專利名稱：用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)用材料制備技術(shù)范圍，特別涉及一種用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，女性乳腺癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，目前我國乳腺癌的發(fā)病率已占到女性惡性腫瘤發(fā)病率的首位。當(dāng)前無論是國內(nèi)還是國外，對乳腺癌的治療方法仍然是以切除患側(cè)的腫瘤和乳房為主。隨著乳腺癌早期發(fā)現(xiàn)率的提高和一些先進(jìn)的輔助治療方法的應(yīng)用，使得患有乳腺癌的婦女的生存率大大地提高。腫瘤被消滅了，乳房也被切除，病人方得以治愈。失去了乳房，有些患者對自己的外表充滿了反感甚至認(rèn)為自己不是女人，影響了她們正常的心理健康和社會交往。
目前隆乳的方法分假體組織隆乳和自體組織乳房再造。比如，自體脂肪移植、注射隆胸和假體植入等?，F(xiàn)在的一些最常用的豐乳和隆乳的方法顯然不適合這部分因?yàn)槿橄倌[瘤而切除了乳房的婦女，原因是這部分婦女需要的是乳房再造而不是豐乳或隆乳。而且做乳房再造時需要的組織量較大，目前的各種隆乳方法不能提供足夠的組織量來達(dá)到這方面的要求，在這種情況下有時就要用硅凝膠假體等合成材料的充填來彌補(bǔ)不足的組織量。因?yàn)檫@些材料本身的一些理化特點(diǎn)，使得隆乳術(shù)后會出現(xiàn)一些不易矯正的并發(fā)癥。如硅膠假體外層的硅膠囊容易刺激假體周圍組織形成纖維結(jié)締組織包膜，包膜攣縮導(dǎo)致乳房硬化，使再造的乳房失去其漂亮的外形和柔軟的彈性。
臨床上，自體脂肪組織移植隆乳術(shù)，從理論上而言較為理想，因?yàn)檎５娜榉渴怯芍炯叭橄賰刹糠謽?gòu)成的。此方法分為兩種，其中自體脂肪顆粒注射隆乳，是用注射器從身體的其他部位如腰部、腹部、大腿抽取一部分脂肪，經(jīng)過清洗，獲得相對純凈的脂肪顆粒，移植至乳房內(nèi)。此法雖有一定的減肥作用，但通常需要多次手術(shù)，才能達(dá)到理想的乳房體積。而且脂肪注入后，還會出現(xiàn)乳房不能很好的維持其美觀的外形，有時還會發(fā)生脂肪的液化、壞死等導(dǎo)致成形失敗。而形成的纖維硬結(jié)，不同程度地影響了乳腺癌的普查工作，故現(xiàn)在美國這種方式的隆胸基本被棄用。另一種是帶血管的脂肪塊移植，此法在脂肪塊的切取部位會遺留明顯的手術(shù)疤痕，故不易為美容者所接受。
殼聚糖是一種具有良好生物相容性可降解的生物材料。多孔殼聚糖海綿材料的傳統(tǒng)冷凍干燥法制備，費(fèi)時，耗能，生產(chǎn)效率低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法，其特征在于所述多孔殼聚糖支架材料是用冷凍-凝膠法制備的多孔殼聚糖海綿材料1)將殼聚糖溶于1M的醋酸使其形成2wt％的濃度；2)在純乙醇里加入氫氧化鈉，形成過飽和NaOH乙醇溶液，置入-20℃預(yù)冷3-5個小時；3)將步驟(1)的殼聚糖溶液置于模具中，-20℃冷凍3-5個小時。拆開模具，將冰凍體置入步驟(2)預(yù)冷的過飽和NaOH乙醇溶液里過夜；4)由于氫氧化鈉可以中和醋酸，在殼聚糖溶液的冰點(diǎn)以下，乙醇析出殼聚糖溶液中的水，并使殼聚糖形成凝膠。
5)將此殼聚糖凝膠置入蒸餾水里反復(fù)洗滌，中和掉殘留的NaOH，使其至中性，最后用D-hanks液中和2-3次；6)將制備的殼聚糖凝膠置于真空室中抽氣或置入40℃烤箱中烘烤5個小時，則形成多孔海綿體即脂肪組織工程的支架材料。
所述模具的形狀為圓球形、方塊形、薄片形或與欲植入脂肪組織形狀相同的模具。
本發(fā)明的有益效果是1.采用“冷凍-凝膠法”制備殼聚糖海綿載體，比采用傳統(tǒng)的冷凍干燥法制備的多孔材料具有制備簡單，節(jié)約能耗。2.由于殼聚糖材料良好的生物相容性，具有易于成型及制備的海綿表面無硬結(jié)等優(yōu)點(diǎn)。更適合用于脂肪組織工程的支架材料。作為脂肪組織工程的載體，克服了硅膠材料長期植入體內(nèi)的毒副反應(yīng)，及單純自體脂肪顆粒注射的乳房不易成型等缺點(diǎn)，這種可降解的生物海綿材料，可望在其他軟組織修復(fù)中廣泛應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的目的是提供一種用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法，其特征在于所述多孔殼聚糖支架材料是用冷凍-凝膠法制備的多孔殼聚糖海綿材料1)將殼聚糖溶于1M的醋酸使其形成2wt％的濃度；2)在純乙醇里加入氫氧化鈉，形成過飽和NaOH乙醇溶液，置入-20℃預(yù)冷3-5個小時；3)將步驟(1)的殼聚糖溶液置于模具中，-20℃冷凍3-5個小時。拆開模具，將冰凍體置入步驟(2)預(yù)冷的過飽和NaOH乙醇溶液里過夜；4)由于氫氧化鈉可以中和醋酸，在殼聚糖溶液的冰點(diǎn)以下，乙醇析出殼聚糖溶液中的水，并使殼聚糖形成凝膠。
5)將此殼聚糖凝膠置入蒸餾水里反復(fù)洗滌，中和掉殘留的NaOH，使其至中性，最后用D-hanks液中和2-3次；6)將制備的殼聚糖凝膠置于真空室中抽氣或置入40℃烤箱中烘烤5個小時，則形成多孔海綿體即脂肪組織工程的支架材料。
通過改變殼聚糖在醋酸的溶解度，來改變所形成的多孔海綿體材料的孔徑。
上述模具的形狀為圓球形、方塊形、薄片形或與欲植入脂肪組織形狀相同的模具。
在上述制備過程中，本發(fā)明以市場上常見的價格低廉的殼聚糖材料為原料，篩選出粘均分子量范圍在18萬～160萬左右的高純度的殼聚糖材料。分子量過低，會導(dǎo)致材料的強(qiáng)度不足，不能起到支撐作用；分子量過高，會導(dǎo)致材料易脆易折，彈性不佳。材料的具體篩選參數(shù)脫乙酰度范圍75％～90％；稀醋酸溶液中的不溶組分小于1％。另外殼聚糖原料應(yīng)該純化將殼聚糖粉末在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在稀有機(jī)酸中回流溶解。等冷卻后，用一定濃度的NaOH溶液將溶液中和到pH值在5～8范圍內(nèi)，然后用透析的方法去掉重金屬離子，冷凍干燥備用。
殼聚糖的正式名稱為聚-β-(1，4)-D-氨基葡萄糖，分子式為 下面舉作為乳房植入物的脂肪組織工程支架材料的制備為例，對本發(fā)明予以進(jìn)一步說明。
1)先制備殼聚糖海綿的圓球形模具直徑為1cm大小。
2)按上述制備殼聚糖海綿的方法制備出直徑1cm的殼聚糖球置入10mg/ml的Matrigel水溶液中2個小時。
3)真空抽干黏附有Matrigel的殼聚糖海綿球4)真空無菌包裝備用。
權(quán)利要求
1.一種用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法，其特征在于所述多孔殼聚糖支架材料是用冷凍-凝膠法制備的多孔殼聚糖海綿材料，制備過程為1)將殼聚糖溶于1M的醋酸使其形成2wt％的濃度；2)在純乙醇里加入氫氧化鈉，形成過飽和NaOH乙醇溶液，置入-20℃預(yù)冷3-5個小時；3)將步驟(1)的殼聚糖溶液置于模具中，-20℃冷凍3-5個小時，拆開模具，將冰凍體置入步驟(2)預(yù)冷的過飽和NaOH乙醇溶液里過夜；4)由于氫氧化鈉可以中和醋酸，在殼聚糖溶液的冰點(diǎn)以下，乙醇析出殼聚糖溶液中的水，并使殼聚糖形成凝膠；5)將此殼聚糖凝膠置入蒸餾水里反復(fù)洗滌，中和掉殘留的NaOH，使其至中性，最后用D-hanks液中和2-3次；6)將制備的殼聚糖凝膠置于真空室中抽氣或置入40℃烤箱中烘烤5個小時，則形成多孔海綿體即脂肪組織工程的支架材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法，其特征在于所述模具的形狀為圓球形、方塊形、薄片形或與欲植入脂肪組織形狀相同的模具。
全文摘要
本發(fā)明公開了屬于生物醫(yī)用材料制備技術(shù)范圍的一種用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料的制備方法。將殼聚糖溶于醋酸，置于模具中－20℃冷凍后，置入預(yù)冷的過飽和NaOH乙醇溶液中和醋酸，并使殼聚糖形成凝膠。再將殼聚糖凝膠置于真空室中抽氣或置入40℃烤箱中烘烤則形成多孔海綿體即用于脂肪組織工程的多孔殼聚糖支架材料。該“冷凍－凝膠法”制備殼聚糖海綿載體比傳統(tǒng)的冷凍干燥法制備的多孔材料具有制備簡單，節(jié)約能耗；用于乳房植入物易于成型及制備的海綿表面無硬結(jié)等優(yōu)點(diǎn)?？赏谄渌浗M織修復(fù)中廣泛應(yīng)用。
文檔編號A61L27/20GK1593671SQ20041004973
公開日2005年3月16日 申請日期2004年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月25日
發(fā)明者李家謀, 張秀芳, 公衍道, 曹文靈, 陳旭峰, 李靜, 孔麗君 申請人:清華大學(xué)