專利名稱：燈盞細(xì)辛制劑用于治療急性呼吸窘迫綜合征的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及燈盞細(xì)辛中藥制劑的新用途，特別涉及在治療急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)方面的新用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于公開燈盞細(xì)辛中藥制劑應(yīng)用于變異冠狀病毒引起的非典型性肺炎等肺嚴(yán)重?fù)p害性疾病發(fā)生ARDS時的新用途。
所述燈盞細(xì)辛制劑包括注射劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、咀嚼劑、氣霧劑、軟膠囊、栓劑、滴丸等臨床應(yīng)用劑型。
本發(fā)明的內(nèi)容與要點(diǎn)是針對肺泡滲出、肺間質(zhì)損害肺微循環(huán)障礙兩個導(dǎo)致ARDS的重要環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明應(yīng)用燈盞細(xì)辛注射劑可顯著減輕肺損傷病理狀態(tài)，有效提高ARDS的血氧分壓和血氧飽和度。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是利用油酸所致家兔ARDS模型的肺毛細(xì)血管損傷肺微循環(huán)障礙、血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡上皮損傷通透性增加，導(dǎo)致間質(zhì)水腫、出血等病理改變及肺泡表面活性物質(zhì)的破壞，模擬非典型肺炎的病理形態(tài)及病理生理的改變。燈盞細(xì)辛注射液顯示能改善擬ARDS的低血氧分壓狀態(tài)，并顯著提高血氧飽和度，減輕了肺泡與間質(zhì)的病理損害，提高了肺臟的氣體彌散交換能力，從而發(fā)揮抗ARDS的作用。
其具體方法是健康日本大耳白家兔，體重2kg左右。設(shè)正常組、模型組、陽性對照藥(地塞米松磷酸鈉注射液)組、各試驗(yàn)藥大、小劑量組(小劑量組給以臨床等效量，大劑量組給以臨床等效量的2倍)，每組8只，雌雄各半。其中A.正常對照組給生理鹽水10ml。
B.模型組給生理鹽水10ml。
C.陽性對照藥(地塞米松磷酸鈉注射液)組給藥量為0.5ml/Kg體重，生理鹽水補(bǔ)足至10ml。
D.清開靈+血塞通注射液小劑量組(簡稱清血小)給藥量為清開靈2.5ml/Kg體重，血塞通0.5ml/Kg體重，生理鹽水補(bǔ)足至10ml合推。
E.清開靈+血塞通注射液大劑量組(簡稱清血大)給藥量為清開靈5ml/Kg體重，血塞通1ml/Kg體重合推。
F.燈盞細(xì)辛注射液小劑量組(簡稱燈細(xì)小)給藥量為2.5ml/Kg體重，生理鹽水補(bǔ)足至10ml。
G.燈盞細(xì)辛注射液大劑量組(簡稱燈細(xì)大)給藥量為5ml/Kg體重。
H.清開靈注射液小劑量組(簡稱清開靈小)給藥量為2.5ml/Kg體重，生理鹽水補(bǔ)足至10ml。
I.清開靈注射液大劑量組(簡稱清開靈大)給藥量為5ml/Kg體重。
家兔稱重后，自耳緣靜脈注射25％烏拉坦溶液按5ml/kg體重進(jìn)行麻醉，仰臥位固定于家兔實(shí)驗(yàn)臺上，分離一側(cè)股動脈并穿線以備取血。自耳緣靜脈注射油酸，劑量為0.08ml/kg，造成急性呼吸窘迫綜合征模型。造模后10分鐘，耳緣靜脈注射藥物(模型組以10ml生理鹽水代替)，推注速度為1ml/min。分別于造模前及造模后60、120、180分鐘時自股動脈取血1ml，密閉冷藏并立即送檢作血?dú)夥治觥Ｔ炷：?80分鐘，頸總動脈放血致死，開胸取下肺臟，觀察肺臟外觀形態(tài)并照相。稱取左肺濕重，并于烤箱60℃烘烤48小時恒重后，稱取干重，計(jì)算肺含水量。取右肺入10％中性福爾馬林固定液固定，按常規(guī)作病理切片鏡檢。數(shù)據(jù)分析采用組間或自身前后比較的t檢驗(yàn)。
結(jié)果顯示一、氧分壓(PaO2)的變化(一)組內(nèi)比較(見表1)表1PaO2的變化(單位mmHg)組別動物數(shù)造模前 造模60min造模120min造模180min正常對照885.143±7.98486.800±5.60584.713±8.006 89.250±5.540模型790.471±4.35464.343±10.881** 69.229±15.182** 76.250±12.183**陽性對照779.814±5.29467.686±11.100* 68.514±10.219*73.543±7.109*清血大 787.557±5.25572.671±13.020** 76.657±14.762*83.767±9.901清血小 786.817±5.53580.017±6.111* 85.067±6.936 87.183±7.870燈細(xì)大 875.650±15.054 78.675±8.06568.625±10.146#75.250±9.665燈細(xì)小 887.363±14.631 71.225±17.414* 69.538±15.793*78.163±12.454清開靈大879.157±5.69970.700±10.352* 72.629±12.964 77.300±11.894清開靈小679.483±5.15373.633±9.92776.833±7.583 80.333±9.147與造模前比較*p＜0.05，**p＜0.01；與造模60min比較#p＜0.05，##p＜0.01結(jié)果顯示正常動物4次血?dú)夥治鲅醴謮簺]有顯著差異。造模后1h、2h和3h血氧分壓顯著低于造模前(p＜0.01)。燈盞細(xì)辛大劑量組和清開靈注射液小劑量組在造模后1、2、3h皆能改善擬ARDS的低血氧分壓狀態(tài)。清開靈注射液+血塞通注射液小劑量組、清開靈注射液大劑量組在造模后2h能夠改善擬ARDS的低血氧分壓狀態(tài)，至造模后3小時作用顯著。清開靈注射液+血塞通注射液大劑量組、燈盞細(xì)辛小劑量組在造模后3h有提高血氧分壓的作用。陽性對照藥無明顯作用。
(二)組間比較首先進(jìn)行4個時段正常組氧分壓統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)4個時段正常組氧分壓數(shù)值間無差異，說明可以進(jìn)行模型組、各給藥組“造模后與造模前氧分壓差值”與正常組“造模后與造模前氧分壓差值”的比較。(見表2)表2造模后各時間點(diǎn)與造模前血氧分壓之差值的變化(單位mmHg)組別 動物數(shù) 造模60min 造模120min 造模180min正常組 8 1.843±7.476 -0.171±9.6794.829±10.169模型組 7-26.129±12.886** -21.243±16.084** -14.500±12.168**陽性對照 7-12.129±8.840**# -11.300±8.033* -6.271±6.219*清血大 7-14.886±12.693** -10.900±14.309 -3.600±8.822#清血小 7-6.800±5.916*##-1.750±6.321## 0.367±6.047#燈細(xì)大 8 3.025±17.845##-7.025±10.629# -0.400±8.944#燈細(xì)小 8-16.138±17.299*-17.825±15.984*-9.200±17.773*清開靈大 8-7.971±13.023# -5.083±16.107# -0.414±13.934#清開靈小 6-5.850±12.286##-2.650±10.369# 0.850±11.907#與正常組比較*p＜0.05，**p＜0.01；與模型組比較#p＜0.05，##p＜0.01結(jié)果顯示，造模后動物的血氧分壓顯著下降，從60分鐘至180分鐘血氧分壓的下降值與正常組比較均具有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01。清開靈注射液兩個劑量、燈盞細(xì)辛注射液大劑量及清開靈注射液合用血塞通注射液小劑量對于肺損傷后血氧分壓降低的阻抑作用，與模型組比較具有顯著的組間差別，P＜0.05或P＜0.01。其變化的時間趨勢與血氧分壓變化具有一致性。
二、血氧飽和度的變化(見表3)
表3血氧飽和度的變化(單位％)組別動物數(shù) 造模前 造模60min造模120min 造模180min正常組896.950±0.91896.538±0.77496.150±1.07696.725±0.373模型組895.538±1.41189.625±5.676** 86.838±9.243** 90.671±5.744*陽性對照 895.500±1.11688.813±9.683* 87.300±14.776 87.263±13.430清血大896.600±0.80294.475±2.976* 94.925±2.76396.363±1.355清血小895.914±2.64595.863±0.86396.563±0.86896.838±0.907#燈細(xì)大892.688±2.40290.571±5.13187.700±7.86188.114±7.734燈細(xì)小893.425±3.76288.125±8.16688.175±6.809* 90.850±2.977清開靈大 893.871±1.95991.100±4.37391.900±5.97194.975±2.271#清開靈小 895.825±2.03795.088±3.01995.138±2.13694.775±2.224與造模前比較*p＜0.05，**p＜0.01；與造模60min比較#p＜0.05，##p＜0.01結(jié)果顯示正常動物4次血?dú)夥治鲅躏柡投葻o顯著差異。造模后1h、2h和3h氧飽和度顯著低于造模前(p＜0.01)和(p＜0.05)。陽性對照藥組造模后1h氧飽和度顯著低于造模前(p＜0.05)，造模后2h、3h與造模前均無顯著差異。清開靈+血塞通注射液組小劑量組造模后1h、2h、3h氧飽和度與造模前均無顯著差異，造模后3h氧飽和度顯著高于造模1h(p＜0.05)；大劑量組造模后1h氧飽和度顯著低于造模前(p＜0.05)，造模后2h、3h與造模前無顯著差異。燈盞細(xì)辛注射液組小劑量組造模后1h、3h氧飽和度與造模前均無顯著差異，造模后2h低于造模前(p＜0.05)；大劑量組造模后1h、2h、3h氧飽和度與造模前均無顯著差異。清開靈組小劑量組造模后1h、2h、3h氧飽和度與造模前均無顯著差異；大劑量組造模后1h、2h、3h氧飽和度與造模前均無顯著差異，造模后3h氧飽和度顯著高于造模后1h(p＜0.05)?？梢?，血氧飽和度的變化與血氧分壓變化具有近似的趨勢。
三、肺含水量的變化(見表4)
表4肺含水量的變化 (單位％)組別動物數(shù)肺含水量正常組880.263±1.159模型組884.306±1.765##陽性對照 783.271±1.213清血大882.913±1.554清血小882.188±1.256**燈細(xì)大883.574±0.919燈細(xì)小882.984±2.279清開靈大 883.400±1.148清開靈小 883.104±1.169與正常組比較##p＜0.01與模型組比較**p＜0.01結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組肺組織含水量顯著增多(p＜0.01)。清開靈+血塞通注射液小劑量組的左肺含水量顯著低于模型組(p＜0.01)。其余各組含水量與模型組比較均無顯著意義的降低。
四、肺臟病理形態(tài)學(xué)觀察正常兔肺組織肉眼觀呈淡紅色，表面光滑，質(zhì)地柔軟。造模后15分鐘，雙側(cè)肺臟發(fā)生廣泛的損害，呈點(diǎn)狀出血；30分鐘出血成片狀，60分鐘肺臟出血并發(fā)生腫脹，肺體積增大，氣管內(nèi)有粉紅色泡沫樣液體；120-180分鐘肺組織呈暗褐色，顯著腫脹，韌性增大，可見小灶性壞死。造模后180分鐘病理鏡檢可見，肺泡壁血管損害，間質(zhì)水腫，肺泡內(nèi)有蛋白性滲出液及出血，部分肺泡呈代償性擴(kuò)張，部分肺泡萎陷顯示局部不張。地塞米松注射液陽性對照組肺臟肉眼觀及顯微形態(tài)學(xué)特征與模型組無顯著差別。
清開靈注射液與血塞通注射液合用組肉眼觀肺組織鮮活，多數(shù)樣本呈點(diǎn)狀出血，肺腫脹致體積增大程度與模型組比較顯著減輕，氣管內(nèi)粉紅色泡沫樣液體顯著減少或無液體溢出。顯微結(jié)構(gòu)觀察，肺泡腔呈輕度滲出，偶見出血，肺間質(zhì)炎癥與血管損傷輕微，與模型組比較肺泡結(jié)構(gòu)破壞范圍減少。
清開靈注射液組肉眼觀肺組織以點(diǎn)、片狀出血為主，肺腫脹致體積增大程度與模型組比較有所減輕，氣管內(nèi)粉紅色泡沫樣液體也顯著減少。顯微結(jié)構(gòu)觀察，可見灶狀肺泡管和肺泡壁結(jié)構(gòu)受損，間質(zhì)輕度水腫，間見肺泡毛細(xì)血管淤血和血細(xì)胞嵌塞，肺泡結(jié)構(gòu)點(diǎn)狀破壞，散在肺泡內(nèi)片狀蛋白性液體和出血，與模型組比較肺泡結(jié)構(gòu)破壞范圍也有所減少，但次于與血塞通注射液合用組。
燈盞細(xì)辛注射液治療組肺臟肉眼觀呈鮮紅和暗紅色，呈點(diǎn)狀或片狀出血，可見散在小灶性壞死，肺葉腫脹顯著；顯微結(jié)構(gòu)觀察可見肺泡管和肺泡壁結(jié)構(gòu)受損，間質(zhì)水腫，偶見肺泡壁毛細(xì)血管淤血和血細(xì)胞嵌塞，結(jié)構(gòu)破壞處肺泡內(nèi)有蛋白性液體，少見出血。
綜合以上結(jié)果得出以下結(jié)論1、清開靈注射液、燈盞細(xì)辛注射液顯示能改善擬ARDS的低血氧分壓狀態(tài)，并顯著提高血氧飽和度。
2、清開靈注射液與血塞通注射液合用，在顯著改善擬ARDS的低血氧分壓狀態(tài)，提高血氧飽和度的同時，對肺含水量有顯著降低作用，顯示了其抗肺泡及間質(zhì)滲出的良好作用。
3、上述藥物應(yīng)用的效應(yīng)基礎(chǔ)是減輕了肺泡與間質(zhì)的病理損害，提高了肺臟的氣體彌散交換能力，從而發(fā)揮抗ARDS的作用。
4、聯(lián)合用藥優(yōu)勢顯著。肺損傷發(fā)生ARDS時，在實(shí)施可靠的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)搶救措施的情況下，抗炎癥滲出與改善肺臟微循環(huán)聯(lián)合用藥是行之有效的辦法。中藥清開靈注射液清熱解毒與血塞通注射液活血化瘀聯(lián)合應(yīng)用，在改善模型兔低血氧分壓狀態(tài)的同時，顯著降低了肺含水量。這與其減輕肺泡腔的炎癥滲出與出血，疏通肺間質(zhì)血管、肺泡壁毛細(xì)血管的細(xì)胞嵌塞、淤血，減輕炎癥反應(yīng)等有關(guān)。
本發(fā)明的有益效果是，發(fā)現(xiàn)了原有臨床中成藥的新效應(yīng)以快速應(yīng)用于臨床危重病的搶救，并可擴(kuò)大原用藥的新用途，避免了此效應(yīng)新藥研發(fā)的重新投入所造成的財(cái)力、資源消耗。
權(quán)利要求
1.燈盞細(xì)辛制劑在制備用于治療低血氧分壓和/或低血氧飽和度病理狀態(tài)藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于在制備治療急性呼吸窘迫綜合征藥物中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述呼吸窘迫綜合征是由變異冠狀病毒及其他肺損害引起。
全文摘要
本發(fā)明公開燈盞細(xì)辛制劑應(yīng)用于變異冠狀病毒引起的非典型性肺炎等肺嚴(yán)重?fù)p害性疾病發(fā)生ARDS時的新用途。利用油酸所致家兔ARDS模型的肺毛細(xì)血管損傷肺微循環(huán)障礙、血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡上皮損傷通透性增加，導(dǎo)致間質(zhì)水腫、出血等病理改變及肺泡表面活性物質(zhì)的破壞，模擬非典型肺炎的病理形態(tài)及病理生理的改變。燈盞細(xì)辛制劑顯示能減輕擬ARDS肺間質(zhì)的病理損害，提高了肺臟的氣體彌散交換能力，改善低血氧分壓狀態(tài)，并顯著提高血氧飽和度，從而發(fā)揮抗ARDS的作用。
文檔編號A61P11/00GK1457876SQ0314774
公開日2003年11月26日 申請日期2003年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月25日
發(fā)明者李澎濤, 潘彥舒, 賈旭, 席時芳, 胡京紅 申請人:北京中醫(yī)藥大學(xué)