專利名稱：間充質干細胞過濾分離器的制作方法
技術領域：
本實用新型屬于醫(yī)療器具，特別是涉及一種從人體或動物胎盤、羊膜、臍帶等組織中消化、分離、收集間充質干細胞的裝置及其使用方法。
背景技術：
隨著干細胞與組織工程技術研究、應用的深入發(fā)展，干細胞的分離制備作為該領域關鍵技術之一而日益受到重視。迄今用于醫(yī)療領域的白細胞、腫瘤細胞的分離裝置發(fā)展較快，但間充質干細胞的分離設備很少，目前應用最多的間充質干細胞分離裝置是細胞篩網，一般選用的是100目 300目的不銹鋼篩網，通過搖晃、攪拌和震蕩來達到細胞與消化后的組織塊分離的目的，比如人胎盤間充質干細胞的分離，就是先用膠原酶消化新鮮人胎盤組織，再用這種不銹鋼篩網篩選消化下來的單個細胞或細胞簇。這種間充質干細胞分離方法的缺陷是①費時費力；②分離效率低；③干細胞成活率低；④干細胞收獲量少；⑤由于長時間暴露操作，干細胞污染機會大大增加。因而，現(xiàn)有間充質干細胞分離制備技術需要改進。
發(fā)明內容本實用新型的目的就是為了克服以上間充質干細胞分離制備方法的缺陷。實現(xiàn)上述目的的本實用新型的技術方案為干細胞分離制備器由打氣球1、除菌過濾器(內置0. 22 μ m濾膜)2、可高壓滅菌的橡膠塞3、空氣壓縮室4、圓錐形不銹鋼篩網 (100目 300目)5、除菌過濾器(內置0. 22 μ m濾膜)6、干細胞收集瓶7和穩(wěn)壓口 8組成。 打氣球通過自身的橡膠導管與除菌過濾器連接，除菌過濾器的另一端穿過并密封固定在開孔的可高壓滅菌的橡膠塞上。橡膠塞密封安裝在空氣壓縮室內，空氣壓縮室的另一端通過螺絲與干細胞收集瓶連接。圓錐形不銹鋼篩網置于干細胞收集瓶內，環(huán)篩網網口并與之無縫連接的為一圈不銹鋼片，其上下各有一圈密封墊。當空氣壓縮室與干細胞收集瓶擰緊后， 不銹鋼篩網可固定在干細胞收集瓶內。干細胞收集瓶由硼硅酸鹽玻璃制成，可進行高壓蒸氣滅菌。不銹鋼篩網和干細胞收集瓶可方便地進行拆卸清洗。干細胞收集瓶的側面有一個穩(wěn)壓口，通過可高壓的硅膠管與另一除菌過濾器連接，用于干細胞分離制備器工作時平衡容器內外氣壓。本實用新型的技術方案具有的優(yōu)點包括①各個部件都能方便地進行拆卸、洗滌和滅菌；②獨特的圓錐形的細胞篩網設計，既減小了其上流體的表面張力，又增大了承載液體的表面積、體積和液體下層壓強，更有利于液體流下，顯著提高了間充質干細胞的過濾效率；③間充質干細胞分離制備操作的時間大大縮短，減少了污染發(fā)生的機會，提高了間充質干細胞成活率；④處理量大，且分離制備的間充質干細胞數(shù)量多、質量好；⑤操作方便，價格低廉，便于推廣應用。

[0006]附圖是本實用新型的剖視圖。圖中1.打氣球；2.除菌過濾器(內置0.22 μ m濾膜)；3.可高壓滅菌的橡膠塞； 4.空氣壓縮室；5.圓錐形不銹鋼篩網(100目 300目)；6.除菌過濾器(內置0.22 μ m濾膜)；7.干細胞收集瓶；8.穩(wěn)壓口。
具體實施方式
本實用新型的安裝使用。干細胞分離制備器由打氣球1、除菌過濾器(內置0. 22 μ m濾膜)2、可高壓滅菌的橡膠塞3、空氣壓縮室4、圓錐形不銹鋼篩網(100目 300目)5、除菌過濾器(內置0. 22 μ m 濾膜)6、干細胞收集瓶7和穩(wěn)壓口 8組成。使用前，可將整個裝置分為3部分①打氣球1 ； ②連接好的除菌過濾器2和橡膠塞3 ；③連接好的除①和②以外的部分，包括空氣壓縮室4、 圓錐形不銹鋼篩網(100目 300目)5、除菌過濾器(內置0. 22 μ m濾膜)6、干細胞收集瓶 7和穩(wěn)壓口 8。將②和③部分進行高壓蒸氣滅菌(12rC，30min)。在無菌條件下，通過無菌操作，將經過酶解消化后的用于提取間充質干細胞的原代細胞與組織的混合物加入圓錐形不銹鋼篩網5內(注意加入的細胞與組織的混合物不能溢出篩網)，然后將②和③兩部分進行連接，再將打氣球1和除菌過濾器(內置0. 22 μ m濾膜)2進行連接。使用打氣球1打氣，細胞與組織的混合物便在自身質量和外界壓力作用下進行過濾分離。待過濾分離完后， 擰開空氣壓縮室4和干細胞收集瓶7之間的螺絲，取出圓錐形不銹鋼篩網5，將干細胞收集瓶7內的間充質干細胞進行傳代培養(yǎng)或利用其他手段進一步純化。上述技術方案僅體現(xiàn)了本實用新型技術方案的優(yōu)選技術方案，本技術領域的技術人員對其中某些部分所可能作出的一些變動均體現(xiàn)了本實用新型的原理，屬于本實用新型的保護范圍之內。
權利要求1.本實用新型公開了一種間充質干細胞過濾分離器，其特征是包括打氣球、除菌過濾器、橡膠塞、空氣壓縮室、不銹鋼篩網、干細胞收集瓶和穩(wěn)壓口，打氣球通過自身的橡膠導管與一除菌過濾器連接，該除菌過濾器的另一端穿過并密封固定在開孔的橡膠塞上，橡膠塞密封安裝在空氣壓縮室內，空氣壓縮室的另一端通過螺絲與干細胞收集瓶連接，不銹鋼篩網置于干細胞收集瓶內，環(huán)篩網網口并與之無縫連接的為一圈不銹鋼片，其上下各有一圈密封墊，當空氣壓縮室與干細胞收集瓶擰緊后，不銹鋼篩網可固定在干細胞收集瓶內，不銹鋼篩網和干細胞收集瓶可方便地進行拆卸清洗，干細胞收集瓶的側面有一個穩(wěn)壓口，通過可高壓的硅膠管與另一除菌過濾器連接，用于干細胞分離制備器工作時平衡容器內外氣壓。
2.根據(jù)權利要求1所述的間充質干細胞過濾分離器，其特征在于除菌過濾器內置的濾膜為 0. 22 μ mo
3.根據(jù)權利要求1所述的間充質干細胞過濾分離器，其特征在于圓錐形不銹鋼篩網的規(guī)格為100目 300目。
4.根據(jù)權利要求1所述的間充質干細胞過濾分離器，其特征在于不銹鋼篩網的形狀為圓錐形。
5.根據(jù)權利要求1所述的間充質干細胞過濾分離器，其特征在于篩網的制作材料為不銹鋼。
6.根據(jù)權利要求1所述的間充質干細胞過濾分離器，其特征在于干細胞收集瓶的制作材料為硼硅酸鹽玻璃。
專利摘要本實用新型屬于醫(yī)療器具，是一種間充質干細胞過濾分離器，由打氣球、除菌過濾器、橡膠塞、空氣壓縮室、圓錐形不銹鋼篩網、干細胞收集瓶和穩(wěn)壓口組成。其主要特征和優(yōu)點是①各個部件都能方便地進行拆卸、洗滌和滅菌；②獨特的圓錐形的細胞篩網設計，減小了其上流體的表面張力，增大了承載液體的表面積、體積和下層壓強，有利于液體流下，顯著提高了間充質干細胞的過濾效率；③間充質干細胞分離制備操作時間縮短，減少了污染發(fā)生的機會，提高了間充質干細胞成活率；④處理量大，且分離制備的間充質干細胞數(shù)量多、質量好；⑤操作方便，價格低廉?？捎糜趶娜梭w或動物胎盤、羊膜、臍帶等組織中分離制備間充質干細胞供臨床治療或實驗室研究。
文檔編號C12M1/00GK202107694SQ20112013940
公開日2012年1月11日 申請日期2011年5月5日 優(yōu)先權日2011年5月5日
發(fā)明者孫晉偉, 張艷梅, 王佃亮 申請人:中國人民解放軍第二炮兵總醫(yī)院