專利名稱：向陰道遞送過氧化物產(chǎn)生酶的制作方法
背景技術(shù)：
健康的陰道微環(huán)境包含過氧化氫并具有約4-5的pH。健康陰道內(nèi)的優(yōu)勢生物包括乳酸桿菌和其它革蘭氏陽性菌；不過，病原生物，如念珠菌(Candida)，也在正常陰道環(huán)境中以低水平存在。許多方式都可以破壞正常的環(huán)境，包括一系列抗生素、絕經(jīng)期和其它因素。這些破壞經(jīng)常導(dǎo)致感染，或病原微生物數(shù)目的增多以及乳酸桿菌和其它革蘭氏陽性有益菌的減少。當(dāng)革蘭氏陽性菌在陰道中減少或消失時，陰道pH上升，氧化作用降低，并且由革蘭氏陰性菌或其它病原微生物，包括革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陰性球菌的異常增多導(dǎo)致正常陰道細(xì)胞菌群的紊亂，這能夠引發(fā)對人身體的傷害并且導(dǎo)致各種疾病和癥狀，包括細(xì)菌性陰道炎。
現(xiàn)有的用于治療革蘭氏陽性菌菌群減少和病原微生物數(shù)目增多的方法并不特別有效。例如，使用抗菌藥物抑制革蘭氏陰性菌和其它異常細(xì)菌的生長。不過，這些藥物可能對病人導(dǎo)致顯著的副作用。而且，抗菌藥物也可能抑制革蘭氏陽性菌的生長，導(dǎo)致重建健康陰道微環(huán)境的困難。在陰道中直接給藥乳酸桿菌也不十分有效，因為它經(jīng)常不能帶來穩(wěn)定的菌群建群。這兩種治療以及許多其它的治療的其它限制，是它們不是簡單地通過維持、改善或產(chǎn)生可接受的陰道環(huán)境條件來試圖使陰道菌群生長環(huán)境正?；?。
因而，本領(lǐng)域需要治療正常陰道細(xì)菌菌群紊亂和促進(jìn)革蘭氏陽性菌，包括乳菌桿菌的陰道生長/重新建群的組合物和方法。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及這樣一種發(fā)現(xiàn)，即陰道菌群的失調(diào)可以通過向哺乳動物，例如人的陰道(陰道內(nèi)地)給藥有效量的至少一種過氧化物產(chǎn)生酶，如過氧化氫產(chǎn)生酶，以及有效量的至少一種合適的底物來進(jìn)行有效治療。例如，本發(fā)明涉及過氧化物產(chǎn)生酶長期產(chǎn)生低劑量的過氧化物以便有助于恢復(fù)和/或維持健康的陰道微環(huán)境的用途。因此，本發(fā)明提供誘導(dǎo)和維持陰道中氧化性微環(huán)境的治療性和/或預(yù)防性組合物和方法，從而控制引發(fā)陰道菌群紊亂的微生物的生長。
本發(fā)明的一個實施方案是一種組合物，所述組合物用于哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的治療性或預(yù)防性治療，包括陰道給藥有效量的含有酶的組合物，所述酶能夠在向所述哺乳動物的陰道給藥所述組合物后產(chǎn)生過氧化物。此外，該組合物可以包括所述酶能夠作用其以便產(chǎn)生過氧化物的底物，和/或一種載體用于遞送至陰道。例如，所述底物包括可氧化的底物，而所述酶是氧化還原酶，其作用產(chǎn)生過氧化物，如過氧化氫。所述載體可以是任何材料，包括栓塞、注射器樣的涂藥器或液體。
本發(fā)明的另一個實施方案是一種治療或預(yù)防哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的方法，包括包括陰道給藥有效量的組合物，所述組合物含有能夠在向所述哺乳動物的陰道給藥所述組合物后產(chǎn)生過氧化物的酶。此外，該組合物可以包括所述酶能夠作用其以便產(chǎn)生過氧化物的底物和/或一種載體用于遞送至陰道。
本發(fā)明的一個實施方案是一種用于哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的治療性或預(yù)防性治療的制品，包括能夠產(chǎn)生過氧化物的酶，該制品適用于陰道。
附圖簡述

圖1是緣自乙醇氧化酶(1.0單位于0.5ml)活性以羧甲纖維素(0.25％w/v)隨著時間(于pH 6.3，不加入起始過氧化物，37℃于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓搖動)產(chǎn)生過氧化氫的圖示。
圖2是用各種濃度的過氧化氫隨著時間(LBG培養(yǎng)基，pH 6.9和37℃于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓搖動)抑制大腸桿菌(E.coli)生長的圖示。
圖3是用各種濃度的過氧化氫隨著時間(蛋白胨培養(yǎng)基，pH 6.5和37℃于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓搖動)抑制白色念珠菌(C.albicans)生長的圖示。
圖4是pH對過氧化氫生產(chǎn)影響的圖示。描述了緣自乙醇氧化酶活性以羧甲纖維素作為pH功能的過氧化氫生產(chǎn)(不加入起始過氧化物，37℃于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓搖動8小時后)。
圖5是起始過氧化氫(H2O2)H2O2對生產(chǎn)影響的圖示。描述了緣自緣自乙醇氧化酶活性以羧甲纖維素作為添加的起始過氧化氫功能的過氧化氫生產(chǎn)(于pH6.3，37℃于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓搖動8小時后)。
圖6描繪一種柱塞。
圖7描繪一種注射器樣的涂藥器。
發(fā)明詳述陰道感染或陰道細(xì)菌菌群紊亂通常是陰道微菌群失調(diào)的結(jié)果。一般，病原因素正常條件下低水平存在于健康陰道系統(tǒng)中。當(dāng)一種減少乳酸桿菌和其它有益微生物的事件(例如，系統(tǒng)性抗生素或絕經(jīng)期)發(fā)生時，有害的微生物增殖并在陰道中或陰道周圍誘導(dǎo)致病狀態(tài)，所述有益微生物正常情況下在健康系統(tǒng)中是占優(yōu)勢的。一種在陰道中的有益菌(例如，乳菌桿菌)抑制病原微生物生長的方法是通過過氧化氫的產(chǎn)生。過氧化氫，盡管對乳酸菌或陰道組織無害，但對于病原生物是有害的并且作用來使它們的數(shù)目保持在低水平。因而，向陰道給藥一種或多種過氧化物產(chǎn)生酶，例如，過氧化氫產(chǎn)生酶對于抑制病原微生物的生長是有用的，同時允許乳酸桿菌增殖并且控制陰道微環(huán)境，并且因而建立一個健康的陰道環(huán)境。
本發(fā)明的方法和組合物對于陰道微菌群紊亂的預(yù)防性和/或治療性治療是有用的。如本文所用的，術(shù)語“陰道微菌群紊亂”意為陰道菌群正常動態(tài)平衡的失調(diào)，如與健康陰道環(huán)境相比革蘭氏陽性菌的減少和/或革蘭氏陰性菌的增多。本發(fā)明的方法或組合物可以起作用的具體紊亂或失調(diào)包括，但不限于，真菌性(例如，酵母感染)、細(xì)菌性(例如，細(xì)菌性陰道病)、病毒性或寄生蟲性(例如，毛滴蟲)感染。所述感染包括那些被特征描述/診斷為陰道炎、陰道念珠菌病和陰道病的那些感染。一些引發(fā)這類感染的微生物的例子包括念珠菌屬，特別是白色念珠菌(Candida albicans)和熱帶念珠菌(C.tropicalis)，和T.glabrata，加德納菌屬(陰道性的)，各種混合的厭氧細(xì)菌和消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus)細(xì)菌。如果不予治療的話，這些陰道感染可以導(dǎo)致陰道的病理性分泌、女性患者極大的不適，和/或嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)后果。
如本文所用的，術(shù)語“酶”意為一種作為催化劑在化學(xué)反應(yīng)中起作用的分子。術(shù)語“底物”意為一種酶對其作用以產(chǎn)生一種所需產(chǎn)物的材料或物質(zhì)。
如本文所用的，術(shù)語“有效量”意為對于治療特定感染(例如，陰道微菌群紊亂)有效的并且為本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定的量。例如，有效量的酶和/或底物是足以抑制病原微生物(例如，革蘭氏陰性菌)的量。
術(shù)語“可藥用的”在此用于意指可以用于對人或其它哺乳動物進(jìn)行治療而不會引發(fā)不良作用，如毒性或起泡的材料。
如本文所用的，術(shù)語“過氧化物”意為任何包含二價離子-O-O-的化合物，包括，但不限于，包含，R1-O-O-R2型的氧-氧單鍵的化合物。例如，一種R1-O-O-R2型的化合物，其中R1和R2可以是氫、烷基、酮、R-羰基、芳基或其任何組合。
如本文所用的，“生物粘附劑”是一種粘附于活體或剛殺死的生物表面，如粘膜(例如，粘膜粘附劑)或皮膚組織上的材料。在本發(fā)明中有用的生物粘附劑包括，但不限于，商業(yè)上現(xiàn)有的以聚卡波非名義由A.H.Robins Co.of Richmond，Virginia出售的材料，和由B.F.Goodrich Chemical Co.of Cleveland，Ohio出售的CARBOPOL″Ex55″也稱作CARBOPOL976和NOVEON All。建議的粘膜粘附劑包括，但不限于，聚(丙烯酸)(PAA)、聚(甲基丙烯酸)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、纖維素衍生物、殼聚糖、藻酸鹽、果膠和明膠。
如本文所用的，術(shù)語“治療性的”意為治愈或恢復(fù)健康，而術(shù)語“預(yù)防性的”意為保持健康或預(yù)防疾病或有助于疾病的預(yù)防。
I.酶和底物在本發(fā)明的方法和組合物中，可以使用多種酶-底物組合。本發(fā)明的治療性和/或預(yù)防性組合物的酶組分包含一種或多種過氧化物產(chǎn)生酶，包括，但不限于，脂加氧酶、前列腺素合酶或氧化還原酶。
脂加氧酶和前列腺素合酶與氧一起作用于花生四烯酸以產(chǎn)生非過氧化氫結(jié)構(gòu)。例如，一種由脂加氧酶催化的反應(yīng)產(chǎn)生5-HPETE，而由前列腺素合酶催化的反應(yīng)產(chǎn)生前列腺素G2，兩種產(chǎn)物都具有過氧化物功能(Biochemistry，Voet和Voet，第二版，John Wiley &Sons，紐約，第707-708頁(1995)。
在一個優(yōu)選的實施方案中，所述酶為氧化還原酶。氧化還原酶能夠氧化一種或多種底物以產(chǎn)生過氧化氫(例如，葡萄糖氧化酶，它將葡萄糖和氧轉(zhuǎn)化為葡萄糖酸和過氧化氫；或乙醇氧化酶，它催化伯醇與氧的相互作用以產(chǎn)生過氧化氫)。這種酶包括那些根據(jù)國際生化與分子生物學(xué)協(xié)會命名委員會(NC-IUBMB)劃分為E.C.1.-.-.-酶(氧化還原酶)的那些，例如，劃分為E.C.1.1.-.-酶(作用于供體的CH-OH基因上)的那些，或劃分為E.C.1.1.3.-酶(以氧作為受體)的那些。
本發(fā)明中有用的氧化還原酶和底物的例證性例子在表1中給出。
表1氧化還原酶
在病理狀態(tài)下，陰道pH一般是大約6-7的pH，它比健康狀態(tài)的pH約4-4.5要高得多。多種過氧化物產(chǎn)生酶在pH6-7左右產(chǎn)生高水平的過氧化物。這些酶的活性隨著pH的降低而降低。這種現(xiàn)象可以用于自我限制本發(fā)明的組合物和方法的酶。即，如果將一種酶和一種底物置于pH升高的陰道系統(tǒng)中，該酶將產(chǎn)生過氧化物。這種過氧化物將抑制病原微生物并允許有益微生物增殖。由了重建了健康的陰道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，pH會下降并且所述酶的活性會下降。這與過氧化物產(chǎn)生的需要減弱相應(yīng)，并且過氧化物的產(chǎn)生將于正常、健康的pH上減少。
此外，幾種過氧化物產(chǎn)生酶在高濃度的過氧化物，例如，大于或等于0.1％的過氧化物存在時失活。這避免了過氧化物的過量產(chǎn)生，并將過氧化物保持于對有益的陰道細(xì)菌和/或健康陰道組織有害的濃度之下。因而，本發(fā)明的一個實施方案提供自我限制的酶，包括相對于pH和環(huán)境中過氧化物濃度而自我限制的酶。
此外，可以給藥在本發(fā)明的組合物和方法中有用的酶，而不用給藥合適的底物。由哺乳動物陰道細(xì)胞分泌而存在于陰道中的物質(zhì)或由存在于陰道中的微生物產(chǎn)生的產(chǎn)物可以作為底物對于由本發(fā)明的組合物和方法的酶所進(jìn)行的過氧化物生產(chǎn)有用。
II.過氧化物產(chǎn)生酶系統(tǒng)的其它組分除了催化過氧化物產(chǎn)生的酶和合適的底物，本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步包含至少一種其它的對于陰道狀況的治療性和/或預(yù)防性治療，或減輕其癥狀的用途有效的制劑，所述狀況如陰道微菌群紊亂。例如，本發(fā)明的組合還可以包含一種或多種酸以幫助降低陰道的pH。建議的酸包括，但不限于，醋酸、已酸、硼酸和乳酸。
此外，本發(fā)明的組合物還可以包括一種局部麻醉劑，如鹽酸利多卡因，或局部類固醇，如皮質(zhì)類固醇，以減輕疼痛或搔癢。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步包括一種或多種生物粘附劑或粘膜粘附劑。包括一種生物粘附劑的組合物的益處在于陰道給藥后，所述組合物可以保持于原地幾天，以提供長期的治療。此外，包含生物粘附劑的組合物的較少應(yīng)用是達(dá)到充分功效所必需的。另外，生物粘附劑，包括熱膠化粘膜粘附劑，在促進(jìn)有益菌的生長中作為一種加溫劑而起作用。
本發(fā)明的組合物還可以包括其它的抗微生物劑，如抗細(xì)菌劑，包括但不限于甲硝唑、多粘菌素或噻肟單酰胺菌素。本發(fā)明的組合物還可以包括防御素(抗微生物肽)和/或精蛋白。另外，本發(fā)明的組合物還可以包括抗真菌劑，包括但不限于酮康唑、三康唑、伊曲康唑或氟康唑。
在本發(fā)明中有用的組合物還可以包含一種或多種可藥用的添加劑，本文指一般用于輔助處長貯存時間并且使消費者接受本發(fā)明的方法和組合物的佐劑。示例性的佐劑包括，但不限于防腐劑、潤滑劑、潤滑油、乳化劑、濕潤劑、著色劑、提供香味和/或氣味的制劑(氣味劑)。所述酶和/或底物可以包括在，例如，微膠?；蛑|(zhì)體，或一些其它的膠囊形式中，或者作為一種前體藥物或以一種延長釋放的形式進(jìn)行給藥以提供延長的保存期和/或遞送效果(例如，持續(xù)釋放)。
可以包括在本發(fā)明的組合物中的建議的防腐劑包括，但不限于，乙醇、抗壞血酸棕櫚酸酯、苯甲酸、丁羥茴醚、丁羥甲苯、氯代丁醇、乙二胺、羥苯乙酯、乙基香草醛、甘油、羥苯甲酯、硫代甘油、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、羥苯丙酯、黃樟油、苯甲酸鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、山梨酸、二氧化硫、馬來酸或沒食子酸丙酯。
可以包括在本發(fā)明的組合物中的建議的潤滑劑包括，但不限于，脂性或油性物質(zhì)，包括蓖麻油、硫化蓖麻油、可可脂、椰子油、冷膏、玉米油、棉花子油、玫瑰水油膏、白臘和白礦脂的組合物、月桂硫酸鈉、丙二醇和硬脂醇的組合物、芝麻油、可可油、肉豆蔻醇或鯊魚肝油。
可以包括于本發(fā)明組合物中的典型潤滑劑或油包括，但不限于，石蠟油、白臘或黃臘、可可脂、油酸甘油酯、橄欖油、希蒙得木油、石蠟、淀粉甘油劑、羊毛脂、親水礦脂、礦物油、軟脂、甘油單硬脂酸酯、硬脂酸、聚乙二醇、聚氧乙烯單硬脂酸酯、聚山梨酯、膽固醇或較高分子量的脂。潤滑劑和滑潤劑為產(chǎn)品提供合適的滑觸的感覺和擦進(jìn)表層的特性，以增強使用的舒適性并且鼓勵消費者在需要的時候隨時使用該產(chǎn)品。
乳化劑用來產(chǎn)生水包油乳劑。在本發(fā)明的組合物中有用的典型乳化劑包括，但不限于，藻酸鈉、阿拉伯膠、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、角叉菜膠、明膠、羥乙基纖維素、羥丙纖維素、羥丙基甲基纖維素、octoxynol-9、油醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、膨潤土、石墨、氫氧化鎂、十二烷基硫酸鈉、脫水山梨醇酯、硬脂醇、黃蓍膠、月桂酸鉀、聚氧乙烯脫水山梨醇-油酸酯或黃原膠。
可以包括于本發(fā)明的組合中的溫潤劑包括，但不限于，甘油、丙二醇、吡咯烷酮羧酸、乳酸鈉、尿素或某些天然脂混合物。建議的其它濕潤劑包括，但不限于，某些蛋白質(zhì)、明膠、透明質(zhì)酸、維生素或一些天然成分。
III.劑量A.劑量形式對于治療性、預(yù)防性和/或保健性的用途來說，可以向陰道給藥本發(fā)明的組合物，所述組合物作為一種制品或載體以陰道插入物、注射器樣涂藥器、片劑、栓劑、子宮托、粉末/滑石粉或其它固體、溶液、液體、噴霧劑、氣霧劑、可藥用的載體、沖洗劑、油膏、衛(wèi)生栓、泡沫、乳膏、膠，包括生物粘附膠(例如，一種粘膜熱膠組合物(參見，例如，遞交于2002年4月30日的美國申請?zhí)?0/135805，在此將其并入作為參考))、膏、微膠囊、陰道海綿、陰道環(huán)，或受控的持續(xù)釋放組合物的形式存在。受控的持續(xù)釋放物可以通過加入時控添加劑來獲得，如本領(lǐng)域已知的聚合結(jié)構(gòu)、微膠囊、基體等。本發(fā)明的組合物還可以通過利用熱熔擠壓制品，如生物粘附性熱熔擠壓膜片(參見，例如，美國專利號6,375,963，在此將其并入作為參考)進(jìn)行給藥。
本發(fā)明的液體組合物可以由吸收性材料，如衛(wèi)生栓或海綿，或作為噴霧/氣霧劑(利用泵型或氣霧噴霧器應(yīng)用于感染區(qū)域)進(jìn)行給藥。使用摻入本發(fā)明的陰道內(nèi)組合物的衛(wèi)生栓的益處在于它不能被稀釋或被月經(jīng)血或其它陰道排出物沖走。提供溶液形式的組合物，使得將該組合物作為陰道沖洗劑進(jìn)行給藥成為可能，所述組合物起初可以以濃縮的液體形式，或作為一種需要在使用前加入水、鹽水或其它合適的稀釋劑的可溶性粉末、片劑等進(jìn)行提供。
本發(fā)明的組合物可以通過多種方法進(jìn)行應(yīng)用，包括利用涂藥器或者患者自已插入。例如，利用涂藥器，如公知的用于施用陰道產(chǎn)品的擠壓型或柱塞型涂藥器，可以向陰道施用藥膏、洗液、栓劑、泡沫、糊劑、油膏、膠、片劑或衛(wèi)生栓。將所述組合物作為栓劑進(jìn)行給藥是有益的，因為它提供方便、舒適的應(yīng)用，增強的安全性和/或整潔性。將所述組合物作為具有低表面張力的藥膏進(jìn)行給藥是有益的，因為它提供均一的濕潤作用，有助于組合物穿入陰道皺褶，并且作為溫潤劑起作用。
一個優(yōu)選的實施方案提供在注射器樣涂藥器中的本發(fā)明的組合物(20；也稱為栓塞型涂藥器(參見圖7))。例如，可以將膠，包括但不限于生物粘附膠，置入注射器樣涂藥器(20)的第一藥室中(60)并且以障壁加以封閉(30；障壁的存在使得酶和底物相分離，從而不會反應(yīng)，同時在裝配、運輸和處理時保持于同一涂布器中，但是當(dāng)使用者壓下栓塞時將破裂)，所述膠包含底物，包括但不限于羧甲基纖維素。隨后將酶，包括但不限于乙醇氧化酶，置入注射器樣涂藥器的第二藥室(50)中并且例如通過凍干進(jìn)行穩(wěn)化以作保存，從而有助于保藏穩(wěn)定。將酶藥室按順序置于膠藥室的出口處。使用時，將涂藥器插入陰道中并且壓下栓塞(40)，它將酶再水化并且將其帶出涂藥器進(jìn)入陰道。因而，在使用時酶和底物的結(jié)合將酶活化。
另一個優(yōu)選的實施方案提供結(jié)合衛(wèi)生栓的本發(fā)明的組合物(10；圖6)。例如，將一種酶，如乙醇氧化酶作為溶液應(yīng)用于衛(wèi)生栓材料中并且在纖維上進(jìn)行干燥?；蛘?，可以首先將酶干燥并且隨后應(yīng)用于衛(wèi)生栓。在應(yīng)用過程中，所述酶被陰道中的濕氣再水化，因而將酶活化?；蛘?，在向陰道給藥之前可以用一種溶液將衛(wèi)生栓再水化。隨后所述酶可以對作為底物的衛(wèi)生栓材料起作用，可以將一種單獨的底物置于衛(wèi)生栓上，或者所述酶可以利用一種已經(jīng)存在于陰道中的底物在陰道中產(chǎn)生過氧化物。
在本發(fā)明中有用的酶和/或底物可以是限定于或者是結(jié)合于一種制品或載體/遞送媒介物上。在一個實施方案中，所述酶和/或底物可以隨時去除，從而終止過氧化物的產(chǎn)生(例如，去除包括產(chǎn)生過氧化物的底物和/或酶的衛(wèi)生栓)，并且因而終止治療。
本發(fā)明的一個實施方案提供載體的用途，所述載體作用來向陰道遞送酶并且作為那些酶的底物。在本發(fā)明的這一實施方案中，催化過氧化物產(chǎn)生的酶的底物也是遞送該酶到陰道的載體。例如，可以將乙醇氧化酶干燥并且置于一種聚(乙烯醇)支持物上。在放入陰道之前將該支持物再水化。再水化的酶在水和氧存在時氧化聚(乙烯醇)，以產(chǎn)生過氧化氫和氧化的聚(乙烯醇)。另一個例子是一種含有粘膜粘附材料的水成膠，在使用之前與所述酶混合或者作為配制過程的一部分，所述粘膜粘附材料如羧甲纖維素(優(yōu)選混以一種熱膠粘膜粘附劑)。再水化的酶隨后氧化載體，膠中的羧甲纖維素，并且產(chǎn)生過氧化物。另一個實施方案提供酶包裝于聚合微粒中。在原位上，包含醇基的聚合物被所述酶所氧化。在這種情況下，酶的釋放可以由所述微粒控制以長期生產(chǎn)所需的產(chǎn)品(例如，持續(xù)釋放)。遞送酶并且作為底物起作用的載體或制品的一個例子是衛(wèi)生栓。衛(wèi)生栓包含纖維質(zhì)材料或包括但不限于人造絲或棉的材料。纖維質(zhì)材料包含能夠被本發(fā)明的氧化還原酶氧化的醇基，以產(chǎn)生過氧化物，所述酶包括乙醇氧化酶。結(jié)合的酶遞送介質(zhì)和底物不限于在陰道中產(chǎn)生過氧化物，還可以應(yīng)用于多種生物醫(yī)藥用途，其中需要遞送酶和該酶的產(chǎn)物。需要對酶的底物進(jìn)行適當(dāng)?shù)毓こ袒O(shè)計以便它們能夠加工進(jìn)遞送介質(zhì)中，這種工程化設(shè)計可以為本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識。
此外，獨立于酶的活性，遞送/底物物質(zhì)可以以一種有益的方式產(chǎn)生改變陰道環(huán)境的降解產(chǎn)物。這類物質(zhì)可以包括被酶所作用的主鏈聚合物，將可以水解降解為酸或產(chǎn)酸物的寡聚物支鏈移植于其上。所述支鏈可以或不可以作為所述酶的底物而起作用。例如，可以制成一種具有聚已內(nèi)酯支鏈的聚(乙烯醇)主鏈，產(chǎn)生聚[聚羥基己酸乙烯酯]。所述聚(乙烯醇)可以作為乙醇氧化酶的底物而起作用以產(chǎn)生過氧化氫。聚已內(nèi)酯將水解降解為已酸。這種酸有助于降低pH和控制有害細(xì)菌生長，因而有助于恢復(fù)陰道的平衡。此外，這種物質(zhì)是可以熔解處理的并且可以形成一個系統(tǒng)以控制所述酶的遞送。此外，Laureth-4(例如，一種Laureth-4終端過氧化物)的過氧化物會釋放Laureth-4和過氧化物(例如，過氧化氫)。Laureth-4降低金黃色葡萄球菌(S.aureus)的TSS-1生產(chǎn)并且存在過氧化物以抑制不需要的厭氧菌和陰道加德納氏菌(Gardneralla vaginalisis)，因而減弱毒素的產(chǎn)生，同時重建陰道菌群。
B.酶/底物的量為了有效，在本發(fā)明組合物中酶和/或底物的量是足以恢復(fù)或保持陰道細(xì)菌菌群的健康內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定或抑制引發(fā)陰道感染，如細(xì)菌性陰道炎的微生物生長的量，同時允許有益微生物繁殖。這種量是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定的。
例如，本發(fā)明的組合物能夠以單位劑量的形式，例如，含有0.5-1000國際單位(IU)，方便地2-500IU，最方便地，10-100IU酶/劑量形式進(jìn)行給藥、例如，一個單位劑量形式可以含有1單位、2單位、3單位或更多單位的酶/大約0.5ml可藥用載體。酶的濃度可以方便地進(jìn)行變化以適應(yīng)陰道中不同體積的粘液/流體。以總體積大約為0.1ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml或更多的可藥用載體可以輕易實現(xiàn)遞送?？裳趸牡孜锿ǔＲ哉冀M合物重量大約0.05％-約99％的量存在于治療性或預(yù)防性組合物中，如占組合物重量大約0.2％-約10％。通過變化酶和底物的濃度，可以控制過氧化物產(chǎn)物的水平。
本發(fā)明組合物給藥的確切方案必須依賴治療的個體受試者的需要和治療類型。例如，治療包括感染的陰道菌群紊亂的酶的有效量，部分地依賴于過氧化物是否會進(jìn)行治療性或預(yù)防性使用、所述組合物和紊亂的嚴(yán)重性或感染和/或感染的性質(zhì)、個體的體格大小和體重等。例如，在月經(jīng)期間優(yōu)選遞送比非月經(jīng)時期產(chǎn)生更多過氧化氫的組合物。確定合適的方案在技術(shù)人員的技術(shù)范圍之內(nèi)。
應(yīng)用含有所述酶的組合物的持續(xù)時間還依賴于所述應(yīng)用是否是為預(yù)防性的目的，其中所述應(yīng)用可以是，例如，每天一次或每周一次，持續(xù)確定的時間，例如，一周、月或更久，或者所述應(yīng)用是否是為治療性目的，其中可能會采用強度更大的使用所述組合物的治療方案，持續(xù)例如2、3、4、5、6、7、10或14天或更久的時間。因而，治療性治療可以跨越幾天或幾周，有可能是以天為基礎(chǔ)的，并且可以是一天多次。例如，所需的劑量可以方便地以單一劑量或于合適的時間間隔給藥的分次劑量來給予，所述時間間隔例如每天兩次、三次、四次或更多次小劑量。小劑量本身可以進(jìn)一步分割為，例如不連續(xù)的松散間隔給藥。
在實踐中，與活性酶單位接觸的持續(xù)時間有可能會影響在劑量中所用的活性酶單位的所需濃度。例如，據(jù)認(rèn)為提供延長釋放的載體能夠提供較低濃度的活性酶單位每劑量，但是是在一個較長的時間上提供的。相反地，較短持續(xù)時間的處理，如沖洗液，能夠提供較高濃度的活性酶單位每劑量。任何在感染位點提供有效濃度的活性酶或者提供充分預(yù)防效應(yīng)的包含足夠酶的劑量形式都在常規(guī)實驗的范圍之內(nèi)，所以也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
在基本治療之后，如抗生素或抗真菌藥，或預(yù)防性地，如在月經(jīng)期間給與乳酸桿菌一次“加強”，可以給藥本發(fā)明的組合物以直接治療陰道微菌群紊亂或感染。
IV.實施例下列實施例意在例示本發(fā)明并且不應(yīng)理解為限制性的A.過氧化物的產(chǎn)生對幾種酶，包括葡萄糖氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、黃嘌呤氧化酶、半乳糖氧化酶、乙酶氧化酶和丙酮酸氧化酶測試在五種底物上的過氧化氫生產(chǎn)，所述底物包括衛(wèi)生栓材料(例如，纖維質(zhì)材料，包括，但不限于，綿和人造絲纖維)、葡聚糖、羧甲纖維素、殼聚糖和聚(乙烯醇)。
在試管中將一個單位的每種酶與0.05ml每種底物的飽和溶液(在蒸餾的、去離子水中)進(jìn)行組合并且以緩沖液(0.5M tris緩沖液，pH調(diào)節(jié)至6.3)稀釋至0.5ml。對于不溶性底物來說，將一塊底物(大約0.25克)置于試管中。將試管置于37℃的振蕩溫育器中。12小時后，移去試管并且通過已建立的方法(Graf，E.和Penniston，J.T.，″Method for Determination of Hydrogen Peroxide，With ItsApplication Illustrated byGlucose Assay，″Clinical Chemistry，26，658-660(1980))對溶液測試H2O2的水平。結(jié)果以μg H2O2/ml的形式顯示于表2中。(對于在時間上過氧化氫的產(chǎn)生，參見表1)。
表2產(chǎn)生的μg H2O2/ml乙醇氧化酶在大多數(shù)底物上具有最高水平的H2O2產(chǎn)生。
對聚(乙烯醇)進(jìn)行修飾以提高可處理性并且增強聚(乙烯醇)的酸遞送能力。這些修飾包括將聚(醋酸乙烯酯)與聚(已內(nèi)酯)反應(yīng)以產(chǎn)生一種修飾以聚(已內(nèi)酯)鏈的碳主鏈。用于產(chǎn)生這種物質(zhì)的方法如下向甲苯中的四份聚(醋酸乙烯酯)溶液加入1份聚已內(nèi)酯和催化量的對-甲苯磺酸。將得到的溶液加熱回流并且通過部分充滿了10％碳酸氫鈉溶液的Dean-Stark分水器除去釋放的醋酸。當(dāng)醋酸釋放停止時，將反應(yīng)物冷卻并且用水洗滌。在真空下去除甲苯以產(chǎn)生修飾的pva/polycap聚合物。
酶對于聚(己內(nèi)酯)鏈的作用可以發(fā)生在醇末端以及在己內(nèi)酯的酯鍵的水解中產(chǎn)生的醇上，所述水解也產(chǎn)生酸。通過直接比較(數(shù)據(jù)未顯示)，乙醇氧化酶在這種物質(zhì)上產(chǎn)生比在未修飾的聚(乙烯醇)上多產(chǎn)生22％的H2O2。
B.H2O2的效力對H2O2對于抑制病原微生物，如白色念珠菌和大腸桿菌的生長的效力進(jìn)行測試。在各種濃度的H2O2存在時亞培養(yǎng)病原微生物，利用595nm處的光密度(吸光度)追蹤它們的生長(圖2和3)。在其間發(fā)生兩種微生物的生長抑制(在6小時期間)的值是大約0.01和大約0.001％H2O2，這相應(yīng)于表2中大約10到大約100μg H2O2/ml的范圍(圖2和3)。這些數(shù)據(jù)顯示由酶進(jìn)行的H2O2的生產(chǎn)可以產(chǎn)生具有治療益處的H2O2水平。
C.過氧化物生產(chǎn)的自我限制特征進(jìn)一步研究了一種酶-底物組合，乙醇氧化酶-羧甲纖維素。在試管中將一個單位的酶與0.05ml的2.5％羧甲纖維素進(jìn)行組合并且以合適pH的緩沖液稀釋至0.5ml。將試管置于37℃的振蕩溫育器中。8小時后，移去試管并且對溶液測試H2O2的水平。
在病理(感染)狀態(tài)下，陰道pH6-7高于健康狀態(tài)的pH(pH 4-4.5)。乙醇氧化酶于pH 6.3產(chǎn)生高水平的過氧化氫。不過，乙醇氧化酶的活性隨著pH的降低而降低(圖4)。因而，如果將酶和底物置于pH升高的感染的陰道系統(tǒng)，該酶將產(chǎn)生過氧化氫。這種過氧化氫將抑制病原微生物并且允許有益微生物增殖。由于重建了健康的陰道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，pH將下降而酶，例如乙醇氧化酶的活性將降低。這與過氧化物產(chǎn)生的需要減弱相對應(yīng)，并且有效地保證了在不需要時不會產(chǎn)生過氧化氫。
本系統(tǒng)的另一個益處是某些酶，如乙醇氧化酶，在高濃度的過氧化氫存在時失活(圖5)。這一特性避免了過氧化氫的過量產(chǎn)生，并保持于對有益的陰道細(xì)菌和陰道組織有害的水平之下。
本文將所有引用的出版物、專利和專利申請并入作為參考，如同個別地并入作為參考一樣。已經(jīng)參照各種實施方案和技術(shù)對本發(fā)明進(jìn)行了介紹。不過，應(yīng)當(dāng)理解可以進(jìn)行許多變化和修飾，同時將其保持于本發(fā)明的精神和范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于治療性和預(yù)防性治療哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的組合物，所述治療包括陰道給藥有效量的含有酶的組合物，所述酶能夠在向所述哺乳動物給藥所述組合物之后產(chǎn)生過氧化物。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述酶包括氧化還原酶、脂加氧酶或前列腺素合酶。
3.權(quán)利要求2的組合物，其中所述氧化還原酶包括選自下列的酶蘋果酸氧化酶、葡萄糖氧化酶、己糖氧化酶、膽固醇氧化酶、芳基醇氧化酶、1-古洛糖酸內(nèi)酯氧化酶、半乳糖氧化酶、吡喃糖氧化酶、1-山梨糖氧化酶、吡哆醇4-氧化酶、乙醇氧化酶、兒茶酚氧化酶、(S)-2-羥酸氧化酶、蛻皮素氧化酶、膽堿氧化酶、仲醇氧化酶、4-羥基扁桃酸氧化酶、長鏈醇氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、黃嘌呤氧化酶、硫胺素氧化酶、1-半乳糖酸內(nèi)酯氧化酶、纖維二糖氧化酶、非洲防己堿氧化酶、羥基植烷酸氧化酶、核苷氧化酶、N-芳基己糖胺氧化酶、聚乙烯醇氧化酶、甲醇氧化酶、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯氧化酶、香草基-醇氧化酶、D-甘露醇氧化酶及其混合物。
4.權(quán)利要求2的組合物，其中所述氧化還原酶包括葡萄糖氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、黃嘌呤氧化酶、膽固醇氧化酶、半乳糖氧化酶、乙醇氧化酶或丙酮酸氧化酶。
5.權(quán)利要求2的組合物，其中所述氧化還原酶包括乙醇氧化酶。
6.權(quán)利要求1的組合物，其中所述酶包括自我限制的酶。
7.權(quán)利要求1的組合物，其中所述酶在高水平的過氧化物或低pH存在時失活。
8.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物還包含底物，所述酶能夠?qū)λ龆任镒饔靡援a(chǎn)生過氧化物。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中所述底物包含可氧化的底物。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中所述可氧化的底物包含(S)-蘋果酸、β-D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、麥芽糖、乳糖、纖維二糖、膽固醇、芳族伯醇、伯醇、L-古洛糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-半乳糖、D-木糖、L-山梨糖、D-葡萄糖酸-1，5-內(nèi)酯、吡哆醇、兒茶酚、(S)-2-羥酸、蛻皮素、膽堿、仲醇、(S)-2-羥基-2-(4-羥基苯基)醋酸、長鏈醇、長鏈脂肪醇、sn-甘油3-磷酸、黃嘌呤、次黃嘌呤、硫胺素、L-半乳糖酸-1，4-內(nèi)酯、L-半乳糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-阿卓糖酸-1，4-內(nèi)酯、L-巖藻糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-蘇氨酸-1，4-內(nèi)酯、纖維糊精、纖維素、乳糖、4-β-D-葡糖基-D-甘露糖、非洲防己堿、L-2-羥基植烷酸、肌苷、腺苷、核苷、2’-脫氧核苷、阿拉伯糖苷、N-乙酰-D-葡糖胺、N-羥乙酰葡糖胺、N-乙?；肴樘前?、N-乙?；事短前?、聚乙烯醇、甲醇、脂族醇、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯、香草醇、甘露醇、D-阿拉伯糖醇、D-山梨糖醇或其混合物。
11.權(quán)利要求9的組合物，其中所述可氧化的底物包含纖維素、葡聚糖、羧甲纖維素、殼聚糖或聚(乙烯醇)。
12.權(quán)利要求9的組合物，其中所述可氧化的底物包含聚(乙烯醇)，聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，或其組合。
13.權(quán)利要求8的組合物，其中所述底物包含纖維素、葡聚糖、羧甲纖維素、殼聚糖、聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，并且所述酶包含乙醇氧化酶。
14.權(quán)利要求8的組合物，其中所述底物包含聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，并且所述酶包含乙醇氧化酶。
15.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物還包含一種載體，用于將所述組合物遞送至陰道中。
16.權(quán)利要求15的組合物，其中所述載體包含陰道插入物、片劑、栓劑、子宮托、粉末、滑石粉或其它固體、溶液、液體、噴霧劑、氣霧劑、沖洗劑、油膏、衛(wèi)生栓、注射器樣涂藥器、泡沫、乳膏、凝膠、生物粘附凝膠、糊劑、微膠囊、陰道海綿、陰道環(huán)、受控的持續(xù)釋放組合物或其組合。
17.權(quán)利要求15的組合物，其中所述酶限制于載體上。
18.權(quán)利要求17的組合物，其中所述載體包含衛(wèi)生栓。
19.權(quán)利要求15的組合物，其中所述載體也是底物，所述酶能夠?qū)ζ渥饔靡援a(chǎn)生過氧化物。
20.權(quán)利要求19的組合物，其中所述載體和底物包含衛(wèi)生栓材料。
21.權(quán)利要求19的組合物，其中所述載體和底物包含聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，所述凝膠包含粘膜粘性物質(zhì)的膠或其組合。
22.權(quán)利要求8或15的組合物，其中所述酶、底物或載體產(chǎn)生不同于過氧化物的有益物質(zhì)。
23.權(quán)利要求22的組合物，其中所述有益物質(zhì)包含酸。
24.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物還包含酸、抗生素、麻醉劑、防御素或抗真菌藥。
25.權(quán)利要求1的組合物，其中所述哺乳動物為人。
26.權(quán)利要求8的組合物，其中所述組合物包含大約0.5-約1000單位的酶和大約0.05％-約99％重量的底物。
27.一種治療或預(yù)防哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的方法，包括陰道給藥有效量的含有酶的組合物，所述酶能夠在向所述哺乳動物給藥所述組合物之后產(chǎn)生過氧化物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述酶是一種氧化還原酶。
29.權(quán)利要求28的方法，其中所述氧化還原酶包含選自下列的酶蘋果酸氧化酶、葡萄糖氧化酶、己糖氧化酶、膽固醇氧化酶、芳基醇氧化酶、1-古洛糖酸內(nèi)酯氧化酶、半乳糖氧化酶、吡喃糖氧化酶、1-山梨糖氧化酶、吡哆醇4-氧化酶、乙醇氧化酶、兒茶酚氧化酶、(S)-2-羥酸氧化酶、蛻皮素氧化酶、膽堿氧化酶、仲醇氧化酶、4-羥基扁桃酸氧化酶、長鏈醇氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、黃嘌呤氧化酶、硫胺素氧化酶、1-半乳糖酸內(nèi)酯氧化酶、纖維二糖氧化酶、非洲防己堿氧化酶、羥基植烷酸氧化酶、核苷氧化酶、N-芳基己糖胺氧化酶、聚乙烯醇氧化酶、甲醇氧化酶、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯氧化酶、香草基-醇氧化酶、D-甘露醇氧化酶及其混合物。
30.權(quán)利要求28的方法，其中所述氧化還原酶包括葡萄糖氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、黃嘌呤氧化酶、膽固醇氧化酶、半乳糖氧化酶、乙醇氧化酶或丙酮酸氧化酶。
31.權(quán)利要求28的方法，其中所述氧化還原酶包括乙醇氧化酶。
32.權(quán)利要求27的方法，其中所述酶包括自我限制的酶。
33.權(quán)利要求27的方法，其中所述酶在高水平的過氧化物或低pH存在時失活。
34.權(quán)利要求27的方法，其中還包含一種底物，所述酶能夠?qū)ζ渥饔靡援a(chǎn)生過氧化物。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述底物包含可氧化的底物。
36.權(quán)利要求9的組合物，其中所述可氧化的底物包含(S)-蘋果酸、β-D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、麥芽糖、乳糖、纖維二糖、膽固醇、芳族伯醇、伯醇、L-古洛糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-半乳糖、D-木糖、L-山梨糖、D-葡萄糖酸-1，5-內(nèi)酯、吡哆醇、兒茶酚、(S)-2-羥酸、蛻皮素、膽堿、仲醇、(S)-2-羥基-2-(4-羥基苯基)醋酸、長鏈醇、長鏈脂肪醇、sn-甘油3-磷酸、黃嘌呤、次黃嘌呤、硫胺素、L-半乳糖酸-1，4-內(nèi)酯、L-半乳糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-阿卓糖酸-1，4-內(nèi)酯、L-巖藻糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯、D-蘇氨酸-1，4-內(nèi)酯、纖維糊精、纖維素、乳糖、4-β-D-葡糖基-D-甘露糖、非洲防己堿、L-2-羥基植烷酸、肌苷、腺苷、核苷、2’-脫氧核苷、阿拉伯糖苷、N-乙酰-D-葡糖胺、N-羥乙酰葡糖胺、N-乙?；肴樘前?、N-乙?；事短前?、聚乙烯醇、甲醇、脂族醇、D-阿拉伯糖酸-1，4-內(nèi)酯、香草醇、甘露醇、D-阿拉伯糖醇或D-山梨糖醇或其混合物。
37.權(quán)利要求35的方法，其中所述可氧化的底物包含纖維素、葡聚糖、羧甲纖維素、殼聚糖、聚(乙烯醇)、聚(乙烯醇)的衍生物或其組合，所述聚(乙烯醇)的衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)。
38.權(quán)利要求35的方法，其中所述可氧化的底物包含聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物或其組合，所述聚(乙烯醇)的衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)。
39.權(quán)利要求34的方法，其中所述底物包含纖維素、葡聚糖、羧甲纖維素、殼聚糖、聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，并且所述酶包含乙醇氧化酶。
40.權(quán)利要求34的方法，其中所述底物包含聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，并且所述酶包含乙醇氧化酶。
41.權(quán)利要求27的方法，其中還包含載體，用于將所述組合物遞送至陰道中。
42.權(quán)利要求41的方法，其中所述載體包含陰道插入物、片劑、栓劑、子宮托、粉末、滑石粉或其它固體、溶液、液體、噴霧劑、氣霧劑、沖洗劑、油膏、衛(wèi)生栓、注射器樣涂藥器、泡沫、乳膏、膠、包括生物粘附膠、糊劑、微膠囊、陰道海綿、陰道環(huán)、受控的持續(xù)釋放組合物或其組合。
43.權(quán)利要求41的方法，其中所述酶限制于載體上。
44.權(quán)利要求43的方法，其中所述載體包含衛(wèi)生栓。
45.權(quán)利要求44的方法，其中從陰道中去除所述衛(wèi)生栓導(dǎo)致治療的終止。
46.權(quán)利要求41的方法，其中所述載體也是底物，所述酶能夠?qū)ζ渥饔靡援a(chǎn)生過氧化物。
47.權(quán)利要求46的方法，其中所述載體和底物包含衛(wèi)生栓材料。
48.權(quán)利要求46的方法，其中所述載體和底物包含聚(乙烯醇)或聚(乙烯醇)的衍生物，所述衍生物包括已經(jīng)與聚(己內(nèi)酯)反應(yīng)過的聚(醋酸乙烯酯)，所述凝膠包含粘膜粘性物質(zhì)的膠或其組合。
49.權(quán)利要求34或41的方法，其中所述酶、底物或載體產(chǎn)生一種不同于過氧化物的有益物質(zhì)。
50.權(quán)利要求49的方法，其中所述有益物質(zhì)是酸。
51.權(quán)利要求27的方法，其中還包含酸、抗生素、麻醉劑、防御素或抗真菌藥。
52.權(quán)利要求27的方法，其中陰道細(xì)菌菌群紊亂是與健康陰道環(huán)境相比革蘭氏陽性菌數(shù)目減少或革蘭氏陰性菌數(shù)目增多。
53.權(quán)利要求27的方法，其中陰道細(xì)菌菌群紊亂是一種陰道感染。
54.權(quán)利要求53的方法，其中陰道感染是細(xì)菌性或真菌性源的。
55.權(quán)利要求53的方法，其中陰道感染是與健康陰道相比革蘭氏陰性細(xì)菌濃度提高的結(jié)果。
56.權(quán)利要求53的方法，其中陰道感染是與健康陰道相比革蘭氏陽性細(xì)菌濃度下降的結(jié)果。
57.權(quán)利要求53的方法，其中陰道感染是細(xì)菌性陰道炎。
58.權(quán)利要求27的方法，其中所述組合物的給藥促進(jìn)革蘭氏陽性細(xì)菌的生長。
59.權(quán)利要求27的方法，其中所述組合物的給藥抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長。
60.權(quán)利要求34的方法，其中所述組合物包含大約0.5-約1000單位的酶和大約0.05％-約99％重量的底物。
61.權(quán)利要求27的方法，其中所述哺乳動物為人。
62.一種用于治療性和預(yù)防性治療哺乳動物中陰道細(xì)菌菌群紊亂的制品，所述制品包含能夠產(chǎn)生過氧化物的酶，所述制品適用于陰道。
63.權(quán)利要求62的制品，所述制品包含陰道插入物、片劑、栓劑、子宮托、粉末、滑石粉或其它固體、溶液、液體、噴霧劑、氣霧劑、沖洗劑、油膏、衛(wèi)生栓、注射器樣涂藥器、泡沫、乳膏、膠、包括生物粘附膠、糊劑、微膠囊、陰道海綿、陰道環(huán)、受控的持續(xù)釋放組合物或其組合。
64.權(quán)利要求62的制品，所述制品包含一種衛(wèi)生栓。
65.權(quán)利要求64的制品，其中所述衛(wèi)生栓包含纖維質(zhì)材料。
66.權(quán)利要求65的制品，其中所述纖維質(zhì)材料包含人造絲、棉或其組合。
67.權(quán)利要求62的制品，所述制品包含注射器樣涂藥器。
68.權(quán)利要求62的制品，所述制品還包含底物，所述酶能夠?qū)λ龅孜镒饔靡援a(chǎn)生過氧化物。
69.權(quán)利要求68的制品，所述制品包含注射器樣涂藥器。
70.權(quán)利要求69的制品，其中底物和酶都存在于注射器樣涂藥器中。
71.權(quán)利要求70的制品，其中底物和酶被注射器樣涂藥器中的障壁所分隔。
全文摘要
本發(fā)明涉及陰道內(nèi)給藥過氧化物產(chǎn)生酶和底物的方法和組合物，以促進(jìn)革蘭氏陽性菌的生長，抑制革蘭氏陰性菌，促進(jìn)氧化性環(huán)境，和/或治療或預(yù)防陰道細(xì)菌菌群紊亂，所述陰道細(xì)菌菌群紊亂伴有革蘭氏陽性菌的減少和諸如革蘭氏陰性菌的病原微生物的增多，導(dǎo)致陰道感染。
文檔編號A61F13/02GK1725991SQ200380106378
公開日2006年1月25日 申請日期2003年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月30日
發(fā)明者R·佩恩, C·塞爾 申請人:金伯利-克拉克環(huán)球有限公司