本發(fā)明涉及一種常溫脫脂制備白色無臭蠶蛹蛋白的方法，屬于蠶蛹蛋白制備技術領域。

背景技術：

蠶蛹蛋白經過幾年時間的推廣，受到了多方關注，特別是纖維具有滑爽如真絲，柔軟似羊絨的手感，蠶蛹蛋白所蘊含的18種氨基酸能呵護親膚，以及抵御紫外、吸濕透氣等優(yōu)點，目前在中、高端針織面料、內衣、襪子、梭織襯衫、家紡面料、填充物、無紡布等領域中已初具影響。蠶蛹的蛋白質含量在50%以上，遠遠高于一般食品，且蛋白質中的必需氨基酸種類齊全，蠶蛹蛋白質由18種氨基酸組成，其中人體必需的8種氨基酸含量很高，是豬肉的2倍，雞蛋的4倍，牛奶的10倍，8種人體必需的氨基酸營養(yǎng)均衡，比例適當，符合聯(lián)合國糧農組織和世界衛(wèi)生組織的要求；蠶蛹也含有鉀、納、鈣、鎂、鐵、銅、錳、鋅、磷、硒等微量元素，維生素A、E、B1、B2，胡蘿卜素等；蠶蛹中的不飽和脂肪酸的含量非常豐富，約占總脂肪的72.5%。目前蠶蛹蛋白的提取方法：有機溶劑提取法、直接酸析法、堿溶酸析法。但由于蠶蛹蛋白為球蛋白，水溶性較差，在生產過程中需對蠶蛹進行加熱，高溫長時間浸提，導致蠶蛹油被加熱氧化，蠶蛹蛋白得率低且腥臭味濃。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術問題：針對目前蠶蛹蛋白為球蛋白，水溶性較差，傳統(tǒng)方法提取蠶蛹蛋白都需在高溫下進行脫脂以提高其溶解性，而長時間的高溫浸提脫脂會破壞蛋白質的結構和生物活性，導致蠶蛹蛋白得率低且腥臭味濃的弊端，提供了一種以具有良好除臭性能的蚯蚓糞和茶葉渣為原料，經高溫炭化制得吸附除臭劑，再將蠶蛹液氮研磨在表面活性劑和生物酶的作用下常溫脫脂，以堿溶酸析得到粗蛋白，最后經非極性溶劑和除臭劑的綜合處理精制，得到蠶蛹蛋白的方法。本發(fā)明常溫脫脂保持了蛋白質的結構和生物活性，解決了傳統(tǒng)高溫脫脂導致蛋白得率低的問題，通過超聲破碎粗蛋白使其中結合脂肪游離出來，在非極性溶劑和除臭劑的綜合作用下脫除游離脂肪，又彌補了以往制備中蠶蛹蛋白腥臭味濃的不足，是一種高效的制備方法。

為解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下所述的技術方案是：

（1）稱取400～500g蚯蚓糞和100～200g茶葉渣混合均勻，再加入兩者總質量1/3的蜂蜜，攪拌混合形成粘稠團狀物，將團狀物放入炭化爐中，在氮氣保護下于300～400℃下炭化2～3h，出料，得自制吸附除臭劑，備用；

（2）將1～2kg新鮮蠶蛹放入液氮研磨機中研磨成粉，將蠶蛹粉末裝入酶解罐中，同時向其中加入蠶蛹粉末體積3～4倍的蒸餾水，攪拌均勻形成懸浮液，再加入3～5g十二烷基苯磺酸鈉和懸浮液總質量5～8%的脂肪酶，置于超聲振蕩器中，超聲混合15～20min；

（3）待超聲混合后，將酶解罐放入恒溫箱中，在35～45℃下保溫酶解5～7h，將酶解產物轉入離心機中，以7000～8000r/min轉速離心分離10～15min，去除上清液，得下層沉淀，得脫脂蠶蛹粉末；

（4）將上述脫脂蠶蛹粉末均勻分散于其體積8～10倍質量濃度為2～3%氫氧化鈉溶液中，混合后移入高壓均質機中，以3～5MPa的壓力均質處理30～40min，再將均質液放入40～50℃水浴鍋中，攪拌浸提20～30min，過濾去除濾渣，得濾液；

（5）用濃度為1mol/L鹽酸調節(jié)上述濾液pH至4.0～5.0，并放入4～6℃冰水浴中靜置沉淀2～3h，過濾得沉淀物，按固液比為1:4，將沉淀物和丙酮混合后裝入超聲萃取儀中，同時稱取沉淀物等質量的備用自制吸附除臭劑，用紗布包裹后放入超聲萃取儀中，以300～400W功率超聲振蕩反應40～60min；

（6）反應結束后，將反應物用臥式離心機離心分離10～15min，去除上清液得濾渣，將濾渣置于真空干燥中干燥，并放入粉碎機中粉碎，過200目標準篩，包裝，即得蠶蛹蛋白。

本發(fā)明的應用方法：將本發(fā)明制得的蠶蛹蛋白作為食品添加劑添加至食品中，添加量為食品總質量3～5%，可有效補充氨基酸，提高人體的抗氧化性能，還能有效促進腸道對鋅、鐵、鎂、鈣元素的吸收，該蠶蛹蛋白溶解性好，營養(yǎng)價值高，值得推廣與使用。

本發(fā)明與其他方法相比，有益技術效果是：

（1）本發(fā)明制備步驟簡單，在常溫下進行脫脂，保持了蛋白質的結構和生物學活性，脫脂后的蠶蛹蛋白溶解性好，營養(yǎng)價值高；

（2）該蠶蛹蛋白溶解率達94.6%以上，收率達76.3%以上，顏色淺，無明顯腥臭味。

具體實施方式

首先稱取400～500g蚯蚓糞和100～200g茶葉渣混合均勻，再加入兩者總質量1/3的蜂蜜，攪拌混合形成粘稠團狀物，將團狀物放入炭化爐中，在氮氣保護下于300～400℃下炭化2～3h，出料，得自制吸附除臭劑，備用；然后將1～2kg新鮮蠶蛹放入液氮研磨機中研磨成粉，將蠶蛹粉末裝入酶解罐中，同時向其中加入蠶蛹粉末體積3～4倍的蒸餾水，攪拌均勻形成懸浮液，再加入3～5g十二烷基苯磺酸鈉和懸浮液總質量5～8%的脂肪酶，置于超聲振蕩器中，超聲混合15～20min；待超聲混合后，將酶解罐放入恒溫箱中，在35～45℃下保溫酶解5～7h，將酶解產物轉入離心機中，以7000～8000r/min轉速離心分離10～15min，去除上清液，得下層沉淀，得脫脂蠶蛹粉末；再將上述脫脂蠶蛹粉末均勻分散于其體積8～10倍質量濃度為2～3%氫氧化鈉溶液中，混合后移入高壓均質機中，以3～5MPa的壓力均質處理30～40min，再將均質液放入40～50℃水浴鍋中，攪拌浸提20～30min，過濾去除濾渣，得濾液；用濃度為1mol/L鹽酸調節(jié)上述濾液pH至4.0～5.0，并放入4～6℃冰水浴中靜置沉淀2～3h，過濾得沉淀物，按固液比為1:4，將沉淀物和丙酮混合后裝入超聲萃取儀中，同時稱取沉淀物等質量的備用自制吸附除臭劑，用紗布包裹后放入超聲萃取儀中，以300～400W功率超聲振蕩反應40～60min；反應結束后，將反應物用臥式離心機離心分離10～15min，去除上清液得濾渣，將濾渣置于真空干燥中干燥，并放入粉碎機中粉碎，過200目標準篩，包裝，即得蠶蛹蛋白。

實例1

首先稱取400g蚯蚓糞和100g茶葉渣混合均勻，再加入兩者總質量1/3的蜂蜜，攪拌混合形成粘稠團狀物，將團狀物放入炭化爐中，在氮氣保護下于300℃下炭化2h，出料，得自制吸附除臭劑，備用；然后將1kg新鮮蠶蛹放入液氮研磨機中研磨成粉，將蠶蛹粉末裝入酶解罐中，同時向其中加入蠶蛹粉末體積3倍的蒸餾水，攪拌均勻形成懸浮液，再加入3g十二烷基苯磺酸鈉和懸浮液總質量5%的脂肪酶，置于超聲振蕩器中，超聲混合15min；待超聲混合后，將酶解罐放入恒溫箱中，在35℃下保溫酶解5h，將酶解產物轉入離心機中，以7000r/min轉速離心分離10min，去除上清液，得下層沉淀，得脫脂蠶蛹粉末；再將上述脫脂蠶蛹粉末均勻分散于其體積8倍質量濃度為2%氫氧化鈉溶液中，混合后移入高壓均質機中，以3MPa的壓力均質處理30min，再將均質液放入40℃水浴鍋中，攪拌浸提20min，過濾去除濾渣，得濾液；用濃度為1mol/L鹽酸調節(jié)上述濾液pH至4.0，并放入4℃冰水浴中靜置沉淀2h，過濾得沉淀物，按固液比為1:4，將沉淀物和丙酮混合后裝入超聲萃取儀中，同時稱取沉淀物等質量的備用自制吸附除臭劑，用紗布包裹后放入超聲萃取儀中，以300W功率超聲振蕩反應40min；反應結束后，將反應物用臥式離心機離心分離10min，去除上清液得濾渣，將濾渣置于真空干燥中干燥，并放入粉碎機中粉碎，過200目標準篩，包裝，即得蠶蛹蛋白。

將本發(fā)明制得的蠶蛹蛋白作為食品添加劑添加至食品中，添加量為食品總質量3%，可有效補充氨基酸，提高人體的抗氧化性能，還能有效促進腸道對鋅、鐵、鎂、鈣元素的吸收，該蠶蛹蛋白溶解性好，營養(yǎng)價值高，值得推廣與使用。

實例2

首先稱取450g蚯蚓糞和150g茶葉渣混合均勻，再加入兩者總質量1/3的蜂蜜，攪拌混合形成粘稠團狀物，將團狀物放入炭化爐中，在氮氣保護下于350℃下炭化3h，出料，得自制吸附除臭劑，備用；然后將2kg新鮮蠶蛹放入液氮研磨機中研磨成粉，將蠶蛹粉末裝入酶解罐中，同時向其中加入蠶蛹粉末體積4倍的蒸餾水，攪拌均勻形成懸浮液，再加入4g十二烷基苯磺酸鈉和懸浮液總質量7%的脂肪酶，置于超聲振蕩器中，超聲混合18min；待超聲混合后，將酶解罐放入恒溫箱中，在40℃下保溫酶解6h，將酶解產物轉入離心機中，以7500r/min轉速離心分離13min，去除上清液，得下層沉淀，得脫脂蠶蛹粉末；再將上述脫脂蠶蛹粉末均勻分散于其體積9倍質量濃度為3%氫氧化鈉溶液中，混合后移入高壓均質機中，以4MPa的壓力均質處理35min，再將均質液放入45℃水浴鍋中，攪拌浸提25min，過濾去除濾渣，得濾液；用濃度為1mol/L鹽酸調節(jié)上述濾液pH至4.5，并放入5℃冰水浴中靜置沉淀3h，過濾得沉淀物，按固液比為1:4，將沉淀物和丙酮混合后裝入超聲萃取儀中，同時稱取沉淀物等質量的備用自制吸附除臭劑，用紗布包裹后放入超聲萃取儀中，以350W功率超聲振蕩反應50min；反應結束后，將反應物用臥式離心機離心分離13min，去除上清液得濾渣，將濾渣置于真空干燥中干燥，并放入粉碎機中粉碎，過200目標準篩，包裝，即得蠶蛹蛋白。

將本發(fā)明制得的蠶蛹蛋白作為食品添加劑添加至食品中，添加量為食品總質量4%，可有效補充氨基酸，提高人體的抗氧化性能，還能有效促進腸道對鋅、鐵、鎂、鈣元素的吸收，該蠶蛹蛋白溶解性好，營養(yǎng)價值高，值得推廣與使用。

實例3

首先稱取500g蚯蚓糞和200g茶葉渣混合均勻，再加入兩者總質量1/3的蜂蜜，攪拌混合形成粘稠團狀物，將團狀物放入炭化爐中，在氮氣保護下于400℃下炭化3h，出料，得自制吸附除臭劑，備用；然后將2kg新鮮蠶蛹放入液氮研磨機中研磨成粉，將蠶蛹粉末裝入酶解罐中，同時向其中加入蠶蛹粉末體積4倍的蒸餾水，攪拌均勻形成懸浮液，再加入5g十二烷基苯磺酸鈉和懸浮液總質量8%的脂肪酶，置于超聲振蕩器中，超聲混合20min；待超聲混合后，將酶解罐放入恒溫箱中，在45℃下保溫酶解7h，將酶解產物轉入離心機中，以8000r/min轉速離心分離15min，去除上清液，得下層沉淀，得脫脂蠶蛹粉末；再將上述脫脂蠶蛹粉末均勻分散于其體積10倍質量濃度為3%氫氧化鈉溶液中，混合后移入高壓均質機中，以5MPa的壓力均質處理40min，再將均質液放入50℃水浴鍋中，攪拌浸提30min，過濾去除濾渣，得濾液；用濃度為1mol/L鹽酸調節(jié)上述濾液pH至5.0，并放入6℃冰水浴中靜置沉淀3h，過濾得沉淀物，按固液比為1:4，將沉淀物和丙酮混合后裝入超聲萃取儀中，同時稱取沉淀物等質量的備用自制吸附除臭劑，用紗布包裹后放入超聲萃取儀中，以400W功率超聲振蕩反應60min；反應結束后，將反應物用臥式離心機離心分離15min，去除上清液得濾渣，將濾渣置于真空干燥中干燥，并放入粉碎機中粉碎，過200目標準篩，包裝，即得蠶蛹蛋白。

將本發(fā)明制得的蠶蛹蛋白作為食品添加劑添加至食品中，添加量為食品總質量5%，可有效補充氨基酸，提高人體的抗氧化性能，還能有效促進腸道對鋅、鐵、鎂、鈣元素的吸收，該蠶蛹蛋白溶解性好，營養(yǎng)價值高，值得推廣與使用。