本發(fā)明涉及金葉過路黃組織培養(yǎng)快速繁殖方法，屬于金葉過路黃的栽培種植技術領域。

背景技術：

金葉過路黃是報春花科過路黃屬多年生匍匐莖宿根草本植物，具豐富的地表匍匐莖，莖節(jié)較短，節(jié)間能著地生根；葉卵圓形，葉色金黃色，具有較高的觀賞價值，是不可多得的耐粗放管理的彩葉地被植物。其生長期長、綠色持續(xù)期長，能夠平臥匍匐生長，蔓延擴展能力很強，植株極富密集性，平臥整齊。因其耐粗放管理、耐旱、耐寒、耐熱性強，近年來金葉過路黃在國內外綠化產(chǎn)業(yè)中需求日益旺盛，因此應加快其繁殖速度，滿足其日益增加的市場需求，對推動園林建設事業(yè)的發(fā)展，特別是對綠地建設具有一定的實用價值。自然條件下以種子和分株形式繁殖，種子繁殖的繁殖周期為1年以上，成活率60％～70％；分株繁殖的繁殖周期雖低于1年，但成活率較低，成活率90％左右，繁殖系數(shù)小于1。由于其繁殖速度較慢，繁殖系數(shù)和成活率低限制了它的推廣應用。

技術實現(xiàn)要素：

發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術問題是提供金葉過路黃組織培養(yǎng)快速繁殖方法，通過組培繁殖可以提高金葉過路黃的繁殖系數(shù)和成活率及繁殖速度，這對豐富我國彩葉綠化地被植物有一定的意義。本研究以金葉過路黃無芽莖段為外植體材料，通過不同的培養(yǎng)基誘導其產(chǎn)生愈傷組織、不定芽、芽增殖及生根，建立金葉過路黃組培快繁體系，以期采用組培技術進行大量繁殖，豐富種質資源。

技術方案：為解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案為：本發(fā)提供了金葉過路黃組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：

1)消毒滅菌：選取金葉過路黃的當年生枝條，以頂端芽為起始芽截取第二個芽至第三個芽之間的無芽莖段為外植體，將外植體放在流水下反復沖洗1h～2h，加入適量的洗滌劑浸泡清洗3次，邊浸泡邊振蕩，沖洗干凈后移至超凈工作臺進行下一步的消毒處理：先用體積濃度75％酒精浸泡20s～25s，用無菌水反復沖洗振蕩外植體至少3次，每次沖洗時間不少于5min；再轉入質量濃度0.1％的升汞消毒10min～15min，用無菌水反復沖洗干凈后，用滅菌紙將外植體表面的水分吸干；

2)愈傷組織的誘導：將消毒滅菌好的金葉過路黃外植體橫向切成0.2cm～0.4cm長的小段，并用刀片在莖段表面縱向劃幾刀，然后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得愈傷組織；

3)愈傷組織的分化培養(yǎng)：外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織切成2mm～3mm的小塊，接入分化培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng)，在愈傷組織上萌發(fā)出一定數(shù)量的不定芽；

4)壯苗培養(yǎng)：將不定芽切接種于壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)得到健壯、且色澤翠綠的無根幼苗；

5)生根培養(yǎng)：把健壯的金葉過路黃無根幼苗轉移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)每苗分化出4～6條根；

6)金葉過路黃的煉苗及移栽：生根后的幼苗在溫度20±2℃的溫室內擰松瓶蓋放置3d～5d進行煉苗然后再移栽。

其中，上述步驟2)中的誘導愈傷組織的培養(yǎng)基配方為：ms+6-ba(0.4～0.5)mg/l+zt0.2mg/l+2,4-d0.05mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.6～5.8。

其中，上述步驟2)中的培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、暗培養(yǎng)、培養(yǎng)地點為無菌培養(yǎng)室。

其中，上述步驟3)中的分化培養(yǎng)基的配方為：ms+6-ba(0.4～0.5)mg/l+zt0.3mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.8～6.0。

其中，上述步驟3)中的培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、光照強度1500～2000lx、光照時間10～12h/d、培養(yǎng)地點為無菌培養(yǎng)室。

其中，上述步驟4)中的壯苗培養(yǎng)基的配方為，ms+6-ba(0.4～0.5)mg/l+zt0.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0。

其中，上述步驟4)中的培養(yǎng)條件為：溫度25±2℃、光照強度2000～2500lx、光照時間12～15h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。

其中，上述步驟5)中的生根培養(yǎng)基配方為：1/4ms+naa(0.2～0.5)mg/l+活性炭3g/l+蔗糖25mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0。

其中，上述步驟5)中的培養(yǎng)條件為：溫度20±2℃、光照強度1500～2000lx、光照時間10～12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。

其中，上述步驟6)中的的移栽的栽培基質由園土、沙、泥炭按(1～2):1:1的體積比混合制成，栽培基質須經(jīng)過滅菌，充分混勻后使用，移栽后，將栽培基質澆透水，并噴施800倍～1000倍質量百分比50％～60％多菌靈藥液，以后每隔兩周噴施一次，連續(xù)3次，移栽初期要注意保持基質和空氣的濕度，濕度保持在70％～80％左右，溫度22±2℃，前期應用遮光率25％～50％的遮陽網(wǎng)進行遮陰10d～15d；全封閉管理5d～7d，在10d左右可以逐步通風，20d可除去覆蓋物。

有益效果：本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術，具備如下優(yōu)點：本發(fā)明的金葉過路黃組織培養(yǎng)快速繁殖方法，通過建立金葉過路黃的組培快繁體系，金葉過路黃從無芽莖段的外植體到移栽成活經(jīng)歷時長260d～280d，繁殖系數(shù)為6～7，成活率95％以上。

具體實施方式

根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領域的技術人員容易理解，實施例所描述的內容僅用于說明本發(fā)明，而不應當也不會限制權利要求書中所詳細描述的本發(fā)明。

本發(fā)明中使用的試劑：iba：吲哚丁酸；naa：萘乙酸；6-ba：6-芐氨基腺嘌呤；zt：玉米素；2,4-d：2，4-二氯苯氧乙酸；以上均為常規(guī)試劑，均可在市場上購買得到。

實施例1：

金葉過路黃組培快繁體系的建立，步驟如下：

一、金葉過路黃的組織培養(yǎng)

1.消毒滅菌

選取金葉過路黃的當年生枝條，以頂端芽為起始芽截取第二個芽至第三個芽之間的無芽莖段為外植體。將外植體放在流水下反復沖洗2h，加入適量的洗滌劑浸泡清洗3次，邊浸泡邊振蕩，沖洗干凈后移至超凈工作臺進行下一步的消毒處理。消毒處理為：先用體積濃度75％酒精浸泡20s，用無菌水反復沖洗振蕩外植體至少3次，每次沖洗時間不少于5min；再轉入質量濃度0.1％的升汞(hgcl2)消毒10min，用無菌水反復沖洗干凈后，用滅菌紙將外植體表面的水分吸干。將消毒好的無芽莖段橫向切成0.2cm～0.4cm長的小段，并用刀片在莖段表面縱向劃幾刀，然后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上。

2.接種培養(yǎng)

2.1愈傷組織的誘導

將經(jīng)過消毒滅菌的金葉過路黃外植體切成相應的小段后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上，誘導愈傷組織的培養(yǎng)基配方為：ms+6-ba0.4mg/l+zt0.2mg/l+2,4-d0.05mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.6～5.8。培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、暗培養(yǎng)、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。外植體接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng)15d，在莖段傷口處開始出現(xiàn)愈傷組織，30d后愈傷組織誘導率達到100％。愈傷誘導率(％)＝誘導出愈傷組織的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)。形成的愈傷組織絕大多數(shù)較致密、呈顆粒狀、黃綠色，屬于外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織；極少數(shù)較疏松、呈水浸狀、黃白色，此類愈傷組織不易分化培養(yǎng)出不定芽。愈傷組織的誘導是在塑料組培瓶內進行，組培瓶的規(guī)格為：容量240ml，高90mm，直徑68mm，口徑62mm。愈傷組織的分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)均是在同種規(guī)格的組培瓶內進行。

2.2愈傷組織的分化培養(yǎng)

將外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織切成2mm～3mm的小塊，接入分化培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、光照強度1500lx、光照時間10h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。分化培養(yǎng)基的配方為：ms+6-ba0.5mg/l+zt0.3mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.8～6.0。分化培養(yǎng)約30d在愈傷組織上萌發(fā)出一定數(shù)量的不定芽，40d后對分化的不定芽進行觀察和統(tǒng)計，計算出分化率(分化出芽的材料數(shù)/接種的材料數(shù))，分化率達97.6％。以后每40d轉接一次，進行繼代分化培養(yǎng)，經(jīng)過幾次分化培養(yǎng)后，達到6～7倍左右時，進行壯苗培養(yǎng)。

2.3壯苗培養(yǎng)

由于分化培養(yǎng)出的不定芽比較幼嫩，有必要進行一定的壯苗培養(yǎng)。將不定芽切接種于壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)。壯苗培養(yǎng)基的配方為，ms+6-ba0.5mg/l+zt0.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度25±2℃、光照強度2500lx、光照時間15h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。壯苗培養(yǎng)30d后，發(fā)現(xiàn)金葉過路黃的不定芽變成健壯、且色澤翠綠的幼苗。

2.4生根培養(yǎng)

把健壯的金葉過路黃無根幼苗轉移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基配方為：1/4ms+naa0.2mg/l+活性炭3g/l+蔗糖25mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度20±2℃、光照強度2000lx、光照時間12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。10d左右有根生出，生根率達100％，40d～50d每苗可分化出4～6條根，即可進行煉苗移栽。

二、金葉過路黃的煉苗及移栽

金葉過路黃組培苗煉苗可先在溫度20±2℃的溫室內擰松瓶蓋放置3d～5d，然后進行移栽。移栽時，將幼苗從組培瓶內取出，用清水將金葉過路黃組培苗根部的固體培養(yǎng)基清洗干凈。栽培基質由園土、沙、泥炭按2:1:1的體積比混合制成，栽培基質須經(jīng)過滅菌，充分混勻后使用。移栽后，將栽培基質澆透水，并噴施800倍質量百分比50％多菌靈藥液，以后每隔兩周噴施一次，連續(xù)3次。移栽初期要注意保持基質和空氣的濕度，濕度保持在70％～80％左右，溫度22±2℃，前期用遮光率25％的遮陽網(wǎng)進行遮陰10d～15d；全封閉管理5d～7d左右，在10d左右可以逐步通風，20d左右可除去覆蓋物。移栽后約30d可見金葉過路黃幼苗生長良好，成活率可達96.5％。

實施例2：

金葉過路黃組培快繁體系的建立，步驟如下：

一、金葉過路黃的組織培養(yǎng)

1.消毒滅菌

選取金葉過路黃的當年生枝條，以頂端芽為起始芽截取第二個芽至第三個芽之間的無芽莖段為外植體。將外植體放在流水下反復沖洗1h，加入適量的洗滌劑浸泡清洗3次，邊浸泡邊振蕩，沖洗干凈后移至超凈工作臺進行下一步的消毒處理。消毒處理為：先用體積濃度75％酒精浸泡25s，用無菌水反復沖洗振蕩外植體至少3次，每次沖洗時間不少于5min；再轉入質量濃度0.1％的升汞(hgcl2)消毒15min，用無菌水反復沖洗干凈后，用滅菌紙將外植體表面的水分吸干。將消毒好的無芽莖段橫向切成0.2cm～0.4cm長的小段，并用刀片在莖段表面縱向劃幾刀，然后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上。

2.接種培養(yǎng)

2.1愈傷組織的誘導

將經(jīng)過消毒滅菌的金葉過路黃外植體切成相應的小段后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上，誘導愈傷組織的培養(yǎng)基配方為：ms+6-ba0.5mg/l+zt0.2mg/l+2,4-d0.05mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.6～5.8。培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、暗培養(yǎng)、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。外植體接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng)15d，在莖段傷口處開始出現(xiàn)愈傷組織，30d后愈傷組織誘導率達到100％。愈傷誘導率(％)＝誘導出愈傷組織的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)。形成的愈傷組織絕大多數(shù)較致密、呈顆粒狀、黃綠色，屬于外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織；極少數(shù)較疏松、呈水浸狀、黃白色，此類愈傷組織不易分化培養(yǎng)出不定芽。愈傷組織的誘導是在塑料組培瓶內進行，組培瓶的規(guī)格為：容量240ml，高90mm，直徑68mm，口徑62mm。愈傷組織的分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)均是在同種規(guī)格的組培瓶內進行。

2.2愈傷組織的分化培養(yǎng)

將外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織切成2mm～3mm的小塊，接入分化培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、光照強度1500lx、光照時間10h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。分化培養(yǎng)基的配方為：ms+6-ba0.4mg/l+zt0.3mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.8～6.0。分化培養(yǎng)約30d在愈傷組織上萌發(fā)出一定數(shù)量的不定芽，40d后對分化的不定芽進行觀察和統(tǒng)計，計算出分化率(分化出芽的材料數(shù)/接種的材料數(shù))，分化率達98.2％。以后每40d轉接一次，進行繼代分化培養(yǎng)，經(jīng)過幾次分化培養(yǎng)后，達到6～7倍左右時，進行壯苗培養(yǎng)。

2.3壯苗培養(yǎng)

由于分化培養(yǎng)出的不定芽比較幼嫩，有必要進行一定的壯苗培養(yǎng)。將不定芽切接種于壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)。壯苗培養(yǎng)基的配方為，ms+6-ba0.4mg/l+zt0.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度25±2℃、光照強度2000lx、光照時間12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。壯苗培養(yǎng)30d后，發(fā)現(xiàn)金葉過路黃的不定芽變成健壯、且色澤翠綠的幼苗。

2.4生根培養(yǎng)

把健壯的金葉過路黃無根幼苗轉移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基配方為：1/4ms+naa0.5mg/l+活性炭3g/l+蔗糖25mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度20±2℃、光照強度2000lx、光照時間10h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。10d左右有根生出，生根率達100％，40d～50d每苗可分化出4～6條根，即可進行煉苗移栽。

二、金葉過路黃的煉苗及移栽

金葉過路黃組培苗煉苗可先在溫度20±2℃的溫室內擰松瓶蓋放置3d～5d，然后進行移栽。移栽時，將幼苗從組培瓶內取出，用清水將金葉過路黃組培苗根部的固體培養(yǎng)基清洗干凈。栽培基質由園土、沙、泥炭按1:1:1的體積比混合制成，栽培基質須經(jīng)過滅菌，充分混勻后使用。移栽后，將栽培基質澆透水，并噴施1000倍質量百分比60％多菌靈藥液，以后每隔兩周噴施一次，連續(xù)3次。移栽初期要注意保持基質和空氣的濕度，濕度保持在70％～80％左右，溫度22±2℃，前期用遮光率50％的遮陽網(wǎng)進行遮陰10d～15d；全封閉管理5d～7d左右，在10d左右可以逐步通風，20d左右可除去覆蓋物。移栽后約30d可見金葉過路黃幼苗生長良好，成活率可達95.8％。

實施例3

金葉過路黃組培快繁體系的建立，步驟如下：

一、金葉過路黃的組織培養(yǎng)

1.消毒滅菌

選取金葉過路黃的當年生枝條，以頂端芽為起始芽截取第二個芽至第三個芽之間的無芽莖段為外植體。將外植體放在流水下反復沖洗1h，加入適量的洗滌劑浸泡清洗4次，邊浸泡邊振蕩，沖洗干凈后移至超凈工作臺進行下一步的消毒處理。消毒處理為：先用體積濃度75％酒精浸泡22s，用無菌水反復沖洗振蕩外植體至少3次，每次沖洗時間不少于5min；再轉入質量濃度0.1％的升汞(hgcl2)消毒12min，用無菌水反復沖洗干凈后，用滅菌紙將外植體表面的水分吸干。將消毒好的無芽莖段橫向切成0.2cm～0.4cm長的小段，并用刀片在莖段表面縱向劃幾刀，然后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上。

2.接種培養(yǎng)

2.1愈傷組織的誘導

將經(jīng)過消毒滅菌的金葉過路黃外植體切成相應的小段后接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上，誘導愈傷組織的培養(yǎng)基配方為：ms+6-ba0.45mg/l+zt0.2mg/l+2,4-d0.05mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.6～5.8。培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、暗培養(yǎng)、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。外植體接種在誘導愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng)15d，在莖段傷口處開始出現(xiàn)愈傷組織，30d后愈傷組織誘導率達到100％。愈傷誘導率(％)＝誘導出愈傷組織的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)。形成的愈傷組織絕大多數(shù)較致密、呈顆粒狀、黃綠色，屬于外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織；極少數(shù)較疏松、呈水浸狀、黃白色，此類愈傷組織不易分化培養(yǎng)出不定芽。愈傷組織的誘導是在塑料組培瓶內進行，組培瓶的規(guī)格為：容量240ml，高90mm，直徑68mm，口徑62mm。愈傷組織的分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)均是在同種規(guī)格的組培瓶內進行。

2.2愈傷組織的分化培養(yǎng)

將外觀表現(xiàn)良好的愈傷組織切成2mm～3mm的小塊，接入分化培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度22±2℃、光照強度2000lx、光照時間12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。分化培養(yǎng)基的配方為：ms+6-ba0.45mg/l+zt0.3mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.8～6.0。分化培養(yǎng)約30d在愈傷組織上萌發(fā)出一定數(shù)量的不定芽，40d后對分化的不定芽進行觀察和統(tǒng)計，計算出分化率(分化出芽的材料數(shù)/接種的材料數(shù))，分化率達98.7％。以后每40d轉接一次，進行繼代分化培養(yǎng)，經(jīng)過幾次分化培養(yǎng)后，達到6～7倍左右時，進行壯苗培養(yǎng)。

2.3壯苗培養(yǎng)

由于分化培養(yǎng)出的不定芽比較幼嫩，有必要進行一定的壯苗培養(yǎng)。將不定芽切接種于壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)。壯苗培養(yǎng)基的配方為，ms+6-ba0.45mg/l+zt0.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度25±2℃、光照強度2500lx、光照時間12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。壯苗培養(yǎng)30d后，發(fā)現(xiàn)金葉過路黃的不定芽變成健壯、且色澤翠綠的幼苗。

2.4生根培養(yǎng)

把健壯的金葉過路黃無根幼苗轉移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基配方為：1/4ms+naa0.4mg/l+活性炭3g/l+蔗糖25mg/l+瓊脂7mg/l，ph值5.7～6.0，培養(yǎng)條件為：溫度20±2℃、光照強度2000lx、光照時間12h/d、培養(yǎng)地點無菌培養(yǎng)室。10d左右有根生出，生根率達100％，40d～50d每苗可分化出4～6條根，即可進行煉苗移栽。

二、金葉過路黃的煉苗及移栽

金葉過路黃組培苗煉苗可先在溫度20±2℃的溫室內擰松瓶蓋放置3d～5d，然后進行移栽。移栽時，將幼苗從組培瓶內取出，用清水將金葉過路黃組培苗根部的固體培養(yǎng)基清洗干凈。栽培基質由園土、沙、泥炭按1.5:1:1的體積比混合制成，栽培基質須經(jīng)過滅菌，充分混勻后使用。移栽后，將栽培基質澆透水，并噴施800倍質量百分比60％多菌靈藥液，以后每隔兩周噴施一次，連續(xù)3次。移栽初期要注意保持基質和空氣的濕度，濕度保持在70％～80％左右，溫度22±2℃，前期用遮光率50％的遮陽網(wǎng)進行遮陰10d～15d；全封閉管理5d～7d左右，在10d左右可以逐步通風，20d左右可除去覆蓋物。移栽后約30d可見金葉過路黃幼苗生長良好，成活率可達97.2％。

實施例4：試驗田育苗效果驗證

對照組1：與實施例1基本一樣，所不同的是誘導愈傷組織的培養(yǎng)基配方為：ms+6-ba0.1mg/l+zt0.2mg/l+2,4-d0.05mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l；

對照組2：與實施例2基本一樣，所不同的是分化培養(yǎng)基的配方為：ms+6-ba0.1mg/l+zt0.3mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30mg/l+瓊脂7mg/l；

對照組3：與實施例3基本一樣，所不同的是生根培養(yǎng)基配方為：1/2ms+naa0.4mg/l+活性炭3g/l+蔗糖25mg/l+瓊脂7mg/l；

實施例1組：與實施例1一樣；

實施例2組：與實施例2一樣；

實施例3組：與實施例3一樣。

根據(jù)對照組1、對照組2、對照組3、實施例1組、實施例2組和實施例3組，考察愈傷組織誘導率、分化培養(yǎng)的分化率、生根培養(yǎng)的生根率和移栽后成活率。結果見表1：

表1各組別效果情況表

由表1可看出，實施例1組、實施例2組和實施例3組的愈傷組織誘導率、分化培養(yǎng)的分化率、生根培養(yǎng)的生根率及組培苗的成活率均較高，且三者無顯著差別。而對照組1的各指標均顯著低于實施例1～3；對照組2的愈傷組織誘導率為100％，但其其他指標均顯著低于實施例1～3；對照組3的愈傷組織誘導率和分化率與實施例1～3相比無顯著差異，但其生根率和成活率顯著低于實施例1～3。