專利名稱：一種以擬人參皂苷元(Ocotillol)為有效成分的戒毒、促智藥物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷，有效戒斷嗎啡樣作用的藥物，其制備方法及其在促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷，有效戒斷嗎啡樣作用的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
阿片類藥物的依耐性和耐受性極易造成吸毒者不斷復(fù)吸，從而惡性循環(huán)，給當(dāng)今社會(huì)帶來(lái)巨大危害，然而目前對(duì)阿片類藥物的依耐性和耐受性還沒(méi)有非常理想的預(yù)防和治療方法。研究能夠有效戒斷阿片類依耐性和耐受性的藥物也成為當(dāng)前新藥開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)之一。目前，臨床應(yīng)用替代療法或綜合療法的戒毒藥物，雖能部分解除對(duì)阿片類藥物的依耐性，但多數(shù)藥物仍不能解除心理依耐性問(wèn)題。
近年來(lái)國(guó)內(nèi)外報(bào)道人參的皂苷成分能夠?qū)拱⑵惖某砂a和耐受作用。國(guó)內(nèi)專利申請(qǐng)(公開(kāi)號(hào)CN 1300593A)報(bào)道了擬人參皂苷F11有拮抗嗎啡樣作用和促智作用。國(guó)外還有報(bào)道越南人參中的Ocotillol型皂苷具有抗嗎啡樣作用。但對(duì)擬人參皂苷元具有拮抗嗎啡樣作用和促智作用未見(jiàn)相關(guān)研究。
本發(fā)明所述的擬人參皂苷元在人參屬植物中含量極低，顯然沒(méi)有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。雖目前國(guó)內(nèi)已有制備擬人參皂苷F11方法的專利申請(qǐng)(公開(kāi)號(hào)CN 1251369A)。但對(duì)擬人參皂苷元大規(guī)模制備方法尚未見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。
根據(jù)本發(fā)明提供的大規(guī)模高效制備擬人參皂苷元的方法，獲得擬人參皂苷元，我們又對(duì)擬人參皂苷元在戒毒和促智方面進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，擬人參皂苷元具有促智和拮抗嗎啡樣作用，從而完成本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種以擬人參皂苷元(Ocotillol)為有效成分的能夠促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷，有效戒斷嗎啡樣作用的藥物。
本發(fā)明提供了擬人參皂苷元(Ocotillol)在制備促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷，有效戒斷嗎啡樣作用的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供了大規(guī)模制備擬人參皂苷元(Ocotillol)的方法。其包括如下步驟用來(lái)制備擬人參皂苷元的起始原料人參皂苷(II)的結(jié)構(gòu)通式如下
R＝糖基首先從西洋參、西洋參莖葉、越南人參、越南人參莖葉等人參屬植物中獲得的富含擬人參皂苷元為母核的結(jié)構(gòu)通式如(II)所示人參皂苷，如含有擬人參皂苷F11、擬人參皂苷-RT4、珠子參苷(majonoside)-R1、珠子參苷(majonoside)-R2或它們的混和物。加入由堿金屬氫氧化物與低級(jí)醇類組成的溶液中，堿濃度一般為0.2％～60％，優(yōu)選濃度為5～20％，在高壓或常壓下加熱進(jìn)行堿降解，徹底水解掉人參皂苷(II)6位上的糖鏈，從而獲得富含擬人參皂苷元的降解產(chǎn)物，反應(yīng)液傾入冷水，攪拌，析出固體，用水洗至中性，過(guò)濾。得到擬人參皂苷元粗品，經(jīng)硅膠柱色譜分離。洗脫劑由底劑和極性調(diào)節(jié)劑組成。底劑可以是石油醚、氯仿、正己烷、環(huán)己烷、正戊烷中的一種或幾中，極性調(diào)節(jié)劑可以是乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯、丙酮、乙醚、含有1-4個(gè)碳原子的一元醇中的一種或幾種。
由擬人參皂苷元粗品經(jīng)重結(jié)晶得精制擬人參皂苷元。重結(jié)晶溶劑可以是乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮以及它們組成的混合劑。
經(jīng)硅膠柱層析或純結(jié)晶，從而獲得擬人參皂苷元單體。
當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)低級(jí)醇為1-4個(gè)碳原子的一元醇時(shí)，優(yōu)選為乙醇，正丁醇，甲醇。反應(yīng)狀態(tài)優(yōu)選在0.05～5Mpa壓力和100～320℃溫度下進(jìn)行。當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)低級(jí)醇為1-4個(gè)碳原子的多元醇時(shí)，優(yōu)選為丙三醇、丙二醇、乙二醇、1.3-丁二醇、1.4-丁二醇、甘二醇，反應(yīng)狀態(tài)在0-4Mpa壓力和150～230℃溫度下進(jìn)行，優(yōu)選為在常壓和150～230℃溫度下進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間取決于降解原料，反應(yīng)溫度和堿的濃度，反應(yīng)時(shí)間在5分鐘至3小時(shí)。
本發(fā)明制備方法的優(yōu)點(diǎn)是提供了一種大規(guī)模高效制備擬人參皂苷元的方法。堿降解反應(yīng)簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，能夠制備出高純度的擬人參皂苷元，為其應(yīng)用提供了方便。
本發(fā)明提供的藥物，可以以片劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、軟膠囊、膠囊、糖漿、注劑、口嚼劑、貼劑、凍干粉針或注射用乳劑形式存在。均可以采用藥學(xué)上常規(guī)方法制備而成。
具體實(shí)施例方式
制備例1擬人參皂苷元(Ocotillol)的制備取200ml95％乙醇加入高壓反應(yīng)釜內(nèi)，加入30g固體氫氧化鉀，攪拌溶解，再加入富含式(II)所示結(jié)構(gòu)通式的五環(huán)三萜皂苷的西洋參莖葉皂苷10g，繼續(xù)攪拌并持續(xù)升溫，升溫至160℃。于大約1.15Mpa的壓力下，保溫下反應(yīng)2.5小時(shí)，反應(yīng)完畢，將反應(yīng)液傾入冷水中，稀釋至3倍，約600ml，再用等體積的乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，回收溶劑，得到4.3g黃褐色固體，再將此固體經(jīng)硅膠柱層析，以石油醚/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，以乙酸乙酯重結(jié)晶得到0.3g無(wú)色結(jié)晶擬人參皂苷元，收率3％。
制備例2擬人參皂苷元(Ocotillol)的制備將10升甘油加入小型具油浴加熱和攪拌的反應(yīng)罐中，再分別加入1kg的氫氧化鈉和1kg西洋參莖葉皂苷，攪拌，常壓下持續(xù)加熱升溫，升溫至210℃下保溫反應(yīng)40分鐘，反應(yīng)完畢，將反應(yīng)液傾入60倍冷水中并攪拌，析出沉淀。靜置，過(guò)濾，水洗至中性，即得擬人參皂苷元粗品。再將此粗品經(jīng)硅膠柱層析，以正己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，回收溶劑，以甲醇-乙酸乙酯混合溶劑重結(jié)晶得到40g擬人參皂苷元，收率4％。
無(wú)色方晶，1H-NMR(400MHz C5D5N)δ0.89(3H，s，CH3-30)，0.94(3H，s，CH3-19)，1.08(3H，s，CH3-18)，1.19(1H，d，J＝10.4Hz，H-5)，1.23(3H，s，CH3-21)，1.24(3H，s，CH3-26)，1.40(3H，s，CH3-29)，1.44(3H，s，CH3-27)，1.95(3H，s，CH3-28)，3.49(1H，dd，J＝11.3Hz，5.2Hz，H-3)，3.69(1H，dt，J＝10.4Hz，4.6Hz，H-12)，3.92(1H，dd，J＝8.4Hz，6.7Hz，H-24)，4.38(1H，m，H-6)制備例3注射用擬人參皂苷元(Ocotillol)凍干粉針的制備稱取由制備例2得到擬人參皂苷元1.00g，加入20ml乙醇使苷元完全融解，再加入40ml甘油混合均勻。將0.20g鹽酸丁卡因、0.02g的EDTA-2Na加入到40ml注射用水中，使輔料完全溶解。并將上述水溶液加入到藥物溶液中，混合均勻。以0.01mol/L的氫氧化鈉和稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值為5.5±1.0。加入0.1％的針用活性炭85度保溫15分鐘，G3垂熔玻璃漏斗過(guò)濾，0.22μm的微孔濾膜過(guò)濾。濾液分裝于7ml西林瓶中，每支裝量2ml。分裝好的注射劑半壓塞，于凍干機(jī)凍干。凍干后壓塞，壓鋁蓋制成凍干粉針劑，20mg/支。
制備例4擬人參皂苷元(Ocotillol)片劑的制備稱取由制備例1得到擬人參皂苷元10.00g，將其與60g淀粉混勻，加入15％淀粉漿適量，混合制成軟材，14目篩制粒，70℃干燥，14目篩整粒后，加入0.5g硬脂酸鎂和1g羧甲基淀粉鈉，混勻，壓制200片，100mg/片制備例5擬人參皂苷元(Ocotillol)軟膠囊劑的制備稱取明膠100g，甘油30g和水130g。取明膠加入適量的水使其吸水膨脹。另將甘油及余下的水置煮膠鍋中加熱至70~80℃，混合均勻，加入膨脹的明膠攪拌，熔融。保溫1~2小時(shí)，靜置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洗凈白布過(guò)濾，加入0.0075mgr Fe2O3粉末，混勻，保溫待用。配成的膠液粘度一般為2.8~3.2度。
稱取擬人參皂苷元5g溶于90g聚乙二醇中，加熱使其充分溶解，放至室溫。
壓制軟膠囊將已制好的明膠甘油和擬人參皂苷元聚乙二醇藥液裝入自動(dòng)旋轉(zhuǎn)軋囊機(jī)中，溫度控制在40~50℃，壓制出每囊含50mg擬人參皂苷元的軟膠囊。
實(shí)驗(yàn)例1對(duì)納洛酮催促所引起的嗎啡依賴大鼠戒斷反應(yīng)的影響用嗎啡對(duì)大鼠進(jìn)行預(yù)處理(d1＝10、d2＝20、d3＝30、d4＝40、d5＝50mg/kg，每日2次，sc)能誘發(fā)大鼠發(fā)生身體依賴。于每次給嗎啡前30min ig F11苷元，完成末次給嗎啡6h，ip納洛酮5mg/kg，觀察給納洛酮后15min內(nèi)戒斷綜合征發(fā)生情況。在納洛酮催促下出現(xiàn)典型的戒斷綜合征，表現(xiàn)為跳躍、濕狗樣搖體、扭體、搖頭、打哈欠、齒顫、咀嚼、流涎、流淚、毛發(fā)直立、眼下垂和腹瀉等一系列戒斷癥狀。稱量用納洛酮后1h后體重的改變。根據(jù)Rasmussen K.(J Neurosci，1990，102308-2317)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判定戒斷癥狀的輕重。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1)表1 F11苷元對(duì)用納洛酮后15min內(nèi)嗎啡依賴大鼠戒斷綜合征分?jǐn)?shù)的抑制作用(n＝10)藥物 劑量(mg/kg) 戒斷分?jǐn)?shù) 體重減輕(g)鹽水 -3.4±4.1 1.1±1.3嗎啡420 27.2±9.4 18.5±4.4F11苷元+嗎啡4+420 19.3±5.9*14.1±5.8*8+420 16.9±6.1° 11.3±4.0#*p＜0.05，#p＜0.01，與嗎啡比較。
實(shí)驗(yàn)例2F11苷元對(duì)嗎啡誘導(dǎo)的條件性位置偏愛(ài)的影響位置偏愛(ài)箱(穿梭箱)由兩個(gè)大小完全相等的盒子組成，中間由可以抽拉的隔板隔開(kāi)，其中一個(gè)盒子為白色，底板鋪一有紋理的壁紙；另一盒子為黑色，底板光滑。對(duì)照組皮下注射生理鹽水后，立即放入黑盒子，給藥組口服F11苷元60min后，皮下注射嗎啡，放入白盒子。實(shí)驗(yàn)前3天，讓小鼠在兩盒之間自由活動(dòng)，觀察小鼠的天然嗜好。此后5天用隔板封閉兩盒間通道，每只小鼠每天上、下午各注射一次，兩次間隔時(shí)間為6h，其中一次為嗎啡(給藥組F11苷元+嗎啡)，另一次為生理鹽水。給嗎啡后，將小鼠放入白盒，給生理鹽水后，將小鼠放入黑盒，每次在盒中停留60min。第9天打開(kāi)洞口，讓小鼠自由跑動(dòng)，記錄15min內(nèi)小鼠在白盒子中的時(shí)間。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2)。
表2 F11苷元對(duì)嗎啡誘導(dǎo)的條件性位置偏愛(ài)的影響組別 劑量(mg/g)動(dòng)物數(shù)時(shí)間(min)空白 -- 12 6.01±2.2嗎啡 815 9.26±2.9#苷元+嗎啡4+8 15 7.81±3.4*8+8 13 7.20±3.6**p＜0.05與嗎啡組比較，#p＜0.01，與空白組比較。
條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)藥物精神依賴性的方法，偏愛(ài)效應(yīng)能夠較好地反映藥物的獎(jiǎng)賞效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)表明，嗎啡可引起明顯的位置偏愛(ài)行為，而F11苷元能夠部分拮抗這種作用。
實(shí)驗(yàn)例3對(duì)嗎啡致小鼠自主活動(dòng)增加的影響采用小動(dòng)物自主活動(dòng)測(cè)定儀測(cè)定，給藥7天，每天皮下注射嗎啡一次，注射前60min口服F11苷元。注射嗎啡后將小鼠放入測(cè)定儀中，適應(yīng)5min，在第1、7天測(cè)定小鼠2min的自主活動(dòng)數(shù)。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3)表3 F11苷元對(duì)嗎啡致小鼠自主活動(dòng)增加的影響組別 劑量 第1天 第7天(mg/kg)空白 -- 57.1±49.2 54.5±50.8嗎啡 10 71.3±60.8 70.9±69.2苷元+嗎啡4+1027.3±20.9*33.4±32.78+1024.6±25.2*30.8±28.1**p＜0.05與嗎啡組比較F11苷元能夠拮抗嗎啡誘發(fā)的自主活動(dòng)增加。
實(shí)驗(yàn)例4對(duì)東莨菪堿所致記憶障礙的影響跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，東莨菪堿2mg/kg致小鼠錯(cuò)誤次數(shù)顯著增加，F(xiàn)11苷元4mg/kg使錯(cuò)誤次數(shù)顯著減少。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4)。
表4 對(duì)東莨菪堿(Scop)所致記憶障礙的影響(跳臺(tái)法)組別 劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)錯(cuò)誤次數(shù)空白 -- 15 0.41±0.54Scop 227 2.51±0.69#苷元+Scope222 1.52±0.77*424 1.66±0.54**p＜0.05與Scop組比較，#p＜0.01與空白組比較。
避暗實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)11苷元能夠顯著延長(zhǎng)錯(cuò)誤潛伏期，降低錯(cuò)誤百分率，提示F11苷元能夠改善東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5)表5 對(duì)東莨菪堿(Scop)所致記憶障礙的影響(避暗法)組別 劑量 潛伏期 錯(cuò)誤次數(shù) 錯(cuò)誤百分率(mg/kg)(sec)空白--340.8±51.1 0.28±0.55 25.0Scop2 70.1±72.7#1.25±0.72#83.3苷元+Scope 2 255.3±90.9*0.62±0.77*58.34 240.8±81.8*0.56±0.50*33.3*p＜0.05與Scop組比較，#p＜0.01，與空白組比較，n＝12。
實(shí)驗(yàn)例5對(duì)氯霉素致小鼠記憶鞏固障礙的影響跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明氯霉素(Chlo)200mg/kg顯著增加小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)，縮短潛伏期；F11苷元可以改善這些癥狀，顯示其減輕氯霉素誘導(dǎo)的小鼠記憶鞏固障礙的作用。(實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6)表6 對(duì)氯霉素(Chlo)致小鼠記憶鞏固障礙的影響(跳臺(tái)法)組別劑量 潛伏期錯(cuò)誤次數(shù)(mg/kg) (sec)空白 -- 159.8±35.5 0.12±0.44Chlo 20066.1±79.1#1.45±0.92#苷元+Chlo2 125.3±70.3*0.42±0.45*4 99.2±81.8 0.76±0.59*p＜0.05與Chlo組比較，#p＜0.01，與空白組比較，n＝12～14。
實(shí)驗(yàn)例6對(duì)乙醇致小鼠記憶再現(xiàn)障礙的影響暗室實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)11苷元能夠明顯減少小鼠進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)，并延長(zhǎng)錯(cuò)誤潛伏期，表明F11苷元能夠明顯改善乙醇致小鼠記憶再現(xiàn)障礙，對(duì)正常動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶也有改善作用，見(jiàn)表7。
表7 對(duì)乙醇致小鼠記憶再現(xiàn)障礙的影響組別 劑量動(dòng)物數(shù) 潛伏期 錯(cuò)誤次數(shù)(mg/kg) (sec)空白 --11287.8±61.8 0.26±0.51乙醇 10ml 1266.1±73.4#3.25±1.75#苷元+乙醇 2 11169.3±120.8*1.32±1.02*4 11150.2±101.7*1.56±1.40**p＜0.05與乙醇組比較，#p＜0.01，與空白組比較
權(quán)利要求
1.一種以擬人參皂苷元(Ocotillol)為有效成分，用于促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷，有效戒斷嗎啡樣作用的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其可以以片劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、軟膠囊、膠囊、糖漿、注射劑、口嚼劑、貼劑、凍干粉針或注射用乳劑形式存在。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物，其中結(jié)構(gòu)式I所示的擬人參皂苷元(Ocotillol)的制備方法，可包含如下步驟 (I)(II)R＝糖基將堿金屬氫氧化物溶于低級(jí)醇類化合物中，再將富含結(jié)構(gòu)通式如(II)所示的人參皂苷溶于此堿性溶液，攪拌下繼續(xù)加熱升溫進(jìn)行堿降解，反應(yīng)完畢，將反應(yīng)液傾入冷水中，攪拌，析出固體，水洗至中性，過(guò)濾，濾后固體即為擬人參皂苷元粗品(或?qū)⒎磻?yīng)液傾入冷水中，用乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑即得擬人參皂苷元粗品)，擬人參皂苷元粗品經(jīng)硅膠柱層析(或進(jìn)一步純結(jié)晶)，得擬人參皂苷元(Ocotillol)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，堿金屬氫氧化物可以是氫氧化鈉、氫氧化鉀或其組合，堿濃度為0.2％～60％；低級(jí)醇可以是1-4個(gè)碳原子的一元醇、多元醇或其組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物，堿濃度優(yōu)選為5％～20％；一元醇優(yōu)選為乙醇、正丁醇、甲醇或其組合；多元醇優(yōu)選為丙三醇、丙二醇、乙二醇、1.3-丁二醇、甘二醇或其組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，結(jié)構(gòu)通式(II)所示的人參皂苷可以是西洋參、西洋參莖葉皂苷、越南人參、越南人參莖葉皂苷或珠子參等人參屬植物的皂苷。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物，結(jié)構(gòu)通式(II)所示的人參皂苷優(yōu)選為單體擬人參皂苷F11、西洋參莖葉皂苷或其組合。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，堿降解反應(yīng)可以在高壓釜或常壓下進(jìn)行。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，堿降解反應(yīng)優(yōu)選在常壓下進(jìn)行，反應(yīng)溫度在100～320℃之間。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的藥物，當(dāng)?shù)图?jí)醇為二元醇時(shí)，反應(yīng)溫度為150～230℃。
11.擬人參皂苷元在促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶，改善腦功能障礙所致的學(xué)習(xí)記憶損傷的促智藥物中的應(yīng)用。
12.擬人參皂苷元在有效戒斷嗎啡樣作用的戒毒藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種以擬人參皂苷元(Ocotillol)為有效成分的戒毒、促智藥物，及其制備方法和用途。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1640406SQ200410023510
公開(kāi)日2005年7月20日 申請(qǐng)日期2004年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月8日
發(fā)明者王澤君, 馬雙剛, 彭維兵, 姜永濤, 范秀玉, 劉珂 申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司