專利名稱：益生菌雙層包埋微囊工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種益生菌雙層包埋微囊工藝。
背景技術(shù)：
目前市場上的益生菌產(chǎn)品層出不窮，但大多數(shù)的益生菌產(chǎn)品是未經(jīng)包埋處理的益生菌產(chǎn)品，例如酸奶、益生菌口服液或營養(yǎng)液、凍干菌粉等，由于人體的胃酸、膽汁酸有殺菌作用，這些益生菌進入人體后會失活，而不能發(fā)揮其理想的療效，且不耐久存。已有技術(shù)中已有幾種對益生菌產(chǎn)品的包埋技術(shù)，其中一種是巨包埋型益生菌，它是利用硬膠囊包裹，它能保護乳酸菌通過胃部，但是硬膠囊不易溶解、不耐久存；還有一種微膠囊包埋型益生菌產(chǎn)品，這種微膠囊包埋型耐久存、耐胃酸，但是熱穩(wěn)定性不好，水活度對它影響大，同時凝膠不易溶解，在腸道中需要4-6小時左右才能溶解釋出；CNO1107518.X公開了一種活性雙歧聯(lián)菌株耐酸腸溶微囊，其復(fù)合腸溶性材料為漂白蟲膠、羧甲基纖維素硬酯酸鎂；或鄰苯二甲酸醋酸纖維素、鄰苯二甲酸二乙酯、司盤80、硬酯酸等，其制備方法是先將凍干菌于包衣鍋中嘖霧造粒，再以菌粉微粒為囊心物，以復(fù)合腸溶性材料為囊衣液，通過流化噴霧法制得；其囊心物和囊衣液的用量比例為2～3∶1～1.5(重量/體積)。這種方法較好地解決了耐久存、耐胃酸的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供另一種耐久存、耐胃酸、耐膽汁酸、能在到達小腸后立即溶解釋放、吸附腸道黏膜定殖，且工藝更加簡單、成本更低的益生菌的雙層包埋微囊工藝。
本發(fā)明包括以下步驟①按已有技術(shù)將益生菌混合發(fā)酵培養(yǎng)、微過濾離心集菌；②菌奶蛋白包埋液的制備將益生菌濃縮液75％、奶蛋白15％、囊芯輔料聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纖維寡糖10％，在溫度30℃以下、濕度55％以下、潔凈度10萬級的環(huán)境中進行攪拌混合30分鐘，均質(zhì)20分鐘；③制備腸溶性膠體包膜液其復(fù)合材料為變性淀粉12-20％、阿拉伯膠4-8％、聚乙二醇6-10％，海藻酸鈉4-8％，殼聚糖3-5％，60％的濃度為0.9％氯化鈉混合溶解；高速剪切乳化分散，過100目篩，超聲波超聲15min制成混懸腸溶膠包膜液；④流化噴霧法制備包埋微囊按菌奶蛋白包埋液與腸溶性膠體的比為1∶1，控制液速5mL/min，進口溫度35℃，出口溫度30℃，噴嘴霧化壓力0.4MPa，干燥空氣流量400m3/h，再經(jīng)冷凍干燥后制成成品。
制成的微囊菌粉為奶白色或奶黃色細顆粒粉末，再用這些菌粉可以制備膠囊劑、沖劑、片劑等產(chǎn)品。
所述益生菌可以為兩岐雙岐桿菌、嬰兒雙岐桿菌、長雙岐桿菌、短雙岐桿菌、青春雙岐桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱鏈球菌.
這種雙層包埋微囊工藝，益生菌外層的蛋白質(zhì)及腸溶性膠體的溶解度會隨水溶液的pH值而改變，最外層的膠體在胃酸中凝結(jié)，保護益生菌使它不會被胃酸、膽汁酸殺死而失活；當益生菌進入較高pH值的十二指腸時，腸溶性膠體則會自然分解溶化，釋放出益生菌，同時，蛋白質(zhì)層在小腸中還能緩沖膽汁及膽酸對菌體未復(fù)活前可能之傷害，一方面幫助益生菌附著在腸壁絨毛上，同時提供益生菌繁殖所需營養(yǎng)，藉此生長定植。另外，該包覆層還能有效隔離益生菌與外界直接接觸，對溫度以及空氣中水分較不敏感，因此活菌濃度可以長久維持而不衰減。故這種方法生產(chǎn)的益生菌制劑能在常溫下長期保存、進入人體后不會失活，能發(fā)揮理想的療效，工藝更加簡單、成本更低。
具體實施例方式
實施例1雙歧桿菌微囊的制備1.按已有技術(shù)進行混合發(fā)酵培養(yǎng)雙歧桿菌、微過濾離心集菌；2.菌奶蛋白包埋液的制備將雙歧桿菌濃縮液75克、奶蛋白15克、囊芯輔料(聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纖維寡糖)10克在溫度30℃以下、濕度55％以下、潔凈度10萬級的環(huán)境中進行攪拌混合30分鐘，均質(zhì)20分鐘；3.制備腸溶膠包膜液變性淀粉16克、阿拉伯膠6克，聚乙二醇8克，海藻酸鈉6克，殼聚糖4克，加至60毫升濃度為0.9％氯化鈉溶液中，混勻，高速剪切乳化分散，過100目篩，超聲波超聲15min制成混懸腸溶膠包膜液。
4.流化噴霧法制備包埋微囊按菌奶蛋白包埋液與腸溶膠包膜液的比為1∶1，控制液速5mL/min，進口溫度35℃，出口溫度30℃，噴嘴霧化壓力0.4MPa，干燥空氣流量400m3/h，再經(jīng)冷凍干燥后制成成品。
結(jié)果與分析細菌計數(shù)方法采用傾注平板計數(shù)法。
微膠囊形態(tài)取固定后的微膠囊反應(yīng)液1滴于載玻片上，加少許龍膽紫溶液后，加蓋玻片，在低倍鏡下觀察；可見微膠囊呈小球形，直徑10～30μm，活菌聚集在微膠囊核心部位，每個微膠囊含100～200個活菌菌體。
包被率將微膠囊產(chǎn)品用水溶解后以4000r/min離心30min，計數(shù)沉淀物中活菌含量。未被包被的活菌為原始菌數(shù)的1％～3％，即包被率為97％以上。
性能檢測結(jié)果(一)雙歧桿菌凍干粉、雙歧桿菌微囊在人工胃液中耐酸性能比較在人工胃液(PH1.2)中處理4h后，凍干粉、微囊的存活率比較見表1表1凍干粉、微囊的耐酸比較結(jié)果

從表1可看出凍干粉的存活率很低，雙層包埋微囊的存活率達到87.8％，耐酸性大大提高。
(二)雙層包埋微囊雙歧桿菌在人工腸液中的溶出雙層包埋微囊在人工腸液處理30min后，活菌數(shù)為1.05×1010，溶出前為1.15×1010)，其溶出率為91.3％(三)雙歧桿菌凍干粉、雙歧桿菌微囊的貯存穩(wěn)定性實驗(1)恒溫加速貯存穩(wěn)定性實驗具體條件恒溫40℃、相對濕度(RH)70％的試驗環(huán)境中，結(jié)果見表2
表2恒溫加速貯存期內(nèi)活菌數(shù)的變化

雙歧桿菌微囊經(jīng)3個月恒溫加速試驗后，測得雙歧桿菌存活率均在70％以上；相當于室溫下貯存1年以上。而雙歧桿菌凍干粉在3個月后活菌數(shù)不足原菌數(shù)的萬分之一。
(2)長效穩(wěn)定性實驗雙歧桿菌凍干粉及雙歧桿菌微囊在23℃和30℃貯藏18個月后產(chǎn)品活性的比較結(jié)果是凍干粉在23℃和30℃貯藏18個月后測得雙歧桿菌存活率分別為15％和0.05％，而雙歧桿菌微囊在23℃和30℃貯藏18個月后測得雙歧桿菌存活率分別為70％以上和48％左右。
權(quán)利要求
1.益生菌雙層包埋微囊工藝，其特征在于包括以下步驟①按已有技術(shù)將益生菌混合發(fā)酵培養(yǎng)、微過濾離心集菌；②菌奶蛋白包埋液的制備將益生菌濃縮液75％、奶蛋白15％、囊芯輔料聚乙烯吡咯烷酮PVP K30、纖維寡糖10％，在溫度30℃以下、濕度55％以下、潔凈度10萬級的環(huán)境中進行攪拌混合30分鐘，均質(zhì)20分鐘；③制備腸溶性膠體包膜液其復(fù)合材料為變性淀粉12-20％、阿拉伯膠4-8％、聚乙二醇6-10，海藻酸鈉4-8，殼聚糖3-5，60％的濃度為0.9％氯化鈉，混合均勻，高速剪切乳化分散，過100目篩，超聲波超聲15min制成混懸腸溶膠包膜液；④流化噴霧法制備包埋微囊按菌奶蛋白包埋液與腸溶性膠體的比為1∶1，控制液速5mL/min，進口溫度35℃，出口溫度30℃，噴嘴霧化壓力0.4MPa，干燥空氣流量400m3/h，再經(jīng)冷凍干燥后制成成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌雙層包埋微囊工藝，其特征在于所述益生菌為兩岐雙岐桿菌、嬰兒雙岐桿菌、長雙岐桿菌、短雙岐桿菌、青春雙岐桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱鏈球菌。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種益生菌雙層包埋微囊工藝。是以益生菌濃縮液75％、奶蛋白15％、囊芯輔料10％與由變性淀粉12－20％、阿拉伯膠4－8％、聚乙二醇6－10，海藻酸鈉4－8，殼聚糖3－5，60％的濃度為0.9％氯化鈉構(gòu)成的腸溶性膠體經(jīng)流化噴霧法制備耐酸雙層包埋腸溶微囊。這種雙層包埋微囊工藝制備的產(chǎn)品耐久存、耐胃酸、耐膽汁酸、能在到達小腸后立即溶解釋放、吸附腸道黏膜定殖，且工藝更加簡單、成本更低。
文檔編號C12N11/00GK1884513SQ20061003187
公開日2006年12月27日 申請日期2006年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月23日
發(fā)明者肖宏, 蘇小平, 李敏艷 申請人:肖宏