本發(fā)明涉及魚類養(yǎng)殖領域，尤其是一種魚類腸道菌群移植再利用的方法。

背景技術：

近年來，關于人體腸道微生物的研究已經(jīng)成為一個熱點，很多研究發(fā)現(xiàn)人體腸道微生物與人類疾病、健康及生長等密切相關。人體腸道微生物組計劃被認為是第二個基因組計劃。與人類腸道微生物研究相比，動物如利用雞、豬等的腸道菌群報道較少，而其他動物的腸道微生物研究更少。

魚類腸道微生物的研究現(xiàn)在還處在起步階段，關于其腸道微生物組成、種類與魚本身的生長、營養(yǎng)、免疫等相關性研究也較少。關于魚腸道糞便(菌群)的重復再利用研究幾乎沒有。由于魚類生活在水中，個體小、且無法咀嚼，現(xiàn)有的關于其他動物的腸道糞便(菌群)移植方法均不適合于魚類。另外，魚類腸道糞便在水中容易分解，導致菌群濃度過低，形成不了優(yōu)勢菌群，而且會導致水體污染，影響魚類健康。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術中，魚類腸道糞便容易在水中分解，對患病魚治療效果差的問題，進而提供一種魚類腸道菌群移植再利用的方法。

本發(fā)明的技術方案是：一種魚類腸道菌群移植再利用的方法，包括如下步驟：

步驟一、收集健康魚類腸道糞便，添加到無菌生理鹽水中溶解，攪拌均勻后過濾，收集濾后的健康魚類腸道糞便菌液；

步驟二、健康魚類腸道糞便菌液中加入固化劑，混合后放置，待其變軟后，制成魚類所能攝食的形狀大小的顆粒物；

步驟三、將所述顆粒物投喂給患病魚，即實現(xiàn)魚類腸道菌群移植再利用。

進一步地，步驟一中魚類腸道糞便與無菌生理鹽水的比例為1:10。

進一步地，步驟一中的操作在無菌環(huán)境下進行，收集健康魚類腸道糞便采用虹吸的方法。

進一步地，步驟二健康魚類腸道糞便菌液中還加入誘食劑和營養(yǎng)物質(zhì)。

進一步地，誘食劑為魚油和麝香米，營養(yǎng)物質(zhì)為葡萄糖、氯化鈉和尿素。

進一步地，固化劑為瓊脂粉。

本發(fā)明具有如下有益效果：本發(fā)明一種魚類腸道菌群移植再利用的方法，針對魚類沒有牙齒、在水中生活等特點，將魚類腸道糞便(菌群)作為一種微生物的集合重新利用起來，并且加入固化劑使其在水中不會擴散、不分解，并且可以制成魚類可以攝食的形狀，保證了菌群的多樣性、種類、比例關系不被破壞，同時也便于患病魚攝食，起到了更好的治療效果。

具體實施方式

本發(fā)明一種魚類腸道菌群移植再利用的方法，包括如下步驟：

步驟一、收集健康魚類腸道糞便，添加到無菌生理鹽水中溶解，攪拌均勻后過濾，收集濾后的健康魚類腸道糞便菌液；

步驟二、健康魚類腸道糞便菌液中加入固化劑，混合后放置，待其變軟后，制成魚類所能攝食的形狀大小的顆粒物；

步驟三、將所述顆粒物投喂給患病魚，即實現(xiàn)魚類腸道菌群移植再利用。

步驟一中的操作在無菌環(huán)境下進行，收集健康魚類腸道糞便采用虹吸的方法。魚類腸道糞便與無菌生理鹽水的比例為1:10。

步驟二中健康魚類腸道糞便菌液中還加入了誘食劑和營養(yǎng)物質(zhì)。優(yōu)選地，誘食劑為魚油和麝香米，營養(yǎng)物質(zhì)為葡萄糖、氯化鈉和尿素。固化劑為瓊脂粉，瓊脂粉起塑性和凝固作用，并在水體中形成保護層，阻止糞便菌液分解擴散。每1000毫升濾后的液體中添加瓊脂粉15g、葡萄糖15g、氯化鈉5g、尿素0.5g、魚油10g和麝香米5g。

上述步驟一中的過濾液起到菌源的作用，步驟二中的瓊脂粉起到固化的作用，魚油和麝香米起到誘食的作用，通過以上物質(zhì)的混合，可以起到在不改變原有菌源性質(zhì)的情況下，誘使魚類迅速的攝食此物質(zhì)，從而達到魚腸道菌群(糞便)移植再利用的目的。

本發(fā)明特別添加了固化劑瓊脂粉，其在液體狀態(tài)下，放置一段時段后，就會呈現(xiàn)果凍狀的物質(zhì)。利用其特性，可將魚類腸道菌群制成果凍狀的顆粒大小的飼料，這樣混合物在水體中不會擴散，可以被魚類積極攝食，繼而在體內(nèi)分解利用，將菌源有效的帶入到患病魚腸道中。

下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步說明：

具體實施方式一

一種魚類腸道菌群移植再利用的方法，包括如下步驟：

步驟一、利用虹吸的方法，將魚類糞便利用無菌的容器收集在無菌容器中，添加無菌生理鹽水將其溶解，魚類腸道糞便與無菌水的比例為1:10；將溶解好后的魚腸道糞便混合物，通過無菌的普通定性濾紙過濾，濾掉固體殘渣，過濾后的液體放于無菌的玻璃容器中；

步驟二、將過濾后的液體中，放入瓊脂粉、葡萄糖、氯化鈉、尿素、魚油、麝香米，使之充分混合，放置30分鐘；以上物質(zhì)的添加比例為：每1000毫升濾液(混合后過濾液)中添加瓊脂粉15g，葡萄糖15g，氯化鈉5g，尿素0.5g，魚油10g，麝香米5g；此時，放置30分鐘的物質(zhì)呈現(xiàn)柔軟固態(tài)狀，利用無菌的鑰匙將其均勻涂布于無菌塑料模板上，無菌塑料模板以魚類所攝食飼料的大小、形狀一致，通過此步驟，以上的混合物完全呈現(xiàn)魚飼料的形狀；

步驟三、通過以上步驟獲得的顆粒物，可以被魚類積極的攝食，從而進入魚類的腸道，通過24h左右，即可有菌群根植于此魚類腸道中，并且通過一段時間的連續(xù)攝食，可以起到魚類腸道菌群(糞便)移植的效果。

具體實施方式二

步驟一、與具體實施方式一相同；

步驟二、將過濾后的液體中，放入瓊脂粉、葡萄糖、氯化鈉、尿素、魚油、麝香米，使之充分混合，(以上物質(zhì)的添加比例為：每1000毫升濾液中添加瓊脂粉15g，葡萄糖15g，氯化鈉5g，尿素0.5g，魚油10g，麝香米5g)，其余部分與具體實施方式一相同；

步驟三、與具體實施方式一相同。

對比試驗：

試驗分組：試驗分為3組，A組利用本發(fā)明內(nèi)容添加、移植有益菌群，B組添加未被瓊脂固化的有益菌群，C組為不添加腸道菌群組。

試驗指標測定：

1個指標為所移植魚類菌群中的細菌占原有魚類細菌組成中的比例；另1個位魚類的健康程度即成活率。

試驗結果：

可以發(fā)現(xiàn)，(1)：A組魚腸道中所移植的細菌占原有細菌比例為80％；B組為40％；C組由于是對照組，為零，試驗結果說明，通過本實驗的方法，可以起到將魚類中的有益菌群快速、有效的移植到新的魚類腸道中的作用；(2)：A組魚的成活率為95％，B組為43％，C組由于是對照組，為零，試驗結果壽命，通過本實驗的方法，可以有效的將健康魚腸道中的有益菌群快速移植到其它魚類腸道中，并起到有益的作用。

實驗證明未被瓊脂固化的腸道菌，在水中會擴散，濃度過低，形成不了優(yōu)勢菌群，雜菌多造成水體污染，而添加固化后的腸道菌，因為不會擴散所以其濃度得到提升，治療效果最好。

上述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實施例，并非用于限制本發(fā)明的實施方案，本領域普通技術人員根據(jù)本發(fā)明的主要構思和精神，可以十分方便地進行相應的變通或修改，故本發(fā)明的保護范圍應以權利要求書所要求的保護范圍為準。