專(zhuān)利名稱(chēng)：抑制因子X(jué)a活性的新化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗凝血作用的新化合物(所謂的抗凝劑)及其藥物可接受的鹽、溶劑化物和水合物，包含所述化合物作為活性成分的藥物組合物，制備該化合物、鹽及組合物的方法，以及在預(yù)防和/或治療血栓栓塞病癥中的應(yīng)用。本發(fā)明的化合物、鹽以及組合物是非常有效的因子X(jué)a抑制劑。本發(fā)明還涉及所述化合物和鹽的前藥、旋光體、外消旋體和非對(duì)映異構(gòu)體。
靜脈血栓形成有可能導(dǎo)致形成浮腫或者受損血管引流組織的炎癥。深部靜脈的血栓形成(所謂的深靜脈血栓形成)有可能導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥，例如肺栓塞。動(dòng)脈血栓形成有可能導(dǎo)致依靠受損動(dòng)脈供氧組織的缺血性壞死，例如冠狀動(dòng)脈受損時(shí)可導(dǎo)致心肌梗塞。其他血栓栓塞病癥例如是動(dòng)脈硬化、中風(fēng)、心絞痛、間歇性跛行。
在正常生理?xiàng)l件下，自然的血液凝塊可防止受損血管中產(chǎn)生更多的血液流失。在血液凝塊期間，液態(tài)血液轉(zhuǎn)化為血塊，其是一種凝膠狀物質(zhì)，在受損血管處形成塞子并密封該血管。在此過(guò)程中，血漿中存在的可溶性纖維蛋白原在多級(jí)過(guò)程(所謂的凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng))中轉(zhuǎn)化為纖維凝膠狀的凝塊物質(zhì)——纖維蛋白。
在兩種不同的激活血液凝塊的過(guò)程之間存在明顯的差異。當(dāng)血液接觸非生理表面時(shí)，將啟動(dòng)內(nèi)源性血液凝塊過(guò)程。外源性血液凝塊過(guò)程是在血管受損時(shí)開(kāi)始啟動(dòng)。這兩種血液凝塊過(guò)程具有一個(gè)共同的過(guò)程，其中血液凝塊因子X(jué)(一種絲氨酸蛋白酶)轉(zhuǎn)化為其活性形式(因子X(jué)a)。在所謂的凝血酶原酶復(fù)合物中，因子X(jué)a與因子Va和Ca2+一起使凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，后者通過(guò)除去肽而由纖維蛋白原中釋放纖維蛋白單體，該纖維蛋白單體能夠凝集形成纖維蛋白纖維。最后，因子X(jué)III產(chǎn)生交聯(lián)并由此穩(wěn)定纖維蛋白的纖維。
抗凝劑可用于預(yù)防和治療血栓栓塞病癥。對(duì)于狹義的抗凝劑，肝素(立即有效并直接抑制某些血液凝塊因子)與維生素K拮抗劑(例如香豆素衍生物)有顯著的差別。后者在肝臟中依賴(lài)于維生素K的存在抑制某些凝血因子的產(chǎn)生，并開(kāi)始緩慢地發(fā)生作用。其他抗凝劑是纖維蛋白溶解劑和血小板聚集抑制劑(例如乙酰水楊酸)，前者直接或者間接地激活纖維蛋白溶解系統(tǒng)。更不太常用的方法是用酶ancrod降低血液中的纖維蛋白原濃度。使用抗凝劑的目的是防止可阻塞血管的血塊的發(fā)展或者是在血塊形成時(shí)立即將其溶解。
上述狹義的抗凝劑(如肝素和維生素K拮抗劑)具有許多缺陷。對(duì)于肝素，有完整的肝素(UFH)和低分子量肝素(LMWH)之分。UFH的缺陷是通常需要靜脈給藥，抗凝作用經(jīng)常變化，并因此必須時(shí)常監(jiān)測(cè)患者以及劑量的適合性。雖然LMWH可以恒定且無(wú)需監(jiān)測(cè)的劑量通過(guò)皮下給藥，但由于其鏈較短，與UFH相比其作用大大降低。
維生素K拮抗劑如華法林在不同的患者之間具有不同的活性程度，這有可能是由于遺傳因素。除上述的開(kāi)始作用緩慢外，維生素K拮抗劑還具有以下缺陷需要監(jiān)測(cè)患者，而且個(gè)體所需劑量需要調(diào)節(jié)。
其他己知的抗凝劑屬于凝血酶抑制劑類(lèi)。該領(lǐng)域相關(guān)研究活動(dòng)的當(dāng)前概要可參考例如Jules A.Shafer，Current Opinion in Chemical Biology，1988，2458-485；Joseph P.Vacca，Current Opinion in Chemical Biology，200，4394-400；以及Fahad Al-Obeidi和James A.Ostrem，DDT，第3卷5號(hào)，1998年5月223-231。
凝血酶抑制劑的主要缺陷在于，為得到所希望的作用，必須非常大程度地抑制凝血酶體內(nèi)活性，使得有可能增加出血的傾向，這也使劑量給藥發(fā)生困難。
相反，因子X(jué)a抑制劑可抑制由凝血酶原形成新的凝血酶，但不會(huì)損害已存在的且對(duì)于主要止血所必須的凝血酶的活性。
除上述綜述文章外，例如還可參考以下文獻(xiàn)DE19743435、DE19755268、DE19819548、DE19839499和WO0031068。
這些因子X(jué)a抑制劑的作用范圍以及副作用的范圍在某些情況下還沒(méi)有完全調(diào)查清楚。
更具體而言，本發(fā)明的目的是提供具有更高活性、更少副作用和/或選擇性增加的新型因子X(jué)a抑制劑。另外，還提供合適的藥物組合物。本發(fā)明的化合物及組合物可通過(guò)口服給藥。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供制備上述新化合物的方法。
這些新的化合物還適合用于預(yù)防和/或治療血栓栓塞病癥。
本發(fā)明所述的新抗凝化合物、其藥物學(xué)上可接受的鹽和溶劑化物和水合物以及藥物制劑具有高活性和選擇性，并可通過(guò)口服給藥。本發(fā)明還涉及上述化合物及鹽的前藥、旋光體、外消旋體和非對(duì)映異構(gòu)體。所述化合物及鹽本身也可以是前藥，僅通過(guò)代謝作用被活化。本發(fā)明還涉及包含上述化合物或其鹽作為活性成分的藥物組合物。還描述了多個(gè)直接且簡(jiǎn)單地合成本發(fā)明化合物、前藥、鹽及組合物的方法以及可用于這些方法中的中間體。本發(fā)明還描述了這些活性成分在預(yù)防和/或治療血栓栓塞病癥中的應(yīng)用。
本發(fā)明涉及通式(I)的化合物 其中X是Cl、Br或R1-N＝CH(-NH2)-，其中R1是H、-OH、-C(＝O)OR2、烷基、芳烷基、芳烷基氧基或者雜烷基例如烷氧基、?；蝓Ｑ趸?，而R2是烷基，如甲基、乙基或叔丁基，雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳基烷基或芳烷基如芐基；Ar是亞芳基、亞雜芳基、雜芳基亞烷基或亞芳烷基，其中X直接鍵連在芳香環(huán)上；R3是H、烷基如C1-4烷基、雜烷基或芳烷基；R4相互獨(dú)立地是可被一個(gè)或者多個(gè)-OH或-NH2取代的烷基，或者是雜烷基，碳環(huán)基，雜環(huán)烷基，芳基，雜芳基或芳烷基，這些基團(tuán)可被一個(gè)或者多個(gè)以下未經(jīng)取代的基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、?；蝓；趸?、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基和芳烷基，或者是羥基或糖氧基，n是0-5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2(根據(jù)優(yōu)選實(shí)施方案n＝0)，R5是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基或芳烷基，R6和R7相互獨(dú)立地是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基如芳基-雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，這些基團(tuán)可被一個(gè)或者多個(gè)優(yōu)選未取代的以下基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、酰基或?；趸⑻辑h(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、芳烷基、-OH和-NH2，或者R6和R7一起形成雜環(huán)烷基環(huán)、特別是芳基雜環(huán)烷基環(huán)的一部分，例如芳基-或雜芳基-哌嗪基，或者是雜芳香環(huán)的一部分，這些環(huán)系可被一個(gè)或者多個(gè)優(yōu)選未取代的以下基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、?；蝓；趸?、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、芳烷基、-OH和-NH2，以及R8是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、或芳烷基，或者與R5一起形成雜環(huán)烷基環(huán)的一部分；或其藥物學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或藥物學(xué)上可接受的制劑。
由于其取代方式，式(I)化合物可包含一個(gè)或者多個(gè)手性中心。因此，本發(fā)明還包括所有純的對(duì)映異構(gòu)體以及所有純的非對(duì)映異構(gòu)體以及它們以任何混合比的混合物。
術(shù)語(yǔ)“雜烷基”是指其中一個(gè)或者多個(gè)碳原子被至少一個(gè)氧、氮、磷或硫原子置換的烷基，其中優(yōu)選氧和氮原子，例如烷氧基如甲氧基或乙氧基、或甲氧基甲基、氰基或2，3-二氧基乙基。術(shù)語(yǔ)“雜烷基”還指羧酸或者衍生于羧酸的基團(tuán)，如?；?、酰基氧基、羧基烷基、羧基烷基酯如羧基烷基甲基酯、羧基烷基酰胺、烷氧基羰基、或者烷氧基羰基氧基。
術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)基”是指飽和或者部分不飽和的環(huán)狀基團(tuán)，其具有一個(gè)或者多個(gè)成環(huán)結(jié)構(gòu)，每個(gè)環(huán)包含例如3-14個(gè)碳原子、優(yōu)選5或6-10個(gè)碳原子，例如環(huán)丙基、環(huán)己基、1，2，3，4-四氫化萘或環(huán)己-2-烯基。雜環(huán)烷基可進(jìn)一步被未取代的烷基、雜烷基、雜芳基或芳基取代。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”是指其中一個(gè)或者多個(gè)碳原子相互獨(dú)立地被氧、氮、磷或硫原子置換的碳環(huán)基。雜環(huán)烷基可進(jìn)一步被未取代的烷基、雜烷基、雜芳基或芳基取代，并例如是哌啶、嗎啉、N-甲基哌嗪或N-苯基哌嗪基。
術(shù)語(yǔ)“芳基”是指具有一個(gè)或者多個(gè)環(huán)并由以下結(jié)構(gòu)形成的芳香環(huán)基團(tuán)，所述結(jié)構(gòu)包含例如5-14個(gè)碳原子、優(yōu)選5或6-10個(gè)碳原子。另外，芳基可被未取代的烷基或雜烷基、OH、CN、NO2或NH2取代，并例如是苯基、萘基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基或4-甲氧基苯基、2-乙氧基苯基、3-乙氧基苯基或4-乙氧基苯基、4-羧基苯基烷基或4-羥基苯基。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指其中一個(gè)或者多個(gè)碳原子相互獨(dú)立地被氧、氮、磷或硫原子置換的芳基。優(yōu)選僅1或2個(gè)碳原子被置換。此等基團(tuán)的例子是4-吡啶基、2-咪唑基、3-吡唑基和異喹啉基。
術(shù)語(yǔ)“芳烷基”是指包括如上定義的芳基和烷基和/或碳環(huán)基的基團(tuán)，例如芐基或四氫萘基。術(shù)語(yǔ)“雜芳基烷基”是指其中一個(gè)或者多碳原子相互獨(dú)立地被氧、氮、磷或硫原子置換的芳烷基，例如四氫異喹啉基、2-或3-乙基吲哚基或者4-甲基吡啶基。
術(shù)語(yǔ)烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、和芳烷基還指其中一個(gè)或者多個(gè)氫原子被氟、氯、溴或碘原子或者被-OH、NH2或SH基團(tuán)取代的基團(tuán)。這些術(shù)語(yǔ)還包括被未取代的烷基、雜烷基、芳烷基或芳烷氧基取代的相應(yīng)基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)亞芳基、亞雜芳基、亞雜芳基烷基和亞芳烷基是指二取代的芳基、雜芳基、雜芳烷基和芳烷基，例如攜帶至少兩個(gè)除H之外的取代基的基團(tuán)。
在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“糖氧基”是指通過(guò)α-或β-O-糖基鍵連接的糖，特別是單糖，優(yōu)選葡萄糖或果糖。
通式(I)或(II)的化合物優(yōu)選為其中X＝R1-N＝C(-NH2)-。
通式(I)或(II)的化合物還優(yōu)選為其中R1＝H、OH或C1-4烷氧基，如甲氧基或乙氧基。
另外，通式(I)的化合物還優(yōu)選為其中Ar是取代或未取代的間-亞苯基。
通式(I)的化合物特別優(yōu)選為其中Ar是在X的對(duì)位被OH、NH2、C1-4烷氧基(如甲氧基)、C1-4烷基氨基或C2-6二烷基氨基或鹵原子(如氯或氟)取代的間-亞苯基。
通式(I)的化合物還優(yōu)選為其中R3＝H。
通式(I)的化合物還優(yōu)選為其中R4基團(tuán)相互獨(dú)立地是OH、-OCH2COOH、-COOH、C1-4烷氧基或糖氧基或鹵原子如F或Cl。特別優(yōu)選的是，R4為-OCH2COOH、-COOH或β-D-糖氧基。
通式(I)的化合物優(yōu)選為其中R5是H、C1-6烷基、C1-6雜烷基或者天然氨基酸的側(cè)鏈。特別優(yōu)選地，R5是H或甲基。
通式(I)的化合物還優(yōu)選為其中R6和R7一起形成芳基-或雜芳基-哌嗪環(huán)(特別優(yōu)選4-芳基-或4-雜芳基-哌嗪環(huán))的一部分。
通式(I)的化合物還優(yōu)選為其中R8＝H或C1-6烷基，如甲基。
通式(I)的化合物還優(yōu)選具有以下結(jié)構(gòu)(II) 其中R1是H、OH或C1-4烷氧基，如甲氧基或乙氧基，R4相互獨(dú)立地是OH、-OCH2COOH、-COOH、C1-4烷氧基或糖氧基(特別是β-D-糖氧基)或鹵原子如F或Cl，是0、1或2，優(yōu)選是0或1，R5是H或C1-4烷基，如甲基，R9是H、OH、F或C1-4烷氧基(特別優(yōu)選甲氧基)，R10是H、鹵原子(特別優(yōu)選F)、CN、NO2或C1-4烷氧基(特別優(yōu)選甲氧基)，Y是N或CR11，而R11是H、鹵原子(特別優(yōu)選F)、CN、NO2或C1-4烷氧基(特別優(yōu)選甲氧基)。
式(I)或(II)化合物之藥物學(xué)上可接受的鹽例如是生理學(xué)上可接受的礦物酸的鹽，如鹽酸、硫酸和磷酸，或者是有機(jī)酸的鹽，如甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、乳酸、乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸和水楊酸。式(I)或(II)化合物可被溶劑化、特別是水合化。水合作用可例如在制備過(guò)程中發(fā)生，或者是由于式(I)或(II)之起始無(wú)水化合物的吸濕特性。
根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包括至少一種式(I)或(II)的化合物作為活性成分以及任選的賦形劑和/或輔劑。
本發(fā)明涉及的前藥由式(I)或(II)的化合物以及至少一個(gè)藥物學(xué)上可接受的保護(hù)基組成，該保護(hù)基可在生理?xiàng)l件下脫除，例如是烷氧基、芳烷基氧基、?；蝓；趸?，如乙氧基、芐基氧基、乙酰基或乙?；趸?。
其中X是氰基的式(I)或(II)化合物可作為合成生理活性化合物的起始物。這些化合物可用本領(lǐng)域中形成酰胺鍵的已知方法來(lái)合成。例如，式(III)的酸化合物和式(IV)的胺化合物 在溶劑如二甲基甲酰胺中通過(guò)偶聯(lián)劑偶聯(lián)在一起，所述偶聯(lián)劑例如是羰基二咪唑或二環(huán)己基二酰亞胺、以及1-羥基苯并三唑。
其中X是氰基的式(III)化合物可如下合成使其中X為氰基的式(V)的胺與式(VI)的α-酮基酸 在溶劑如乙醇或甲醇中反應(yīng)，例如使用氰基硼氫化鈉和催化量的乙酸。
或者，式(III)的化合物還可如下合成使α-溴酸與堿如氫氧化鈉反應(yīng)，蒸發(fā)溶劑，然后添加過(guò)量的式(V)胺，接著在80-120℃的優(yōu)選溫度下加熱所得的混合物數(shù)小時(shí)。
式(III)的化合物還可如下合成使醛如3-氰基苯甲醛與氨基酸在堿的水溶液如氫氧化鈉水溶液中反應(yīng)，然后優(yōu)選在低于5℃的溫度下添加例如氰基硼氫化鈉。
在立體選擇性地合成式(I)或(II)化合物的優(yōu)選方法中，式(III)的化合物是如下合成的使芳基溴化物如3-溴芐腈與苯基甘氨酸衍生物如(S)-苯基甘氨酸反應(yīng)。該合成可例如類(lèi)似于在以下文獻(xiàn)中描述的方法來(lái)實(shí)施D.Ma等人，J.Amer.Chem.Soc.1998，12012459-12467。對(duì)于以此方式立體選擇性地制備的化合物，發(fā)現(xiàn)在苯基甘氨酸單元處具有(R)構(gòu)型的式(I)或(II)化合物以及具有(S)構(gòu)型的相應(yīng)化合物都是非常有效的因子X(jué)a抑制劑，在具有相同的取代基時(shí)，具有(S)構(gòu)型的化合物具有略微更高的抑制性質(zhì)。對(duì)于通式(I)或(II)化合物的第二個(gè)氨基酸單元，具有(S)構(gòu)型的化合物類(lèi)似地為略微更好的因子X(jué)a抑制劑，而具有(R)構(gòu)型的相應(yīng)化合物也是非常有效的因子X(jué)a抑制劑。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選具有S，S-構(gòu)型的式(I)或(II)化合物，同時(shí)具有R，S-、S，R-和R，R-構(gòu)型的化合物也表現(xiàn)出非常良好的抑制性質(zhì)并構(gòu)成本發(fā)明的一部分。
式(IV)的化合物是如下合成的使用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)方法，用偶聯(lián)劑和1-羥基苯并三唑，所述偶聯(lián)基例如是羰基二咪唑或二環(huán)己基碳二亞胺，使N-Boc保護(hù)的氨基酸與式(XI)的胺反應(yīng)。式(IV)的化合物也可通過(guò)使用混合酸酐或者N-Boc保護(hù)的相應(yīng)氨基酸的4-硝基苯基酯來(lái)合成。在水或者二氯甲烷中用酸如鹽酸、三氟乙酸或甲酸處理，脫除氨基處的保護(hù)基，形成最終的式(IV)化合物。
其中X是-CN或-C(＝NH)NH2而R8是H的式(I)化合物也可根據(jù)本發(fā)明通過(guò)使式(VII)的胺、式(VIII)的醛和式(IX)的異腈例如在溶劑(如甲醇、異丙醇、乙醇、氯仿、乙腈、二氯甲烷)或者溶劑混合物(如甲醇/水、異丙醇/水、乙腈/水或氯仿/水)中一起反應(yīng)而一步合成。 上述反應(yīng)可通過(guò)添加Broensted酸，如對(duì)甲苯磺酸或2，4-二硝基苯磺酸，或者Lewis酸，如二氯化鋅、三氯化鐵、三氟化硼乙醚合物或者三氟磺酸鐿，進(jìn)行催化。
式(IX)的化合物可如下合成使式(X)的異腈與式(XI)的胺在溶劑(如甲醇、二氯甲烷或二甲基甲酰胺)中，或者也可不用溶劑，例如在室溫或者高至80℃的溫度下反應(yīng)(參見(jiàn)K.Matsumoto等人，Synthesis，1997，249-250)。 上述起始化合物，特別是式(VII)、(VIII)、(XI)、(V)和(VI)的化合物，可市售得到或者可根據(jù)文獻(xiàn)中已知的方法制備。式(X)的化合物可用根據(jù)I.Ugi(I.Ugi編輯，有機(jī)化學(xué)中的異腈化學(xué)(IsonitrileChemistry in Organic Chemistry)，第20卷，Academic Press，1971，NewYork and London)的已知方法來(lái)合成。
在將-CN轉(zhuǎn)化為-C(＝NH)NH2時(shí)，起始腈可溶解在溶劑(如乙醇或甲醇)或者溶劑混合物(如氯仿和甲醇或者氯仿和乙醇)中，然后將該溶液與無(wú)水氯化氫氣流在低于10℃的溫度下接觸。數(shù)小時(shí)-數(shù)天的反應(yīng)時(shí)間后，用醚沉淀出中間體然后過(guò)濾。用堿如碳酸鈉或氫氧化鈉中和后，將該中間體溶解在水中并用溶劑如二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯萃取。所得物質(zhì)接著與無(wú)水氨或者銨鹽如氯化銨在溶劑如甲醇或乙醇中優(yōu)選于高至80℃的溫度下反應(yīng)?；蛘?，過(guò)濾得到的中間體可立即在溶劑如甲醇或乙醇中與無(wú)水氨或銨鹽如氯化銨反應(yīng)。
在將-CN轉(zhuǎn)化為-C(＝N-OH)NH2時(shí)，起始腈可溶解在溶劑如二甲基甲酰胺或乙醇中，然后將該溶液優(yōu)選在低于5℃的溫度下添加至堿如鈉、氫化鈉或三乙胺與羥胺或羥胺鹽如鹽酸羥胺在溶劑如二甲基甲酰胺或乙醇中的溶液混合物中。在將-CN轉(zhuǎn)化為-C(＝N-R1)NH2(其中R1是烷氧基)時(shí)，使用相應(yīng)的烷基羥胺替代羥胺。
在將-CN轉(zhuǎn)化為-C(＝NH)NH2時(shí)，該轉(zhuǎn)化可首先根據(jù)上述方法進(jìn)行轉(zhuǎn)變?yōu)槠渲蠿是-C(＝N-OH)NH2的式(I)化合物。在第二步中，將上述式(I)化合物溶解在溶劑如乙醇或乙酸中，然后用催化劑如鈀或鈀/炭或者鉑或者Raney鎳在氫氣氛中進(jìn)行氫化。
其中X是-C(＝O)OR2的式(I)化合物可如下合成使其中R1是H的式(I)化合物在溶劑如二甲基甲酰胺或二氯甲烷中與式ClC(＝O)OR2的氯甲酸酯反應(yīng)。
根據(jù)上述方法之一制得的式(I)化合物可通過(guò)HPLC法分離為單獨(dú)的立體異構(gòu)體。
合成后，其中X是-C(＝N-R1)NH2的式(I)化合物可任選地轉(zhuǎn)化為生理相容鹽、溶劑化物或水合物。
本發(fā)明的化合物或者藥物組合物可用于抑制因子X(jué)a活性，預(yù)防和/或治療血栓栓塞性病癥、動(dòng)脈再狹窄、敗血病、癌癥、急性炎癥或者因子X(jué)a介導(dǎo)的其他病癥，并特別是例如靜脈血栓形成、浮腫或炎癥、深靜脈血栓形成、肺栓塞，較大的手術(shù)、長(zhǎng)時(shí)間不動(dòng)、下肢折斷等導(dǎo)致的血栓栓塞并發(fā)癥，動(dòng)脈硬化、中風(fēng)、心絞痛、間歇性跛行。
通常情況下，如開(kāi)始時(shí)所述，根據(jù)本發(fā)明的活性成分對(duì)因子X(jué)a具有盡可能高的抑制作用，同時(shí)又具有盡可能高的選擇性。在本發(fā)明中，選擇性是通過(guò)比較對(duì)因子X(jué)a、類(lèi)胰蛋白酶和凝血酶(兩種其他的絲氨酸蛋白酶)的抑制作用來(lái)評(píng)估的。
如上所述，式(I)或(II)化合物及其藥物學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和水合物以及制劑和藥物組合物都是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明還涉及這些活性成分在制備用于預(yù)防和/或治療血栓栓塞性病癥的藥物中的應(yīng)用。通常情況下，式(I)或(II)的化合物可單獨(dú)或者與其他所希望的治療劑組合使用已知并可接受的方式給藥。所述治療有用的藥物可按照以下途徑之一給藥口服，例如為錠劑、包衣片劑、丸劑、半固體物質(zhì)、軟或硬膠囊、溶液、乳液劑或混懸劑的劑型；非胃腸道途徑，例如為注射液；直腸途徑，例如為栓劑；吸入途徑，例如粉末劑或噴霧劑；透皮或者鼻腔內(nèi)途徑。在制備片劑、丸劑、半固體物質(zhì)、包衣片、錠劑和硬明膠膠囊時(shí)，治療有用的產(chǎn)物可與藥理學(xué)上惰性的無(wú)機(jī)或有機(jī)賦形劑混合，例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、明膠、麥芽、硅膠、淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽、脫脂乳粉等。在制備軟膠囊時(shí)，可使用諸如植物油、礦物、動(dòng)物或者合成油、蠟、脂和多元醇的賦形劑。在制備液態(tài)溶液和糖漿劑時(shí)，可使用諸如水、醇、鹽水溶液、葡萄糖水溶液、多元醇、甘油、植物油、礦物和動(dòng)物或者合成油脂。對(duì)于栓劑，可使用諸如植物油、礦物、動(dòng)物或者合成油、蠟、脂和多元醇。對(duì)于噴霧劑，可使用合適的壓縮氣體，如氧氣、氮?dú)夂投趸肌Ｋ幬镏苿┻€可包括以下添加劑防腐劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、甜味劑、調(diào)味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、包封添加劑和抗氧劑。
與其他治療劑的組合可包括通常用于預(yù)防和/或治療血栓栓塞病癥的其他活性成分，如華法林等。
在預(yù)防和/或治療如上所述的病癥時(shí)，本發(fā)明生理活性化合物的劑量可在較寬的范圍內(nèi)變化，并可針對(duì)個(gè)體的需要進(jìn)行調(diào)節(jié)。通常情況下，每日0.1μg-10mg/kg體重的劑量是合適的，優(yōu)選的劑量為每日0.5-4mg/kg。在合適的情況下，劑量也可低于或者高于以上數(shù)值。
以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明。3，4，5-三羥基-6-羥甲基-四氫吡喃-2-基氧基的立體化學(xué)相應(yīng)于β-D-葡萄糖的立體化學(xué)。
C34H42N6O9(678.7486)ESI-TOF-MS679[M+H]+
C34H42N6O9(678.7486)
ESI-TOF-MS679[M+H]+
C34H36N6O3(576.7044)ESI-TOF-MS577[M+H]+
C34H36N6O3(576.7044)ESI-TOF-MS577[M+H]+
C30H36N6O5(560.6586)ESI-TOF-MS561[M+H]+
C30H36N6O5(560.6586)ESI-TOF-MS561[M+H]+
C34H39N5O9(661.72)ESI-TOF-MS662[M+H]+
C33H38F2N6O9(700.7024)ESI-TOF-MS701[M+H]+
C29H30F2N6O5(580.5965)ESI-TOF-MS581[M+H]+
C34H42N6O10(694.7480)ESI-TOF-MS695[M+H]+
C34H39N7O8(673.7320)
ESI-TOF-MS674[M+H]+
C33H41N7O9(679.7362)ESI-TOF-MS680[M+H]+
C30H32BrN5O6(638.5234)ESI-TOF-MS639[M+H]+
C31H38N6O3(542.6869)ESI-TOF-MS543[M+H]+
C29H31N7O7(589.6131)ESI-TOF-MS590[M+H]+
C30H32F2N6O6(610.6229)ESI-TOF-MS611[M+H]+
C31H36F2N6O7(604.6686)ESI-TOF-MS605[M+H]+
C27H31N7O2(485.5938)ESI-TOF-MS486[M+H]+實(shí)施例20類(lèi)似于實(shí)施例1，并使用相應(yīng)合適的起始原料，得到2-(3-carbamimidoyl-苯基氨基)-N-{2-[4-(2-硝基-苯基)-哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基}-2-苯基-乙酰胺。
C27H29N7O4(515.5767)ESI-TOF-MS516[M+H]+
C27H28F2N6O2(506.5600)ESI-TOF-MS507[M+H]+
C33H38F2N6O8(684.7030)ESI-TOF-MS685[M+H]+
C26H29N7O2(471.5667)ESI-TOF-MS472[M+H]+
C35H44N6O10(708.7751)ESI-TOF-MS709[M+H]+
C32H39N7O8(649.7097)ESI-TOF-MS650[M+H]+
C33H39N7O10(693.7197)
ESI-TOF-MS694[M+H]+
C29H34N6O4(530.6321)ESI-TOF-MS531[M+H]+
C28H32N6O3(500.6056)ESI-TOF-MS501[M+H]+
C30H34N6O6(574.6421)ESI-TOF-MS575[M+H]+
C30H34N6O6(574.6421)ESI-TOF-MS575[M+H]+
C29H32N6O6(560.6150)ESI-TOF-MS561[M+H]+
C30H31N7O5(569.6255)ESI-TOF-MS570[M+H]+
C29H32N6O5(544.6156)ESI-TOF-MS545[M+H]+實(shí)施例33類(lèi)似于實(shí)施例1，并使用相應(yīng)合適的起始原料，得到2-(3-carbamimidoyl-苯基氨基)-N-[2-(4-羥基-4-苯基-哌啶-1-基)-2-氧代-乙基]-2-苯基-乙酰胺。
C28H31N5O3(485.5910)ESI-TOF-MS486[M+H]+
C30H34N6O6(574.6421)ESI-TOF-MS575[M+H]+
C28H32N6O3(500.6056)ESI-TOF-MS501[M+H]+
C28H32N6O4(516.6050)
ESI-TOF-MS517[M+H]+
C29H34N6O8(594.6297)ESI-TOF-MS595[M+H]+
C35H35F3N6O4(660.7022)ESI-TOF-MS661[M+H]+
C30H36N6O5(560.6586)ESI-TOF-MS561[M+H]+實(shí)施例40類(lèi)似于實(shí)施例1，并使用相應(yīng)合適的起始原料，得到[2-芐氧基-5-((3-carbamimidoyl-苯基氨基)-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基氨甲?；鶀-甲基)-苯氧基]-乙酸。
C37H40N6O7(680.7674)ESI-TOF-MS681[M+H]+
在110ml的二甲基甲酰胺(DMF)中于室溫(RT)下攪拌分別為20mmol的Boc-肌氨酸、HOBt、二異丙基碳二亞胺(DIC)、哌嗪和三乙胺過(guò)夜。真空除去溶劑后，所得的粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純制。所得的產(chǎn)物在20ml三氟乙酸和20ml二氯甲烷的混合物中于室溫下攪拌5小時(shí)。除去溶劑后，通過(guò)液相色譜純制部分II。
在14ml的DMF中于室溫下過(guò)夜攪拌分別為2mmol的部分I、部分II、DIC、HOBt和三乙胺。除去溶劑后，粗產(chǎn)物通過(guò)液相色譜純制。為將氰化物轉(zhuǎn)化為脒，將1mmol的氰化物溶解在10ml氯仿中，向其中添加氯化氫在無(wú)水甲醇中的飽和溶液5ml，然后使反應(yīng)混合物在4℃下放置2天。真空除去溶劑后，向其中添加氨在甲醇中的無(wú)水溶液20ml，并在室溫下攪拌4小時(shí)。通過(guò)HPLC純制所希望的產(chǎn)物，2-(3-carbamimidoyl-苯基氨基)-N-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基}-N-甲基-2-苯基-乙酰胺。
C29H34N6O3(514.6327)
ESI-TOF-MS515[M+H]+
類(lèi)似于實(shí)施例41，并使用相應(yīng)合適的起始原料，選擇性地合成了四種非對(duì)映異構(gòu)體。
C29H34N6O3(514.6327)ESI-TOF-MS515[M+H]+
C36H38N6O7(666.7403)ESI-TOF-MS667[M+H]+
C28H29N7O6(559.5866)ESI-TOF-MS560[M+H]+實(shí)施例45類(lèi)似于實(shí)施例1，并使用相應(yīng)合適的起始原料，得到2-(3-carbamimidoyl-苯基氨基)-N-{[(吡啶-3-基甲基)-氨甲?；鵠-甲基}-2-喹啉-4-基-乙酰胺。
C26H25N7O2(467.5349)ESI-TOF-MS468[M+H]+
C34H41N5O10(679.7334)ESI-TOF-MS680[M+H]+
C36H43N5O9(689.7722)ESI-TOF-MS690[M+H]+
C30H33N5O7(575.6268)ESI-TOF-MS576[M+H]+
C32H35N5O6(585.6657)ESI-TOF-MS586[M+H]+
C33H38F2N6O5(636.7048)ESI-TOF-MS637[M+H]+
C35H44N6O10(708.7751)ESI-TOF-MS709[M+H]+實(shí)施例52類(lèi)似于實(shí)施例1，并使用相應(yīng)合適的起始原料，得到4-[4-((3-carbamimidoyl-苯基氨基)-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-2-氧代-乙基氨甲?；鶀-甲基)-3-甲氧基-苯氧基]-丁酸。
C33H40N6O7(632.7228)ESI-TOF-MS633[M+H]+為證明對(duì)因子X(jué)a的抑制作用，使用顯色肽底物。如下驗(yàn)證上述化合物對(duì)因子X(jué)a的amidolytic活性的抑制作用。測(cè)量是在室溫下于微滴定板中進(jìn)行的。將化合物溶解在二甲基亞砜中，然后將5μl的該溶液添加至1nM的人重組因子X(jué)a(Enzyme Research Laboratories，South Bend，IN，USA)于緩沖液(pH8.0，并使用50mMTris-HCl、100mM氯化鈉、0.1％的PEG 6000和0.005％的Tween 80)中的溶液內(nèi)。最后，添加在緩沖液中的N-甲氧基羰基-D-正亮氨?；?甘氨?；?L-精氨酸-4-苯基重氮酸乙酸鹽(Roche Diagnostics，Mannheim，Germany)，然后用Spectra Flour Plus分光光度計(jì)(Tecan，Crailsheim，Germany)監(jiān)測(cè)底物的水解共20分鐘。通過(guò)Erithacus Software Ltd.(Staines，Middlesex，UK)制造的“GraFit 4”程序計(jì)算IC50值。假設(shè)動(dòng)力學(xué)包括競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用，則可通過(guò)Cheng-Prusoff等式Ki＝IC50/(1+[S]/Km))測(cè)定Ki值(Cheng和Prusoff，Biochemical Pharmacology 1973，223099-3108)。使用相同的方法，但在Hepes緩沖液(pH7.8)中使用甲苯磺?；?甘氨?；?脯氨?；?賴(lài)氨酸-4-苯基重氮酸乙酸鹽作為底物，測(cè)定所述化合物對(duì)重組人類(lèi)胰蛋白酶(Promega，Madison，WI，USA)之蛋白水解活性的抑制作用。
上述實(shí)施例的IC50值在1nM至1μM的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物 其中X是Cl、Br或R1-N＝CH(-NH2)-，其中R1是H、-OH、-C(＝O)OR2、烷基、芳烷基、芳烷基氧基或者雜烷基例如烷氧基、?；蝓Ｑ趸?，而R2是烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳基烷基或芳烷基；Ar是亞芳基、亞雜芳基、雜芳基亞烷基或亞芳烷基，其中X直接鍵連在芳香環(huán)上；R3是H、烷基、雜烷基或芳烷基；R4相互獨(dú)立地是可被一個(gè)或者多個(gè)-OH或-NH2取代的烷基，或者是雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或芳烷基，這些基團(tuán)可被一個(gè)或者多個(gè)以下未取代的基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、?；蝓；趸⑻辑h(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或芳烷基，或者是羥基或糖氧基，n是0-5的整數(shù)，R5是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基或芳烷基，R6和R7相互獨(dú)立地是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基如芳基-雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，這些基團(tuán)可被一個(gè)或者多個(gè)下基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、?；蝓；趸?、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、芳烷基、-OH或-NH2，或者R6和R7一起形成雜環(huán)烷基環(huán)、特別是芳基雜環(huán)烷基環(huán)的一部分，例如芳基-哌嗪基，或者是雜芳香環(huán)的一部分，這些環(huán)系可被一個(gè)或者多個(gè)以下基團(tuán)取代烷基、雜烷基如烷氧基、?；蝓；趸?、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、芳烷基、-OH或-NH2，R8是H、烷基、雜烷基、碳環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜芳烷基、或芳烷基，或者與R5一起形成雜環(huán)烷基環(huán)的一部分；或其藥物學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或藥物學(xué)上可接受的制劑。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，X是R1-N＝C(-NH2)-。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中，R1是H、OH或C1-4烷氧基。
4.如權(quán)利要求1-3之一所述的化合物，其中，Ar是取代或未取代的間亞苯基。
5.如權(quán)利要求1-4之一所述的化合物，其中，Ar在X的對(duì)位被OH、NH2、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基或C2-6二烷基氨基或鹵原子取代。
6.如權(quán)利要求1-5之一所述的化合物，其中，R3為H。
7.如權(quán)利要求1-6之一所述的化合物，其中，R4相互獨(dú)立地是OH-、-OCH2COOH、-COOH、C1-4烷氧基、糖氧基或鹵原子。
8.如權(quán)利要求1-7之一所述的化合物，其中，n為0、1或2。
9.如權(quán)利要求1-8之一所述的化合物，其中，R5是H、C1-6烷基、C1-6雜烷基或天然氨基酸的側(cè)鏈。
10.如權(quán)利要求1-9之一所述的化合物，其中，R6和R7一起形成芳基-哌嗪環(huán)的一部分。
11.如權(quán)利要求1-10之一所述的化合物，其中，R8為H或C1-6烷基。
12.藥物組合物，其包含如權(quán)利要求1-11之一所述的化合物作為活性成分以及任選的賦形劑和/或輔劑。
13.如權(quán)利要求1-12之一所述的化合物或藥物組合物在抑制因子X(jué)a中的應(yīng)用。
14.如權(quán)利要求1-12之一所述的化合物或藥物組合物在治療和/或預(yù)防血栓栓塞病癥、動(dòng)脈再狹窄、敗血病、癌癥、急性炎癥或者因子X(jué)a介導(dǎo)的其他病癥中的應(yīng)用。
15.如權(quán)利要求1-12之一所述的化合物或藥物組合物在血管手術(shù)中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或藥物學(xué)上可接受的制劑。這些化合物可用于抑制因子X(jué)a以及預(yù)防和/或治療血栓栓塞病癥。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1460101SQ01814535
公開(kāi)日2003年12月3日 申請(qǐng)日期2001年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月23日
發(fā)明者米夏埃爾·W·卡佩, 蒂洛·富克斯, 羅伯特·埃克爾, 西爾克·沙波特 申請(qǐng)人:莫波化學(xué)股份有限公司