專利名稱：一種鞘氨醇單胞菌dx-t3-03菌株及其提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于鞘氨醇單胞菌菌株領(lǐng)域，特別涉及一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株 及其提取方法。
背景技術(shù)：
隨著采礦業(yè)的發(fā)展和重金屬在電鍍、冶金、化工和制藥業(yè)等方面的應(yīng)用，重金屬污 染日趨嚴(yán)重。由于重金屬在土壤中難降解、難遷移、危害期長(zhǎng)等特點(diǎn)，已使得土壤重金屬污 染成為國(guó)內(nèi)外普遍關(guān)注的環(huán)境問(wèn)題之一。其中重金屬鋅既是重要的營(yíng)養(yǎng)元素，也是污染元 素。鋅曾被譽(yù)為“生命之花”，是維持機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育、新陳代謝的重要物質(zhì)。我國(guó)是產(chǎn)鋅 大國(guó)，最大的消費(fèi)領(lǐng)域是鍍鋅工業(yè)，消費(fèi)量約占鋅總產(chǎn)量的30% 40%。除此之外，其它工業(yè) 產(chǎn)生的含鋅廢水也不容忽視。許多實(shí)驗(yàn)和流行病學(xué)調(diào)查已經(jīng)證實(shí)，如果鋅在人體內(nèi)含量過(guò) 高，將會(huì)抑制吞噬細(xì)胞的活性和殺菌力，從而降低人體的免疫功能，對(duì)疾病易感性增加。最 近的科學(xué)研究表明，攝入過(guò)量的鋅，會(huì)對(duì)人體造成一定的傷害，甚至可引起中毒，以至死亡； 同時(shí)鋅中毒會(huì)導(dǎo)致胰腺、腎和體內(nèi)多元系統(tǒng)(Muitisystem)功能紊亂甚至死亡。對(duì)于重金屬的處理，由于傳統(tǒng)的物理或化學(xué)方法常伴隨二次污染，且運(yùn)行費(fèi)用高， 操作復(fù)雜，已越來(lái)越不適宜現(xiàn)代污染治理的需要。近年來(lái)，微生物在重金屬污染治理的潛在 應(yīng)用前景，使得其在處理重金屬污染問(wèn)題上成為國(guó)內(nèi)外一個(gè)新型的研究方向。因此，篩選新 的具有高抗性能力的微生物并研究它們的抗性機(jī)理也成為當(dāng)前的主要任務(wù)之一。苯酚是造紙、煉油、制藥、焦化等工業(yè)過(guò)程中產(chǎn)生的一種有機(jī)污染物，會(huì)對(duì)動(dòng)、植物 產(chǎn)生有毒甚至致命的作用。大量酚類物質(zhì)及其衍生物在土壤和水體中的排放和積累導(dǎo)致了 生態(tài)環(huán)境的日趨惡化，許多國(guó)家已將其列入環(huán)境優(yōu)先控制污染物的黑名單中。近年來(lái)，隨著 生物新技術(shù)的發(fā)展，利用微生物降解法處理高濃度含酚廢水是一種經(jīng)濟(jì)高效且不會(huì)產(chǎn)生二 次污染的方法，相關(guān)方面的研究越來(lái)越受到人們的關(guān)注。但含酚工業(yè)廢水中往往含有較高 濃度的重金屬離子，而高濃度重金屬離子的存在會(huì)抑制微生物對(duì)苯酚的生物降解。因此，獲 得有一定耐受重金屬能力的苯酚降解菌在含酚工業(yè)廢水的生物處理中將具有突出的應(yīng)用 潛力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株及其提取方 法，該菌株對(duì)鋅的耐受性高達(dá)4mM/L的同時(shí)，苯酚的降解率高達(dá)88 %，營(yíng)養(yǎng)要求不高，對(duì)苯 酚有較好的降解能力，在生物治理含酚工業(yè)廢水和重金屬雙重污染中具有重要應(yīng)用潛力； 提取方法簡(jiǎn)便快捷，成本低，對(duì)環(huán)境友好。本發(fā)明的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株，其特征在于該菌株對(duì)鋅具有高抗性 并且具有降解苯酚能力。本發(fā)明的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，包括(1)定向馴化
在礦區(qū)取土制成土壤懸液按5wt%的接入量接種于無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，以梯度壓力 式馴化法馴化2個(gè)月；(2)菌株的富集分離和純化將上述馴化后的樣品靜置，取上層水樣作梯度稀釋，然后每種稀釋濃度分別取ImL 菌液于接種到固體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)，如此反復(fù)多次確保長(zhǎng)出純的單一菌株，再接種到 斜面培養(yǎng)基，即可。所述步驟(1)中的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基為(NH4)2SO410. OgjKH2PO4 7. 5g,Na2HPO4 10. Og, FeCl3 0. 0125g, MgSO4 · 7H20 0. 015g，蒸餾水 IOOOmL, pH = 6· 5 7· 0。所述步驟(1)中的梯度壓力式馴化法為在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，同時(shí)加入梯度濃度的 濾菌苯酚和濾菌Zn2+溶液，使培養(yǎng)基中同時(shí)含有苯酚和Zn2+且兩種物質(zhì)濃度均依次升高，即 苯酚 300、400、500、600、700、800、900、100011^/1，2112+濃度0· 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5、 4. OmM/L,改變濃度的間隔時(shí)間為6 7d，于30 35°C，振蕩速率150r/min條件下進(jìn)行馴 化培養(yǎng)。所述步驟⑵中的梯度稀釋為ICT1 ICTki的梯度稀釋。所述步驟(2)中的固體培養(yǎng)基為富集液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1. 5%的瓊 脂，IX IO5Pa滅菌30min，冷卻后而形成的培養(yǎng)基，其中富集液體培養(yǎng)基為蛋白胨0. 25g，胰 蛋白胨 0. 25g，酵母粉 0. 5g，葡萄糖 0. 5g，MgSO4 · 7H20 0. 03g，蒸餾水 IOOOmL, pH = 6. 5 7. 0。斜面培養(yǎng)基為將固體培養(yǎng)基加熱溶化，取干凈的試管，試管中倒入約5mL固體培養(yǎng)基， 將試管口端放在玻璃棒上，使管內(nèi)培養(yǎng)基形成斜面而形成。所述步驟(2)中富集培養(yǎng)是指將菌液于接種到富集培養(yǎng)基后于30°C培養(yǎng)箱中培 養(yǎng)48h，挑取形態(tài)清晰的單一菌落，編號(hào)，在固體培養(yǎng)基上劃線，將培養(yǎng)皿倒置于30°C培養(yǎng) 箱中培養(yǎng)48h，再觀察結(jié)果，在電子顯微鏡下觀察菌落形態(tài)，反復(fù)2 4次，確保長(zhǎng)出純的單 一菌株。鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的16S rDNA序列如下CCAATGGCGGCTGCCTACACATGCAGTCGAACGAGATCTTCGGGTCTAGTGGCGCACGGGTGCGTAACG CGTGGGAATCTGCCCTTTGGTTCGGAATAACAGTTGGAAACGACTGCTAATACCGGATGATGACGAAAGTCCAAAGA TTTATCGCCAGAGGATGAGCCCGCGTAGGATTAGCTAGTTGGTGTGGTAAAGGCGCACCAAGGCGACGATCCTTAGC TGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATAT TGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCTTAGGGTTGTAAAGCTCTTTTACCC GGGATGATAATGACAGTACCGGGAGAATAAGCTCCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGAGCT AGCGTTGTTCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCGGCTTTGTAAGTTAGAGGTGAAAGCCTGGAGCTCAAC TCCAGAACTGCCTTTAAGACTGCATCGCTTGAATCCAGGAGAGGTGAGTGGAATTCCGAGTGTAGAGGTGAAATTCG TAGATATTCGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCACTGGACTGGTATTGACGCTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGA GCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGATAACTAGCTGTCCGGGGACTTGGTCTTTGGGT GGCGCAGCTAACGCATTAAGTTATCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCC TGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCAGCGTTTGACATGTCCGGACGAT TTCCAGAGATGGATCTCTTCCCTTCGGGGACTGGAACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGAT GTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCTTTAGTTACCATCATTTAGTTGGGGACTCTAAAGGAACCGC CGGTGATAAGCCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGCGCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGGTGACAGTGGGCAGCAAACTCGCGAGAGTGCGCTAATCTCCAAAAGCCGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTG CAACTCGAGAGCATGAAGGCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCAGGCCTTGT ACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTTGGGTTCACCCGAAGGCGTTGCGCTAACTCGCAAGAGAGGCAGGCGACCA CGGTGCTAGCGTGT。菌株16S rDNA的基因全序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中分析比較，鑒定為鞘氨醇單胞菌，鑒 定結(jié)果見(jiàn)圖 2，其系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)見(jiàn)圖 3，與 Sphingomonas aquatilis strain JSS-7 (AF131295) 同源性高達(dá) 99%，命名為 Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03。所述的鞘氨醇單胞菌Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03為革蘭氏陰性短桿菌， 好氧，菌體大小約為(0. 4 0.6) μ mX (1.0 2.0) μ m，其電鏡掃面見(jiàn)圖4;在固體培養(yǎng)基 中菌落呈圓形，凸起，乳白略帶淡黃色，表面光滑濕潤(rùn)，不透明，邊緣規(guī)則整齊，極易挑起；最 適生長(zhǎng)條件PH為6. 7左右，溫度為30 35°C，搖床震蕩速率為150r/min。該鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp. strain DX-T3-03)可以有效地對(duì)重金屬鋅進(jìn) 行生物吸附和生物積累，能夠在最高濃度為55mM/L鋅濃度固體平板中生長(zhǎng)，并且12h培養(yǎng) 后就能在25mM/L鋅濃度的培養(yǎng)液中良好生長(zhǎng)。該鞘氨醇單胞菌(Sphingomonassp. Strain DX-T3-03)能將濃度為 0. 2、0. 4、 0. 6g/L的苯酚，在24h內(nèi)幾乎完全降解；苯酚濃度0. 8、1. Og/L時(shí)，能在36h降解率達(dá)70% 左右；要完全降解1. 2g/L苯酚，還需要一定時(shí)間，說(shuō)明該菌株對(duì)苯酚有較好的降解能力，并 且加入4mM/LZn2+并不會(huì)對(duì)該菌降解苯酚產(chǎn)生明顯抑制作用，這對(duì)菌株在含重金屬污染的 含酚工業(yè)廢水的處理應(yīng)用中的作用十分重要。Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03具有降解苯酚及抗重金屬的雙重功效，由于 重金屬與污染物的共存抑制了污染物降解菌的降解能力。因此，在重金屬污染的極端環(huán)境 中，只具有降解有機(jī)物污染單一能力的細(xì)菌將難以發(fā)揮其降解效能，而此菌株的篩選為利 用耐重金屬的苯酚降解菌進(jìn)行生物修復(fù)提供了參考。有益效果本發(fā)明的菌株對(duì)鋅的耐受性高達(dá)4mM/L的同時(shí)，苯酚的降解率高達(dá)88%，營(yíng)養(yǎng)要 求不高，對(duì)苯酚有較好的降解能力，在生物治理含酚工業(yè)廢水和重金屬雙重污染中具有重 要應(yīng)用潛力；提取方法簡(jiǎn)便快捷，成本低，對(duì)環(huán)境友好。


圖1為苯酚的分子結(jié)構(gòu)式；圖 2 為 Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03 的 16S rDNA 序列的鑒定結(jié)果；圖 3 為 Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03 遺傳發(fā)育樹(shù)圖；圖 4 為 Sphingomonas sp. Strain DX-T3-03 的掃描電鏡圖；圖5為添加4mM/L重金屬鋅時(shí)細(xì)菌對(duì)不同濃度苯酚降解率圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定
6的范圍。實(shí)施例1(1)取某礦山尾礦壩取土制成土壤懸液按5襯％的接入量接種于以苯酚為唯一 碳源的含鋅無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，其中無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基為(NH4)2SO4 10. 0g, KH2PO4 7. 5g, Na2HPO4 10. 0g, FeCl3 0. 0125g，MgSO4 · 7H20 0. 015g，蒸餾水 lOOOmL，pH = 6. 5 7. 0。同時(shí)加入 梯度濃度的濾菌苯酚和濾菌Zn2+溶液，使培養(yǎng)基中同時(shí)含有苯酚和Zn2+且兩種物質(zhì)濃度均 依次升高，為苯酚 500、600、700、800、900、1000mg/L，Zn2+濃度 0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5,3. 0、 3. 5,4. OmM/L，改變濃度的間隔時(shí)間為6 7d，于30 35°C，振蕩速率150r/min條件下進(jìn) 行馴化培養(yǎng)2個(gè)月；(2)取馴化2個(gè)月后的樣品，靜置30分鐘，取上層水樣lmL，作10—1 10,梯度稀 釋。每種稀釋濃度分別取ImL菌液于培養(yǎng)皿內(nèi)，倒入固體培養(yǎng)基后將培養(yǎng)皿放在桌上，來(lái)回 轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿后，將培養(yǎng)皿倒置于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，挑取形態(tài)清晰的單一菌落，編號(hào)， 在固體培養(yǎng)基上劃線，將培養(yǎng)皿倒置于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，再觀察結(jié)果，反復(fù)幾次，并 在電子顯微鏡下觀察，確保是純的單一菌株后，將分離出的菌種接種到斜面培養(yǎng)基上，4°C 下保存于冰箱中待后續(xù)進(jìn)行降解試驗(yàn)。其中固體培養(yǎng)基為富集液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入質(zhì)量 分?jǐn)?shù)1. 5%的瓊脂，1 X IO5Pa滅菌30min，冷卻后而形成的培養(yǎng)基，其中富集液體培養(yǎng)基為蛋 白胨0. 25g，胰蛋白胨0. 25g，酵母粉0. 5g，葡萄糖0. 5g，MgSO4 ·7Η20 0. 03g,蒸餾水IOOOmL, pH = 6. 5 7. 0。斜面培養(yǎng)基為將固體培養(yǎng)基加熱溶化，取干凈的試管，試管中倒入約5mL 固體培養(yǎng)基，將試管口端放在玻璃棒上，使管內(nèi)培養(yǎng)基形成斜面而形成；(3)分別挑取經(jīng)分離純化后的單一菌落于無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，各無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中均 含有0. 6g/L的苯酚和4mM/L Zn2+，在30°C、150r/min、250mL錐形瓶中裝填量IOOmL的條件 下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為24h，培養(yǎng)后通過(guò)電子顯微鏡觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況以及測(cè)定溶液中苯 酚的剩余濃度，從而確定出具有抗鋅特性的苯酚高效降解菌株。本菌株在初始pH值為6. 7左右，溫度為30°C，振蕩速率為150r/min，250mL錐形瓶 的裝液量為IOOmL的條件下，苯酚初始濃度為0. 6g/L，重金屬Zn2+為4mM/L培養(yǎng)時(shí)間24h， 然后利用4-氨基安替比林法對(duì)苯酚濃度進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定波長(zhǎng)為510nm;苯酚的降解率高達(dá) 88%。
權(quán)利要求
一種鞘氨醇單胞菌DX T3 03菌株，其特征在于該菌株對(duì)鋅具有高抗性并且具有降解苯酚能力；其16S rDNA序列如下CCAATGGCGGCTGCCTACACATGCAGTCGAACGAGATCTTCGGGTCTAGTGGCGCACGGGTGCGTAACGCGTGGGAATCTGCCCTTTGGTTCGGAATAACAGTTGGAAACGACTGCTAATACCGGATGATGACGAAAGTCCAAAGATTTATCGCCAGAGGATGAGCCCGCGTAGGATTAGCTAGTTGGTGTGGTAAAGGCGCACCAAGGCGACGATCCTTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCTTAGGGTTGTAAAGCTCTTTTACCCGGGATGATAATGACAGTACCGGGAGAATAAGCTCCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGAGCTAGCGTTGTTCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCGGCTTTGTAAGTTAGAGGTGAAAGCCTGGAGCTCAACTCCAGAACTGCCTTTAAGACTGCATCGCTTGAATCCAGGAGAGGTGAGTGGAATTCCGAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTCGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCACTGGACTGGTATTGACGCTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGATAACTAGCTGTCCGGGGACTTGGTCTTTGGGTGGCGCAGCTAACGCATTAAGTTATCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCTGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCAGCGTTTGACATGTCCGGACGATTTCCAGAGATGGATCTCTTCCCTTCGGGGACTGGAACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCTTTAGTTACCATCATTTAGTTGGGGACTCTAAAGGAACCGCCGGTGATAAGCCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGCGCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGGTGACAGTGGGCAGCAAACTCGCGAGAGTGCGCTAATCTCCAAAAGCCGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTGCAACTCGAGAGCATGAAGGCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCAGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTTGGGTTCACCCGAAGGCGTTGCGCTAACTCGCAAGAGAGGCAGGCGACCACGGTGCTAGCGTGT。
2.一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，包括(1)定向馴化在礦區(qū)取土制成土壤懸液按5wt%的接入量接種于無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，以梯度壓力式馴 化法馴化2個(gè)月；(2)菌株的富集分離和純化將上述馴化后的樣品靜置，取上層水樣作梯度稀釋，然后每種稀釋濃度分別取ImL菌 液于接種到固體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)；將培養(yǎng)的純的單一菌株，接種到斜面培養(yǎng)基，即可。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，其特征在于 所述步驟(1)中的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基為(NH4) 2504 10. 0g, KH2PO4 7. 5g, Na2HPO4 10. 0g, FeCl3 0. 0125g, MgSO4 · 7H20 0. 015g,蒸餾水 IOOOmL, pH = 6· 5 7· 0。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，其特征在 于所述步驟(1)中的梯度壓力式馴化法為在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，同時(shí)加入梯度濃度的濾菌 苯酚和濾菌Zn2+溶液，使培養(yǎng)基中同時(shí)含有苯酚和Zn2+且兩種物質(zhì)濃度均依次升高，即苯酚 300、400、500、600、700、800、900、1000mg/L，Zn2+ 濃度 0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5、 4. OmM/L,改變濃度的間隔時(shí)間為6 7d，于30 35°C，振蕩速率150r/min條件下進(jìn)行馴化培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，其特征在于 所述步驟⑵中的梯度稀釋為10—1 10,的梯度稀釋。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，其特征在 于所述步驟(2)中的固體培養(yǎng)基為富集液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1. 5%的瓊脂， IX IO5Pa滅菌30min，冷卻后而形成的培養(yǎng)基，其中富集液體培養(yǎng)基為蛋白胨0. 25g，胰蛋白 胨 0. 25g，酵母粉 0. 5g，葡萄糖 0. 5g，MgSO4 · 7H20 0. 03g，蒸餾水 lOOOmL，pH = 6. 5 7. 0。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株的提取方法，其特征在于 所述步驟(2)中富集培養(yǎng)是指將菌液于接種到富集培養(yǎng)基后于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，挑 取形態(tài)清晰的單一菌落，編號(hào)，在固體培養(yǎng)基上劃線，將培養(yǎng)皿倒置于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48h，再觀察結(jié)果，在電子顯微鏡下觀察菌落形態(tài)，反復(fù)2 4次，確保長(zhǎng)出純的單一菌株。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鞘氨醇單胞菌DX-T3-03菌株及其提取方法，該菌株對(duì)鋅具有高抗性并且具有降解苯酚能力。本發(fā)明的菌株從礦山尾礦壩土壤中分離提取，對(duì)鋅的耐受性高達(dá)4mM/L的同時(shí)，苯酚的降解率高達(dá)88％，營(yíng)養(yǎng)要求不高，在生物治理含酚工業(yè)廢水和重金屬雙重污染中具有重要應(yīng)用潛力；提取方法簡(jiǎn)便快捷，成本低，對(duì)環(huán)境友好。
文檔編號(hào)C12R1/01GK101974471SQ20101054158
公開(kāi)日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月12日
發(fā)明者付瑾, 張濤, 張萌, 張 誠(chéng), 柳建設(shè), 王志樓, 王慧萍, 謝學(xué)輝, 鄭青鳳 申請(qǐng)人:東華大學(xué)