專利名稱：：用作ppar(過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體)配體來(lái)治療高脂血癥和糖尿病的2－{－3－′2...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有環(huán)己基甲氧基取代基的乙酸衍生物、其制備方法和其作為藥物的用途以及其生理上耐受的鹽和生理功能性衍生物。具有類似結(jié)構(gòu)的化合物已經(jīng)在本領(lǐng)域被描述為用于治療高脂血癥和糖尿病(WO2004/076427)。本發(fā)明基于如下目的發(fā)現(xiàn)一種特別有效的化合物，其允許可用于治療的對(duì)脂類和/或碳水化合物代謝的調(diào)節(jié)并因此適用于預(yù)防和/或治療疾病如2型糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化及其多種后遺癥。這已經(jīng)通過(guò)選擇如下文所述的化合物得以實(shí)現(xiàn)，該化合物除了顯示出特別好的PPARα作用外，還出人意料地顯示出相應(yīng)的好的PPARγ作用。因此，本發(fā)明涉及式I化合物及其生理上耐受的鹽、溶劑化物和生理功能性衍生物，其中含義為R為H、CF3；R1為H、CF3、(C1-C6)烷基、苯基、苯氧基；R2為H、(C1-C4)烷基、O-(C1-C4)烷基、CF3；或R1和R2與苯基環(huán)一起為稠合萘基；R3為(C1-C6)烷基；R4為(C1-C6)烷基、芐基；R5為H、(C1-C6)烷基。優(yōu)選的式I化合物是那些化合物，其中R為H；R1為H、甲基、丁基、苯基、苯氧基或CF3；R2為H、甲基、甲氧基或CF3；R1和R2與苯基環(huán)一起為稠合萘基；R3為乙基或丙基；R4為甲基；且R5為H。取代基R、R1、R2、R3、R4和R5中的烷基可以是直鏈或支鏈。式I化合物含有至少兩個(gè)不對(duì)稱中心，并且可以含有更多個(gè)不對(duì)稱中心。因此，式I化合物可以以它們的外消旋物、外消旋混合物、純對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)混合物的形式存在。本發(fā)明包括式I化合物的所有這些異構(gòu)形式。這些異構(gòu)形式可通過(guò)已知方法獲得，即使其中一些沒(méi)有被明確描述。由于水溶性高于起始或基礎(chǔ)化合物，可藥用鹽特別適于醫(yī)藥應(yīng)用。這些鹽必須具有可藥用的陰離子或陽(yáng)離子。本發(fā)明化合物的適宜的可藥用酸加成鹽為無(wú)機(jī)酸鹽和有機(jī)酸鹽，所述的無(wú)機(jī)酸例如是鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸，所述的有機(jī)酸例如是乙酸、苯磺酸、苯甲酸、枸櫞酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、乙醇酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、馬來(lái)酸、蘋果酸、甲磺酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸和酒石酸。適宜的可藥用堿性鹽為銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)、氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)、二乙醇胺、賴氨酸或乙二胺。作為用于制備或純化可藥用鹽和/或用于非治療應(yīng)用、例如體外應(yīng)用的有用中間體的具有不可藥用陰離子的鹽、例如三氟乙酸鹽同樣屬于本發(fā)明的范圍。本文所用的術(shù)語(yǔ)“生理功能性衍生物”是指施用于哺乳動(dòng)物(如人)后能夠(直接或間接)生成式I化合物或其活性代謝物的本發(fā)明式I化合物的任何生理學(xué)上耐受的衍生物，例如酯。生理功能性衍生物還包括本發(fā)明化合物的前體藥物，例如如H.Okada等，Chem.Pharm.Bull.1994，42，57-61中所述。這類前體藥物可以被體內(nèi)代謝為本發(fā)明的化合物。這些前體藥物本身可以具有或不具有活性。本發(fā)明的化合物也可以以不同的多晶型形式存在，例如以無(wú)定形和結(jié)晶性多晶型形式存在。本發(fā)明的化合物的所有多晶型形式均被本發(fā)明的范圍所涵蓋，是本發(fā)明的另一方面。下文所有提及的“式I化合物”均是指以上所述的式I化合物以及本文所述的它們的鹽、溶劑化物和生理功能性衍生物。用途本發(fā)明還涉及式I化合物和它們的藥物組合物作為PPAR受體配體的用途。本發(fā)明的PPAR受體配體適宜作為PPAR受體活性的調(diào)節(jié)劑。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)是可以通過(guò)配體激活且屬于核激素受體類的轉(zhuǎn)錄因子。有三種PPAR同型，PPARα、PPARγ和PPARδ，它們由不同基因編碼(過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)結(jié)構(gòu)、激活機(jī)理和不同功能.MotojimaK，CellStructFunct.，1993年10月，18(5)，267-77)。存在兩種PPARγ變體，即PPARγ1和PPARγ2，它們是啟動(dòng)子選擇使用和差別mRNA剪接的結(jié)果(Vidal-Puig等，J.Clin.Invest.，972553-2561，1996)。不同的PPAR受體具有不同的組織分布并且調(diào)節(jié)不同的生理功能。PPAR受體在大量基因調(diào)節(jié)的各個(gè)方面起關(guān)鍵作用，這些基因的產(chǎn)物至關(guān)重要地直接或間接參與脂類和碳水化合物代謝。因此，例如，PPARα受體在肝臟中的脂肪酸分解代謝或脂蛋白代謝的調(diào)節(jié)中起重要作用，而PPARγ至關(guān)重要地參與例如脂肪細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)。然而，PPAR受體還另外參與多種其它生理過(guò)程的調(diào)節(jié)，包括不直接與碳水化合物或脂類代謝相關(guān)聯(lián)的生理過(guò)程。不同PPAR受體的活性可以通過(guò)多種脂肪酸、脂肪酸衍生物和合成化合物來(lái)不同程度地調(diào)節(jié)。對(duì)于涉及功能、生理作用以及病理生理學(xué)的相關(guān)綜述，參見(jiàn)JoelBerger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；TimothyWilson等，J.Med.Chem.，2000，43卷，第4期，527-550；StevenKliewer等，RecentProgHormRes.，2001，56，239-63。本發(fā)明涉及適于調(diào)節(jié)PPAR受體活性、特別是PPARα和PPARγ的活性的式I化合物?；谡{(diào)節(jié)的特性，式I化合物適宜用于治療、控制和預(yù)防下文所述的適應(yīng)癥以及一系列其它相關(guān)的醫(yī)藥應(yīng)用(例如參見(jiàn)JoelBerger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；TimothyWilson等，J.Med.Chem.，2000，43卷，第4期，527-550；StevenKliewer等，RecentProgHormRes.，2001，56239-63；Jean-CharlesFruchart，BartStaels和PatrickDuriezPPARS，代謝疾病和動(dòng)脈硬化，PharmacologicalResearch，44卷，第5期，2001；SanderKersten，BeatriceDesvergne&WalterWahliPPAR在健康和疾病中的作用，Nature，405卷，2000年5月25日；InesPinedaTorra，GiuliaChinetti，CarolineDuval，Jean-CharlesFruchart和BartStaels過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體從轉(zhuǎn)錄控制到臨床實(shí)踐，CurrOpinLipidol122001，245-254)。此類化合物特別適用于治療和/或預(yù)防1.-脂肪酸代謝紊亂和葡萄糖利用紊亂-其中涉及抗胰島素性的紊亂2.-糖尿病，特別是2型糖尿病，包括與之有關(guān)的后遺癥的預(yù)防。其中的具體方面是-高血糖癥，-抗胰島素性增加，-葡萄糖耐量增加，-胰腺β細(xì)胞的保護(hù)-大-和微血管紊亂的預(yù)防3.血脂異常癥和它們的后遺癥，例如動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦血管病等，特別是下述一個(gè)或多個(gè)因素表征的疾病(但不限于此)-高血漿甘油三酯濃度，高餐后血漿甘油三酯濃度-低HDL膽固醇濃度-低ApoA脂蛋白濃度-高LDL膽固醇濃度-低密度LDL膽固醇顆粒-高ApoB脂蛋白濃度4.與代謝綜合征有關(guān)的多種其它病癥，如-肥胖癥(超重)，包括向心性肥胖-血栓形成、高凝性和血栓形成前狀態(tài)(動(dòng)脈和靜脈)-高血壓-心力衰竭，例如(但不限于此)心肌梗塞、高血壓性心臟病或心肌病后的心力衰竭5.其中涉及例如炎性反應(yīng)或細(xì)胞分化過(guò)的疾病或病癥-動(dòng)脈粥樣硬化，例如(但不限于此)冠狀動(dòng)脈硬化，包括心絞痛或心肌梗塞、中風(fēng)。-血管再狹窄或再閉塞-慢性炎性腸病，例如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎-胰腺炎-其它炎性狀態(tài)-視網(wǎng)膜病變-脂肪細(xì)胞腫瘤-脂肪細(xì)胞癌，例如脂肉瘤-實(shí)體瘤和贅生物，例如(但不限于此)胃腸道癌、肝癌、膽管癌、胰腺癌、內(nèi)分泌腫瘤、肺癌、腎癌和泌尿道癌、生殖道癌、前列腺癌等-急性和慢性骨髓增生性疾病和淋巴瘤-血管生成-神經(jīng)變性疾病-阿爾茨海默病-多發(fā)性硬化癥-帕金森病-紅斑鱗屑性皮膚病，例如銀屑病-尋常痤瘡-由PPAR調(diào)節(jié)的其它皮膚病和皮膚病學(xué)病癥-濕疹和神經(jīng)性皮炎-皮炎，例如脂溢性皮炎或光照性皮炎-角膜炎和角化病，例如脂溢性角化病、老年角化病、光化性角化病、光誘導(dǎo)性角化病或毛囊角化病-瘢痕瘤和瘢痕瘤預(yù)防-疣，包括濕疣或尖銳濕疣-人乳頭瘤病毒(HPV)感染，例如性病疣、病毒性疣，例如傳染性軟疣、粘膜白斑病-丘疹皮膚病，例如扁平苔癬-皮膚癌，例如基底細(xì)胞癌、黑素瘤或皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤-局限性良性表皮瘤，例如角皮病、表皮痣-凍瘡-高血壓-X綜合征-多囊性卵巢綜合征(PCOS)-哮喘-骨關(guān)節(jié)炎-紅斑狼瘡(LE)或炎性風(fēng)濕病，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎-脈管炎-消瘦(惡病質(zhì))-痛風(fēng)-缺血/再灌注綜合征-急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)。制劑為了達(dá)到所需生物學(xué)作用而需要的式I化合物的量取決于多種因素，例如所選擇的具體化合物、預(yù)期用途、施用方式和患者的臨床狀況。日劑量一般為0.001mg至100mg(通常0.01mg至50mg)/天/千克體重，例如0.1-10mg/kg/天。靜脈內(nèi)劑量可以是例如0.001mg至1.0mg/kg，可以合適地以10ng至100ng/千克/分鐘輸注施用。適于這些目的的輸液可以含有例如0.1ng至10mg、通常1ng至10mg/毫升。單個(gè)劑量可以含有例如1mg至10g活性成分。因此，注射用安瓿劑可以含有例如1mg至100mg，可以口服施用的單劑量制劑、例如膠囊劑或片劑可以含有例如0.05至1000mg，通常0.5至600mg。對(duì)于上述病癥的治療，式I化合物可以以化合物本身的形式使用，不過(guò)它們優(yōu)選是含可接受載體的藥物組合物形式。當(dāng)然載體必須是可接受的，這意味著它與組合物的其它成分是相容的，并且對(duì)患者的健康無(wú)害。載體可以是固體或液體或者是固體和液體，優(yōu)選地與化合物配制成單劑量，例如片劑，所述的單劑量可以含有0.05至95重量％的活性成分。也可以存在包括其它式I化合物在內(nèi)的其它藥學(xué)活性物質(zhì)。本發(fā)明的藥物組合物可以用已知的制藥方法之一制備，所述方法主要包括將活性成分與藥理學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑混合。本發(fā)明的藥物組合物是適于口服、直腸、局部、經(jīng)口(例如舌下)和胃腸道外(例如皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)或靜脈內(nèi))施用的那些，但是在每種情況下最適宜的施用方式取決于所治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及在每種情況下所用的式I化合物的類型。包衣制劑和包衣緩釋制劑也被本發(fā)明的范圍所涵蓋。優(yōu)選耐酸的和耐胃液的制劑。適宜的耐胃液的包衣包括醋酞纖維素、聚醋酸乙烯鄰苯二甲酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯和甲基丙烯酸與甲基丙烯酸甲酯的陰離子聚合物。適于口服施用的藥物制劑可以是獨(dú)立的單位形式，例如膠囊劑、扁囊劑、可吮吸片劑(suckabletablet)或片劑，其中每個(gè)單位形式含有確定量的式I化合物；散劑或顆粒劑；在水性或非水性液體中的溶液劑或混懸劑；或者水包油型或油包水型乳劑。如已經(jīng)提及的那樣，這些組合物可以通過(guò)任何適宜的藥學(xué)方法制備，所述方法包括使活性成分與載體(其可以含有一種或多種另外的成分)相接觸的步驟。一般而言，組合物可以通過(guò)以下方法制備將活性成分與液體和/或微細(xì)粉碎的固體載體均勻且均質(zhì)地混合，如果必要，之后使產(chǎn)品成形。因此，例如，片劑可以通過(guò)將化合物、酌情與一種或多種另外的成分的粉末或顆粒進(jìn)行壓制或成形來(lái)制備。壓制片可以通過(guò)在適宜的機(jī)器中將酌情與粘合劑、助流劑、惰性稀釋劑和/或一種(或多種)表面活性劑/分散劑混合的自由流動(dòng)形式、例如粉末或顆粒形式的化合物進(jìn)行壓片來(lái)制備。成形片可以通過(guò)在適宜的機(jī)器中將被惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉狀化合物成形來(lái)制備。適于經(jīng)口(舌下)施用的藥物組合物包括含有式I化合物以及矯味劑、通常是蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠的可吮吸片劑，和含有在惰性基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中的化合物的錠劑。適于胃腸道外施用的藥物組合物優(yōu)選包括式I化合物的無(wú)菌水性制劑，其優(yōu)選與預(yù)期接受者的血液等張。這些制劑優(yōu)選靜脈內(nèi)施用，但是也可以以注射劑形式皮下、肌內(nèi)或皮內(nèi)施用。這些制劑優(yōu)選可通過(guò)將化合物與水混合以及使得到的溶液滅菌并與血液等張來(lái)制備。本發(fā)明的注射用組合物一般含有0.1至5重量％的活性化合物。適于直腸施用的藥物組合物優(yōu)選為單劑量栓劑形式。這些組合物可以通過(guò)將式I化合物與一種或多種常規(guī)的固體載體例如可可脂混合并將所得混合物成形來(lái)制備。適于局部應(yīng)用于皮膚的藥物組合物優(yōu)選為軟膏劑、乳膏劑、洗劑、糊劑、噴霧劑、氣霧劑或油形式。可使用的載體有凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇和兩種或多種這些物質(zhì)的組合。活性成分的濃度一般為組合物重量的0.1至15％，例如0.5至2％。透皮施用也是可能的。適于透皮應(yīng)用的藥物組合物可以是適宜與患者的表皮長(zhǎng)期緊密接觸的單個(gè)硬膏劑形式。該類硬膏劑適宜地含有活性成分，所述活性成分處于酌情被緩沖的水溶液中、溶解于和/或分散于膠粘劑中或分散于聚合物中。適宜的活性成分濃度為約1％至35％，優(yōu)選約3％至15％?；钚猿煞挚梢酝ㄟ^(guò)電轉(zhuǎn)運(yùn)或離子導(dǎo)入法被釋放，如例如PharmaceuticalResearch，2(6)318(1986)中所述。式I化合物通過(guò)有利地作用于代謝障礙而區(qū)別于其它化合物。它們對(duì)脂類和碳水化合物代謝具有有利的作用，特別是它們可降低甘油三酯水平，適于預(yù)防和治療II型糖尿病和動(dòng)脈硬化及其多種后遺癥。與其它藥物的組合本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)施用或與一種或多種其它藥學(xué)活性物質(zhì)例如能有利地作用于代謝紊亂或常常與之有關(guān)的疾病的藥學(xué)活性物質(zhì)組合施用。這些藥物的實(shí)例有1.降血糖藥、抗糖尿病藥，2.用于治療血脂異常癥的活性成分，3.抗動(dòng)脈粥樣硬化藥，4.抗肥胖劑，5.抗炎活性成分，6.用于治療惡性腫瘤的活性成分，7.抗血栓形成的活性成分，8.用于治療高血壓的活性成分，9.用于治療心力衰竭的活性成分以及10.用于治療和/或預(yù)防由糖尿病引起的或與糖尿病有關(guān)的并發(fā)癥的活性成分。它們可以與本發(fā)明的式I化合物組合使用，特別是用于產(chǎn)生協(xié)同增強(qiáng)作用。通過(guò)將活性成分分別施用于患者或以其中多種活性成分存在于一種藥物制劑中的組合產(chǎn)品的形式可以施用活性成分的組合?？商峒暗膶?shí)例有抗糖尿病藥適宜的抗糖尿病藥例如在RoteListe2001，第12章中或在USPDictionaryofUSANandInternationalDrugNames，USPharmacopeia，Rockville2001中公開(kāi)?？固悄虿∷幇ㄋ幸葝u素和胰島素衍生物，例如Lantus(參見(jiàn)www.lantus.com)或Apidra以及其它速效胰島素(參見(jiàn)US6,221,633)、GLP-1受體調(diào)節(jié)劑，如WO01/04146等中所述，例如在NovoNordiskA/S的WO98/08871中公開(kāi)的那些?？诜行У慕笛腔钚猿煞謨?yōu)選包括磺酰脲類、雙胍類、氯茴苯酸類、二唑烷二酮類、噻唑烷二酮類、葡糖苷酶抑制劑、胰高血糖素拮抗劑、口服GLP-1激動(dòng)劑、DPP-IV抑制劑、鉀通道開(kāi)放劑，例如在WO97/26265和WO99/03861中所公開(kāi)的那些、胰島素增敏劑、與刺激糖異生和/或糖原分解有關(guān)的肝酶的抑制劑、葡萄糖攝取調(diào)節(jié)劑、改變脂類代謝和導(dǎo)致血液脂類組成改變的化合物、減少食物攝入或食物吸收的化合物、PPAR和PXR調(diào)節(jié)劑以及作用于β細(xì)胞的ATP-依賴性鉀通道的活性成分。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與胰島素組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與影響肝糖生成的物質(zhì)如糖原磷酸化酶抑制劑(參見(jiàn)WO01/94300、WO02/096864、WO03/084923、WO03/084922、WO03/104188)組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與磺酰脲類例如甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪或格列美脲組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與作用于β細(xì)胞的ATP-依賴性鉀通道的活性成分例如甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列美脲或瑞格列奈組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與雙胍類例如二甲雙胍組合施用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與氯茴苯酸類例如瑞格列奈組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與噻唑烷二酮類例如環(huán)格列酮、吡格列酮、羅格列酮或Dr.Reddy’sResearchFoundation的WO97/41097中所公開(kāi)的化合物、特別是5-[[4-[(3，4-二氫-3-甲基-4-氧代-2-喹唑啉基)甲氧基]苯基]甲基]-2，4-噻唑烷二酮組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與DPPIV抑制劑例如WO98/19998、WO99/61431、WO99/67278、WO99/67279、WO01/72290、WO02/38541、WO03/040174中所述的那些、特別是P93/01(1-環(huán)戊基-3-甲基-1-氧代-2-戊基氯化銨)、P-31/98、LAF237(1-[2-(3-羥基金剛烷-1-基氨基)乙?；鵠吡咯烷-2-(S)-甲腈)、TS021((2S，4S)-4-氟-1-[[(2-羥基-1，1-二甲基乙基)氨基]乙?；鵠吡咯烷-2-甲腈單苯磺酸鹽)組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與PPARγ激動(dòng)劑例如羅格列酮、吡格列酮組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與對(duì)SGLT-1和/或2有抑制作用的化合物、例如直接或間接在WO2004/007517、WO2004/052902和WO2004/052903中公開(kāi)的那些化合物組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與α-葡糖苷酶抑制劑例如米格列醇或阿卡波糖組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與一種以上的上述化合物、例如與磺酰脲和二甲雙胍、磺酰脲和阿卡波糖、瑞格列奈和二甲雙胍、胰島素和磺酰脲、胰島素和二甲雙胍、胰島素和曲格列酮、胰島素和洛伐他汀等組合施用。脂類調(diào)節(jié)劑在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與HMGCoA還原酶抑制劑如洛伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、ivastatin、伊伐他汀、阿托伐他汀、羅蘇伐他汀組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與膽酸吸收抑制劑(參見(jiàn)例如US6,245,744、US6,221,897、US6,227,831、EP0683773、EP0683774)組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與聚合膽酸吸附劑例如考來(lái)烯胺、考來(lái)維侖組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與膽固醇吸收抑制劑例如WO0250027中所述的那些或依澤替米貝、替奎安、帕馬苷組合施用。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與LDL受體誘導(dǎo)劑(參見(jiàn)例如US6,342,512)組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與填充劑、優(yōu)選不溶性填充劑(參見(jiàn)例如carob/Caromax(ZunftHJ；等，用于治療高膽固醇血癥的角豆果肉制品，ADVANCESINTHERAPY(2001年9月-10月)，18(5)，230-6)；Caromax是一種由Nutrinova，NutritionSpecialties&FoodIngredientsGmbH，IndustieparkHchst，65926Frankfur/Main提供的含角豆的產(chǎn)品)組合施用?？赡苁窃谝粋€(gè)制劑中或通過(guò)分別施用式I化合物和Caromax來(lái)實(shí)現(xiàn)與Caromax組合。Caromax在本文中也可以以食物產(chǎn)品形式施用，例如以烘烤產(chǎn)品或穆茲利棒形式施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與PPARα激動(dòng)劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與混合型PPARα/γ激動(dòng)劑、例如AZ242(Tesaglitazar，(S)-3-(4-[2-(4-甲磺酰氧基苯基)乙氧基]苯基)-2-乙氧基丙酸)、BMS298585(N-[(4-甲氧基苯氧基)羰基]-N-[[4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-唑基)乙氧基]苯基]甲基]甘氨酸)或WO99/62872、WO99/62871、WO01/40171、WO01/40169、WO96/38428、WO01/81327、WO01/21602、WO03/020269、WO00/64888或WO00/64876中所述的化合物組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與貝特類例如非諾貝特、吉非貝齊、氯貝特、苯扎貝特組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與煙酸或尼克酸組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與CETP抑制劑例如CP-529、414(托切普(torcetrapib))組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與ACAT抑制劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與MTP抑制劑例如英普他派組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與抗氧化劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂蛋白脂肪酶抑制劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與ATP檸檬酸裂合酶抑制劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與鯊烯合成酶抑制劑組合施用。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂蛋白(a)拮抗劑組合施用?？狗逝謩┰诒景l(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂肪酶抑制劑例如奧利司他組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，其它活性成分是芬氟拉明或右旋芬氟拉明。在另一個(gè)實(shí)施方案中，其它活性成分是西布曲明。在另一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與以下物質(zhì)組合施用CART調(diào)節(jié)劑(參見(jiàn)“可卡因-苯丙胺調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄影響小鼠的能量代謝、焦慮和胃排空”Asakawa，A等，M.HormoneandMetabolicResearch(2001)，33(9)，554-558)、NPY拮抗劑如萘-1-磺酸{4-[(4-氨基喹唑啉-2-基氨基)甲基]環(huán)己基甲基}酰胺鹽酸鹽(CGP71683A))、MC4激動(dòng)劑(例如1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-甲酸[2-(3a-芐基-2-甲基-3-氧代-2，3，3a，4，6，7-六氫吡唑并[4，3-c]吡啶-5-基)-1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基]酰胺(WO01/91752))、食欲素(orexin)拮抗劑(例如1-(2-甲基苯并唑-6-基)-3-[1，5]萘啶-4-基脲鹽酸鹽(SB-334867-A))、H3激動(dòng)劑(3-環(huán)己基-1-(4，4-二甲基-1，4，6，7-四氫咪唑并[4，5-c]吡啶-5-基)丙-1-酮草酸鹽(WO00/63208))、TNF激動(dòng)劑、CRF拮抗劑(例如[2-甲基-9-(2，4，6-三甲基苯基)-9H-1，3，9-三氮雜芴-4-基]二丙基胺(WO00/66585))、CRFBP拮抗劑(例如尿皮質(zhì)素(urocortin))、尿皮質(zhì)素激動(dòng)劑、β3激動(dòng)劑(例如1-(4-氯-3-甲磺酰基甲基苯基)-2-[2-(2，3-二甲基-1H-吲哚-6-基氧基)乙基氨基]乙醇鹽酸鹽(WO01/83451))、MSH(促黑激素)激動(dòng)劑、CCK-A激動(dòng)劑(例如{2-[4-(4-氯-2，5-二甲氧基苯基)-5-(2-環(huán)己基乙基)噻唑-2-基氨基甲酰基]-5，7-二甲基吲哚-1-基}乙酸三氟乙酸鹽(WO99/15525))、5-羥色胺再攝取抑制劑(例如右旋芬氟拉明)、混合型5-羥色胺能和去甲腎上腺素能化合物(例如WO00/71549)、5HT激動(dòng)劑例如1-(3-乙基苯并呋喃-7-基)哌嗪草酸鹽(WO01/09111)、鈴蟾肽激動(dòng)劑、甘丙肽(galanin)拮抗劑、生長(zhǎng)激素(例如人生長(zhǎng)激素)、生長(zhǎng)激素釋放化合物(6-芐氧基-1-(2-二異丙氨基乙基氨基甲?；?-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯(WO01/85695))、TRH激動(dòng)劑(參見(jiàn)例如EP0462884)、解偶聯(lián)蛋白2或3調(diào)節(jié)劑、瘦素(leptin)激動(dòng)劑(參見(jiàn)例如Lee，DanielW.；Leinung，MatthewC.；Rozhavskaya-Arena，Marina；Grasso，Patricia.瘦素激動(dòng)劑用作治療肥胖癥的潛在手段.DrugsoftheFuture(2001)，26(9)，873-881)、DA激動(dòng)劑(溴隱亭、Doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑(例如WO00/40569)、PPAR調(diào)節(jié)劑(例如WO00/78312)、RXR調(diào)節(jié)劑或TR-β激動(dòng)劑。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，其它的活性成分是瘦素。在一個(gè)實(shí)施方案中，其它的活性成分是右旋苯丙胺、苯丙胺、嗎吲哚或苯丁胺。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與作用于冠脈循環(huán)和血管系統(tǒng)的藥物例如ACE抑制劑(例如雷米普利)、作用于腎素-血管緊張素系統(tǒng)的藥物、鈣拮抗劑、β-阻滯劑等組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與具有抗炎作用的藥物組合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與用于癌癥治療和癌癥預(yù)防的藥物組合施用?？梢岳斫猓景l(fā)明的化合物與一種或多種上述化合物以及任選的一種或多種其它藥理學(xué)活性物質(zhì)的任何適宜的組合均被認(rèn)為落入本發(fā)明授予保護(hù)的范圍內(nèi)?；衔锏幕钚匀缦逻M(jìn)行測(cè)試在細(xì)胞PPARα試驗(yàn)中PPAR激動(dòng)劑的EC50值的測(cè)定原理采用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HEK細(xì)胞系(HEK＝人胚腎)(在本文稱為“PPARα報(bào)告細(xì)胞系”)分析與人PPARα結(jié)合并以激動(dòng)方式激活它的物質(zhì)的功效。所述細(xì)胞包含兩個(gè)基因元件，即螢光素酶報(bào)告元件(pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo)和PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)，PPARα融合蛋白依賴PPARα配體介導(dǎo)螢光素酶報(bào)告元件的表達(dá)。穩(wěn)定和組成型表達(dá)的融合蛋白GR-GAL4-人PPARα-LBD在PPARα報(bào)告細(xì)胞系的細(xì)胞核中通過(guò)GAL4蛋白部分結(jié)合到穩(wěn)定整合進(jìn)此細(xì)胞系基因組中的螢光素酶報(bào)告元件的5’-上游GAL4DNA結(jié)合基序。如果在試驗(yàn)中使用脂肪酸耗竭的胎牛血清(cs-FCS)，沒(méi)有PPARα配體加入時(shí)，只有極少量螢光素酶報(bào)告基因表達(dá)。PPARα配體結(jié)合并激活PPARα融合蛋白，因而導(dǎo)致螢光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。形成的螢光素酶可以通過(guò)借助合適底物的化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。細(xì)胞系的構(gòu)建分兩個(gè)步驟制備PPARα報(bào)告細(xì)胞系。首先，構(gòu)建螢光素酶報(bào)告元件并且將其穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞。為此目的，將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的五個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(每種情況下為5’-CGGAGTACTGTCCTCCGAG-3’)克隆進(jìn)68bp長(zhǎng)的最小的MMTV啟動(dòng)子(Genbank登錄號(hào)V01175)的5’-上游。最小MMTV啟動(dòng)子部分包含CCAAT盒和TATA元件以便使通過(guò)RNA聚合酶II的有效轉(zhuǎn)錄成為可能。GAL4-MMTV構(gòu)建體的克隆和測(cè)序可類似于SambrookJ.等的描述(Molecularcloning，ColdSpringHarborLaboratoryPress，1989)進(jìn)行。然后將完整的螢火蟲(chóng)螢光素酶基因(Genbank登錄號(hào)M15077)克隆進(jìn)GAL4-MMTV元件的3’-下游。測(cè)序后，將由五個(gè)GAL4結(jié)合位點(diǎn)、MMTV啟動(dòng)子和螢光素酶基因組成的螢光素酶報(bào)告元件再克隆進(jìn)提供zeozin抗性的質(zhì)粒中以便獲得質(zhì)粒pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo。根據(jù)Ausubel，F(xiàn).M.等的描述(Currentprotocolsinmolecularbiology，1-3卷，JohnWiley&Sons，Inc.，1995)將載體轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞中。然后用含有zeozin的培養(yǎng)基(0.5mg/ml)來(lái)選擇適宜的穩(wěn)定的細(xì)胞克隆，它表現(xiàn)出十分低的螢光素酶基因的基本表達(dá)量。第二步，將PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)導(dǎo)入所述穩(wěn)定細(xì)胞克隆中。為此目的，最初，將編碼糖皮質(zhì)激素受體N端76個(gè)氨基酸的cDNA(Genbank登錄號(hào)P04150)連接到編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA部分(Genbank登錄號(hào)P04386)上。將人PPARα受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(氨基酸S167-Y486；Genbank登錄號(hào)S74349)的cDNA克隆進(jìn)此GR-GAL4構(gòu)建體的3’端。將用此方法制備的融合構(gòu)建體(GR-GAL4-人PPARα-LBD)再克隆進(jìn)質(zhì)粒pcDNA3(購(gòu)自Invitrogen)以便使通過(guò)巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子進(jìn)行的組成型表達(dá)成為可能。將這個(gè)質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶線性化并穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)前述含有螢光素酶報(bào)告元件的細(xì)胞克隆中。所得到的包含螢光素酶報(bào)告元件并組成型表達(dá)PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)的PPARα報(bào)告細(xì)胞系可以通過(guò)zeozin(0.5mg/ml)和G418(0.5mg/ml)選擇進(jìn)行分離。試驗(yàn)方法PPARα激動(dòng)劑活性在3天的試驗(yàn)中得以測(cè)定，描述如下第一天將PPARα報(bào)告細(xì)胞系在混合有如下添加物的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invirogen)中培養(yǎng)至80％匯合10％cs-FCS(胎牛血清，#SH-30068.03，Hyclone)、0.5mg/ml的zeocin(#R250-01，Invitrogen)、0.5mg/ml的G418(#10131-027，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)。培養(yǎng)在存在5％CO2時(shí)于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶(#353112，BectonDickinson)里進(jìn)行。80％匯合的細(xì)胞用15mlPBS(#14190-094，Invitrogen)洗滌一次，用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘，將其置于5ml上述DMEM培養(yǎng)基中并且在細(xì)胞計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)。稀釋到500000個(gè)細(xì)胞/ml后，將35000個(gè)細(xì)胞接種在具有透明塑料底的96孔微量滴定板(#3610，CorningCostar)的每個(gè)孔中。將板在37℃和5％CO2下于細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。第二天將待檢測(cè)的PPARα激動(dòng)劑溶解于DMSO中，濃度為10mM。將此儲(chǔ)備溶液用DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)稀釋，在此培養(yǎng)基中混合有5％的cs-FCS(#SH-30068.03，Hyclone)、2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)以及上述抗生素(zeozin、G418、青霉素和鏈霉素)。供試物質(zhì)在10μM到100pM范圍的11種不同濃度下進(jìn)行檢測(cè)。較有效的化合物以1μM到10pM或100nM到1pM之間的濃度下進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)抽吸將在第一天接種的PPARα報(bào)告細(xì)胞系的培養(yǎng)基完全除去，并且立刻將在培養(yǎng)基中稀釋了的供試物質(zhì)加入細(xì)胞中。使用機(jī)器手(BeckmanFX)進(jìn)行此類物質(zhì)的稀釋和添加。在培養(yǎng)基中稀釋的供試物質(zhì)的終體積是每個(gè)96-孔微量滴定板孔100μl。在試驗(yàn)中DMSO的濃度低于0.1％v/v以防止溶劑的細(xì)胞毒效應(yīng)。為了證明本試驗(yàn)在各個(gè)單獨(dú)板中起作用，將同樣稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARα激動(dòng)劑加入到各個(gè)板中。將檢測(cè)板于37℃和5％CO2下在培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。第三天將用供試物質(zhì)處理的PPARα報(bào)告細(xì)胞從培養(yǎng)箱中移出，并且將培養(yǎng)基抽吸掉。通過(guò)吸移50μlBrightGlo試劑(來(lái)自Promega)進(jìn)入96-孔微量滴定板的每個(gè)孔，將細(xì)胞裂解。在暗處室溫下孵育10分鐘后，在光度計(jì)(來(lái)自Wallac的Trilux)中測(cè)定微量滴定板。微量滴定板的每個(gè)孔的測(cè)定時(shí)間為1秒。評(píng)價(jià)將來(lái)自發(fā)光計(jì)的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入MicrosoftExcel文件中，按照生產(chǎn)商(IDBS)的使用說(shuō)明用XL.Fit程序計(jì)算PPAR激動(dòng)劑的劑量-效應(yīng)曲線和EC50值。在細(xì)胞PPARγ試驗(yàn)中PPAR激動(dòng)劑的EC50值的測(cè)定原理采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染體系來(lái)測(cè)定PPAR激動(dòng)劑的細(xì)胞PPARγ活性。這基于螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒(pGL3basic-5xGAL4-TK)和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD)的使用。將兩種質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染進(jìn)入人胚腎細(xì)胞(HEK細(xì)胞)。然后在這些細(xì)胞中融合蛋白GAL4-人PPARγLBD表達(dá)，所述融合蛋白結(jié)合到報(bào)告質(zhì)粒的GAL4結(jié)合位點(diǎn)。在存在PPARγ-活性配體時(shí)，激活的融合蛋白GAL4-人PPARγLBD誘導(dǎo)螢光素酶報(bào)告基因的表達(dá)，這可以在加入螢光素酶底物后以化學(xué)發(fā)光信號(hào)的形式被檢測(cè)。與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的PPARα報(bào)告細(xì)胞系不同，在細(xì)胞PPARγ試驗(yàn)中兩種組分(螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒)被瞬時(shí)轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞中，這是因?yàn)镻PARγ融合蛋白的穩(wěn)定和持久表達(dá)是有細(xì)胞毒作用的。質(zhì)粒的構(gòu)建螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK是基于來(lái)自Promega的載體pGL3basic。報(bào)告質(zhì)粒通過(guò)將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的五個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(每個(gè)結(jié)合位點(diǎn)具有序列5’-CTCGGAGGACAGTACTCCG-3’)和160bp-長(zhǎng)的胸苷激酶啟動(dòng)子部分(Genbank登錄號(hào)AF027128)5’-上游一起克隆進(jìn)pGL3basic而被制備。胸苷激酶啟動(dòng)子3’-下游是來(lái)自螢火蟲(chóng)(Photinuspyralis)的全長(zhǎng)螢光素酶基因(Genbank登錄號(hào)M15077)，此螢光素酶基因已經(jīng)是所用質(zhì)粒pGL3basic的一個(gè)組分。報(bào)告質(zhì)粒GL3basic-5xGAL4-TK的克隆和測(cè)序可類似于SambrookJ.等(Molecularcloging，ColdSpringHarborLaboratoryPress，1989)的描述進(jìn)行。PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD通過(guò)以下方法制備首先將編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA(Genbank登錄號(hào)P04386)克隆進(jìn)質(zhì)粒pcDNA3(來(lái)自Invitrogen)巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的3’-下游。接著，將人PPARγ受體的配體-結(jié)合結(jié)構(gòu)域(LBD)的cDNA(氨基酸l152-Y475；登錄號(hào)#g1480099)GAL4DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的3’-下游克隆。PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD的克隆和測(cè)序同樣可類似于SambrookJ.等(Molecularcloning，ColdSpringHarborLaboratoryPress，1989)的描述進(jìn)行。除了螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD外，還用于細(xì)胞PPARγ試驗(yàn)的是參考質(zhì)粒pRL-CMV(來(lái)自Promega)和來(lái)自Stratagene的質(zhì)粒pBluescriptSK(+)。所有四種質(zhì)粒均用來(lái)自Qiagen的質(zhì)粒制備試劑盒制備，該試劑盒可以確保質(zhì)粒在轉(zhuǎn)染進(jìn)入HEK細(xì)胞之前具有最小內(nèi)毒素含量的質(zhì)量。試驗(yàn)方法PPARγ激動(dòng)劑的活性在如下描述的4天的試驗(yàn)中得以測(cè)定。在轉(zhuǎn)染之前，HEK細(xì)胞在混合有以下添加物的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中培養(yǎng)10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)。第一天首先制備溶液A，它是一種包含所有四種上述質(zhì)粒以及DMEM的轉(zhuǎn)染混合液。下列量用于制備3ml溶液A，在試驗(yàn)中其用于96孔微量滴定板的每個(gè)孔2622μl無(wú)抗生素和無(wú)血清的DMEM(#41965-039，Invitrogen)、100μl參考質(zhì)粒pRL-CMV(1ng/μl)、100μl螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK(10ng/μl)、100μlPPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD(100ng/μl)以及78μl質(zhì)粒pBluescriptSK(+)(500ng/μl)。然后通過(guò)混合1.9mlDMEM(#41965-039，Invitrogen)與100μlPolyFect轉(zhuǎn)染試劑(來(lái)自Qiagen)為每個(gè)96孔微量滴定板制備2ml溶液B。接著，將3ml溶液A和2ml溶液B混合產(chǎn)生5ml溶液C，通過(guò)多次抽吸將其充分混合并在室溫下孵育10分鐘。將175cm2容量的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中80％匯合的HEK細(xì)胞用15ml的PBS(#14190-094，Invitogen)洗滌一次并用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃下處理2分鐘。然后將細(xì)胞置于15ml混合有10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中。將細(xì)胞混懸液在細(xì)胞計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)后，將混懸液稀釋至250000個(gè)細(xì)胞/ml。將15ml該細(xì)胞混懸液和5ml溶液C混合以用于一塊微量滴定板。將200μl此混懸液接種到具有透明塑料底部的96孔微量滴定板(#3610，CorningCostar)的每個(gè)孔中。將此板于37℃和5％CO2下在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。第二天將待檢測(cè)的PPAR激動(dòng)劑以10mM的濃度溶解于DMSO中。將該儲(chǔ)備溶液用混合有2％Ultroser(#12039-012，Biosepra)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mML-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)稀釋。將供試物質(zhì)在總共11種從10μM到100pM范圍內(nèi)的不同濃度下進(jìn)行試驗(yàn)。較有效的化合物在1μM到10pM范圍內(nèi)的濃度下進(jìn)行試驗(yàn)。將在第一天轉(zhuǎn)染和接種的HEK細(xì)胞的培養(yǎng)基通過(guò)抽吸完全除去，并將用培養(yǎng)基稀釋的供試物質(zhì)立刻加入細(xì)胞中。這些物質(zhì)的稀釋和添加通過(guò)機(jī)器手(BeckmanFX)進(jìn)行。用培養(yǎng)基稀釋的供試物質(zhì)的最終體積是96孔微量滴定板的每個(gè)孔100μl。將每個(gè)板裝載同樣被稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARγ激動(dòng)劑，以便證明每個(gè)單獨(dú)板中的檢測(cè)功能。將試驗(yàn)板在37℃和5％CO2下于培養(yǎng)箱中孵育48小時(shí)。第四天通過(guò)抽吸將培養(yǎng)基除去后，將50μlDual-GloTM試劑(Dual-GloTM螢光素酶測(cè)試體系；Promega)按照生產(chǎn)商的使用說(shuō)明加入每個(gè)孔中以便裂解細(xì)胞并且向細(xì)胞中形成的螢火蟲(chóng)螢光素酶(Photinuspyralis)提供底物。在室溫下暗處孵育10分鐘后，在測(cè)量?jī)x器中測(cè)量螢火蟲(chóng)螢光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光(測(cè)量時(shí)間/孔為1秒；來(lái)自Wallac的Trilux)。然后將50μlDual-GloTMStop&Glo試劑(Dual-GloTM螢光素酶測(cè)試體系；Promega)加入每個(gè)孔中以便終止螢火蟲(chóng)螢光素酶的活性并向通過(guò)參考質(zhì)粒pRL-CMV表達(dá)的海腎(Renilla)螢光素酶提供底物。在室溫下暗處孵育另外10分鐘后，再次在測(cè)量?jī)x器中以1秒/孔測(cè)量通過(guò)海腎螢光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光。評(píng)價(jià)將來(lái)自發(fā)光計(jì)的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入MicrosoftExcel文件中。對(duì)源自微量滴定板每個(gè)孔的每次檢測(cè)值確定螢火蟲(chóng)/海腎螢光素酶活性比率。按照生產(chǎn)商(IDBS)的使用說(shuō)明通過(guò)XL.Fit程序由該比率計(jì)算出PPAR激動(dòng)劑的劑量-效應(yīng)曲線和EC50值。本發(fā)明的一些式I化合物的活性結(jié)果顯示在下表I中表I*WO2004/076427的實(shí)施例58。**WO2004/076427的實(shí)施例61。表1顯然表明與臨床上使用的貝特類類似(例如參見(jiàn)J.-Ch.Fruchard等人PPARS，代謝病和動(dòng)脈粥樣硬化，PharmacologicalResearch，第44卷，第5期，2001；S.Kersten等人PPAR在健康和疾病中的作用，NATURE，第405卷，2000年5月25日；I.Pineda等人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體從轉(zhuǎn)錄控制到臨床實(shí)踐，CurrOpinLipidol122001，245-254)，本發(fā)明的式I化合物激活PPARα受體和PPARγ受體并因此例如引起體內(nèi)甘油三酯水平降低。以下詳述的實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明但并非限制于此。表IIa表IIb方法本發(fā)明的式I化合物可以按照以下反應(yīng)流程圖來(lái)獲得方法A將化合物A-1(按照N.W.Boaz，TetrahedronAsymmetry，(1999)10，813-816所述的方法制備)還原為醇A-2(例如使用氯甲酸乙酯、三乙胺和硼氫化鈉在THF中進(jìn)行或使用氯甲酸異丁酯和N-甲基嗎啉和硼氫化鈉在THF中進(jìn)行)，然后在伯羥基上用保護(hù)基團(tuán)PG進(jìn)行保護(hù)(例如對(duì)于PG＝THP；通過(guò)于室溫與二氫吡喃和甲苯磺酸一水合物在二氯甲烷中攪拌來(lái)進(jìn)行)，產(chǎn)生化合物A-3。用氫化鋁鋰在醚溶劑中將A-3還原為化合物A-4。將化合物A-4在伯羥基上用獨(dú)立(orthogonal)于PG的保護(hù)基團(tuán)PG′進(jìn)行保護(hù)(例如對(duì)于PG＝TBDPS；通過(guò)于室溫與TBDPSCl和咪唑在DMF中攪拌來(lái)進(jìn)行)，產(chǎn)生化合物A-5。將化合物A-5在一側(cè)脫保護(hù)(例如對(duì)于DG＝THP而言；通過(guò)于室溫與甲苯磺酸一水合物或吡啶對(duì)甲苯磺酸鹽在甲醇或異丙醇中攪拌來(lái)進(jìn)行)，產(chǎn)生化合物A-6。使化合物A-6與化合物C(2-鹵代乙酸(鹵素可以是溴或氯)和醇R6-OH的酯，其中R6具有上述含義)反應(yīng)，得到化合物A-7。于降低溫度在醚溶劑中使化合物A-7與堿氨基化鋰(例如二異丙基氨基鋰或鋰-2，2，5，5-四甲基pyrrolidide)和通式R4X的烷基鹵反應(yīng)，其中R4具有上述含義。然后，于降低溫度在醚溶劑中使以這種方法得到的化合物與堿氨基化鋰(例如二異丙基氨基鋰或鋰-2，2，5，5-四甲基pyrrolidide)和通式R5X的烷基鹵反應(yīng)，其中R5具有上述含義，得到化合物A-8。從A-8中除脫保護(hù)基團(tuán)SG′(對(duì)于PG＝TBDPS而言，使用四丁基氟化銨在THF中進(jìn)行)，產(chǎn)生通式A-9的化合物。使化合物A-9在醚溶劑中與堿(例如氫化鈉或叔丁醇鉀)和化合物D反應(yīng)，其中R1、R2和R3具有上述含義，得到化合物A-10。將化合物A-10水解為酸A-11當(dāng)R6為伯或仲烷基時(shí)使用堿在甲醇中進(jìn)行，或者當(dāng)R6為叔烷基時(shí)使用無(wú)水酸在惰性溶劑中進(jìn)行(例如使用氯化氫在二烷中進(jìn)行或使用三氟乙酸在二氯甲烷中進(jìn)行)。實(shí)施例1至11可以通過(guò)這種方法合成。方法B使化合物A-4(見(jiàn)方法A)與化合物C(2-鹵代乙酸(鹵素可以是溴或氯)和醇R6-OH的酯，其中R6具有上述含義)反應(yīng)，得到化合物B-1。于降低溫度在醚溶劑中使化合物B-1與堿氨基化鋰(例如二異丙基氨基鋰)和通式R4X的烷基鹵反應(yīng)，其中R4具有上述含義。然后，于降低溫度在醚溶劑中使以這種方法得到的化合物與堿氨基化鋰(例如二異丙基氨基鋰)和通式R5X的烷基鹵反應(yīng)，其中R5具有上述含義，得到化合物B-3。從B-2中除脫保護(hù)基團(tuán)PG，產(chǎn)生通式B-3的化合物。使化合物B-3在醚溶劑中與堿(例如氫化鈉或叔丁醇鉀)和化合物D反應(yīng)，其中R1、R2和R3具有上述含義，得到化合物B-4。將化合物B-4水解為酸B-5當(dāng)R6為伯或仲烷基時(shí)使用堿在甲醇中進(jìn)行，或者當(dāng)R6為叔烷基時(shí)使用無(wú)水酸在惰性溶劑中進(jìn)行(例如使用氯化氫在二烷中進(jìn)行或使用三氟乙酸在二氯甲烷中進(jìn)行)。實(shí)施例12-21的對(duì)映異構(gòu)產(chǎn)物可以通過(guò)這種方法合成。所用的縮略語(yǔ)表示Ac乙酰基Bn芐基Bu丁基iBu異丁基tBu叔丁基BuLi正丁基鋰Bz苯甲?；鵆y環(huán)己基DCI直接化學(xué)電離(MS中)DCM二氯甲烷DHP2，3-二氫吡喃DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶DMFN，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜EA乙酸乙酯EDCN′-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺×HClEI電子碰撞電離(MS中)equiv.當(dāng)量ESI電噴霧電離(MS中)Et乙基h小時(shí)HATU六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲HOBt1-羥基-1H-苯并三唑×H2OHPLC高壓、高效液相色譜法LC-MS聯(lián)用液相色譜法-質(zhì)譜法Me甲基MS質(zhì)譜法MsCl甲磺酰氯MTBE叔丁基甲基醚NMR核磁共振光譜法Pd/C披鈀炭Ph苯基iPr異丙基nPr正丙基Rf保留比(TLC中)RT室溫sat.飽和TBAF丁基氟化銨TBAI丁基碘化銨TBDPSCl叔丁基二苯基甲硅烷基氯TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯TFA三氟乙酸THF氫呋喃THP氫吡喃基TLC薄層色譜法Tr三苯甲基TsOH甲苯磺酸其它化合物可以按照上述方法制備。通式A-8的化合物的結(jié)構(gòu)單元的合成使二乙酮與亞硝酸異戊酯和HCl在乙醚中反應(yīng)，產(chǎn)生戊烷-2，3-二酮-2-肟(G.Buechi，J.Galindo，J.Org.Chem.(1991)56(8)，2605-2606)。使后者與對(duì)甲基苯甲醛和HCl在乙酸中反應(yīng)，得到5-乙基-4-甲基-2-對(duì)甲苯基唑-3-氧化物(P.M.Weintraub，J.Med.Chem.(1972)15(4)，419-420)。使該化合物與磷酰氯在氯仿中沸騰，產(chǎn)生4-氯甲基-5-乙基-2-對(duì)甲苯基唑(M.S.Malamas，R.P.Carlson，D.Grimes，R.Howell，K.Glaser，I.Gunawan，J.A.Nelson，M.Kanzelberger，U.Shah，D.A.Hartman，J.Med.Chem.(1996)39(1)，237-245)。將該化合物與碘化鈉在丙酮中加熱回流，產(chǎn)生5-乙基-4-碘甲基-2-對(duì)甲苯基唑(A.，Zlatkov，P.，Peikov，J.，Rodriguez-Alvarez，N.，Danchev，I.，Nikolova，J.，Mitkov，Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.(2000)35(10)，941-948)。按照類似的合成方法由表III中所述的前體得到以下結(jié)構(gòu)單元表III實(shí)施例12-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)-唑-4-基甲氧基甲基]-環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸(1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己烷甲酸異丙酯將140g(1S，3R)-3-異丙氧基羰基環(huán)己烷甲酸溶解于THF中，加入100ml三乙胺。于-10℃滴加68.4ml氯甲酸乙酯，將混懸液攪拌過(guò)夜。通過(guò)硅藻土過(guò)濾后，于0℃加入55g硼氫化鈉，于室溫將混懸液另外攪拌6小時(shí)。另外加入25g硼氫化鈉，將混懸液攪拌過(guò)夜。加入水，將溶液攪拌2小時(shí)。分離相，將水相用MTBE萃取，將合并的有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮。得到105g無(wú)色油狀的(1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己烷甲酸異丙酯。C11H20O3(200.28)LCMS(ESI)201.2[MH+](1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己烷甲酸異丙酯將100g(1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己烷甲酸異丙酯和46.2g二氫吡喃溶解于500ml二氯甲烷中，于0℃加入4.75g甲苯磺酸一水合物。將溶液攪拌過(guò)夜，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液。分離有機(jī)相，用MTBE稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮，產(chǎn)生140g褐色油狀的(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己烷甲酸異丙酯。C16H28O4(284.4)；MS(CI+)285(5)[MH+]，201(100)[MH+-C5H8O]，85(77)(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲醇將60.6g(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己烷甲酸異丙酯溶解于100mlTHF中，于0℃逐滴加入到16.2g氫化鋁鋰在300mlTHF中的混懸液中。于室溫將混合物攪拌直至通過(guò)TLC檢測(cè)不出前體。于0℃將50ml10NKOH加入到混合物中。倒掉灰色沉淀上面的溶液，將殘余物用乙酸乙酯消化，過(guò)濾。蒸發(fā)合并的濾液，將殘余物用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)相通過(guò)MgSO4干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)，產(chǎn)生30.7g黃色油狀的(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲醇。C13H24O3(228，17)MS(Cl+)229，4(24)[MH+]，145，4(9)[MH+-C5H8O]，85，2(100).(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)-環(huán)己基甲醇將36.2g(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲醇溶解于190mlDMF和130ml甲苯中，加入27.0g咪唑。于0℃逐滴加入47.9g叔丁基二苯基氯硅烷，于室溫將溶液攪拌過(guò)夜。將溶液濃縮，將殘余物置于MTBE和水中，將水相再次用MTBE萃取，將合并的有機(jī)相用水洗滌兩次并用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮。以定量產(chǎn)率產(chǎn)生黃色油狀的叔丁基二苯基-[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]硅烷。將后者溶解于400ml異丙醇中，加入1.52g對(duì)甲苯磺酸后，于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。然后，加入飽和NaHCO3溶液直至用pH試紙觀察到中性反應(yīng)?；菊麴s掉溶劑。將水性殘余物置于水和MTBE中。分離水相，用MTBE萃取3次。將合并的有機(jī)相用水和飽和NaCl溶液洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮，產(chǎn)生67g黃色油狀的(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲醇。C24H34O2Si(382，62)LCMS(ESI)383，5[MH+].2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯將67g(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲醇、86.3g溴乙酸叔丁酯、19.8g四丁基硫酸氫銨溶解于300ml甲苯中，于10℃(冰-水浴)加入70.8g氫氧化鈉在73ml水中的溶液，于10℃將混合物劇烈攪拌(KPG槳式攪拌器)18小時(shí)。然后加入MTBE和水，分離相。將水相用MTBE萃取兩次，將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)。產(chǎn)生60.7g淡黃色油狀的2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯。C30H44O4Si(496，30)LCMS(ESI)514，49[M++NH4]2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯于-78℃將155ml二異丙基氨基鋰溶液(2M，在THF中)加入到60.7g2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯在180mlTHF中的溶液中，在此期間溫度不應(yīng)超過(guò)-55℃。于此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂?℃，于此溫度另外攪拌15分鐘，然后將溶液再次冷卻至-78℃，逐滴加入38ml甲基碘。將溶液溫?zé)嶂?℃，然后加入飽和NH4Cl溶液和乙酸乙酯。分離相，將有機(jī)相用飽和NH4Cl溶液洗滌，將合并的水相再次用乙酸乙酯萃取，然后將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。于-78℃將150ml二異丙基氨基鋰溶液(2M，在THF中)加入到以這種方法得到的殘余物在180mlTHF中的溶液中，在此期間溫度不應(yīng)超過(guò)-55℃。于此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂?10℃，于此溫度另外攪拌15分鐘，然后將溶液再次冷卻至-78℃，逐滴加入38ml甲基碘。將溶液溫?zé)嶂?10℃，然后加入飽和NH4Cl溶液和乙酸乙酯。分離相，將有機(jī)相用飽和NH4Cl溶液洗滌，將合并的水相再次用乙酸乙酯萃取，然后將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)，產(chǎn)生51.2g褐色油狀的2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯。1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝7.57-7.63(m，4H)；7.40-7.50(m，6H)；3.43-3.49(m，2H)；3.11-3.16(m，1H)；3.04-3.09(m，1H)；1.80-1.86(m，1H)；1.65-1.78(m，2H)；1.46-1.62(m，2H)；1.40(s，9H)；1.26(s，6H)；0.74-1.60(m，4H)；1.00(s，9H)；0.58-0.67(m，1H).2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯將51.2g2-[(1S，3R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸叔丁酯溶解于350mlTHF中，加入54.5g四丁基氟化銨水合物后，于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。蒸餾掉大部分THF，將殘余物置于MTBE/水中。分離有機(jī)相，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)，產(chǎn)生14.4g黃色油狀的2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯。1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝4.30-4.36(m，1H)；3.23-3.29(m，1H)；3.15-3.21(m，2H)；3.05-3.13(m，1H)；1.53-1.81(m，4H)；1.15-1.52(m，3H)；1.41(s，9H)；1.27(s，6H)；0.70-0.86(m，2H)；0.49-0.58(m，1H).2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸叔丁酯將300mg2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯溶解于10mlMTBE中，加入50mg氫化鈉(60％，在礦物油中)。氣體釋出停止后，加入600mg5-乙基-4-碘甲基-2-(4-三氟甲基苯基)唑，將混懸液加熱回流過(guò)夜。加入水和MTBE后，分離相，將有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮。將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化，產(chǎn)生190mg黃色油狀的2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸叔丁酯。C29H40F3NO5(539，64)LCMS(ESI)540，7[MH+].2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸將270mg2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸叔丁酯溶解于5ml二氯甲烷和2.5ml三氟乙酸中，攪拌過(guò)夜。然后將溶液完全蒸發(fā)，將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化，產(chǎn)生127mg黃色油狀的2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C25H32F3NO5(483，22)LCMS(ESI)484，41[MH+].實(shí)施例22-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(3-三氟甲基苯基)-唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和5-乙基-4-碘甲基-2-(3-三氟甲基苯基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C25H32F3NO5(483，22)LCMS(ESI)484，42[MH+].實(shí)施例32-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(2-三氟甲基苯基)-唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和5-乙基-4-碘甲基-2-(2-三氟甲基苯基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-乙基-2-(2-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C25H32F3NO5(483，22)LCMS(ESI)484，36[MH+].實(shí)施例42-{(1S，3R)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基-4-碘甲基唑得到2-{(1S，3R)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H37NO5(443，27)LCMS(ESI)444，42[MH+].實(shí)施例52-{(1S，3R)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基-4-碘甲基唑得到2-{(1S，3R)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C28H41NO5(471，30)LCMS(ESI)472，46[MH+].實(shí)施例62-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(4-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H34F3NO5(497，24)LCMS(ESI)498，41[MH+].實(shí)施例72-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H34F3NO5(497，24)LCMS(ESI)498，35[MH+].實(shí)施例82-{(1S，3R)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-(3，4-二甲基苯基)-4-碘甲基-5-異丙基唑得到2-{(1S，3R)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C27H39NO5(457，28)LCMS(ESI)458，44[MH+].實(shí)施例92-{(1S，3R)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-(4-叔丁基苯基)-4-碘甲基-5-異丙基唑得到2-{(1S，3R)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C29H43NO5(485，31)LCMS(ESI)486，23[MH+].實(shí)施例102-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H37NO6(459，26)LCMS(ESI)460，42[MH+].實(shí)施例112-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(萘-2-基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例1類似的方法由2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(萘-2-基)唑得到2-{(1S，3R)-3-[5-異丙基-2-(萘-2-基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C29H37NO5(479，27)LCMS(ESI)480，44[MH+].實(shí)施例122-{(1R，3S)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]乙酸叔丁酯將51g[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基]甲醇、151.5g溴乙酸叔丁酯、23.22g四丁基硫酸氫銨溶解于380ml甲苯中，于10℃(冰-水浴)加入89.36g氫氧化鈉在143ml水中的溶液，于10℃和室溫將混合物劇烈攪拌(KPG槳式攪拌器)18小時(shí)。然后加入MTBE和水，分離相。將水相用MTBE萃取兩次，將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)。產(chǎn)生56.1g淡黃色油狀的[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]乙酸叔丁酯。1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝4.49-4.53(m，1H)；3.91(s，2H)；3.67-3.74(m，1H)；3.37-3.46(m，2H)；3.20-3.27(m，2H)；3.09-3.17(m，1H)；1.65-1.88(m，5H)；1.35-1.62(m，7H)；1.15-1.30(m，1H)；1.41(s，9H)；0.78-0.91(m，2H)；0.56-0.68(m，1H).2-甲基-2-[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]丙酸叔丁酯于-78℃將147ml二異丙基氨基鋰溶液(2M，在THF中)加入到50.4g[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]乙酸叔丁酯在450mlTHF中的溶液中，在此期間溫度不應(yīng)超過(guò)-55℃。于此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂?℃，于此溫度另外攪拌15分鐘，然后將溶液再次冷卻至-78℃，逐滴加入28.9ml甲基碘。將溶液溫?zé)嶂?℃，然后加入飽和NH4Cl溶液和乙酸乙酯。分離相，將有機(jī)相用飽和NH4Cl溶液洗滌，將合并的水相再次用乙酸乙酯萃取，然后將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。于-78℃將二異丙基氨基鋰(2M，在THF中)加入到以這種方法得到的殘余物在550mlTHF中的溶液中，在此期間溫度不應(yīng)超過(guò)-55℃。于此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂?10℃，于此溫度另外攪拌15分鐘，然后將溶液再次冷卻至-78℃，逐滴加入34.3ml甲基碘。將溶液溫?zé)嶂?10℃，然后加入飽和NH4Cl溶液和乙酸乙酯。分離相，將有機(jī)相用飽和NH4Cl溶液洗滌，將合并的水相再次用乙酸乙酯萃取，然后將合并的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，通過(guò)硫酸鎂干燥，濃縮。將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯梯度)，產(chǎn)生31.4g褐色油狀的2-甲基-2-[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]丙酸叔丁酯。1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝4.49-4.53(m，1H)；3.67-3.74(m，1H)；3.39-3.46(m，2H)；3.05-3.17(m，3H)；1.65-1.86(m，6H)；1.35-1.62(m，6H)；1.41(s，9H)；1.15-1.30(m，1H)；1.26(s，6H)；0.77-0.91(m，2H)；0.55-0.67(m，1H).2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯將31.4g2-甲基-2-[(1R，3S)-3-(四氫吡喃-2-基氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]丙酸叔丁酯溶解于115ml異丙醇中，加入1.61g對(duì)甲苯磺酸一水合物后，于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。然后，加入飽和NaHCO3溶液直至用pH試紙觀察到中性反應(yīng)。蒸餾掉大部分溶劑。將水性殘余物置于水和MTBE中。分離水相，用MTBE萃取3次。將合并的有機(jī)相用水和飽和NaCl溶液洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，濃縮，將殘余物進(jìn)行硅膠色譜法(庚烷/乙酸乙酯10/1)，產(chǎn)生14.9g黃色油狀的2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯。1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝4.32(t，J＝6Hz，1H)；3.67-3.74(m，2H)；3.05-3.12(m，2H)；1.76-1.83(m，1H)；1.66-1.75(m，2H)；1.15-1.50(m，4H)；1.41(s，9H)；1.27(s，6H)；0.71-0.88(m，2H)；0.48-0.57(m，1H).2-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸將100mg2-((1R，3S)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯溶解于2mlMTBE中，加入21mg氫化鈉(60％，在礦物油中)。氣體釋出平息后，加入248mg2-(3，4-二甲基苯基)-4-碘甲基-5-異丙基唑，將溶液加熱回流過(guò)夜。加入水后，分離相，將有機(jī)相通過(guò)硅藻土柱(Separtis)干燥，將濾液濃縮。將殘余物置于CH2Cl2/TFA(3∶1)中，放置過(guò)夜。將溶液完全濃縮，將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化，產(chǎn)生31mg2-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C27H39NO5(457，62)LCMS(ESI)458，32[MH+].實(shí)施例132-[(1R，3S)-3-(2-聯(lián)苯-4-基-5-甲基唑-4-基甲氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-聯(lián)苯-4-基-4-碘甲基-5-甲基唑得到2-[(1R，3S)-3-(2-聯(lián)苯-4-基-5-甲基唑-4-基甲氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸。C29H35NO5(477，25)LCMS(ESI)478，30[MH+].實(shí)施例142-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(萘-2-基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(萘-2-基)唑得到2-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(萘-2-基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C29H37NO5(479，27)LCMS(ESI)480，30[MH+].實(shí)施例152-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑得到2-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C25H35NO6(445，56)LCMS(ES-)444，14[M-H+].實(shí)施例162-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑得到2-{(1R，3S)-3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H34F3NO5(497，24)LCMS(ESI)498，42[MH+].實(shí)施例172-{(1R，3S)-3-[2-(4-異丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-2-(4-異丁基苯基)-5-異丙基唑得到2-{(1R，3S)-3-[2-(4-異丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C29H43NO5(485，67)LCMS(ESI)486，42[MH+].實(shí)施例182-{(1R，3S)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑得到2-{(1R，3S)-3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C29H43NO5(485，67)LCMS(ESI)486，34[MH+].實(shí)施例192-[(1R，3S)-3-(5-乙基-2-萘-2-基-唑-4-基甲氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和5-乙基-4-碘甲基-2-萘-2-基-唑得到2-[(1R，3S)-3-(5-乙基-2-萘-2-基-唑-4-基甲氧基甲基)環(huán)己基甲氧基]-2-甲基丙酸。C28H35NO5(465，59)LCMS(ESI)466，31[MH+].實(shí)施例202-甲基-2-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和4-碘甲基-5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑得到2-甲基-2-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}丙酸。C29H35NO6(493，61)LCMS(ESI)494，29[MH+].實(shí)施例212-{(1R，3S)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例12類似的方法由2-((1S，3R)-3-羥甲基環(huán)己基甲氧基)-2-甲基丙酸叔丁酯和2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基-4-碘甲基唑得到2-{(1R，3S)-3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基甲基]環(huán)己基甲氧基}-2-甲基丙酸。C26H37NO5(443，59)LCMS(ES-)442，20[M-H+].權(quán)利要求1.式I化合物及其生理上耐受的鹽、溶劑化物和生理功能性衍生物，其中含義為R為H、CF3；R1為H、CF3、(C1-C6)烷基、苯基、苯氧基；R2為H、(C1-C4)烷基、O-(C1-C4)烷基、CF3；或R1和R2與苯基環(huán)一起為稠合萘基；R3為(C1-C6)烷基；R4為(C1-C6)烷基、芐基；R5為H、(C1-C6)烷基。2.如權(quán)利要求1所要求的式I化合物，其中R為H；R1為H、甲基、丁基、苯基、苯氧基或CF3；R2為H、甲基、甲氧基或CF3；R1和R2與苯基環(huán)一起為稠合萘基；R3為乙基或丙基；R4為甲基；且R5為H。3.藥物，包含一種或多種如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物。4.藥物，包含一種或多種如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物以及一種或多種對(duì)代謝紊亂或與之有關(guān)的紊亂具有有益作用的活性成分。5.藥物，包含一種或多種如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物以及一種或多種抗糖尿病劑。6.藥物，包含一種或多種如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物以及一種或多種脂類調(diào)節(jié)劑。7.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物在治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝紊亂和葡萄糖利用紊亂中的用途。8.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物在治療和/或預(yù)防其中涉及抗胰島素性的紊亂中的用途。9.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物在治療和/或預(yù)防糖尿病和與之有關(guān)的后遺癥中的用途。10.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物在治療和/或預(yù)防血脂異常癥及其后遺癥中的用途。11.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的式I化合物在治療和/或預(yù)防與代謝綜合征有關(guān)的病癥中的用途。12.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的化合物與至少一種其它活性成分組合在治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝紊亂和葡萄糖利用紊亂中的用途。13.如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的化合物與至少一種其它活性成分組合在治療和/或預(yù)防其中涉及抗胰島素性的紊亂中的用途。14.制備包含一種或多種如權(quán)利要求1至2中一項(xiàng)或多項(xiàng)所要求的化合物的藥物的方法，該方法包括將活性成分與可藥用載體混合并將該混合物轉(zhuǎn)化為適于施用的形式。全文摘要本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R表示H、CF文檔編號(hào)A61P3/10GK101014579SQ200580027148公開(kāi)日2007年8月8日申請(qǐng)日期2005年7月30日優(yōu)先權(quán)日2004年8月14日發(fā)明者H·格隆比克,C·施塔帕爾,E·法爾克,S·凱爾,H-L·舍費(fèi)爾,W·文德勒,S·克尼普斯申請(qǐng)人:塞諾菲-安萬(wàn)特德國(guó)有限公司