專利名稱：藿香油的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藿香油的新的制藥用途，具體說是藿香油在制備治療腦血管病藥物中的應用，以及藿香油在制備治療血管痙攣所引起的多種疾病藥物中的應用。
藿香用于治療疾病已有2000多年的歷史，但主要用于治療消化系統(tǒng)的疾病，如嘔吐，腹瀉，感冒，食欲下降等。具有芳香化濁，開胃止嘔，發(fā)表解暑的功效(《中華人民共和國藥典》2000年版)?！端幤坊x)》記載“藿香，其氣芳香，善行胃氣，以此調(diào)中，治嘔吐霍亂。且香能和合五臟，若脾胃不和，用之助胃而進飲食，有醒脾開胃之功”?！侗静輬D經(jīng)》記載藿香“治脾胃吐逆，為最要之藥”?！侗静菰傩隆酚涊d藿香“解表散邪，利濕除風，清熱止渴”。
盡管藿香作為藥用已有悠久歷史，但未見報道藿香或藿香油及其主要成分藿香醇、藿香酮治療腦血管痙攣，以及血管痙攣所引起的頭痛，偏頭痛，腦缺血，癡呆，腦疲勞，腦缺氧，冠狀動脈痙攣，心肌供血不足等疾病的作用。
在多年的研究中，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了藿香油具有擴張腦血管，改善血管痙攣的作用，可以用來治療由于血管收縮障礙所致的腦血管痙攣，頭痛，偏頭痛，腦缺血，血管性癡呆，腦疲勞，腦缺氧，冠狀動脈痙攣，心肌供血不足等病癥，發(fā)現(xiàn)了藿香油的一些新的可靠的用途。
本發(fā)明提供的藿香油是在制備治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物中的應用。
具體的說，本發(fā)明所述的藿香油是在制備治療頭痛的藥物中的應用；是在制備治療偏頭痛的藥物中的應用；是在制備治療腦缺血的藥物中的應用；是在制備治療血管性神經(jīng)精神障礙的藥物中的應用；是在制備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用；是在制備治療心肌供血不足的藥物中的應用。
在治療血管痙攣及其由此引起的疾病時，以藿香油為活性成分，以常規(guī)的制劑工藝，單獨使用或與其他藥物配合制備成在臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。如滴鼻劑，滴眼劑，及其它五官科藥劑，散劑，丸劑，膠囊劑，片劑，微囊劑，軟膠囊劑，膜劑，栓劑，注射劑，膏劑，酊劑，散劑，沖劑，氣霧劑以及各種外用制劑等。
本發(fā)明的實驗結(jié)果表明，藿香油對小鼠腦膜血流量有明顯增加的作用。一般在給藥后1分鐘即有腦血流升高，并表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。如大劑量(25mg/kg)給藥后與對照組相比，可使腦膜血流量增加15-20％。表明藿香油對腦血管有直接地擴張作用，對于血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。藿香油給藥后5分鐘對小鼠大腦皮質(zhì)一氧化氮(NO)含量有明顯增加的作用。這一現(xiàn)象與小鼠腦膜血流量的結(jié)果有一定的吻合度。由于NO對血管平滑肌的收縮有一定的抑制作用，能擴張血管，抑制血管平滑肌痙攣，故藿香油對于血管性痙攣所引起的疾病有較好的。體外試驗結(jié)果表明，藿香油有較強地抑制ADP誘導血小板聚集的作用，最低有效濃度為3.31×10-6g/ml，由于血小板的聚集提高直接導致凝血過程加劇和血栓形成，所以本實驗結(jié)果提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
在藥劑應用上就是將藿香油單獨地或者加入復方中以常規(guī)的制劑工藝制備成藥劑。其藥劑可以是臨床上能夠使用的各種不同劑型。
下述藥物實驗資料使本發(fā)明所說的藿香油新的用途得以證實。
動物實驗例1對小鼠腦膜血流量的作用觀察本發(fā)明藿香油對小鼠腦膜血流量的作用。藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配制成所需濃度。試驗動物為雄性昆明種小鼠，非近交系封閉群，體重18-22g，合格證號醫(yī)動字01-3001，由中國醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對濕度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠8只，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠烏拉坦(1.0g/kg)麻醉后，固定頭部，切開皮膚，于大腦皮質(zhì)運動區(qū)(AP-1，L2)安置激光探頭(JI-200激光微循環(huán)儀，天津南開大學生產(chǎn))，待穩(wěn)定5-10分鐘后開始測試腦血流，記錄給藥前后腦膜血流量的變化。
本試驗觀察指標及指標表達所測結(jié)果直接經(jīng)JI-200軟件處理，腦膜血流量以KHz(千赫茲)表示，腦膜血流量增加百分值[＝(給藥后血流量-給藥前血流量)/給藥前血流量]。
本試驗給藥劑量分別為25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；給藥途徑為尾靜脈給藥；給藥體積為0.05ml/10g小鼠。
本試驗空白對照為等體積生理鹽水，陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制藥廠生產(chǎn)，批號9811191，京衛(wèi)藥準字(1996)第157008號，小鼠用量為25mg/kg。
本試驗數(shù)據(jù)均以Excel軟件處理。
表1 藿香油對正常大鼠腦血流量的作用(x±s)分組劑量 腦血流量(KHz)(mg/kg) 0 1 3 5 10 15(分鐘)對照組 31.32 ± 31.67 ± 31.59 ± 31.45 ± 31.51 ± 31.53±2.71 2.02 2.58 2.69 2.63 2.27川芎嗪 25 30.91 ± 32.66 ± 33.52 ± 33.96 ± 33.32 ± 33.2 ±2.24 2.69 1.84 1.69* 1.99 1.95藿香油 25 31.02 ± 35.44 ± 37.02 ± 37.48 ± 37.38 ± 36.91±2.51 4.67 5.13* 4.08* 3.14* 3.02藿香油 12.5 31.64 ± 34.14 ± 37.44 ± 37.46 ± 36.55 ± 36.32±3.39 3.73 1.98* 2.46* 2.41 1.77藿香油 6.25 33.73 ± 35.31 38.05 38.45 38.4 36.8710.25 ±9.79±9.95±9.10*6±9.51±9.49與同時間對照組相比，P＜0.05。n＝8表2 藿香油對正常大鼠腦血流量增加百分比值(x±s)分組 劑量 腦血流量增加百分比值(％)(mg/kg) 0 135 10 15(分鐘)對照組 0 1.45±0.96±0.45± 0.65±0.78±6.04 2.95 3.00 3.07 1.73川芎嗪 25 0 5.75±8.64± 10.08± 7.93±7.56±2.67 4.20*4.41*3.22*3.89*藿香油 25 0 14.16± 19.34± 20.96± 20.61± 19.09±10.53* 12.78** 10.04** 5.42** 5.56**藿香油 12.5 0 7.98± 19.35± 19.09± 16.12± 15.61±4.80*12.38* 8.95** 7.40*9.36*藿香油 6.25 0 5.31± 13.74± 15.48± 15.18± 10.28±4.74 4.76*7.36** 6.98 5.61*與同時間對照組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8實驗結(jié)果顯示，藿香油對小鼠腦膜血流量有明顯增加的作用。一般在給藥后1分鐘即有腦血流升高，并表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系；表明藿香油對腦血管有直接地擴張作用，對于血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。
動物實驗例2對小鼠腦內(nèi)NO(一氧化氮)含量的作用觀察本發(fā)明藿香油對小鼠腦內(nèi)NO含量的作用。本發(fā)明所用藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配制成所需濃度。試驗動物為雄性昆明種小鼠，非近交系封閉群，體重18-22g；合格證號醫(yī)動字01-3001，由中國醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對濕度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠8只，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠隨機分為5組，每組8只，尾靜脈給與不同藥物。給藥后5分鐘脫頸處死小鼠，迅速取出全腦，分離大腦皮質(zhì)部分，迅速投入液氮中固定。然后轉(zhuǎn)入-70℃冰箱保存，備測NO。測試時取小鼠大腦皮質(zhì)，加入生理鹽水冰水浴制備成20％勻漿液(w/v)，12000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分，取上清液0.3ml，分別加入1×10-6mol/L的硫酸奎寧(購自Sigma公司)液3ml，混勻。再加入1mol/L HCl 0.1ml，1.6×10-2mol/L N-乙酰半胱氨酸(購自Sigma公司)0.3ml，搖勻后于850熒光分光光度計測試并記錄熒光強度(激發(fā)波長為334nm，發(fā)射波長為445nm)。
本試驗NO測試方法為硫酸奎寧法，腦組織蛋白定量方法為雙縮脲法。
觀察指標及指標表達熒光值(f)/g蛋白。
所測結(jié)果經(jīng)Excel軟件處理。
本試驗給藥劑量分別為25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；給藥途徑為尾靜脈給藥；給藥體積為0.05ml/10g小鼠。
本試驗空白對照為等體積生理鹽水，陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制藥廠生產(chǎn)，批號9811191。京衛(wèi)藥準字(1996)第157008號，小鼠用量為25mg/kg。
表3 藿香油對小鼠大腦皮質(zhì)NO含量的影響(x±s)分組 給藥劑量(mg/kg) NO(f/g蛋白)生理鹽水3.94±1.38川芎嗪255.81±2.01*藿香油258.98±3.04**藿香油12.5 7.27±2.58**藿香油6.25 6.45±2.83**與生理鹽水組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8實驗結(jié)果顯示，藿香油給藥后5分鐘對小鼠大腦皮質(zhì)NO含量有明顯增加的作用.這一現(xiàn)象與小鼠腦膜血流量的結(jié)果有一定的吻合度。由于NO對血管平滑肌收縮有一定的抑制作用，能擴張血管，抑制血管平滑肌痙攣。故本實驗表明藿香油對于血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。
動物實驗例3對大鼠血小板聚集的抑制作用觀察本發(fā)明藿香油對大鼠血小板聚集的抑制作用。本發(fā)明所用藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配制成所需濃度。實驗所用動物為二級Wistar大鼠，雌雄各半，非近交系封閉群，醫(yī)動字(95)01-3008，中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所提供，體重為230-260g。實驗室室溫20-22℃，相對濕度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠5只，每三日清掃籠舍一次。
取大鼠10％烏拉坦(1g/kg)麻醉，腹主動脈采血(3.8％枸櫞酸鈉抗凝)，每分鐘1000轉(zhuǎn)離心3-5分鐘，分離富含血小板血漿，取富含血小板血漿0.15ml，置B1202血小板聚集儀(北京生化儀器廠生產(chǎn))的比色池中，分別加入不同濃度的藿香油20ul，1mmol/L ADP(血小板聚集誘導劑，Sigma產(chǎn)品)20ul。觀察并記錄5分鐘內(nèi)吸光值最大變化數(shù)值，以反映血小板聚集程度。每個濃度做3個平行管。
本試驗觀察指標及指標表達所測結(jié)果直接經(jīng)B1202軟件處理，血小板聚集程度以血小板聚集百分率表示。
本試驗藿香油給藥終濃度分別為3.31×10-6g/ml，3.31×10-5g/ml，3.31×10-4g/ml，3.31×10-3g/ml，3.31×10-2g/ml。
本試驗為體外實驗。本試驗空白對照為等體積生理鹽水.陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制藥廠生產(chǎn)，批號9811191，京衛(wèi)藥準字(1996)第157008號。川芎嗪終濃度為3.31×10-2g/ml。
本試驗數(shù)據(jù)均以Excel軟件處理。
表4 藿香油體外對ADP誘導血小板聚集作用的影響(x±s)分組 藥物終濃度 血小板聚集百分率(g/ml)(％)生理鹽水 70.11±2.06川芎嗪 3.31×10-227.26±3.66**藿香油 3.31×10-231.26±2.70**藿香油 3.31×10-337.92±2.53**藿香油 3.31×10-445.68±2.53**藿香油 3.31×10-557.33±4.08*藿香油 3.31×10-662.49±2.07*與生理鹽水組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝3本實驗結(jié)果顯示，藿香油體外有較強地抑制ADP誘導血小板聚集的作用，最低有效濃度為3.31×10-6g/ml，提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
權(quán)利要求
1.藿香油在制備治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物中的用途。
2.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療頭痛的藥物中的應用。
3.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療偏頭痛的藥物中的應用。
4.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療腦缺血的藥物中的應用。
5.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療血管性神經(jīng)精神障礙的藥物中的應用。
6.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用。
7.按照權(quán)利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制備治療心肌供血不足的藥物中的應用。
8.以藿香油為活性成分治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物。
9.按照權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于所述的藥物是以常規(guī)的制劑工藝制備的，在臨床上可以使用的各種不同劑型。
全文摘要
藿香油的新用途，涉及藿香油在制備治療血管痙攣及由此所引起的多種疾病的藥物中的應用。具體的說，本發(fā)明所述的藿香油是在制備治療頭痛的藥物中的應用、制備治療偏頭痛的藥物中的應用、制備治療腦缺血的藥物中的應用、制備治療血管性神經(jīng)精神障礙的藥物中的應用、制備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用以及在制備治療心肌供血不足的藥物中的應用。在治療上述疾病時，以藿香油為活性成分，單獨使用或與其他藥物配合制備成在臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。經(jīng)藥理研究表明，藿香油對實驗動物腦膜血流量有明顯升高作用，有升高實驗動物腦一氧化氮含量的作用，體外有抑制ADP誘導的血小板聚集活性的作用。
文檔編號A61P9/00GK1442197SQ0312114
公開日2003年9月17日 申請日期2003年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月28日
發(fā)明者邢東明, 杜力軍, 丁怡, 王雪莉, 王偉 申請人:清華大學