專利名稱：黨參黃芪組合物在預(yù)防與治療急性肺損傷中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種黨參黃芪組合物在制備治療急性肺損傷的藥物中的應(yīng)用。本申請是由同一申請人于2003年4月29日提交的專利申請CN03123045.8的相關(guān)申請。
背景技術(shù)：
急性肺損傷(acute lung injury，ALI)可以由外源刺激直接作用，也可以由嚴重創(chuàng)傷后繼發(fā)性損傷而引起。對ALI的病理機制的研究雖然已非常深入，但是臨床上急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratorydistress syndrome，ARDS)的病死率仍然達50％左右。
急性肺損傷是全身炎性反應(yīng)綜合征和多器官功能障礙綜合征在肺上的具體表現(xiàn)，是由細胞和體細胞介導(dǎo)的在肺泡毛細血管水平的急性炎癥反應(yīng)。
脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)是內(nèi)毒素的主要成分，有研究表明在LPS引起肺的急性炎癥反應(yīng)中，LPS是通過損傷肺血管內(nèi)皮細胞，激活白細胞，與巨噬細胞表面受體結(jié)合，促進氧自由基及多種炎癥的釋放等途徑誘發(fā)急性肺損傷的發(fā)生。同時，急性肺損傷多是多器官功能障礙綜合征的首發(fā)病變，是機體過度的全身炎癥反應(yīng)在局部臟器的表現(xiàn)，多器官功能障礙綜合征往往是急性肺損傷惡化加重并發(fā)的臟器嚴重損害的結(jié)果。急性肺損傷發(fā)展迅速，極易誘發(fā)其他器官損傷，直接威脅老年患者生命。其病理表現(xiàn)主要為肺組織細胞受損，肺間質(zhì)明顯增寬、滲出明顯引起水腫，臨床上對感染急性肺損傷除用抗炎藥及糖皮質(zhì)激素常規(guī)治療外，目前尚無理想防治手段。但使用糖皮質(zhì)激素雖然有一定的抗炎與抗水腫作用，但由于眾所周知的激素的使用引起的副作用等原因，臨床上對使用糖皮質(zhì)激素治療急性肺損傷尚有一定爭議。
參芪扶正注射液由黨參、黃芪兩味藥組成，具有扶正固體的功效。其中，黨參具有大補元氣、補脾益肺的功效，黃芪則有補氣升陽、益衛(wèi)固表的作用，兩者合用更能增強補肺益氣的功效。但尚未見利用參芪扶正注射液對急性肺損傷的防治作用的臨床藥理研究方面的報道。
本發(fā)明申請人于2003年4月29日提交的專利申請CN03123045.8中提出的發(fā)明是一種含有黨參和黃芪的免疫抑制劑組合物。但本申請人在經(jīng)過進一步的實驗研究后發(fā)現(xiàn)，黨參黃芪組合物對急性肺損傷具有明顯的治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
因此，根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明人在此提供了黨參黃芪組合物在制備治療急性肺損傷的藥物中的用途。
本發(fā)明涉及一種從中藥黨參、黃芪中提取出的具有藥用價值的組合物在預(yù)防與治療急性肺損傷方面的用途。
所述的組合物中黨參和黃芪的重量比范圍優(yōu)選為0.5∶1至1∶0.5，更優(yōu)選為1∶1。
所述的黨參黃芪組合物還可以包括補氣、補血類中藥。所述的補氣、補血類中藥是當(dāng)歸、熟地、何首烏、白術(shù)、山藥或其結(jié)合。
所述組合物優(yōu)選以注射劑、片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、溶液、懸浮劑、乳劑的形式使用。
所述組合物的給藥途徑包括口服、經(jīng)皮、靜脈或肌肉注射。
所述組合物的有效劑量為58-70mg/kg體重/天，優(yōu)選58.3mg/kg體重/天。
優(yōu)選本發(fā)明所述的中藥黨參Codonopsis Pilosula(Franch.)Nannf為桔?？浦参锏母稍锔?；中藥黃芪(膜莢黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.或蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao)的干燥根。
本發(fā)明提供的組合物中，每1克中含總固體物不少于0.325克，其主要成分為糖類物質(zhì)(包括多糖、單糖)、有機酸、皂苷、香豆精(少量)、黃酮苷、生物堿、甾醇類、烷烴類物質(zhì)等。其中主要活性成分為皂苷類、香豆精類以及黃酮類物質(zhì)。
在應(yīng)用時，本發(fā)明的藥物可以根據(jù)需要加入一種或多種藥學(xué)上可以接受的載體，如稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等，制備成需要的劑型。
本發(fā)明提供的藥物，根據(jù)實際需要，可進一步加工制成口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑以及注射劑等多種劑型。上述劑型均可按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
通過進一步的動物實驗證實本發(fā)明參芪組合物可以明顯減輕急性肺損傷期間的病理改變，即由脂多糖引起的急性肺損傷的病理改變，肺組織水腫明顯減輕，與未處理組比較，肺組織濕/干重比明顯降低，單獨使用本發(fā)明的參芪組合物對急性肺損傷的治療作用幾乎相當(dāng)于單獨使用地塞米松對急性肺損傷的治療作用。
發(fā)明詳細說明和具體實施例為了使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明，以下通過實施例來進一步闡述本發(fā)明參芪組合物的組成、其制備方法及用途。
實施例分別將黨參、黃芪除雜質(zhì)，加工成飲片。準確稱定黨參與黃芪各400克用去離子水沖洗干凈，加入3200ml去離子水，加熱提取1小時后，放出提取液；再加入2400ml去離子水，加熱提取1小時后，放出提取液；再加入2400ml去離子水，加熱提取0.5小時后，放出提取液。三次提取液過濾后合并，濃縮至600ml，再加入濃度為95％的乙醇使含醇量為60％，沉淀24小時，過濾；濾液回收至400ml，加入濃度為95％的乙醇使含醇量為80％，沉淀，過濾，回收乙醇并濃縮至400g，即得黨參和黃芪提取組合物。
對本發(fā)明的藥物可加適量乙醇冷藏保存，也可烘干后室溫保存。在本發(fā)明的藥物中，每1克中含總固體物不少于0.325克，其主要成分為糖類物質(zhì)(包括多糖、單糖)、有機酸、皂苷、香豆精(少量)、黃酮苷、生物堿、甾醇類、烷烴類物質(zhì)等。其中主要活性成分為皂苷類、香豆精類以及黃酮類物質(zhì)。
實驗例1實驗藥物黨參、黃芪提取組合物按上述實施例制備的黨參、黃芪提取組合物，其中每20ml中含等量黨參、黃芪提取物3.25g，實驗時將之水浴濃縮2ml至1ml，流通蒸汽消毒40分鐘滅菌。
LPS(美國Sigma公司，粉劑，使用前用無菌生理鹽水稀釋)。
地塞米松(成都第一制藥廠)2實驗動物Wistar大鼠(四川大學(xué)華西校區(qū)動物中心提供，微生物控制等級二級)3實驗方法分組將60只大鼠隨機分為正常對照組、造模組(LPS+NS組)、地塞米松干預(yù)(治療)組(LPS+DEX組)以及參芪扶正注射液干預(yù)(治療)組(LPS+SQ組)四組，其中造模組、LPS+DEX組和LPS+SQ組每組分為1小時、2小時、4小時3個時相小組，共10小組，每小組6只大鼠用于實驗。
實驗方法1、準備工作實驗前三天對實驗中所需器械、容器及移液等均高溫高壓消毒，烘干待用；部分涉及提取總RNA的實驗用品予DEPC水浸泡過夜后消毒烘干。
2、ALI模型制備及給藥方法LPS+SQ組共18只大鼠于造模前1周每天腹腔注射黨參、黃芪提取組合物2ml進行預(yù)處理；LPS+DEX組18只大鼠于造模前2小時腹腔注射地塞米松50mg/kg；LPS+NS組18只大鼠于造模前2小時注射生理鹽水。除正常對照組外，上述三組均在實驗時尾靜脈注射LPS(4mg/kg)。
3、標(biāo)本采集所有動物均于設(shè)定時相點，予水合氯醛腹腔注射麻醉后，經(jīng)頸動脈采血2ml，800gr/min離心8分鐘，吸取上清液置零下20度冰箱備用；開胸取右肺下葉置于經(jīng)DEPC水處理后的EP管中，立即放入零下70度低溫冰箱凍存供提取總RNA；取右肺上葉于10％甲醛液中浸泡固定；取左肺測肺濕干重比值。
4、于相應(yīng)定時點，取動物肺組織進行肉眼觀察和HE染色方法光鏡下觀察，同時測量其濕/干重比例。
實驗結(jié)果所有實驗動物尾靜脈注射LPS后，均出現(xiàn)呼吸急促，口唇發(fā)紺，精神萎靡，少動少食，尤以LPS+NS組各時相點明顯，而LPS+DEX組和LPS+SQ組表現(xiàn)相對較輕，持續(xù)時間較短。在實驗所設(shè)定的各時相點所有動物均存活。
大體觀察正常對照組肺組織呈白色略紅，組織柔軟有彈性；LPS+NS 1h組肺上即觀察到充血、水腫，表面偶見散在瘀點；2h組見肺表面呈暗紅色，明顯充血水腫，可見片狀瘀斑及出血灶；4h組肺大體情況與2h相似。LPS+DEX組及LPS+SQ組大體觀察較LPS+NS組同時相點有不同程度減輕。
光鏡觀察與大體觀察結(jié)果基本一致。正常對照組肺組織結(jié)構(gòu)清晰，肺泡壁薄，肺間質(zhì)水腫、增寬，炎性細胞浸潤，急性肺損傷病理程度分級多為輕度；2h組肺細胞損傷最明顯，可見肺間質(zhì)明顯增寬、滲出、水腫，透明膜形成，肺泡出血，大量炎性細胞浸潤，ALI病理程度分級為中到重度；4h組肺細胞損傷程度與2h組基本相同，ALI病理程度分級多為中度；LPS+NS組相同點均有不同程度減輕。各組肺損傷病理程度分級見表3。
表3各組肺損傷程度病理分級

秩和檢驗顯示在造模組與各干預(yù)組間1h時點病理變化差異不明顯(p＞0.05)，2h及4h時點病理改變差異有顯著性(p＜0.05)；各干預(yù)組內(nèi)不同時點比較，LPS+NS組差異明顯(p＜0.05)，LPS+DEX組和LPS+SQ組內(nèi)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
肺濕/干比值(W/D)變化LPS+NS組各時相點肺W/D均明顯高于正常對照組(p＜0.05)；LPS+DEX組及LPS+SQ組同一時相點降低(P＜0.05)。見表4，

圖1。
表4各組肺W/D變化

注*與正常對照組比較p＜0.05；△同時相點LPS+NS組比較p＜0.05；#干預(yù)組內(nèi)各時相點與1h時相點比較p＜0.05由上述實驗可以看出，本發(fā)明參芪組合物可以明顯減輕急性肺損傷期間的病理改變，即由LPS引起的急性肺損傷的病理改變，肺組織水腫明顯減輕，與未處理組比較，肺組織濕/干重比明顯降低，單獨使用本發(fā)明的參芪組合物對急性肺損傷的治療作用幾乎相當(dāng)于單獨使用地塞米松對急性肺損傷的治療作用。
以上以實施例的方式對本發(fā)明進行了說明。但應(yīng)該理解的是，上述實施例僅僅是為了闡明本發(fā)明，而非限制本發(fā)明，在本發(fā)明所附的權(quán)利要求范圍內(nèi)可以作多種修改和變動，而這些修改和變動也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種從中藥黨參、黃芪中提取出的組合物在制備預(yù)防與治療急性肺損傷的藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的黨參黃芪組合物含有的黨參/黃芪重量比為0.5∶1至1∶0.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項所述的用途，其特征在于使用所述組合物的有效劑量范圍為58～70mg/kg體重/天。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項所述的用途，其特征在所述組合物是以注射劑、片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、溶液、懸浮劑、乳劑的形式使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及黨參黃芪組合物在制備預(yù)防與治療急性肺損傷的藥物中的用途。該組合物主要成分由黨參、黃芪按一定重量配比而成，其配比比例大致為0.5∶1至1∶0.5，優(yōu)選1∶1。
文檔編號A61P11/00GK1552420SQ0315628
公開日2004年12月8日 申請日期2003年9月2日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月2日
發(fā)明者李延謙, 王蕾, 謝偉宏 申請人:麗珠集團利民制藥廠