專利名稱：吲哚基馬來酰亞胺衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及吲哚基馬來酰亞胺衍生物、它們制備的方法以及含有它們的藥物組合物。
更具體而言，本發(fā)明提供式I化合物 其中Ra為H、CH3、CH2-CH3或異丙基，Rb為H、鹵素、C1-6烷氧基或C1-6烷基，或者I.R為式(a)的基團 其中R1為在3或4位上由CH3任選取代的哌嗪-1-基；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；R2為Cl、Br、CF3或CH3；且R3為H、CH3或CF3；當R3為H、Ra為H或CH3。Rb為H且R1為4-甲基-1-哌嗪基時，R2不為CH3或Cl；或者II.R為式(b)的基團 其中
R4為在3和/或4位上由CH3取代的1-哌嗪基；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；當R4為4-甲基-1-哌嗪基時，Ra不為H或CH3；或者III.R為式(c)的基團 其中R14為1-哌嗪基，任選在3和/或4位上由CH3取代或者任選在3位上由乙基、苯基-C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基或者鹵代-C1-4烷基取代；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；R15為鹵素、CF3或CH3；當R16為CH3、Ra為H或CH3、Rb為H且R14為4-甲基-1-哌嗪基時，R15不為CH3；且R16為H、CH3、CH2-CH3或CF3；當R15為Cl、Ra為H或CH3、Rb為H且R14為4-甲基-1-哌嗪基時，R16不為H；或者IV.R為式(d)的基團 其中R8為1-哌嗪基、3-甲基-哌嗪-1-基或4-芐基-哌嗪-1-基；或者VR為式(e)的基團 其中R9為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；或者為在3位上由甲基或乙基取代且在4位上由甲基任選取代的哌嗪-1-基。
式I化合物可以游離形式或鹽形式存在，如以與有機酸或無機酸(如鹽酸、乙酸、三氟乙酸)的加成鹽形式存在。
可以理解，式I化合物可以光學異構體、外消旋物或非對映異構體形式存在。如，哌嗪基的3位具有一個取代基的環(huán)碳原子是不對稱的，因此可以R-或S-構型存在?？梢岳斫猓景l(fā)明包含所有的對映體和它們的混合物。相對于外消旋物，更優(yōu)選對映體。類似原則也適用于具有不對稱碳原子的原料。
烷基或烷氧基可為直鏈或支鏈。優(yōu)選苯基-C1-4烷基為芐基或苯乙基。C1-4烷氧基-C1-4烷基中的烷氧基部分優(yōu)選為甲氧基或乙氧基且烷基部分優(yōu)選甲基或乙基；適當的例子為2-甲氧基乙基。鹵素為F、Cl、Br或I，優(yōu)選F、Cl或Br。鹵代-C1-4烷基是指烷基中的一個或多個H被鹵素(如Cl或F)取代的烷基，如CH2Cl、CH2F或CF3。
R優(yōu)選式(a)、(c)或(e)基團，優(yōu)選(e)。
在式(a)或(c)基團中，優(yōu)選R2或R15相對于R1或R14分別為對位。R3優(yōu)選位于R1的間位。在式(e)基團中，R9優(yōu)選4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；當R9為3位取代的哌嗪基時，它有R或S構型。
本發(fā)明也包括制備式I化合物的方法，該方法包括使式II化合物與式III化合物反應，式II化合物如下 其中Ra和Rb如上所定義，III化合物如下R-CH2-CO-NH2(III)其中R如上所定義。
并且，如果需要，將所得游離形式的式I化合物轉化為鹽形式，反之亦然。
如WO02/38561中所公開的那樣，在強堿(如t-BuOK)存在的情況下，可以方便地進行該方法，WO02/38561的內容在此并入本文作參考，并且在實施例中對該制備方法加以說明。
根據已知的方法可以制備式II和III化合物，如在WO02/38561中所公開的方法，該專利的內容一并并入本文作參考，并且在實施例中加以說明。
如果沒有具體描述原料的制備方法的話，那么該原料是已知的，或者可采用本領域已知的方法或下文描述的方法的類似方法進行制備。
如下的實施例僅用于說明本發(fā)明，而對本發(fā)明的范圍沒有任何限制。
RT＝室溫THF ＝四氫呋喃FCC ＝快速柱層析TBAF ＝四丁基氟化銨BINAP ＝2，2′-雙(二苯膦基)-1，1′-聯萘Pd2(dba)3＝Pd(0)-雙(二亞芐丙酮)實施例13-[2-氯-3-甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮 將2-[2-氯-3-甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙酰胺(211mg，0.75mmol)和3-吲哚乙醛酸(270mg，1.35mmol)溶解于THF(5mL)中。加入溶于THF中的1.0M的叔-BuOK溶液(2.98mL，4eq)，并在35℃下攪拌混合物過夜。用AcOEt(20mL)稀釋反應物并用水(20mL)和鹽水(10mL)洗滌。經Na2SO4干燥有機相并蒸發(fā)溶劑。經FCC(AcOEt/AcOH/H2O 7∶1∶1)純化殘留物，得到標題化合物的乙酸鹽形式。
1H NMR(DMSO，400MHz)δ2.16(s，3H)，2.31(s，3H)，2.32-2.38(m，4H)，2.97-3.10(m，4H)，6.61(d，J＝8.0Hz，1H)，6.71-6.77(m，2H)，7.04(d，J＝2.8Hz，1H)，7.08(dd，J＝7.4，7.2Hz，1H)，7.41(d，J＝8.2Hz，1H)，7.98(d，J＝1.5Hz，1H)，11.05(br s，1H)，11.90(br s，1H)；ES-MS435[M+H]+。
作為原料的2-[2-氯-3-甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙酰胺的制備如下 將(5-溴-2-氯-3-甲基-苯基)-乙酸甲酯(2.0g，7.2mmol)、N-甲基哌嗪(960μL，8.6mmol)和Cs2CO3(3.3g，10.1mmol)懸浮于甲苯(80mL)中。加入Pd(OAc)2(81mg，0.36mmol)和BINAP(224mg，0.36mmol)并在100℃下攪拌反應物過夜。經硅藻土過濾混合物并蒸發(fā)溶劑。經FCC(AcOEt/AcOH/H2O 60∶15∶15)純化殘留物，得到2-[2-氯-3-甲基-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙酸甲酯。將該酯懸浮于25％NH4OH(60mL)中。在RT下攪拌混合物過夜并濾去沉淀物，得到酰胺化合物。1HNMR(DMSO，400MHz)δ2.20(s，3H)，2.27(s，3H)，2.40-2.45(m，4H)，3.07-3.13(m，4H)，3.48(s，2H)，6.78(s1H)，6.82(s1H)，6.91(br s，1H)，7.34(br s，1H)。
將CuCl2(8.0g，0.06mol)和叔丁基腈(8.9mL，0.074mol)懸浮于乙腈(60mL)中。在20℃下逐滴加入1，，1-二氯乙烯。加入溶于乙腈(60mL)中的5-溴-2-氯-3-甲基-苯胺(11.0g，0.05mol)并在RT下攪拌反應物3個小時。將混合物傾入20％HCl水溶液(150mL)中并用CH2Cl2(2×150mL)萃取水相。有機相經Na2SO4干燥并蒸發(fā)溶劑。經FCC(己烷/CH2Cl29∶1)純化殘留物，得到5-溴-2-氯-1-甲基-3-(2，2，2-三氯乙基)-苯。將中間體再溶解于MeOH(80mL)中并加熱到70℃。逐滴加入溶于MeOH(28.4mL)的5.4MNaOMe溶液并在70℃下攪拌反應物3個小時。將反應物冷卻到RT并加入濃H2SO4(10mL)?；亓鲾嚢璺磻?個小時。用水(200mL)稀釋混合物并用CH2Cl2(2×200mL)萃取。所混合的有機相經Na2SO4干燥并蒸發(fā)溶劑，經FCC(己烷/CH2Cl2，9∶1至1∶1)純化殘留物，得到(5-溴-2-氯-3-甲基-苯基)-乙酸甲酯。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.26(s，3H)，3.61(s，3H)，3.63(s，2H)，7.15(s，1H)，7.21(s，1H)。
按照實施例1的方法，但是采用適當的原料，可得到如下表1所示的R為式(a)基團的式I化合物。
表1
實施例203-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮
將2-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酰胺(100mg，0.30mmol)和(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-氧代-乙酸甲酯(97mg，0.44mmol)與無水THF一起共沸三次，然后溶解于無水THF(3ml)中。在RT下經20分鐘逐滴加入溶解于THF(1.2ml)中的1.0M KOBu溶液。5分鐘后，TLC分析顯示原料全部轉化。通過加入水(5ml)使反應結束。用EtOAc稀釋混合物并用飽和的NH4Cl水溶液洗滌兩次。水相用EtOAc萃取兩次。混合的有機相經Na2SO4干燥并蒸發(fā)溶劑。經FCC(EtOAc/AcOH/H2O 800∶55∶45)純化殘留物，得到標題化合物的乙酸鹽。將化合物溶解于MeOH/TFA中并去除溶劑，得到標題化合物的三氟乙酸鹽。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.95(M，4H)，3.39(br，4H)，3.49(br，2H)，3.86(s，3H)，6.16(d，J＝7.9Hz，1H)，6.46(dd，J＝6.6/7.9Hz，1H)，7.00(dd，J＝6.6/7.9Hz，1H)，7.13(dd，J＝7.6/7.6Hz，1H)，7.40(m，4H)，7.55(d，J＝8.5Hz，1H)，7.78(d，J＝7.6Hz，1H)，8.14(s，1H)，9.10(br，2H)，11.17(s，1H)；ES-MS463[M+H]+。
作為原料的2-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酰胺制備如下 a)將2-[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酰胺(280mg，0.73mmol)與1.25M HCl在MeOH中的溶液一起共沸兩次。將殘留物溶解于EtOH(10ml)中。加入披鈀炭(10％，77mg)，并在氫氣(1個標準大氣壓)下、于RT下攪拌混合物14個小時及50℃下2個小時。過濾混合物，并濃縮混合物。經FCC(EtOAc/AcOH/H2O 750∶83∶68至600∶150∶150)純化殘留物，得到含有0.7eq AcOH的標題化合物。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.53(m，4H)，1.78(s，AcOH)，2.93(ddd，2H)，3.04(s，2H)，3.16(ddd，2H)，3.76(s，2H)，6.94(br，1H)，6.99(s，1H)，7.25(dd，1H)，7.26(s，1H)，7.35(dd，J＝6.7/7.8，1H)，7.49(br，1H)，7.69(d，J＝7.8，1H)，7.88(d，J＝10.0，1H)；ES-MS296[M+H]+。
b)2-[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酰胺在氬氣氛中，將[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酸乙酯(347mg，0.84mmol)和甲酰胺(126mg，2.80mmol)溶解在DMF(1ml)中。將溶液加熱到105℃，并在15分鐘內逐滴加入NaOMe(溶解于MeOH中的155μL 5.4M的溶液，45mg，0.84mmol)。在105℃下經30分鐘后，TLC分析顯示原料完全消耗。將反應混合物冷卻到RT，用水稀釋，并用EtOAc萃取。用水洗滌EtOAc層兩次。去除溶劑并經FCC(EtOAc/MeOH98∶2至96∶4至90∶10)純化，得到標題化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.71(ddd，2H)，0.89(ddd，2H)，3.10(ddd，2H)，3.16(s，2H)，3.31(ddd，2H)，3.93(s，2H)，3.99(s，2H)，5.33(br，1H)，5.42(br，1H)，7.11(s，1H)，7.23(d，J＝2.0，1H)，7.32(m，5H)，7.37(dd，J＝6.7Hz，1H)，7.45(dd，J＝6.7Hz，1H)，7.73(d，J＝8.9Hz，1H)，7.85(d，J＝8.9Hz，1H)；ES-MS386[M+H]+。
c)[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-萘-1-基]-乙酸乙酯在氬氣氛中，將將(3-三氟甲磺酰氧基-萘-1-基)-乙酸乙酯(500mg，1.38mmol)溶解于無水THF(10ml)中。加入4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛烷(325mg，1.61mmol)，然后加入K3PO4(410mg，1.93mmol)、Pd2(dba)3(62mg，0.069mmol)以及聯苯-2-基-二-叔丁基-磷烷(21mg，0.069mmol)。將反應混合物加熱到80℃。4小時后，TLC分析顯示原料全部消耗。將反應混合物冷卻到RT，過濾并濃縮。經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至90∶10至80∶20至70∶30至0∶100)純化殘留物，得到標題化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.69(ddd，2H)，0.86(ddd，2H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)，3.09(ddd，2H)，3.19(s，2H)，3.31(ddd，2H)，3.93(s，2H)，4.02(s，2H)，4.17(q，J＝7.0Hz，2H)，7.08(s，1H)，7.21(s，1H)，7.33(m，6H)，7.42(dd，J＝8.8Hz，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，1H)，7.88(d，J＝8.8Hz，1H)；ES-MS415[M+H]+。
d)(3-三氟甲磺酰氧基-萘-1-基)-乙酸乙酯 在氬氣下將(3-羥基-萘-1-基)-乙酸乙酯(1.67g，7.25mmol)溶解于CH2Cl2(20ml)中。加入吡啶(1.17ml，1.15g，14.50mmol)，并將反應混合物冷卻到0℃，再逐滴加入三氟甲基磺酰酐(1.79ml，3.07g，10.88mmol)。使反應混合物的溫度升至RT，1小時后，TLC分析顯示原料全部消耗。用EtOAc稀釋反應混合物并用水洗滌兩次。經Na2SO4干燥結合的有機相，去除溶劑，經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至97∶3至95∶5至93∶7至90∶10)純化殘留物，得到標題化合物。1H NMR(DMSO，400MHz)δ1.19(t，J＝7.2Hz，3H)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，4.38(s，2H)，7.60(d，J＝3.0Hz，1H)，7.70(m，2H)，8.03(m，1H)，8.12(m，2H)；ES-MS362[M+H]+。
e)(3-羥基-萘-1-基)-乙酸乙酯將(3-芐氧基-萘-1-基)-乙酸乙酯(2.43g，7.58mmol)溶解于MeOH(50ml)中。加入披鈀炭(807mg)，并在氫氣(1個標準大氣壓)氛下、于RT攪拌反應混合物14個小時。過濾反應混合物。濃縮得到純的標題化合物。1HNMR(DMSO，400MHz)δ1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，4.05(s，2H)，4.10(q，J＝7.2Hz，2H)，7.04(d，J＝1.8Hz，1H)，7.06(d，J＝1.8，1H)，7.30(t，J＝7.8，1H)，7.40(t，J＝7.8，1H)，7.70(d，J＝7.8，1H)，7.80(d，J＝7.8Hz，1H)；ES-MS230[M+H]+。
f)(3-芐氧基-萘-1-基)-乙酸乙酯在氬氣下，將3-芐氧基-1-溴-萘(5.64g，18.01mmol)溶解于無水DMF(100ml)中。加入三丁基甲錫烷基-乙酸乙酯(7.47g，19.81mmol)，以及[雙(三-鄰-甲苯基-膦)]二氯化鈀(II)(2.83g，3.60mmol)和溴化鋅(II)(5.27g，23.41mmol)。將反應混合物加熱至80℃3個小時。用EtOAc稀釋反應混合物并用淡鹽水洗滌兩次(反萃取)。經Na2SO4干燥合并的有機層，去除溶劑，并經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至97.5∶2.5至95∶5至90∶10)純化殘留物。在EtOAc/1N NaOH1∶1的混合物(200ml)中攪拌所得的仍含有錫殘余物的油狀物1個小時。用EtOAc萃取混合物兩次。用水洗滌合并的有機層兩次(反萃取)，經Na2SO4干燥并濃縮。經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至97∶3至95∶5至93∶7至92∶8至90∶10)純化殘留物，得到標題化合物。1HNMR(DMSO，400MHz)δ1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，4.10(q，J＝7.2Hz，2H)，4.11(s，2H)，5.25(s，2H)，7.21(d，J＝3.0Hz，1H)，7.41(m，8H)，7.53(d，J＝6.6Hz，1H)，7.84(dd，J＝7.2Hz，1H)；ES-MS320[M+H]+。
g)3-芐氧基-1-溴-萘在氬氣下，將4-溴-萘-2-酚(5.0g，22.41mmol)溶解于無水DMF(50ml)中。加入氯化鈉(986mg 60％的在礦物油中的懸浮液，592mg，24.65mmol)并在50℃下攪拌混合物1個小時。再次冷卻到RT后，加入芐基溴(3.46ml，4.98g，29.14mmol)和四丁基碘化銨(828mg，2.24mmol)。在RT下16小時后，用EtOAc稀釋反應混合物。用半濃縮的鹽水洗滌溶液兩次(反萃取)。經Na2SO4干燥合并的有機層，去除溶劑，并經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至95∶5至90∶10)純化殘留物，得到標題化合物。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ5.22(s，2H)，7.25(d，J＝1.5Hz，1H)，7.45(m，7H)，7.64(d，J＝2.4，1H)，7.75(d，J＝7.8，1H)，8.17(d，J＝7.8，1H)；ES-MS312[M+H]+。
按照實施例20的方法，可得到如表2所示的R為式(b)基團的式I化合物。
表2
按照如上或在WO02/38561的實施例56所公開的方法，但是采用適當的原料，可得到如下表3所示的R為式(c)基團的式I化合物。
表3
按照如上或在WO02/38561的實施例163所公開的方法，但是采用適當的原料，可得到如下表4所示的R為式(d)基團的式I化合物。
表4
實施例693-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-4-(7-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮 將2-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酰胺(4.95g，16.70mmol)和(7-甲基-1H-吲哚-3-基)-氧代-乙酸甲酯(5.44g，25.05mmol)與無水THF一起共沸兩次。然后加入無水THF(100ml)，并在氬氣下在20分鐘內將KOtBu(溶于THF 1.0M，50ml，50mmol)逐滴加入。再過90分鐘后，TLC分析顯示原料完全轉化。用水稀釋反應混合物并用EtOAc萃取兩次。用飽和的NH4Cl水溶液洗滌合并的有機層兩次(反萃取)。經Na2SO4干燥并濃縮。經FCC(CH2Cl2/MeOH 100∶0至98∶2至96∶4至94∶6至92∶8至90∶10)純化，得到標題化合物，經EtOH/AcOH溶液濃縮轉化為該化合物的乙酸鹽。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.26-053(br，4H)，1.89(s，3H，CH3COOH)，2.36(s，3H)，2.80(br m，2H)，3.15-3.48(br m，2H)，6.14(d，J＝8.2HZ，1H)，6.44(dd，J＝8.2/7.4Hz，1H)，6.75(d，J＝7.4Hz，1H)，7.00(s，1H)，7.02(dd，J＝8.2/8.2Hz，1H)，7.40(dd，J＝8.2/8.2Hz，1H)，7.59(d，J＝8.2Hz，1H)，7.63(d，J＝8.2Hz，1H)，7.63(d，J＝8.2Hz，1H)，7.97(d，J＝2.9Hz，1H)，11.04-11.21(br，1H)，11.86(d，J＝2.9Hz，1H)；ES-MS464[M+H]+。
用作原料的2-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酰胺制備如下 a)將2-[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酰胺(490mg，1.27mmol)溶解于無水MeOH(5ml)中。加入披鈀炭(140mg)以及甲酸銨(200mg，3.17mmol)。回流1個小時后(T＝75℃)，另外加入甲酸銨(200mg，3.17mmol)。1小時后，TLC分析顯示原料完全轉化。過濾并濃縮后，在CH2Cl2中吸收殘留物并用水(加入2N NaOH使pH為10)洗滌。經Na2SO4干燥有機層并去除溶劑。經FCC(EtOAc/AcOH/H2O 750∶83∶68至700∶110∶90至650∶130∶120至600∶150∶150)純化，得到標題化合物的雙乙酸鹽。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.46-0.52(m，4H)，2.88(t，J＝5.5，2H)，3.35(s，2H)，3.49(t，J＝5.5，2H)，3.94(s，2H)，6.77(s，1H)，7.00(br s，1H)，7.18-7.25(m，1H)，7.45-7.56(m，2H)，7.60-7.65(m，1H)，7.95(d，J＝9.9，1H).ES-MS297[M+H]+。
b)[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酰胺在氬氣下，將2-[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酸乙酯(700mg，1.68mmol)溶解于無水DMF中。加入甲酰胺(224μl，254mg，5.64mmol)，并將反應混合物加熱到105℃。在該溫度下在20分鐘內將NaOMe(溶于MeOH的5.4M溶液312μl，91mg，1.68mmol)逐滴加入。在105℃下30分鐘后，TLC分析顯示原料完全轉化。將反應混合物冷卻到RT，然后加入水并用EtOAc萃取。用水洗滌有機層(兩次)，經Na2SO4干燥并濃縮。經FCC(己烷/EtOAc 1∶1至1∶3至0∶100至EtOAc/MeOH 98∶2)純化殘留物，得到標題化合物。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.68-0.70(m，2H)，0.82-0.88(m，2H)，3.08(t，J＝4.4，2H)，3.45(s，2H)，3.58(t，J＝4.4，2H)，3.96(s，2H)，4.27(s，2H)，5.3-5.5(br，1H)，6.55-6.7(br，1H)，6.72(s，1H)，7.26-7.36(m，6H)，7.51(t，J＝8.8，1H)，7.60 d，J＝9.9，1H)，8.02(d，J＝9.9，1H)；ES-MS387[M+H]+。
c)[3-(4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-乙酸乙酯在氬氣下，將(3-氯-異喹啉-1-基)-乙酸乙酯(2.50g，10.01mmol)、4-芐基-4，7-二氮雜-螺[2.5]辛烷(2.23g，11.01mmol)、NaOtBu(1.06g，11.01mmol)、BINAP(249mg，0.40mmol)和乙酸鈀(II)(180mg，0.80mmol)混合。加入除氣、無水的二噁烷(36ml)后，將混懸液加熱到85℃。在85℃下25分鐘后，HPLC分析顯示71％轉化。將混合物冷卻到RT，用EtOAc稀釋，并用水及飽和的NH4Cl水溶液洗滌(反萃取)。經Na2SO4干燥合并的有機層，去除溶劑并經FCC(己烷/EtOAc 100∶0至96∶4至93∶7至90∶10至85∶15)純化殘留物，得到標題化合物。1H NMR(DMSO，400MHz)δ0.58-0.61(m，2H)，0.70-0.73(m，2H)，1.18(t，J＝8.8，3H)，2.98(t，J＝5.5，2H)，3.39(s，2H)，3.49(t，J＝5.5，2H)，3.86(s，2H)，4.12(s，2H)，4.12(q，J＝8.8，2H)，5.59(s，1H)，7.14-7.19(m，6H)，7.39(t，J＝8.8，1H)，7.51(d，J＝9.9，1H)，7.78(d，J＝9.9，1H)；ES-MS417[M+H]+。
d)(3-氯-異喹啉-1-基)-乙酸乙酯將1，1，1，3，3，3-六甲基-二硅烷基胺(27.4ml，20.37g，126.2mmol)溶解于無水甲苯(150ml)中。冷卻到-78℃后，在20分鐘內慢慢加入正BuLi(溶于己烷中的1.6M溶液79ml，126.2mmol)。在-78℃下攪拌白色混懸液15分鐘并在RT下攪拌15分鐘后，得到清亮的亮黃色溶液。用導管將溶液導入含有Pd2(dba)3(1.39g，1.51mmol)和(2′-二環(huán)己基磷烷基-聯苯-2-基)-二甲基-胺(1.25g，3.18mmol)的雙頸燒瓶中的第二個燒瓶內。在RT下攪拌10分鐘后，將清亮的暗紅色溶液冷卻到-10℃。在5分鐘內加入乙酸叔丁酯(15.7ml，13.5g，116.1mmol)。在-10℃下經過10分鐘后，一次性加入1，3-二氯-異喹啉(10.0g，50.49mmol)混勻。將暗紅色溶液的溫度升至RT。在RT下30分鐘后，TLC分析顯示原料完全轉化。將反應混合物經2cm硅膠墊過濾，并用EtOAc/MeOH 98∶2洗滌。濃縮后，經FCC(甲苯/CH2Cl22∶1至甲苯/EtOAc 100∶0至99∶1至98∶2至97∶3至96∶4至94∶6至90∶10)純化殘留物，得到(3-氯-異喹啉-1-基)-乙酸叔丁酯。將該化合物溶解于飽和的HCl乙醇溶液(200ml)并回流15分鐘。濃縮后以定量產率得到標題化合物。1H NMR(DMSO，400MHz)δ1.17(t，J＝8.8，3H)，4.11(q，J＝8.8，2H)，4.28(s，2H)，7.51-7.57(m，1H)，7.61(s，1H)，7.61-7.66(m，1H)，7.72(d，J＝8.8，1H)，7.98(d，J＝8.8，1H)；ES-MS250[M+H]+。
按照實施例69的方法，但是采用適當的原料，可得到如下表1所示的R為式(e)基團的式I化合物。
表5
*實施例80的化合物轉化為它的雙-三氟乙酸鹽或乙酸鹽。
游離形式的或藥學上可接受的鹽形式的式I化合物具有重要的藥理學性質，如抑制蛋白激酶C(PKC(如PKC同種型α、β、δ、ε、η或θ))的活性，抑制T細胞活化和增殖，如抑制T細胞或細胞活素(如白介素-2)的生成，如抑制T細胞對細胞活素(如白介素-2)的增殖反應，如在體外和體內試驗中所顯示的性質，因此，這些化合物具有治療作用。
A.體外1.蛋白激酶C測定根據已公開的方法(D.Geiges等Biochem.Pharmacol.1997；53865-875)測定式I化合物對不同PKC同種型的活性。該測定在96孔聚丙烯微量滴定板(Costar 3794)上進行，此前用Sigmacote(Sigma SL-2)硅化處理微量滴定板。反應混合物(50μl)含有10μl PKC的同工酶以及25μl試驗化合物和15μl混合溶液，所述混合溶液在20mM Tris緩沖液(pH 7.4+0.1％BSA)中含有200μg/ml硫酸魚精蛋白、10mM Mg(NO3)2、10μMATP(Boehringer 519987)以及3750Bq的33P-ATP(Hartmann AnalyticSFC301，110TBq/mmol)。將微量滴定板置于搖動培養(yǎng)箱中(BiolaboScientific Instruments)，在32℃下溫育15分鐘。加入10μl 0.5M Na2EDTA(pH 7.4)使反應停止。在輕微壓力下將50μl的混合物轉移到預濕的磷酸纖維素紙(Whatmann 3698-915)上。用100μl雙蒸水沖去未結合的ATP。在15分鐘內用0.5％H3PO4洗滌纖維素紙兩次，然后再在5分鐘內用EtOH洗滌。然后風干纖維素紙并放置于通用過濾器(Packard 6005219)上，在用Topcount放射活性計數器(Packard)進行計數前用10μl/孔的Microscint-O(Packard 6013611)覆蓋。根據上述方法，將濃度為1-1000μM之間的一系列抑制劑的稀釋液按常規(guī)方法溫育從而測定IC50。由S型曲線擬合圖計算出IC50值。
2.蛋白激酶Cθ測定在如上所述的測定條件下，采用人重組PKCθ進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCθ的IC50≤1μM。在該測定中，實施例33和69的化合物抑制PKCθ的IC50分別為6.8和12.1nM。
3.蛋白激酶Cα測定從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKCα，并在如上A.1部分所述的測定條件下進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCα的IC50≤1μM。在該測定中，實施例29的化合物抑制PKCα的IC50為4.3nM。
4.蛋白激酶Cβ1測定從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKCβ1并在如上A.1部分所述的測定條件下進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCβ1的IC50≤1μM。在該測定中，實施例33的化合物抑制PKCβ1的IC50為19.6nM。
5.蛋白激酶Cδ測定從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKCδ并在如上A.1部分所述的測定條件下進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCδ的IC50≤1μM.。在該測定中，實施例29的化合物抑制PKCδ的IC50為20nM。
6.蛋白激酶Cε測定從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKCε并在如上A.1部分所述的測定條件下進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCε的IC50≤1μM。在該測定中，實施例69的化合物抑制PKCε的IC50為18nM。
7.蛋白激酶Cη測定從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKCη并在如上A.1部分所述的測定條件下進行測定。在該測定中，式I化合物抑制PKCη的IC50≤1μM。在該測定中，實施例29的化合物抑制PKCη的IC50為27.4nM。
8.CD28共刺激測定根據Baumann G等在Transplant.Proc.1992；2443-8所描述的方法，用人白細胞介素-2啟動子/報導基因構建物轉染的Jurkat細胞進行該測定，將β-半乳糖苷酶報導基因由熒光素酶基因(de Wet J.，等，Mol.Cell Biol.1987，7(2)，725-737)取代。如下所述，用固相偶聯的抗體或佛波醇豆蔻酸乙酸酯(PMA)和Ca++離子載體離子霉素刺激細胞。在進行抗體介導的刺激時，在RT下將Microlite TM1微量滴定板(Dynatech)上的每個孔用溶于55μl磷酸緩沖液(PBS)中的3μg/ml山羊抗小鼠的IgG Fc抗體(Jackson)包被3個小時。去除抗體后，在RT下，通過加入2％牛血清白蛋白(BSA)的PBS液(300μl/孔)孵育2個小時封閉培養(yǎng)板。每孔用300μl PBS洗滌三次后，加入在50μl 2％BSA/PBS中的10ng/ml抗T細胞受體(WT31，Becton &Dickinson)和300ng/ml抗CD28抗體(15E8)作為刺激抗體，并在4℃下溫育過夜。最后，培養(yǎng)板的各孔用300μl PBS洗滌三次。在兩個分別的培養(yǎng)板中以一式兩份在測定培養(yǎng)基中制備7個濃度的待測化合物的3倍的系列稀釋液，所述測定培養(yǎng)基為含有10％胎牛血清(FCS))的RPMI 1640，其中含有50μM 2-巰基乙醇、100單位青霉素/ml和100μg鏈霉素/ml，與轉染的Jurkat細胞(克隆系K22 290_H23)混合并在37℃下5％CO2中溫育30分鐘。然后將100μl含有1×105細胞的該混合物轉移到抗體包被的測定培養(yǎng)板上。同時將100μl混合物分別與40ng/ml PMA和2μM離子霉素溫育。在37℃下5％CO2中溫育5.5個小時后，通過生物發(fā)光測定法測定熒光素酶水平。在500g下離心培養(yǎng)板10分鐘并輕彈去除上清液。每孔加入20μl裂解緩沖液，其中含有25mM Tris磷酸鹽(pH 7.8)、2mM DTT、2mM 1.2-二氨基環(huán)己烷-N，N，N′，N-四乙酸、10％(v/v)甘油和1％(v/v)Triton X-100。在RT下在連續(xù)搖動的情況下溫育培養(yǎng)板10分鐘。每孔自動加入50μl熒光素酶反應緩沖液(含有20mM Tricine、1.07mM(MgCO3)4Mg(OH)2x5H2O、2.67mMMgSO4、0.1mM EDTA、33.3mMDTT、270μM輔酶A、470μM熒光素(Chemie Brunschwig AG)、530μMATP，pH 7.8)，用生物發(fā)光讀板儀(Labsystem，Helsinki，Finland)測定熒光素酶活性。滯后時間為0.5秒，總測定時間為1或2秒。在沒有加入任何試樣的情況下，由抗T細胞受體或PMA刺激細胞的光單位獲得低對照值，由抗T細胞受體/抗CD28刺激細胞或PMA/離子霉素刺激細胞的光單位獲得高對照值。從總值中減去低對照值。在存在測定化合物的情況下獲得的抑制以相對于高對照的抑制百分比表示。從劑量-反應曲線，獲得產生50％抑制的測定化合物的濃度(IC50)。在該測定中，式I化合物抑制抗T細胞受體/抗CD28和PMA/離子霉素刺激的Jurkat細胞的IC50≤1μM。在該測定中實施例29化合物的IC50為20nM。
9.異源淋巴細胞混合反應(MLR)根據標準方法(J.Immunol.Methods，1973，2，279和Meo T.等，Immunological Methods，New York，Academic Press，1979，227-39)進行二向MLR。簡要地說，在RPMI培養(yǎng)基(含有10％FCS、100U青霉素/ml、100μg鏈霉素/ml(Gibco BRL，Basel，Switzerland)、50μM 2-巰基乙醇(Fluka，Buchs，Switzerland))以及一系列稀釋的化合物)中溫育獲自CBA和BALB/c小鼠的脾細胞(在平底組織培養(yǎng)微量滴定板上，每孔1.6×105個細胞/系，總量3.2×105個)。該測定以一式兩份進行，將測定化合物以3倍進行系列稀釋，得到7種濃度的化合物。溫育4天后，加入1μCi3H-胸腺嘧啶脫氧核苷。再溫育5小時后，捕獲細胞，并根據標準方法測定摻入的3H-胸腺嘧啶脫氧核苷。MLR背景值(低對照)為BALB/c增殖。從總值中減去低對照值。在沒有任何樣品存在的情況下的高對照被看作為100％增殖。計算出樣品的抑制百分比，由此測定出50％抑制所需的濃度(IC50值)。在該測定中，實施例29化合物的IC50為28nM。當用人的MLR進行測定時，式I化合物IC50值在nM范圍內。
10.對GSK-3β的抑制作用在96孔聚丙烯板上用50μl反應物進行GSK-3β結合測定，每個反應物中含有20mM氯化鎂、40μM ATP、2mM DTT、88.5μM生物素化和磷酸化的CREB-肽底物(生物素-KRREILSRRPS(PO4)YR-OH；Q.M.Wang等，J.Biol.Chem.269，14566-14574，1994)、 和2μl的待測化合物在DMSO中的溶液(各種濃度)。加入15μl GSK-3β(各種濃度)并在30℃下溫育混合物1個小時。將25μl的混合物轉移到含有130μl 1.85％磷酸的磷酸纖維素板上使反應停止。在真空下用1.85％磷酸沖去濾膜上游離的放射性核苷(5次)。最后一次洗滌完后，將板放到接合板上并在每孔中加入50μl閃爍混合液(Microscint-20，Packard，cat.#20-133)并在上蓋計數器(top counter)中對放射活性進行計數。在該測定中，式I化合物具有活性。也可用其他的底物(如可從商業(yè)上獲得的)，通過其他標準的GSK-3β結合測定來測定式I化合物的活性。
B.體內大鼠心臟移植應用重組系Male Lewis(RT1單元型)和BN(RT1單元型)。用吸入異熒烷的方法麻醉動物。對大鼠供體進行大動脈放血并同時經腹部的下靜脈腔進行肝素化，然后打開胸腔并迅速冷卻心臟。在第一分杈處的遠端進行結扎并分離大動脈并在第一杈處分離頭臂動脈干。結扎并分離左肺動脈，分離右側但使左側敞開。完全切開其他所有的血管，結扎并分離，然后將供體心臟置于冰凍鹽水中。
將腎以下的腹腔動脈和靜脈解剖并放置交叉鉗備好受體。采用端側吻合術植入移植物，用10/0單絲縫合線，縫合供體頭臂動脈干和受體大動脈以及供體的右肺動脈和受體的腔靜脈。移去鉗子，在腹后拴住移植物，用溫鹽水洗滌腹內容物并在關閉動物腹腔，然后在加熱燈下使其復原。每天經腹壁捫診供體心臟搏動來監(jiān)測移植物的存活狀況。當心臟搏動停止時，則認為是完全排斥反應。給予動物口服1-30mg/kg式I化合物每天兩次可增加移植物的存活。
移植物-宿主模型將來自Wistar/F大鼠的脾細胞(2×107)皮下注射進F1雜種大鼠(Wistar/F x Fischer 344)的右后足墊中。不處置左足墊。連續(xù)4天(0-3)給予動物待測化合物。第7天取出腘處的淋巴結，并測定相應的兩淋巴結的重量差。結果以對淋巴結增大的抑制率來表示(表示為百分比)，比較測定組淋巴結重量差和相應的未用待測化合物處理的動物間淋巴結重量差。在該測定中，當每天兩次給予30mg/kg劑量的實施例29化合物時，得到100％的抑制率。
因此，式I化合物可用于治療和/或預防T淋巴細胞和/或PKC誘導的疾病或紊亂，如器官或組織的同種或異種移植物的急性或慢性排斥反應、移植物抗宿主反應、動脈硬化癥、由血管損傷如血管成形術引起的血管栓塞、再狹窄、肥胖、X綜合征、糖耐量減低、多囊卵巢綜合征、高血壓、心力衰竭、慢性阻塞性肺病、如阿爾茨海默病的CNS病或肌萎縮性側索硬化、癌癥、如AIDS的感染性疾病、敗血癥性休克或成人呼吸窘迫綜合征、如心肌梗塞的缺血再灌注損傷、中風、胃腸缺血、腎衰竭或出血性休克或外傷性休克(如外傷性腦損傷)。式I化合物也用于治療和/或預防T淋巴細胞誘導的急性或慢性炎性疾病或紊亂或者自身免疫性疾病，如風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、系統性紅斑狼瘡、橋本甲狀腺病、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I型或II型糖尿病以及其并發(fā)癥(如血管病、糖尿病性增殖性視網膜病、糖尿病性黃斑水腫、腎病、神經病變及黎明現象)、如哮喘的呼吸疾病、或炎性肺損傷、炎性肝損傷、炎性腎小球損傷、免疫介導的炎性紊亂或疾病的皮膚癥狀、炎性及過度增生性皮膚病(如牛皮癬、特應性皮炎、過敏性接觸性皮炎、刺激性接觸性皮炎和其它濕疹性皮炎、脂溢性皮炎)、炎性眼病(如舍格倫綜合征、角膜結膜炎或眼色素層炎)、炎性胃腸病、局限性回腸炎或潰瘍性結腸炎。在上述應用中，所需的劑量當然要根據給藥方式、所治療的特定病情以及需達到的效果而變化。但是，通常而言，每天約0.1-約100mg/公斤體重的劑量可達到的理想效果。在大型哺乳動物(如人)中，每天所需要的劑量為約0.5mg-約2000mg，為了方便，可將劑量分成4次或采用緩釋形式服用。
可通過任何便利的方式給予式I化合物，優(yōu)選胃腸內給藥，如以片劑或膠囊形式的口服給藥，以注射液或混懸液形式的胃腸外給藥，以洗劑、凝膠劑、膏劑或霜劑形式或者滴鼻劑或栓劑形式的局部給藥。通過常規(guī)方法，將游離形式的式I化合物或藥學上可接受的鹽形式與藥學上可接受的載體或稀釋劑混合可制備含有游離形式的式I化合物或藥學上可接受的鹽和至少一種藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。用于口服給藥的單位劑量形式中含有約0.1mg-約500mg的活性物質。
局部給藥如皮膚的局部給藥。其它局部給藥形式如眼睛的局部給藥。
如上所述，式I化合物可以游離形式或藥學上可接受的鹽形式給藥?？赏ㄟ^常規(guī)的方法，制備這種鹽形式并且這種鹽形式與游離化合物具有相同的活性。
根據如上所述，本發(fā)明還提供1.1在需要此類治療的患者中，預防或治療T淋巴細胞和/或PKC或GSK-3β介導的紊亂或疾病的方法，如上所述的那些紊亂或疾病，該方法包括給予所述患者有效量的式I化合物或其藥學上可接受的鹽；1.2在需要此類治療的患者中，預防或治療急性或慢性移植排斥反應或T細胞介導的炎性或自身免疫性疾病的方法，如上所述的那些紊亂或疾病，該方法包括給予所述患者有效量的式I化合物或其藥學上可接受的鹽；2.游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式I化合物作為藥物應用，如在任一1.1和1.2所述方法中用作藥物。
3.藥物組合物，如在任一1.1和1.2所述方法中應用，該組合物包括游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式I化合物和藥學上可接受的稀釋劑或載體。
4.式I化合物或其藥學上可接受的鹽形式用于制備藥物組合物，在任一1.1和1.2所述方法中使用該藥物組合物。
式I化合物可作為唯一的活性成分給藥或者與其它免疫調節(jié)劑或其他抗炎藥物一起給藥，如在治療或預防同種或異種移植的急性或慢性排斥反應或者炎性或自身免疫性疾病中。如，這些化合物可以與環(huán)胞菌素、子囊菌素或它們的免疫抑制劑類似物或衍生物聯合使用，如環(huán)胞菌素A、ISATx247、FK-506、ABT-281、ASM 981；與mTOR抑制劑聯合使用，如雷帕霉素、40-O-(2-羥基)乙基-雷帕霉素、CCI779、ABT578或rapalog如AP23573等；與皮質類固醇類聯合使用；與環(huán)磷酰胺類聯合使用；與硫唑嘌呤聯合使用；與甲氨蝶呤聯合使用；與加速淋巴細胞歸巢的EDG受體激動劑聯合使用，如FTY 720或其類似物；與來氟米特或其類似物聯合使用；與咪唑立賓聯合使用；與麥考酚酸聯合使用；與霉酚酸嗎啉乙酯聯合使用；與15-脫氧精胍菌素或其類似物聯合使用；與單克隆抗體型的免疫抑制劑聯合使用，如白細胞受體的單克隆抗體(如MHC、CD2、CD3、CD4、CD11a/CD18、CD7、CD25、CD 27、B7、CD40、CD45、CD58、CD 137、ICOS、CD150(SLAM)、OX40、4-1BB或它們的配體，如CD154)；或者與其他的免疫調節(jié)劑化合物聯合使用，如含有至少一個CTLA4或其突變型的胞外結構域部分的重組結合分子，如至少一個結合有非-CTLA4蛋白序列的CTLA4或其突變型(如CTLA4Ig(如，ATCC 68629)或其突變型如LEA29Y)的胞外部分，或者與其他粘附分子抑制劑如mAbs或小分子量抑制劑(包括LFA-1拮抗劑、Selectin拮抗劑和VLA-4拮抗劑)聯合使用。式I化合物也可與抗增生藥物一起給藥，如治療癌癥的化療藥物，包括但不限于芳化酶抑制劑、抗雌激素、I型拓撲異構酶抑制劑、II型拓撲異構酶抑制劑、微管活性劑、烷化劑、組蛋白脫乙酰酶抑制劑、法呢基轉移酶抑制劑、COX-2抑制劑、MMP抑制劑、mTOR抑制劑、抗腫瘤抗代謝藥物、鉑化合物、減少蛋白激酶活性的化合物以及其他抗血管生成的化合物、促性腺激素激動劑、抗雄激素、bengamides、雙膦酸酯、抗增生抗體和替莫唑胺，或者在糖尿病的治療中與治療糖尿病的藥物一起給藥，胰島素促分泌素或胰島素分泌增強劑，如磺酰脲(如甲苯磺丁脲、氯磺丙脲、妥拉磺脲、醋磺己脲、4-氯-N-[(1-吡咯烷基)羰基]-苯磺胺(glycopyramide)、格列苯脲、格列齊特、1-丁基-3-間氨基苯磺酰脲、氨磺丁脲、格列波脲、格列吡嗪、格列喹酮、格列派特、格列噻唑、glibuzole、格列己脲、格列嘧啶、格列平脲、苯磺丁脲或tolylcyclamide)、口服促胰島素藥物衍生物如短效胰島素增強劑(如美格列奈、瑞格列奈)、苯乙酸衍生物(如那格尼奈)、DPP IV抑制劑(如1-{2-[(5-氰基吡啶-2-基)氨基]乙基氨基}乙酰基-(2S)-氰基-吡咯烷二鹽酸鹽、LAF237、GLP-1或GLP-1激動劑類似物)或者胰島素增敏劑如過氧化物酶體增殖劑活化的受體γ激動劑(PPARγ)(如格列酮、非格列酮類，如N-(2-苯甲?；交?-L-酪氨酸類似物，如GI-262570或者oxolidinedione如JTT501)、PPARγ/PPARα雙重激動劑(如DRF-554158、NC-2100或NN-622)，類視色素X受體激動劑或rexinoid(如2-[1-(3，5，5，8，8-五甲基-5，6，7，8-四氫-2-萘基)-環(huán)丙基]-吡啶-5-甲酸、4-[(3，5，5，8，8-五甲基-5，6，7，8-四氫-2-萘基)-2-羰基]-苯甲酸、9-順式視黃酸或它們的類似物、衍生物或藥學上可接受的鹽)。
根據如上所述，本發(fā)明還提供如下方面5.如上所述的方法，該方法包括聯合給予(例如同時或依次給予)治療有效量的GSK-3β、PKC抑制劑或T細胞活化和增生抑制劑，如游離形式或藥學上可接受鹽形式的式I化合物以及第二種藥物，所說的第二種藥物為如上所述的免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物。
6.治療組合，如藥盒，該組合包括a)GSK-3β、PKC抑制劑或T細胞活化和增生抑制劑，如游離形式或藥學上可接受鹽形式的式I化合物，以及b)至少一種選自免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物的第二種藥物。成分a)和成分b)可同時或先后使用。所述藥盒中包括給藥說明。
當GSK-3β、PKC抑制劑或T細胞活化和增生抑制劑(如式I化合物)與其他免疫抑制劑/免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物聯合給藥如用于預防或治療如上所述的急性或慢性移植排斥反應或炎性或自身免疫性疾病時，聯合給藥的免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物的劑量當然要根據聯合給藥的種類(如是否為類固醇或環(huán)胞菌素)、所選用的特定藥物、所治療的病情等而變化。
式I化合物的藥物動力學以及體外和體內活性均是非常重要的。
權利要求
1.式I化合物或其鹽 其中Ra為H、CH3、CH2-CH3或異丙基，Rb為H、鹵素、C1-6烷氧基或C1-6烷基，或者I.R為式(a)的基團 其中R1為在3或4位上由CH3任選取代的哌嗪-1-基；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；R2為Cl、Br、CF3或CH3；且R3為H、CH3或CF3；當R3為H、Ra為H或CH3。Rb為H且R1為4-甲基-1-哌嗪基時，R2不為CH3或Cl；或者II.R為式(b)的基團 其中R4為在3和/或4位上由CH3取代的1-哌嗪基；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；當R4為4-甲基-1-哌嗪基時，Ra不為H或CH3；或者III.R為式(c)的基團 其中R14為1-哌嗪基，任選在3和/或4位上由CH3取代或者任選在3位上由乙基、苯基-C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基或者鹵代-C1-4烷基取代；或者為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；R15為鹵素、CF3或CH3；當R16為CH3、Ra為H或CH3、Rb為H且R14為4-甲基-1-哌嗪基時，R15不為CH3；且R16為H、CH3、CH2-CH3或CF3；當R15為Cl、Ra為H或CH3、Rb為H且R14為4-甲基-1-哌嗪基時，R16不為H；或者IV.R為式(d)的基團 其中R8為1-哌嗪基、3-甲基-哌嗪-1-基或4-芐基-哌嗪-1-基；或者V R為式(e)的基團 其中R9為4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基；或者為在3位上由甲基或乙基取代且在4位上由甲基任選取代的哌嗪-1-基。
2.根據權利要求1的化合物，選自3-[5-氯-6-甲基-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-4-基]-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮、3-[3-(4，7-二氮雜-螺[2.5]辛-7-基)-異喹啉-1-基]-4-(7-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮和3-(1H-吲哚-3-基)-4-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-嘧啶-4-基]吡咯-2，5-二酮或者它們的鹽。
3.制備根據權利要求1的式I化合物的方法，該方法包括使式II化合物與式III化合物反應，式II化合物如下 其中Ra和Rb如權利要求1所定義，III化合物如下R-CH2-CO-NH2(III)其中R如上所定義。并且，如果需要，將所得游離形式的式I化合物轉化為鹽形式，反之亦然。
4.游離形式或藥學上可接受的鹽形式的權利要求1或2的式I化合物，它們用作藥物。
5.藥物組合物，該組合物包括根據權利要求1或2的式I化合物或者其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的稀釋劑或載體。
6.根據權利要求1或2的式I化合物或者其藥學上可接受的鹽，它們用于制備治療或預防T淋巴細胞和/或PKC或GSK-3β介導的紊亂或疾病的藥物組合物。
7.根據權利要求1或2的式I化合物或者其藥學上可接受的鹽，它們用于與免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物結合。
8.組合，該組合包括a)游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式I化合物，以及b)免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物。
9.在需要此類治療的宿主中治療或預防T淋巴細胞和/或PKC或GSK-3β介導的紊亂或疾病的方法，該方法包括給予所述宿主有效量的根據權利要求1或2的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
10.根據權利要求9的方法，該方法包括同時或先后給予治療上有效量的游離形式或其藥學上可接受的鹽形式的式I化合物，以及第二種藥物，所說的第二種藥物為免疫抑制劑、免疫調節(jié)劑、抗炎藥物、抗增生藥物或治療糖尿病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供式I化合物，這些化合物可以用于治療和/或預防T淋巴細胞和/或PKC介導的疾病或紊亂，如器官或組織的同種或異種移植物的急性或慢性排斥反應、移植物抗宿主反應、動脈硬化癥、由血管損傷如血管成形術引起的血管栓塞、再狹窄、肥胖、X綜合征、糖耐量減低、多囊卵巢綜合征、高血壓、心力衰竭、慢性阻塞性肺病、如阿爾茨海默病的CNS病或肌萎縮性側索硬化、癌癥、如AIDS的感染性疾病、敗血癥性休克或成人呼吸窘迫綜合征、如心肌梗塞的缺血再灌注損傷、中風、胃腸缺血、腎衰竭或出血性休克或外傷性休克(如外傷性腦損傷)。式I化合物也可用于治療和/或預防T淋巴細胞介導的急性或慢性炎性疾病或紊亂或者自身免疫疾病，如風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、系統性紅斑狼瘡、橋本甲狀腺病、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I型或II型糖尿病以及其并發(fā)癥(如血管病、糖尿病性增殖性視網膜病、糖尿病性黃斑水腫、腎病、神經病變及黎明現象)、如哮喘的呼吸疾病、或炎性肺損傷、炎性肝損傷、炎性腎小球損傷、免疫介導的炎性紊亂或疾病的皮膚癥狀、炎性及過度增生性皮膚病(如牛皮癬、特應性皮炎、過敏性接觸性皮炎、刺激性接觸性皮炎和其它濕疹性皮炎、脂溢性皮炎)、炎性眼病(如舍格倫綜合征、角膜結膜炎或眼色素層炎)、炎性胃腸病、局限性回腸炎或潰瘍性結腸炎。
文檔編號A61P37/06GK1639153SQ03805343
公開日2005年7月13日 申請日期2003年4月2日 優(yōu)先權日2002年4月3日
發(fā)明者J-P·埃弗努, P·馮馬特, J·韋格納, G·森克 申請人:諾瓦提斯公司