本發(fā)明屬于生物制品領(lǐng)域的一種從沙蠶中制備天然抗氧化劑的方法。

背景技術(shù)：

沙蠶在分類學(xué)上屬于環(huán)節(jié)動物門、多毛綱、游走目、沙蠶科，俗稱海蟲、海蛆、海蜈蚣、海螞蝗。我國的沙蠶種類有約80多種，經(jīng)濟種類和用于養(yǎng)殖的品種主要有：日本刺沙蠶、多刺圍沙蠶、雙齒圍沙蠶等。喜棲息于有淡水流入的沿海灘涂、潮間帶中區(qū)到潮下帶的沙泥中，幼蟲食浮游生物，成蟲以腐植質(zhì)為食。沙蠶有很高的營養(yǎng)價值，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中得到廣泛應(yīng)用。沙蠶（nereid）英文名—clamworm，屬環(huán)節(jié)動物門，多毛綱葉須蟲目的1科，經(jīng)濟價值較高。

沙蠶體長圓柱形,兩側(cè)對稱、后端尖,具許多（80～200多個）體節(jié)?？煞譃轭^部、軀干部和尾部。頭部發(fā)達，由口前葉和圍口節(jié)兩個主要部分組成?？谇叭~為伸于口前方的圓三角形或圓錐形肉質(zhì)葉突，具2對簡單的圓形眼,1～2個前伸的頭觸手和其前端腹側(cè)兩個大的分節(jié)的觸角。圍口節(jié)為一大的環(huán)狀節(jié)，腹面具橫長的口，其兩側(cè)具3～4對觸須，肌肉質(zhì)的吻可由口伸出，吻前端具1對幾丁質(zhì)大顎,吻表面平滑或具幾丁質(zhì)顎齒或軟乳突；軀干部有許多結(jié)構(gòu)相似的體節(jié)，每個體節(jié)兩側(cè)具外伸的肉質(zhì)扁平突起，即疣足。疣足多為雙葉型具內(nèi)足刺，外有刺狀或鐮狀復(fù)型剛毛；尾部為蟲體最后1節(jié)或數(shù)節(jié),亦稱肛節(jié)，具一對肛須、肛門開口于肛節(jié)末端背面。剛毛有毒腺，刺到皮膚有紅腫疼痛的現(xiàn)象。

沙蠶營養(yǎng)豐富，不僅是魚蝦嗜食的餌料生物，也可以作為優(yōu)良的釣餌。沿海居民還視生殖腺成熟的沙蠶為營養(yǎng)珍品。干制后，煮湯白如牛奶，味極鮮美，且濃度大，有“天然味精”之稱。油炸后酥松香脆，為下酒佳肴。沙蠶無論在國內(nèi)或出口，都十分暢銷。近幾年，沙蠶研究的比較多的是從它身上提取的一些活性成分，例如抑菌肽，沙蠶素等。，

另外，由于沙蠶具有良好的環(huán)境適應(yīng)性，一些研究人員把它作為生態(tài)關(guān)鍵物種來指示環(huán)境污染程度。

文獻還報道了沙蠶體內(nèi)自有的一套抗氧化系統(tǒng)，報道了沙蠶能夠很好的防止鉛離子的毒害，具有很好的抗氧化功能,但文章沒有報道該抗氧化系統(tǒng)如何制備成抗氧化劑制品的方法和相關(guān)報道。本發(fā)明的目的是提供一種從沙蠶中制備天然抗氧化劑的方法,以彌補已有報道的不足。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種從沙蠶中制備天然抗氧化劑的方法，所制備的天然抗氧化劑具有清除自由基的作用，可用于醫(yī)藥和食品的抗氧化保護,也可作為食品添加劑和保健品用于體內(nèi)清除自由基，預(yù)防肌體衰老等。

本發(fā)明采用沙蠶為唯一原料，如日本刺沙蠶、多刺圍沙蠶、雙齒圍沙蠶等，原材料是天然海洋生物，是營養(yǎng)價值豐富的食材，制備過程不需要添加其他有毒副作用的化學(xué)試劑和助劑，制備過程綠色環(huán)保，沒有環(huán)境污染，產(chǎn)品綠色，可降解吸收，安全無副作用。

本發(fā)明采用原料是沙蠶，如日本刺沙蠶、多刺圍沙蠶、雙齒圍沙蠶等，但不局限于這三種沙蠶原料，所有沙蠶在本發(fā)明中的制備技術(shù)方法是相同的。

本發(fā)明中采用的原料是新鮮健康沙蠶，經(jīng)過海水陰濕環(huán)境處理，用干凈海水暫養(yǎng)，用去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)和粘液，然后用于本發(fā)明中沙蠶天然抗氧化劑的制備。

本發(fā)明中采用沙蠶經(jīng)過海水陰濕環(huán)境存放處理的時間為1-7天，用海水暫養(yǎng)的時間為1-3天，用去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)和粘液后，迅速撈出用于沙蠶天然抗氧化劑的制備，也可以-20℃冰凍保存?zhèn)溆谩?/p>

本發(fā)明中首先將沙蠶切成段狀，然后用組織勻漿器進行勻漿處理，進一步超聲破碎，破碎后加入向體系中加入去離子水，靜置浸泡提取，加熱分離，過濾得到第一粗提液和第一提取殘渣。

本發(fā)明中將沙蠶切斷后勻漿處理，轉(zhuǎn)速5000-10000rpm，10-15min，進一步超聲破碎10-20min，破碎后加入向體系中加入的去離子水是沙蠶重量10-100倍，靜置溫度是4℃-45℃浸泡提取時間是8-20h，加熱分離的條件是沸騰溫下60-90min。

本發(fā)明中采用向第一提取殘渣中加入去離子水，靜置1-5小時，加去離子水的量是沙蠶重量的5-50倍，煮沸5-30分鐘，過濾，得到第二粗提液和第二提取殘渣。

本發(fā)明中將第一粗提液和第二粗提液合并，4℃-10℃低溫靜置5-10小時，過濾除去不容物，收集濾液，用超濾膜濃縮，冰凍干燥，密封保存，得到本發(fā)明的沙蠶天然抗氧化劑制品。

本發(fā)明采用了水相浸泡提取、煎煮分離法，超濾膜濃縮和冰凍干燥技術(shù)，不使用其他化學(xué)試劑，操作過程簡單，工藝穩(wěn)定性能好，提取率高。本發(fā)明制造的抗氧化產(chǎn)品保存穩(wěn)定，具有良好的抗氧化活性，能明顯清除超氧陰離子等自由基，因此，本產(chǎn)品在醫(yī)藥、保健等方面都具有良好研究和應(yīng)用前景。并用以下具體實施例進一步闡明本發(fā)明的過程。

具體實施方式

沙蠶經(jīng)過海水陰濕環(huán)境存放，海水暫養(yǎng)后，稱取新鮮沙蠶1份，去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)以及血液。剪刀將沙蠶剪斷成段狀，勻漿、超聲。30份去離子水中37℃浸泡過夜，浸泡過夜的沙蠶煮沸30min，待冷卻過后加去離子水15份繼續(xù)煮沸直至沙蠶骨架呈現(xiàn)白色狀，將混合物用雙層紗布過濾3次，完全去除雜質(zhì)，將收集的濾液低溫靜置1-5小時，濃縮后冷凍干燥，所得產(chǎn)品置于4℃冰箱保存。

以下幾個具體實施例為例進一步給出本發(fā)明的制造方法。

實施例1

將日本刺沙蠶置于海水陰濕環(huán)境中處理1天，海水暫養(yǎng)1天。取沙蠶1份，去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)以及血液。將沙蠶個體剪斷后5000rpm勻漿15min，超聲破碎10min。30份去離子水洗凈浸泡過夜后，煎煮1h，冷卻后加去離子水15份繼續(xù)煮沸20min，將兩次煎煮液混合，冷卻后4℃靜置5h，濃縮后冷凍干燥，即得到沙蠶抗氧化產(chǎn)品，產(chǎn)品為棕色粘稠狀，收率為13.63%。

實施例2

將多刺圍沙蠶置于海水陰濕環(huán)境中處理7天，海水暫養(yǎng)3天。取沙蠶1份，去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)以及血液。將沙蠶個體剪斷后10000rpm勻漿25min，超聲破碎20min。30份去離子水洗凈浸泡過夜后，煎煮1h，冷卻后加去離子水15份繼續(xù)煮沸20min，將兩次煎煮液混合，冷卻后4℃靜置5h，濃縮后冷凍干燥，即得到沙蠶抗氧化產(chǎn)品，產(chǎn)品為紅棕色粘稠狀，收率為10.80%。

實施例3

將雙齒圍沙蠶置于海水陰濕環(huán)境中處理3天，海水暫養(yǎng)2天。取沙蠶1份，去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)以及血液。將沙蠶個體剪斷后5000rpm勻漿15min，超聲破碎10min。30份去離子水洗凈浸泡過夜后，煎煮1h，冷卻后加去離子水15份繼續(xù)煮沸20min，將兩次煎煮液混合，冷卻后4℃靜置5h，濃縮后冷凍干燥，即得到沙蠶抗氧化產(chǎn)品，產(chǎn)品為紅棕色粘稠狀，收率為11.68%。

實施例4

將日本刺沙蠶、多刺圍沙蠶、雙齒圍沙蠶分別置于海水陰濕環(huán)境中處理3天，海水暫養(yǎng)2天。取混合沙蠶1份，去離子水沖洗，去除表面雜質(zhì)以及血液。將沙蠶個體剪斷后10000rpm勻漿20min，超聲破碎20min。30份去離子水洗凈浸泡過夜后，煎煮1h，冷卻后加去離子水15份繼續(xù)煮沸20min，將兩次煎煮液混合，冷卻后4℃靜置5h，濃縮后冷凍干燥，即得到沙蠶抗氧化產(chǎn)品，產(chǎn)品為深紅棕色粘稠狀，收率為19.66%。

抗氧化研究

本發(fā)明中探究了產(chǎn)物對超氧陰離子以及羥基自由基的清除率，其結(jié)果圖標(biāo)如下：

圖1，沙蠶提取物對超氧陰離子的清除。圖2，沙蠶提取物對羥基自由基的清除。

由實驗結(jié)果證明，隨著材料濃度的增加，其對超氧陰離子和羥基自由基的清除率都是增加的，在40mg/ml時達到了60%，說明其具有明顯的抗氧化作用，因此在醫(yī)藥、保健等方面都具有良好研究和應(yīng)用前景。