèn)題；對(duì)板藍(lán)根等其他藥材的純化精制不夠理想；另外由于在實(shí)際生產(chǎn)中凍干時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使獲得的注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑存在樣品成型不太均勻，色澤較深、不溶性微粒數(shù)量較多等問(wèn)題，同時(shí)生產(chǎn)成本也相應(yīng)增加。因此，如何優(yōu)化生產(chǎn)工藝、提高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、提高和完善清開(kāi)靈凍干粉針劑的質(zhì)量，是申請(qǐng)人一直關(guān)注的問(wèn)題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是解決現(xiàn)有技術(shù)金銀花、水牛角、板藍(lán)根等原料藥的提取工藝以及清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備工藝中存在的問(wèn)題，提供一種雜質(zhì)含量更低、穩(wěn)定性更好、療效更佳的注射用清開(kāi)靈凍干粉針制劑的制備方法，大大減少藥物中的無(wú)效成份。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明優(yōu)選出了如下的技術(shù)方案本發(fā)明注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑是由膽酸1020g、黃芩苷550g、豬去氧膽酸1025g、梔子50500g、水牛角50500g、珍珠母50500g、板藍(lán)根5002000g和金銀花504000g制備而成，其制備方法為水牛角用堿水解得水解液；珍珠母粉碎后用硫酸溶液水解，水解液調(diào)pH至3.54.2，濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，力口純水，冷藏，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加水煎煮，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮，分別加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水，冷藏，過(guò)濾，加入活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加乙醇回流提取，過(guò)濾，提取液回收乙醇，加純水，冷藏，過(guò)濾，加活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)7080%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水，冷藏，過(guò)濾，得混合濾液；黃芩苷加注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值至6.88.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，加入活性炭，過(guò)濾，濃縮，加入無(wú)水乙醇，調(diào)pH為6.88.3，加注射用水，無(wú)菌過(guò)濾，灌裝，凍干，軋蓋，即得。具體的，注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法為水牛角用1.01.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解；珍珠母粉碎后用l.02.Omol/L的硫酸溶液水解，水解液混合后調(diào)pH至3.54.2，濃縮至相對(duì)密度l.101.30，加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加水煎煮13次，每次0.51.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至相對(duì)密度l.101.30，分別加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏，過(guò)濾，加入活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加6080%乙醇回流提取24次，每次8oiio分鐘，合并提取液，回收乙醇，力neio倍量純水冷藏，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，力Q610倍量純水冷藏，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，力口800ml純水冷藏，過(guò)濾，加活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加7080%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)7080%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏，過(guò)濾，得混合濾液；黃芩苷加注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值至6.88.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280330毫升，調(diào)pH為6.88.3，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按l.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，即得。進(jìn)一步的，該制備方法優(yōu)選為水牛角用814倍量1.01.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解68小時(shí)；珍珠母粉碎后用812倍量1.02.0mol/L的硫酸溶液水解68小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.54.2，濃縮至608(TC相對(duì)密度1.101.30，加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加812倍量水煎煮13次，每次0.51.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至608(TC相對(duì)密度1.101.30，分別加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，按O.51.Og/100ml濾液加入活性炭，微沸1020分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加812倍量70%乙醇回流提取24次，每次80110分鐘，合并提取液，回收乙醇，力Q610倍量純水冷藏2448h，過(guò)濾，濃縮至60-8(TC相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q610倍量純水冷藏2448h，過(guò)濾，濃縮至60-80。C相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，加800ml純水冷藏2448h，過(guò)濾，按O.40.6g/100ml濾液加活性炭，微沸1020分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加7080%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)7080%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加注射用水，用5。/。氫氧化鈉調(diào)pH值至6.88.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.30.8g/100ml濾液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280330毫升，調(diào)pH為6.88.3，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按l.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，即得。在本發(fā)明的凍干粉針劑中，可以加入輔料，也可以不加入輔料直接制備。針對(duì)本發(fā)明所述的制備方法，發(fā)明人進(jìn)行了大量的試驗(yàn)研究，具體如下實(shí)驗(yàn)一金銀花提取工藝實(shí)驗(yàn)研究1.1、提取溶劑選擇金銀花為方中重要有效成分之一，其提取方法的優(yōu)劣直接影響到產(chǎn)品的治療效果，因此，首先對(duì)藥材的提取溶劑及方法進(jìn)行研究。取金銀花(綠原酸含量2.57%)兩份，每份20g(綠原酸的含量為514mg)，分別用水回流提取和70%乙醇回流提取兩次，分別合并水提液和醇提液并定容至500mL，IO倍稀釋后用HPLC法測(cè)定綠原酸含量，水浴揮干提取液均得淡黃色固體，稱量，結(jié)果見(jiàn)下表l。表l金銀花7k提、醇提工藝比較<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，乙醇提取所得固體量少，而綠原酸相對(duì)含量高于水提取，故確定醇提工藝。1.2、乙醇提取工藝研究以綠原酸提取率為考察指標(biāo)。以不同濃度乙醇為溶劑，采用不同用量、不同提取次數(shù)、不同提取時(shí)間為條件，考察乙醇回流提取工藝。1.2.l乙醇濃度的考察樣品制備稱取金銀花10g，按表2所示濃度用10倍量的乙醇作溶劑，回流提取2次，合并提取液并定容至500mL，IO倍稀釋后用HPLC法測(cè)定綠原酸含量，計(jì)算提取率，結(jié)果見(jiàn)表2。表2乙醇濃度一綠原酸提取率<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由上表可知，乙醇濃度在6080%時(shí)綠原酸提取率較高，最佳提取濃度為70%。1.2.2溶劑用量的考察樣品制備稱取金銀花10g，按表3所示用量用70%乙醇作溶劑，回流提取2次，合并提取液并定容至500mL，IO倍稀釋后用HPLC法測(cè)定綠原酸含量，計(jì)算提取率，結(jié)果見(jiàn)表3。表3溶劑用量一綠原酸提取率表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由上表可知，溶劑用量在8-12倍時(shí)綠原酸提取率較高，最佳用量為10倍。1.2.3提取次數(shù)及時(shí)間的考察樣品制備稱取金銀花10g，用10倍量70%乙醇作溶劑，回流提取1一5次，每次提取時(shí)在60、80、90、110、120分鐘時(shí)分別取提取液，合并，用HPLC法測(cè)定綠原酸含量，計(jì)算提取率，結(jié)果見(jiàn)表4。表4提取次數(shù)、時(shí)間一綠原酸提取率表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由表4可知回流提取次數(shù)在2-5次，時(shí)間在80-120分鐘時(shí)提取效果較好，同時(shí)提取4次和5次、時(shí)間在110分鐘和120分鐘時(shí)綠原酸的提取率差別不大，考慮生產(chǎn)成本，確定提取范圍為提取2-4次，每次提取80-110分鐘。最佳參數(shù)為提取3次，每次90分鐘。1.3、純化精制研究藥材經(jīng)過(guò)提取后，在提取出有效成分的同時(shí)也提取出部分雜質(zhì)(樹(shù)脂、油脂、色素、蛋白、無(wú)機(jī)鹽等)，本發(fā)明研究人員為優(yōu)化純化工藝，采用不同的除雜方法，以選擇使有效成分高，雜質(zhì)含量少的最佳方法。1.3.1、精制方法選擇取經(jīng)上述方法提取的金銀花提取液，回收乙醇，分別采用如下方法進(jìn)行除雜①水醇交替除雜金銀花提取液，回收乙醇，加純水冷藏，過(guò)濾，濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)70-85%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水冷藏，過(guò)濾，濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)75-90%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水冷藏，過(guò)濾，得金銀花藥液，測(cè)定綠原酸含量和總固體收率；②醇沉除雜金銀花提取液，回收乙醇，加純水稀釋，濾過(guò)，濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)70-85%，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，得金銀花藥液，測(cè)定綠原酸含量和總固體收率；③水沉除雜金銀花提取液，回收乙醇，加純水冷藏，過(guò)濾，濃縮，得金銀花藥液，測(cè)定綠原酸含量和總固體收率；測(cè)定結(jié)果如表5:表5精制方法選擇方法①水醇交替除雜②醇沉除雜③水沉除雜綠原酸含量(mg/ml)11.619.218.79總固體收率(％)10.219.248.01由結(jié)果可知，采用水醇交替的方法除去雜ilg，綠原酸含量、總固體收率都較單純采用醇沉、水沉的方法好。1.3.2、工藝優(yōu)化采用梯度醇沉。設(shè)計(jì)不同醇沉梯度，醇沉、水沉?xí)r間和醇沉藥液相對(duì)密度，以綠原酸含量和總固物為考察指標(biāo)，對(duì)水醇交互沉淀方式的效果進(jìn)行考察，結(jié)果如表6所示。表6水醇交互沉淀結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表6可知，以綠原酸為考察指標(biāo)，醇沉梯度為75%-90%，醇沉、水沉?xí)r間為24-48小時(shí)，水沉定容量為6-8倍，醇沉藥液相對(duì)密度為1.05-1.25時(shí)，綠原酸的含量和總固體收率都較好，為了盡可能減少綠原酸損失，除雜效果最佳的條件為醇沉?xí)r藥液相對(duì)密度控制在1.05-1.25，醇沉梯度為75%85%，水沉定容量為8倍，水沉、醇沉?xí)r間為48小時(shí)。1.4、活性炭脫色處理金銀花液工藝研究經(jīng)醇沉水沉后的金銀花提取液顏色較深(深黃色)，發(fā)明人采取加活性炭的方法對(duì)其進(jìn)行脫色，設(shè)計(jì)對(duì)比試驗(yàn)考察活性炭加入量、加熱時(shí)間對(duì)脫色效果和對(duì)綠原酸含量的影響。1.4.l樣品制備按處方量稱取金銀花900g，按上面確定的工藝進(jìn)行提取、純化后平均分為9份，按表7進(jìn)行試驗(yàn)，過(guò)活性炭后每份濃縮至200ml，取樣測(cè)定綠原酸含量，計(jì)算綠原酸收率，觀察脫色效果。結(jié)果見(jiàn)表7。表7金銀花純化液過(guò)活性炭后結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>備注*表示藥液顏色，其中*深黃色；林黃色；***淺黃；**林*淡黃1.4.2結(jié)果分析從表7結(jié)果可知，活性炭加入到O.5g/100ml濾液以上，加熱時(shí)間15分鐘以上時(shí)脫色效果較好，但綠原酸含量也隨之減少，考慮綠原酸的收率，確定活性炭加入范圍為0.40.6g/100ml濾液，加熱脫色時(shí)間為10-20分鐘。最佳加入量為O.5%，加熱脫色時(shí)間為15分鐘，表明該工藝脫色效果較好，同時(shí)綠原酸收率較高，所以確定該參數(shù)為金銀花脫色最終工藝。實(shí)驗(yàn)2、水牛角、珍珠母水解工藝研究2.1、水牛角水解工藝研究2.1.l提取工藝考察水牛角主要含有蛋白質(zhì)、肽類、氨基酸、膽留醇、強(qiáng)心成分等。其中蛋白質(zhì)、肽類經(jīng)水解后能得多種氨基酸，由于水牛角中的蛋白質(zhì)屬角蛋白，較難溶于水，煎出率極低，因此分別采用酸水解和堿水解的方法，以含氮量為考察指標(biāo)，對(duì)兩種提取工藝進(jìn)行考察。酸水解法取水牛角125g，分別用2mol/L的硫酸溶液、2mol/L鹽酸溶液加熱至沸，攪拌并保持微沸7小時(shí)，濾液加l倍量注射用水稀釋，離心后上清液再過(guò)濾，水洗沉淀物，水洗液與上清液合并后備用，供檢測(cè)。堿水解法取水牛角125g，分別用2mo1/1氫氧化鋇溶液、2mol/l氫氧化鈉溶液加熱至沸，攪拌并保持微沸7小時(shí)，濾液加l倍量注射用水稀釋，離心后上清液再過(guò)濾，水洗沉淀物，水洗液與上清液合并后備用，取藥液照中國(guó)藥典一部附錄氮測(cè)定法測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表8:表8水牛角不同溶劑水解比較表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>結(jié)果分析從表8可失口，水牛角用堿水解較酸水解完全，水解液含氮量較高，所以按堿水解對(duì)工藝進(jìn)行研究，其中氫氧化鋇水解比氫氧化鈉水解含氮量高，故選擇最佳堿水解液為氫氧化鋇溶液。2.1.2提取參數(shù)確定以含氮量為參考指標(biāo)，考察堿濃度、堿液液體積、水解時(shí)間對(duì)氮收率的影響，優(yōu)化堿水解提取水牛角中氨基酸工藝的條件。取水牛角25g，按表9說(shuō)述的量用氫氧化鋇水解，水解液離心濾過(guò)，用純水稀釋。取樣品照中國(guó)藥典一部附錄氮測(cè)定法測(cè)定稀釋后藥液含氮量，結(jié)果見(jiàn)表9:表9不同工藝提取的水牛角藥液含氮量<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>結(jié)果表明，氫氧化鋇濃度為l-1.5mol/L、體積為8-l刮'咅、水解時(shí)間為6-8小時(shí)時(shí)，含氮量均較高，最佳參數(shù)為加入Ba(0H)濃度為1.2mol/L，酸液體積為水牛角量的ll倍，水解時(shí)間為7小時(shí)。2.2、珍珠母水解工藝研究以含氮量為參考指標(biāo)，考察酸濃度、酸液體積、水解時(shí)間對(duì)含氮量的影響。取珍珠母粉(過(guò)80目篩)50g，加入規(guī)定倍數(shù)體積及濃度的硫酸液，加熱水解，過(guò)濾，中和濃縮，離心過(guò)濾后得珍珠母水解液，濃縮。取樣品，蒸干，中國(guó)藥典一部附錄照氮測(cè)定法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表10:表10不同工藝提取的珍珠母藥液的含氮量方法硫酸濃度(mol/L)硫酸體積(倍)水解時(shí)間(小時(shí))含氮量(mg/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>珍珠母主要成分為碳酸鈣、氨基酸及微量元素。因硫酸揮發(fā)性小，且硫酸在水解后，可以和珍珠母中的碳酸鈣中和，生成沉淀，易經(jīng)分離而除去，故采用硫酸水解。結(jié)果表明，硫酸濃度為l-2mol/L、體積為8-12倍、水解時(shí)間為6-8小時(shí)時(shí)，含氮量均較高，最佳參數(shù)為加入硫酸濃度為1.5mol/L，酸液體積為水牛角量的10倍，水解時(shí)間為7小時(shí)。2.3、水解液醇沉及水沉工藝研究2.3.1醇沉工藝研究水解液在醇沉?xí)r影響醇沉效果的因素為藥液pH值、藥液相對(duì)密度、醇濃度、醇沉?xí)r間。為更好的控制生產(chǎn)，使工藝更加穩(wěn)定可行，以含氮量和總固體含量為考察指標(biāo)，設(shè)定不同試驗(yàn)參數(shù)對(duì)醇沉?xí)r間和醇沉藥液pH值進(jìn)行考察，篩選最佳醇沉條件。樣品制備稱取水牛角粉750g、珍珠母粉1500g各l份，按本發(fā)明水解步驟工藝分別進(jìn)行水解得樣品6份，調(diào)節(jié)不同pH值，每份濃縮后分成兩份，醇沉，回收乙醇，濃縮。取樣品照中國(guó)藥典測(cè)定含氮量及總固體含量。結(jié)果見(jiàn)表ll:表ll水解液醇沉工藝研究試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>從以上試驗(yàn)結(jié)果可知，pH值越高則含氮量越高，但總固體含量也相應(yīng)增加，醇沉?xí)r間越長(zhǎng)則總固體越少，同時(shí)含氮量無(wú)明顯減少，故選擇醇沉pH值為3.5-4.2，存放時(shí)間為24-48h，其中醇沉pH值為3.8-4.0，存放時(shí)間為48h為最佳醇沉工藝。2.3.2水解液水沉工藝研究試驗(yàn)為了去除水解液中水不溶性雜質(zhì)，本發(fā)明人采取水沉方式對(duì)水解液進(jìn)行純化處理，影響水沉效果的主要因素是存放時(shí)間。采用醇沉驗(yàn)證試驗(yàn)的樣品做該試驗(yàn)研究。結(jié)果見(jiàn)表12:表12水解液水沉工藝研究試驗(yàn)結(jié)果方法水沉?xí)r間(h)總含氮量(g)總固體量(g)1248.645.522488.575.183728.124.11從以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析可知，水沉?xí)r間越長(zhǎng)則總固體量越少，即除雜效果越好，但氮含量也有逐漸遞減的趨勢(shì)，所以，為了穩(wěn)定含氮量和節(jié)約工時(shí)，確定水沉?xí)r間范圍為24-48小時(shí)，最佳時(shí)間為48小時(shí)。實(shí)驗(yàn)3、板藍(lán)根、梔子工藝研究本發(fā)明人在原清開(kāi)靈凍干制劑板藍(lán)根、梔子工藝的基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究，細(xì)化提取工藝參數(shù)，并對(duì)板藍(lán)根、梔子藥材采用醇沉、水沉和活性炭過(guò)濾的多極方法進(jìn)行純化，優(yōu)化了產(chǎn)品工藝。3.l水煎煮工藝研究3.l.l加水量考察稱取板藍(lán)根藥材100g，梔子62.5g，按表14加水量分別煎煮2次，每次1小時(shí)，取樣測(cè)定含氮量、梔子苷含量，總固體含量，計(jì)算總固體得率。考察加水量對(duì)煎煮工藝的影響。結(jié)果如表14:表14加水量考察<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>結(jié)果表明，在煎煮次數(shù)不變條件下，加水量越多則板藍(lán)根煎煮液含氮量和總固體量、梔子苷含量和梔子提取液總固體相應(yīng)增加，為了提高含氮量和梔子苷收率及減少雜質(zhì)的帶入，選擇加水量為S-12倍，最佳加水量為藥材l0倍。3.1.2煎煮次數(shù)和時(shí)間考察稱取板藍(lán)根藥材100g，梔子62.5g，加10倍量水，按表15時(shí)間分別煎煮2次，取樣測(cè)定，考察煎煮時(shí)間對(duì)工藝的影響。結(jié)果如表15:表15煎煮時(shí)間考察<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>稱取板藍(lán)根藥材100g，梔子62.5g，加10倍量水，按表16次數(shù)分別煎煮1小時(shí)，取樣測(cè)定，考察煎煮時(shí)間對(duì)工藝的影響。結(jié)果如下表16煎煮次數(shù)考察<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結(jié)果表明，選擇煎煮l-3次，每次時(shí)間為0.5-1.5小時(shí)，藥材有效成分提取較好，最佳煎煮工藝為加10倍量水，煎煮2次，每次1小時(shí)。3.2煎煮液醇沉工藝研究原工藝中明確了醇沉?xí)r乙醇濃度、藥液相對(duì)密度，本發(fā)明人對(duì)醇沉?xí)r間進(jìn)行考察，以含氮量、梔子苷含量和總固體量為考察指標(biāo)，確定最佳醇沉?xí)r間。取板藍(lán)根藥材3000g，梔子藥材375g，按以上確定工藝分別煎煮，藥液分別濃縮至相對(duì)密度1.2Q(70°C)，加入乙醇使含醇量為60%，平均分成6份，按照表17試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行試驗(yàn)，回收乙醇，板藍(lán)根液濃縮至500ml，梔子液濃縮至100ml，取樣測(cè)定含量和總固體。表17板藍(lán)根煎煮液醇沉試驗(yàn)結(jié)果(n=2)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果表明，醇沉?xí)r間越長(zhǎng)則雜質(zhì)去除越多，但含氮量和梔子苷含量有所減少，醇沉48小時(shí)和60小時(shí)的含量幾乎接近，為了確保含氮量不大量流失的情況下盡量去除雜質(zhì)，同時(shí)從省時(shí)考慮，我們確定醇沉?xí)r間定為24-48小時(shí)，最佳醇沉?xí)r間為48小時(shí)。3.3醇沉液水沉工藝研究發(fā)明人在研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，板藍(lán)根、梔子提取液醇沉之后，再采取水沉方式對(duì)醇沉液進(jìn)行純化處理，得到的總固體量明顯低于醇沉液，說(shuō)明除雜效果好。對(duì)比研究如下取板藍(lán)根藥材3000g，梔子藥材375g，按以上確定工藝分別進(jìn)行煎煮，醇沉，回收乙醇，加純水冷藏24-48小時(shí)，水沉后濾過(guò)，板藍(lán)根液濃縮或稀釋至500ml，梔子液濃縮或稀釋至100ml，取樣測(cè)定含氮量、梔子苷量和總固體，結(jié)果如表18。表18純化對(duì)比研究結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果表明，提Jf又液醇沉后加入水沉步驟，有纟問(wèn)于藥物有效成分的提取。3.4活性炭對(duì)板藍(lán)根、梔子水沉液除雜試驗(yàn)研究為了進(jìn)一步去除藥液中雜質(zhì)，我們采取活性炭吸附方式對(duì)藥液進(jìn)行精制，以含氮量、梔子苷含量及總固體收率為考察指標(biāo)，設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇最好吸附工藝，確定最終工藝參數(shù)。取板藍(lán)根藥材3000g，梔子藥材375g，按以上確定工藝分別煎煮，醇沉，水沉后藥液平均分成6份，加入相應(yīng)活性炭量微沸15分鐘，過(guò)濾后板藍(lán)根液濃縮至500ml，梔子液濃縮至100ml，取樣測(cè)定含量和總固體，結(jié)果見(jiàn)表19。表19活性炭加入量選擇試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結(jié)果表明，在溶液量加活性炭O.5lg/100ml濾液，除雜效果較好且對(duì)含測(cè)指標(biāo)成份影響甚微。實(shí)驗(yàn)4、膽酸、豬去氧膽酸溶解試驗(yàn)研究稱取膽酸、豬去氧膽酸lg，分別加注射用水、75%乙醇、70%氯仿進(jìn)行溶解，以溶液的澄清度、含量為指標(biāo)，考査溶劑選擇。表20溶劑選擇<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>由表20可知，采用75%乙醇溶解膽酸、豬去氧膽酸藥材，藥液澄清，溶解更完全。實(shí)驗(yàn)5、凍干制劑配料工藝研究5.l醇沉研究本發(fā)明人在大生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)如果在配料時(shí)增加醇沉水沉和加入活性炭處理后，藥液顏色、凍干后不溶性微粒、可見(jiàn)異物有一定程度改善，且對(duì)含測(cè)指標(biāo)的影響較小，具體對(duì)照結(jié)果見(jiàn)表21:表21配料工藝對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結(jié)果可見(jiàn)，配料經(jīng)醇沉水沉后含量不受影響而整體質(zhì)量較好。5.2凍干時(shí)間發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在配液后加入280-330ml無(wú)水乙醇(技術(shù)方案中的各原料用:為準(zhǔn))則凍干時(shí)間將近縮短一半，具體研究數(shù)據(jù)見(jiàn)表22:表22凍干時(shí)間研究數(shù)據(jù)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>結(jié)果表明，加入280-330ml無(wú)水乙醇，凍干35小時(shí)左右凍干粉成型飽滿、色澤均勻、水分及溶解后澄清度等均較好，時(shí)間越長(zhǎng)水分越低，但干燥后搖即松散，成型性不好，表明加入無(wú)水乙醇凍干時(shí)間可縮短一半，節(jié)約了生產(chǎn)成本，效果更佳。實(shí)驗(yàn)6、質(zhì)量對(duì)比研究本發(fā)明人針對(duì)對(duì)工藝的改進(jìn)，對(duì)變更前后的藥品質(zhì)量做了全面的比較研究。6.l試驗(yàn)藥品本發(fā)明所述方法制備的清開(kāi)靈凍干粉針劑；市售注射用清開(kāi)靈(凍干)。6.2試驗(yàn)內(nèi)容成品外觀、pH值、不溶性微粒、含量、凍干時(shí)間等比較考察。6.3方法及結(jié)果將本發(fā)明產(chǎn)品與市售產(chǎn)品各取3份，按照已有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果見(jiàn)表22:表22本發(fā)明工藝與市售產(chǎn)品工藝比較結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>由表22可以看出，除pH值無(wú)大的區(qū)別外，本發(fā)明清開(kāi)靈凍干粉針劑在含測(cè)指標(biāo)上均有提高，同時(shí)成品外觀和不溶性微粒有較大改善，凍干時(shí)間相應(yīng)減少，表明制備工藝路線設(shè)計(jì)合理，工藝生產(chǎn)條件符合工廠生產(chǎn)要求，成品質(zhì)量可控。實(shí)驗(yàn)7、本發(fā)明制劑對(duì)家兔感染性發(fā)熱的退熱作用7.l材料7.l.l動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭大耳白兔56只，體重1.8-2.2kg，雌雄各半。7.1.2藥物本發(fā)明所述方法制備的注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑；市售注射用清開(kāi)靈(凍干)。7.2方法與結(jié)果7.2.l方法取新西蘭大耳白兔隨機(jī)分為7組，每組8只。禁食不禁水12小時(shí)，在19-21'C室溫下固定家兔，連續(xù)測(cè)兩次肛溫(實(shí)驗(yàn)前均經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)校正)，每次隔30min，求平均值為正常體溫。體溫確定后，各組家兔按1.0mg/kg靜注傷寒副傷寒甲乙三聯(lián)菌液。60min時(shí)按上述方法測(cè)定致熱后體溫變化。然后，一組灌服常水作為陰性對(duì)照組，三組分別肌內(nèi)注射不同劑量的清開(kāi)靈凍干粉針劑，余三組分別肌內(nèi)注射不同劑量的市售注射用清開(kāi)靈(凍干)。給藥后依次測(cè)定30、60、120、180、240和300min時(shí)的體溫，并將各組家兔的正常體溫與改組動(dòng)物致熱后給藥前的體溫進(jìn)行對(duì)比，觀察正常體溫與致熱后體溫的變化，同時(shí)將給藥動(dòng)物組體溫與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比，分別比較致熱后的體溫變化。結(jié)果見(jiàn)表23。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>備注給藥前致熱后lh與正常體溫比較P〈0.01;給藥后lh與給藥前致熱后體溫比較P〈0.01;各給藥組給藥后lh與對(duì)照組相應(yīng)點(diǎn)的體溫比較AP〈0.01。7.2.2結(jié)果以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，家兔被靜注三聯(lián)菌液l小時(shí)后，產(chǎn)生致熱效應(yīng)，體溫明顯升高。與致熱前比較具有顯著性差異(P<0.01)。本發(fā)明注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑可明顯降低致熱動(dòng)物體溫。本發(fā)明制劑組與市售注射用清開(kāi)靈(凍干)組同對(duì)照組相應(yīng)點(diǎn)的體溫比較，差異有非常顯著性(P<0.01)，說(shuō)明在臨床用量相同的情況下，本發(fā)明制劑組與市售復(fù)方斑蝥膠囊的療效相同，均對(duì)感染性高熱有良好治療效果。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明以現(xiàn)有清開(kāi)靈制劑的制備工藝為基礎(chǔ)，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)方法，將傳統(tǒng)中藥與先進(jìn)的制劑工藝相結(jié)合，使得藥材中的有效成分得到了充分提取，利用交替沉淀和多極除雜的方法純化提取液，使得其有效成分含量有明顯提高，同時(shí)在制劑工藝中采用多極過(guò)濾的方法除雜，加入無(wú)水乙醇以縮短產(chǎn)品冷凍干燥的時(shí)間，這樣大大降低了生產(chǎn)成本，優(yōu)化了產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，使工藝更加精煉、有效，不溶性微粒、可見(jiàn)異物檢査都有較大改善，提高了藥物的生物利用度和穩(wěn)定性。本發(fā)明所提供的清開(kāi)靈凍干粉制劑具有質(zhì)地疏松、成型性好、含水量低、穩(wěn)定性好、不溶性微粒數(shù)量減少、外觀色澤優(yōu)良、便于貯存等特點(diǎn)，可有效確保該制劑的臨床療效。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:膽酸llg、珍珠母175g、豬去氧膽酸13g、梔子87g、水牛角87g、板藍(lán)根700g、黃芩苷17g、金銀花70g水牛角用IO倍量I.0mol/L氫氧化鋇溶液水解7小時(shí)；珍珠母粉碎后用10倍量1.Omol/L的硫酸水解，調(diào)水解液pH至4.0，濃縮至相對(duì)密度1.10，加乙醇使含醇量達(dá)50%，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，得水解液，冷藏備用。板藍(lán)根、梔子分別加IO倍量水煎煮O.5小時(shí)，板藍(lán)根煎煮液與梔子煎煮液分別濃縮至相對(duì)密度l.10，分別加乙醇使含醇量達(dá)50%，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，分別加入5g活性炭，微沸15分鐘，趁熱過(guò)濾，分別得板藍(lán)根液與梔子液，冷藏備用。金銀花加60%乙醇回流提取2次，每次80分鐘，合并提取液，回收乙醇，力Q6倍量純水冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，力Q6倍量純水冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏48小時(shí)，過(guò)濾，按0.5g/100ml溶液的量活性炭，微沸15分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用。另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，力卩70%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加適量注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值(pH=6.88.0)使溶解，與金銀花過(guò)濾液混勻，并入上述混合濾液，混勻，按100ml混合濾液加入0.5g活性炭的量加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280毫升(用適量注射用水稀釋)，調(diào)pH=6.88.3，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按l.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例2:膽酸22g、珍珠母325g、豬去氧膽酸25g、梔子163g、水牛角163g、板藍(lán)根謹(jǐn)g、黃芩苷33g、金銀花130g水牛角用8倍量1.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解6小時(shí)；珍珠母粉碎后用8倍量2.0mol/L的硫酸溶液水解8小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.54.2，濃縮至608(TC相對(duì)密度1.30，加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏24h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加10倍量水煎煮3次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至608(TC相對(duì)密度1.30，分別加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏24h，過(guò)濾，加入8g活性炭，微沸10分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加8倍量60%乙醇回流提取4次，每次110分鐘，合并提取液，回收乙醇，加10倍量純水冷藏24h，過(guò)濾，濃縮至60-8(TC相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)90%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加10倍量純水冷藏48h，過(guò)濾，濃縮至60-8(TC相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)90%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏2448h，過(guò)濾，按O.4g/100ml溶液的量加活性炭，微沸20分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，力陽(yáng)0%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)80%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加注射用水，用5。/。氫氧化鈉調(diào)pH值至6.88.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.8g/100ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇330毫升，調(diào)pH為6.88.3，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例3:膽酸16.25g、珍珠母250g、豬去氧膽酸18.75g、梔子125g、水牛角125g、板藍(lán)根1000g、黃芩苷25g、金銀花100g水牛角用12倍量1.2mol/L的氫氧化鋇溶液水解7小時(shí)；珍珠母粉碎后用IO倍量I.5mol/L的硫酸溶液水解7小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.84.0，濃縮至7(TC相對(duì)密度1.20，加乙醇使含醇量達(dá)60%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加10倍量水煎煮2次，每次1.0小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至7(TC相對(duì)密度1.20，分別加乙醇使含醇量達(dá)60%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，加入8g活性炭，微沸15分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加10倍量70%乙醇回流提取3次，每次90分鐘，合并提取液，回收乙醇，力陽(yáng)倍量純水冷藏48h，過(guò)濾，濃縮至7(TC相對(duì)密度1.101.20，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，力陽(yáng)倍量純水冷藏48h，過(guò)濾，濃縮至7(TC相對(duì)密度1.101.20，加乙醇使含醇量達(dá)85%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏48h，過(guò)濾，按0.5g/ml溶液加入活性炭，微沸15分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，力卩75%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加適量注射用水，用5。/。氫氧化鈉調(diào)pH值至7.07.5，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.5g/ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇300毫升(用適量注射用水稀釋)，調(diào)pH為7.08.0，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例4:膽酸13.8g、珍珠母212.5g、豬去氧膽酸15.9g、梔子106.2g、水牛角106.2g、板藍(lán)根850g、黃芩苷21.2g、金銀花85g水牛角用8倍量1.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解6小時(shí)；珍珠母粉碎后用8倍量1.Omol/L的硫酸溶液水解6小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.5，濃縮至6(TC相對(duì)密度1.10，加乙醇使含醇量達(dá)50%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏24h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加8倍量水煎煮3次，每次0.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至6(TC相對(duì)密度1.10，分別加乙醇使含醇量達(dá)50%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏24h，過(guò)濾，加入10g活性炭，微沸10分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加8倍量60%乙醇回流提取2次，每次80分鐘，合并提取液，回收乙醇，加6倍量純水冷藏24h，過(guò)濾，濃縮至6(TC相對(duì)密度1.05，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q6倍量純水冷藏24h，過(guò)濾，濃縮至6(TC相對(duì)密度1.25，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏24h，過(guò)濾，按O.4g/100ml溶液加入活性炭，微沸20分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加70%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏24h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加注射用水，用5。/。氫氧化鈉調(diào)pH值至6.8，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.3g/100ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280毫升(用適量注射用水稀釋)，調(diào)pH為6.8，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例5:膽酸19.5g、珍珠母300g、豬去氧膽酸22.5g、梔子150g、水牛角150g、板藍(lán)根1200g、黃芩苷30g、金銀花120g水牛角用8倍量1.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解6小時(shí)；珍珠母粉碎后用12倍量1.0mol/L的硫酸溶液水解8小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至4.0，濃縮至8(TC相對(duì)密度1.30，加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏30h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加12倍量水煎煮1次，煎煮1.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至8(TC相對(duì)密度1.30，分別加乙醇使含醇量達(dá)70%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏30h，過(guò)濾，加入10g活性炭，微沸15分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加12倍量70%乙醇回流提取2次，每次110分鐘，合并提取液，回收乙醇，加10倍量純水冷藏30h，過(guò)濾，濃縮至8(TC相對(duì)密度1.05，加乙醇使含醇量達(dá)90%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，加10倍量純水冷藏30h，過(guò)濾，濃縮至8(TC相對(duì)密度1.25，加乙醇使含醇量達(dá)90%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏30h，過(guò)濾，按O.6g/100ml溶液加活性炭，微沸10分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，力陽(yáng)0%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)80%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏30h，過(guò)濾，得混合濾液;將黃芩苷加注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值至7.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.8g/100ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280毫升(加適量注射用水溶解)，調(diào)pH為7.0，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例6:膽酸17.6g、珍珠母260g、豬去氧膽酸20g、梔子130g、水牛角130g、板藍(lán)根薩g、黃芩苷26.4g、金銀花104g水牛角用IO倍量I.3mol/L的氫氧化鋇溶液水解7.5小時(shí)；珍珠母粉碎后用9倍量1.8mol/L的硫酸溶液水解6.5小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.8，濃縮至7(TC相對(duì)密度1.20，加乙醇使含醇量達(dá)60%，冷藏35h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏30h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加11倍量水煎煮2次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至7(TC相對(duì)密度1.25，分別加乙醇使含醇量達(dá)60%，冷藏40h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏30h，過(guò)濾，加入8g活性炭，微沸12分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加9倍量65%乙醇回流提取3次，每次100分鐘，合并提取液，回收乙醇，力n7倍量純水冷藏45h，過(guò)濾，濃縮至6(TC相對(duì)密度1.20，加乙醇使含醇量達(dá)80%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q9倍量純水冷藏38h，過(guò)濾，濃縮至8(TC相對(duì)密度1.20，加乙醇使含醇量達(dá)80%，冷藏30h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q800ml純水冷藏30h，過(guò)濾，按O.5g/100ml溶液加活性炭，微沸18分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，力075%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏24h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值至8.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.6g/100ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇290毫升(用適量注射用水稀釋)，調(diào)pH為8.0，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。實(shí)施例7:膽酸14.6g、珍珠母225g、豬去氧膽酸16.9g、梔子112.5g、水牛角112.5g、板藍(lán)根900g、黃芩苷22.5g、金銀花90g以上八味藥，水牛角用12倍量1.2mol/L氫氧化鋇水解8小時(shí)；珍珠母粉用12倍量1.3mol/L的硫酸水解8小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.84.2，濃縮至相對(duì)密度l.20-1.30(65°C)，加乙醇使含醇量達(dá)65%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得水解液，冷藏備用。板藍(lán)根、梔子分別加12倍量水煎煮2次，每次1小時(shí)，板藍(lán)根提取液與梔子提取液分別濃縮至相對(duì)密度l.10-1.20(65°C)，分別加乙醇使含醇量達(dá)65%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，加入7g活性炭，微沸18分鐘，趁熱過(guò)濾，分別得板藍(lán)根液與梔子液，冷藏備用。金銀花加11倍量70%乙醇回流提取2次，每次90分鐘，合并提取液，回收乙醇，力Q9倍量純水冷藏48h，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度l.101.25(75°C)，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，力Q7倍量純水冷藏48h，過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.051.20(6(TC)，加乙醇使含醇量達(dá)85%，冷藏48h，過(guò)濾，回收乙醇，力n800ml純水冷藏48h，過(guò)濾，按O.5g/100ml溶液加活性炭，微沸14分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用。另取豬去氧膽酸與膽酸加75%乙醇溶解，加入上述水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)75%，冷藏48h，過(guò)濾、回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏48h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加適量注射用水，用5y。氫氧化鈉調(diào)pH值(pH=7.08.0)使溶解，與金銀花過(guò)濾液混勻，并入上述混合濾液，混勻，按O.4g/100ml溶液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇300毫升(用適量注射用水稀釋)，調(diào)pH=6.88.0，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，制成1000支，即得。用法與用量臨用前每支用注射用水5ml溶解。肌內(nèi)注射一日24ml。重癥患者靜脈滴注一日6支，加入l(F。葡萄糖注射液250ml或氯化鈉注射液100ml稀釋后使用，一日l(shuí)次。輸液速度注意滴速勿快，滴速以4060滴/分為宜。權(quán)利要求1.一種注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法，它是由膽酸10～20g、黃芩苷5～50g、豬去氧膽酸10～25g、梔子50～500g、水牛角50～500g、珍珠母50～500g、板藍(lán)根500～2000g和金銀花50～4000g制備而成，其特征在于水牛角用堿水解得水解液；珍珠母粉碎后用硫酸溶液水解，水解液調(diào)pH至3.5～4.2，濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)50～70％，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水，冷藏，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加水煎煮，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮，分別加乙醇使含醇量達(dá)50～70％，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水，冷藏，過(guò)濾，加入活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加乙醇回流提取，過(guò)濾，提取液回收乙醇，加純水，冷藏，過(guò)濾，加活性炭，微沸，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)70～80％，冷藏，過(guò)濾，回收乙醇，加純水，冷藏，過(guò)濾，得混合濾液；黃芩苷加注射用水，用氫氧化鈉調(diào)pH值至6.8～8.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，加入活性炭，過(guò)濾，濃縮，加入無(wú)水乙醇，調(diào)pH為6.8～8.3，加注射用水，無(wú)菌過(guò)濾，灌裝，凍干，軋蓋，即得。3按照權(quán)利要求2所述注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法，其特征在于水牛角用814倍量1.01.5mol/L的氫氧化鋇溶液水解68小時(shí)；珍珠母粉碎后用812倍量1.02.0mol/L的硫酸溶液水解68小時(shí)，水解液混合后調(diào)pH至3.54.2，濃縮至6080。C相對(duì)密度1.101.30，加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至1000毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，所得水解液冷藏備用；板藍(lán)根和梔子分別加812倍量水煎煮13次，每次O.51.5小時(shí)，過(guò)濾，所得煎煮液分別濃縮至608(TC相對(duì)密度1.101.30，分別加乙醇使含醇量達(dá)5070%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，分別加純水至1000毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，按O.51.0g/100ml濾液加入活性炭，微沸1020分鐘，趁熱過(guò)濾，所得板藍(lán)根液與梔子液冷藏備用；金銀花加812倍量70%乙醇回流提取24次，每次80110分鐘，合并提取液，回收乙醇，力n610倍量純水冷藏2448h，過(guò)濾，濃縮至60-80。C相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，力口610倍量純水冷藏2448h，過(guò)濾，濃縮至60-8(TC相對(duì)密度1.051.25，加乙醇使含醇量達(dá)7590%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，力陽(yáng)00ml純水冷藏2448h，過(guò)濾，按O.40.6g/100ml濾液加活性炭，微沸1020分鐘，趁熱過(guò)濾，得金銀花藥液備用；另取豬去氧膽酸和膽酸，粉碎，混合，加7080%乙醇溶解，加入水牛角水解液、珍珠母水解液、板藍(lán)根液和梔子液，加乙醇使含醇量達(dá)7080%，冷藏2448h，過(guò)濾，回收乙醇，加純水至IOOO毫升，冷藏2448h，過(guò)濾，得混合濾液；將黃芩苷加注射用水，用5。/。氫氧化鈉調(diào)pH值至6.88.0，使溶解，與金銀花藥液混勻，加入混合濾液，混勻，按O.30.8g/100ml濾液加入活性炭，過(guò)濾，濃縮至1000毫升，加入無(wú)水乙醇280330毫升，調(diào)pH為6.88.3，加注射用水至1500毫升，無(wú)菌過(guò)濾，按1.5毫升/支灌裝于滅菌西林瓶中，凍干，軋蓋，即得。全文摘要本發(fā)明提供了一種注射用清開(kāi)靈凍干粉針劑的制備方法，它由膽酸、珍珠母、豬去氧膽酸、梔子、水牛角、板藍(lán)根、黃芩苷和金銀花經(jīng)提取、交替沉淀、多極除雜得提取液，提取液加入無(wú)水乙醇制備而成，與現(xiàn)有技術(shù)相比，提高了藥材中有效成分的含量，縮短了產(chǎn)品冷凍干燥的時(shí)間，降低了生產(chǎn)成本，優(yōu)化了生產(chǎn)工藝，不溶性微粒、可見(jiàn)異物檢查都有較大改善，提高了藥物的生物利用度和穩(wěn)定性。本發(fā)明所提供的清開(kāi)靈凍干粉制劑具有質(zhì)地疏松、成型性好、含水量低、穩(wěn)定性好、不溶性微粒數(shù)量減少、外觀色澤優(yōu)良、便于貯存等特點(diǎn)，可有效確保該制劑的臨床療效。文檔編號(hào)A61K36/185GK101259181SQ20081030116公開(kāi)日2008年9月10日申請(qǐng)日期2008年4月16日優(yōu)先權(quán)日2008年4月16日發(fā)明者周黎亞,朱亭潘,義楊,帆江,牟蘭進(jìn),竇啟玲,簡(jiǎn)高華申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司