一種金花茶的組培方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種金花茶的組培方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）外植體的消毒；（2）愈傷組織培養(yǎng)；（3）愈傷組織分化芽；（4）芽生根。本發(fā)明提供一種金花茶的組培方法，能降低繁殖的成本，生長周期短、繁殖率高、方便管理、利于工業(yè)化生產(chǎn)和自動化監(jiān)控大大的節(jié)約了人力、物力和田間作物的土地。
【專利說明】一種金花茶的組培方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于組織培養(yǎng)生產(chǎn)【技術(shù)領(lǐng)域】，本發(fā)明涉及一種金花茶的組培方法。

【背景技術(shù)】
[0002]金花茶屬于山茶科、山茶屬，與茶、山茶、南山茶、油茶、茶梅等為孿生姐妹。金花茶的花金黃色，耀眼奪目，仿佛涂著一層蠟，晶瑩而油潤，似有半透明之感。金花茶單生于葉腋，花開時，有杯狀的、壺狀的或碗狀的，嬌艷多姿，秀麗雅致。以前，人們沒有見到過花色金黃的種類。I960年，中國科學(xué)工作者首次在廣西南寧一帶發(fā)現(xiàn)了一種金黃色的山茶花，被命名為金花茶。國外稱之為神奇的東方魔茶，被譽(yù)為“植物界大熊貓”、“茶族皇后”。
[0003]金花茶是一種古老的植物，極為罕見，分布極其狹窄，全世界90%的野生金花茶僅分布于中國廣西防城港市十萬大山的蘭山支脈一帶，生長于海拔700米以下，以海拔200?500米之間的范圍較常見，垂直分布的下限為海拔20米左右。如金花茶在防城縣大王江附近的濱海丘陵臺地仍有分布。垂直分布的上限可達(dá)海拔890米，如寧明縣那陶大山仍可見到個別小瓣金花茶，數(shù)量極少，是世界上稀有的珍貴植物。金花茶喜溫暖濕潤氣候，喜歡排水良好的酸性土壤，苗期喜蔭蔽，進(jìn)入花期后，頗喜透射陽光。對土壤要求不嚴(yán)，微酸性至中性均土壤中可生長。耐瘠薄，也喜肥，耐澇力強(qiáng)。
[0004]據(jù)中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心、廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生監(jiān)督檢驗中心、北京疾病預(yù)防控制中心中心營養(yǎng)與食品安全所、廣西壯族自治區(qū)分析測試研宄中心、廣西中醫(yī)學(xué)院、廣西農(nóng)學(xué)院實驗中心等權(quán)威機(jī)構(gòu)檢驗表明:金花茶屬無毒級、含有400多種營養(yǎng)物質(zhì)、無毒副作用。富含茶多糖、茶多酚、總皂甙、總黃酮、茶色素、咖啡因、蛋白質(zhì)、維生素B1、B2、維生素C、維生素E、葉酸、脂肪酸、B-胡蘿卜素等多種天然營養(yǎng)成份；金花茶含有茶氨酸、蘇氨酸等幾十種氨基酸，以及富含有多種對人體具有重要保健作用的天然有機(jī)鍺(Ge)、砸(Se)、鉬(Mo)、鋅(Zn)、釩(V)等微量元素，和鉀(K)、鈣(Ca)、鎂(Mg)等宏量元素。自2009年成功舉辦首屆金花茶節(jié)以來，金花茶節(jié)成為了防城港市主打的四大文化節(jié)慶品牌之一。金花茶產(chǎn)業(yè)也得到了迅速發(fā)展，涌現(xiàn)出桂人堂金花茶、中港高科國寶金花茶、百喜金花茶等一批龍頭企業(yè)，金花茶系列產(chǎn)品分獲廣西名牌產(chǎn)品、廣西著名商標(biāo)，產(chǎn)品暢銷國內(nèi)外市場，年產(chǎn)值超過12億元。
[0005]由此可見金花茶深受大眾的喜愛，提高金花茶的產(chǎn)量就要對金花茶進(jìn)行后代繁殖，為了滿足這一需求，本發(fā)明提供一種金花茶的組培方法，能夠快速的對金花茶進(jìn)行組織培養(yǎng)繁殖，且出苗率較高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明針對上述存在的問題，提供一種金花茶的組培方法，能降低繁殖的成本，生長周期短、繁殖率高、方便管理、利于工業(yè)化生產(chǎn)和自動化監(jiān)控大大的節(jié)約了人力、物力和田間作物的土地。
[0007]本發(fā)明的方案是通過這樣實現(xiàn)的: 一種金花茶的組培方法，包括如下步驟:
(I)外植體的消毒:采摘5?7月份的金花茶葉，使用20?40%樂果乳劑稀釋400?600倍液浸泡5?lOmin，取出后，放入超凈工作臺使用4%維生素C水溶液浸泡30min后，再用0.15%的取(:12進(jìn)行消毒20?30min，然后用無菌水沖洗3?5次，再用0.25%的HgCl 2進(jìn)行消毒20?30min，最后使用滅菌濾紙吸干金花茶葉表面的無菌水。
[0008](2)愈傷組織培養(yǎng):愈傷組織培養(yǎng):使用解剖刀沿著金花茶葉的莖干位置橫切出長15?18cm，寬10?15cm的葉條片，將葉條片放入已經(jīng)裝入愈傷組織培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕壓葉條片，在29?31°C下暗培養(yǎng)8?15天，而后轉(zhuǎn)入26?28°C下進(jìn)行8?15天的暗培養(yǎng)，獲得金花茶愈傷組織；采用光暗培養(yǎng)的方式，暗培養(yǎng)的時間原大于光培養(yǎng)，可以避免金花茶葉修復(fù)期間過多的光照使其進(jìn)行光合作用生成糖類，失去金花茶葉體內(nèi)的一部分物質(zhì)和能量，使得完成修復(fù)過程的物質(zhì)和能量的總量減少，造成形成愈傷組織的時間變慢。
[0009](3)愈傷組織分化芽:將上述得到的愈傷組織移置芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6?8g/L瓊脂+25?29 g/L蔗糖+ 0.3?0.8mg/L 6?芐基嘌呤+0.8?1.5mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值為6.0?6.5，于25?28°C條件下，光暗培養(yǎng)30?45天后愈傷組織分化出芽；添加6?芐基嘌呤在培養(yǎng)基中具有抑制植物葉內(nèi)葉綠素、核酸、蛋白質(zhì)的分解，保綠防老；將氨基酸、生長素、無機(jī)鹽等向處理部位調(diào)運等多種效能。
[0010](4)芽生根:待步驟(3)中芽長至5?6cm時，將芽移置根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6?8g/L瓊脂+25?29g/L蔗糖+0.8?2.5mg/L吲哚乙酸+0.5?
1.5mg/L萘乙酸+0.8?1.5mg/L活性炭+0.8?1.5mg/L的硫酸亞鐵，于25?28°C條件下，光暗培養(yǎng)20?30天，培養(yǎng)出幼苗，組培結(jié)束。采用萘乙酸為培養(yǎng)基其中之一的添加物質(zhì)能夠促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴(kuò)大，可誘導(dǎo)生根；而抗褐化劑活性炭+0.8?1.5mg/L的硫酸亞鐵可降低組培過程中外植體、原球莖和叢生芽產(chǎn)生褐化，目前已達(dá)到外植體初誘導(dǎo)、原球莖繼代增殖褐化率控制在15%以下，叢生芽生根誘導(dǎo)褐化率低于5%以下。
[0011]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述每個培養(yǎng)皿放入3?5片的葉條片。適當(dāng)放入葉條片能保證每條葉條片能充分的吸收足量的養(yǎng)分，防止養(yǎng)分不足造成培養(yǎng)失敗，即提高繁殖率。
[0012]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述愈傷組織培養(yǎng)基的配方為MS+6?8g/L瓊脂+25?29 g/L蔗糖+ 0.3?0.8mg/L 6?芐基嘌呤+0.8?1.5mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值為6.5?7.0 ;將培養(yǎng)基放入高溫滅菌鍋，在121?130°C、1.1?1.5 kg/cm2條件下進(jìn)行滅菌30?50min，然后取出冷卻至45 °C后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經(jīng)經(jīng)過高溫滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)皿中。
[0013]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述培養(yǎng)皿的規(guī)格為90 X 15mm ;所述裝入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基為培養(yǎng)皿體積的1/3?1/2。采用直接傾倒的方法，相比使用量筒量取定量的培養(yǎng)基，具有快速，簡便的優(yōu)點。
[0014]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述步驟(3)和步驟(4)中的光暗培養(yǎng)周期為光培養(yǎng)20?22h，暗培養(yǎng)2?4h。在愈傷組織發(fā)芽和生根期間，需要吸收足夠的光源來形成葉綠素繼而能通過吸收光源來完成光合作用，光合作用能夠合成能源，補(bǔ)充生長所需的能量。
[0015]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述步驟(3)中光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1500?1700勒克斯，步驟(4)中光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為2000?3000勒克斯。愈傷組織培養(yǎng)時采用弱光的光培養(yǎng)，提高了金花茶組培的增殖倍數(shù)，縮短周期培養(yǎng)的時間，且采用較弱光的光培養(yǎng)能夠減少日光燈補(bǔ)光時產(chǎn)生的電耗和產(chǎn)生的熱量，減少降溫所需的費用，因此采用此方法可提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，有利產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。芽生根培養(yǎng)加強(qiáng)了光照的強(qiáng)度，順應(yīng)金花茶的生活習(xí)性，促進(jìn)其快速生根發(fā)芽。
[0016]本發(fā)明中，作為進(jìn)一步說明，所述金花茶葉為顏色嫩綠、完整、無病蟲害；金花茶葉的采摘時間為晚上I?2點。在深夜對金花茶葉進(jìn)行采摘，深夜的金花茶葉已經(jīng)停止進(jìn)行光合作用，但是還是進(jìn)行呼吸作用，消耗了體內(nèi)的淀粉，為金花茶葉進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)提供良好的條件，減少形成愈傷組織的時間。與現(xiàn)有技術(shù)中先采摘葉片后進(jìn)行暗培養(yǎng)一段時間后再進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)的工序更加簡單。
[0017]本發(fā)明的突出的實質(zhì)性特點和顯著進(jìn)步是:
1.本發(fā)明利用深夜的金花茶葉進(jìn)行組培，為金花茶葉進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)提供良好的條件，能夠快速使金花茶葉形成金花茶葉愈傷組織，進(jìn)而減少了組培的時間。
[0018]2.本發(fā)明形成金花茶葉愈傷組織后發(fā)芽、生根都進(jìn)行光暗培養(yǎng)，不僅僅通過光培養(yǎng)促進(jìn)金花茶葉愈傷組織形成葉綠素，進(jìn)行光合作用合成能源提供生長所需能量，而且通過暗培養(yǎng)促進(jìn)其進(jìn)行呼吸作用，物質(zhì)轉(zhuǎn)換，促進(jìn)生長。
[0019]3.本發(fā)明光培養(yǎng)使用的是較弱的光照強(qiáng)度，不僅提高了金花茶組培的增殖倍數(shù)，縮短周期培養(yǎng)的時間，且采用弱光的光培養(yǎng)能夠減少日光燈補(bǔ)光時產(chǎn)生的電耗和產(chǎn)生的熱量，減少降溫所需的費用，因此采用此方法可提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，有利產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，通過本發(fā)明的方法金花茶的發(fā)芽率達(dá)到75%以上。
[0020]4.本發(fā)明的方法有利于工業(yè)化生產(chǎn)和自動化監(jiān)控，大大的節(jié)約了人力、物力和田間作物的土地；在金花茶苗栽培生產(chǎn)領(lǐng)域中具有極大的推廣價值。

【具體實施方式】
[0021]下面通過具體實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，以使本發(fā)明的優(yōu)點和特征更易于被理解，應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實施例僅僅是用于本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制。
[0022]實施例1:
一種金花茶的組培方法，包括如下步驟:
(1)外植體的消毒:于6月份晚上I點采摘顏色嫩綠、完整、無病蟲害的金花茶葉，然后使用20%樂果乳劑稀釋400倍液浸泡5min，取出后放入超凈工作臺使用4%維生素C水溶液浸泡30min后再3%，再用0.15%的取(:12進(jìn)行消毒lOmin，然后用無菌水沖洗3次，再用0.25%的取(:12進(jìn)行消毒20min，最后使用滅菌濾紙吸干金花茶葉表面的無菌水；
(2)愈傷組織培養(yǎng):使用解剖刀沿著金花茶葉的莖干位置橫切出長15cm，寬1cm的葉條片，將3片的葉條片放入已經(jīng)裝入愈傷組織培養(yǎng)基的規(guī)格為90X 15mm的培養(yǎng)皿中，輕壓葉條片，在29°C下暗培養(yǎng)8天，而后轉(zhuǎn)入26°C下進(jìn)行8天的暗培養(yǎng)，獲得金花茶愈傷組織，其中，愈傷組織培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+25 g/L蔗糖+ 0.3mg/L 6?芐基嘌呤+0.8mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值為6.5 ;將培養(yǎng)基放入高溫滅菌鍋，在121°C、1.1kg/cm2條件下進(jìn)行滅菌30min，然后取出冷卻至45°C后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經(jīng)經(jīng)過高溫滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)皿中，裝入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基為培養(yǎng)皿體積的1/3 ；
(3)愈傷組織分化芽:將上述得到的愈傷組織移置芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+25g/L蔗糖+ 0.3mg/L 6?芐基嘌呤+0.8mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值為6.0，于25°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)20h，暗培養(yǎng)4h的光暗培養(yǎng)30天后愈傷組織分化出芽，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1500勒克斯；
(4)芽生根:待步驟(3)中芽長至5cm時，將芽移置根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+25g/L蔗糖+0.8mg/L吲哚乙酸+0.5mg/L萘乙酸+0.8mg/L活性炭+0.8mg/L的硫酸亞鐵，于25°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)20h，暗培養(yǎng)4h的光暗培養(yǎng)20天，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為3000勒克斯，至培養(yǎng)出幼苗，組培結(jié)束。
[0023]實施例2:
一種金花茶的組培方法，包括如下步驟:
(1)外植體的消毒:于7月份晚上2點采摘顏色嫩綠、完整、無病蟲害的金花茶葉，然后使用40%樂果乳劑稀釋600倍液浸泡lOmin，取出后放入超凈工作臺使用4%維生素C水溶液浸泡30min，再用0.15%的取(:12進(jìn)行消毒20min后，用無菌水沖洗5次，再用0.25%的取(:12進(jìn)行消毒30min，最后使用滅菌濾紙吸干金花茶葉表面的無菌水；
(2)愈傷組織培養(yǎng):使用解剖刀沿著金花茶葉的莖干位置橫切出長18cm，寬15cm的葉條片，將5片的葉條片放入已經(jīng)裝入愈傷組織培養(yǎng)基的規(guī)格為90X15mm的培養(yǎng)皿中，輕壓葉條片，在31°C下暗培養(yǎng)15天，而后轉(zhuǎn)入28°C下進(jìn)行15天的暗培養(yǎng)，獲得金花茶愈傷組織，其中，愈傷組織培養(yǎng)基的配方為MS+8g/L瓊脂+29 g/L蔗糖+ 0.8mg/L 6?芐基嘌呤+1.5mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值為6.0 ;將培養(yǎng)基放入高溫滅菌鍋，在130°C、1.5 kg/cm2條件下進(jìn)行滅菌50min，然后取出冷卻至45°C后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經(jīng)經(jīng)過高溫滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)皿中，裝入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基為培養(yǎng)皿體積的1/2 ；
(3)愈傷組織分化芽:將上述得到的愈傷組織移置芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+8g/L瓊脂+29 g/L蔗糖+ 0.8mg/L 6?芐基嘌呤+1.5mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值為7.5，于28°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)22h，暗培養(yǎng)2h的光暗培養(yǎng)45天后愈傷組織分化出芽，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1700勒克斯；
(4)芽生根:待步驟(3)中芽長至6cm時，將芽移置根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+8g/L瓊脂+29g/L蔗糖+ 2.5mg/L吲哚乙酸+1.5mg/L萘乙酸+1.5mg/L活性炭+1.5mg/L的硫酸亞鐵，于28°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)22h，暗培養(yǎng)2h的光暗培養(yǎng)30天，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為2000勒克斯，至培養(yǎng)出幼苗，組培結(jié)束。
[0024]實施例3:
一種金花茶的組培方法，包括如下步驟:
(1)外植體的消毒:于5月份晚上I點30分時采摘顏色嫩綠、完整、無病蟲害的金花茶葉，然后使用22%樂果乳劑稀釋550倍液浸泡9min，取出后放入超凈工作臺，使用4%維生素C水溶液浸泡30min后，再用0.15%的取(:12進(jìn)行消毒15min，然后用無菌水沖洗4次，再用0.25%的取(:12進(jìn)行消毒15min，最后使用滅菌濾紙吸干金花茶葉表面的無菌水；
(2)愈傷組織培養(yǎng):使用解剖刀沿著金花茶葉的莖干位置橫切出長17cm，寬14cm的葉條片，將3片的葉條片放入已經(jīng)裝入愈傷組織培養(yǎng)基的規(guī)格為90X15mm的培養(yǎng)皿中，輕壓葉條片，在29°C下暗培養(yǎng)11天，而后轉(zhuǎn)入26°C下進(jìn)行11天的暗培養(yǎng)，獲得金花茶愈傷組織，其中，愈傷組織培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+25 g/L蔗糖+ 0.7mg/L 6?芐基嘌呤+1.2mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值為6.4 ;將培養(yǎng)基放入高溫滅菌鍋，在129°C、1.2 kg/cm2條件下進(jìn)行滅菌45min，然后取出冷卻至45°C后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經(jīng)經(jīng)過高溫滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)皿中，裝入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基為培養(yǎng)皿體積的1/2 ；
(3)愈傷組織分化芽:將上述得到的愈傷組織移置芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+26 g/L蔗糖+ 0.7mg/L 6?芐基嘌呤+1.3mg/L萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值為7.3，于25°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)21h，暗培養(yǎng)3h的光暗培養(yǎng)42天后愈傷組織分化出芽，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1650勒克斯；
(4)芽生根:待步驟(3)中芽長至5cm時，將芽移置根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6g/L瓊脂+25g/L蔗糖+2.3mg/L吲哚乙酸+0.9mg/L萘乙酸+1.3mg/L活性炭+1.3mg/L的硫酸亞鐵，于25°C條件下，進(jìn)行光培養(yǎng)22h，暗培養(yǎng)2h的光暗培養(yǎng)29天，其中，光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為2500勒克斯，至培養(yǎng)出幼苗，組培結(jié)束。
【權(quán)利要求】
1.一種金花茶的組培方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)外植體的消毒:采摘5?7月份的金花茶葉，使用20?40%樂果乳劑稀釋400?600倍液浸泡5?100111，取出后，放入超凈工作臺使用4%維生素0水溶液浸泡30-11后，再用0.15%的取012進(jìn)行消毒20?30-11,然后用無菌水沖洗3?5次，再用0.25%的取〇1 2進(jìn)行消毒20?30-1最后使用滅菌濾紙吸干金花茶葉表面的無菌水； (2)愈傷組織培養(yǎng):使用解剖刀沿著金花茶葉的莖干位置橫切出長15?180111，寬10?150111的葉條片，將葉條片放入已經(jīng)裝入愈傷組織培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕壓葉條片，在29?3IX:下暗培養(yǎng)8?15天，而后轉(zhuǎn)入26?281:下進(jìn)行8?15天的暗培養(yǎng)，獲得金花茶愈傷組織； (3)愈傷組織分化芽:將上述得到的愈傷組織移置芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為13+6?此凡瓊脂+25?29 ^/1鹿糖+ 0.3?0.8^/1 6?節(jié)基嘌呤+0.8?1.51118/1萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的邱值為6.0?6.5，于25?28。〇條件下，光暗培養(yǎng)30?45天后愈傷組織分化出芽； (4)芽生根:待步驟(3)中芽長至5?6挪時，將芽移置根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，其中，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為13+6?徹/1瓊脂+25?298凡蔗糖+0.8?2.5呢/1吲哚乙酸+0.5?1.5呢凡萘乙酸+0.8?1.5^/1活性炭+0.8?1.5^/1的硫酸亞鐵，于25?28。0條件下，光暗培養(yǎng)20?30天，培養(yǎng)出幼苗，組培結(jié)束。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述每個培養(yǎng)皿放入3?5片的葉條片。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述愈傷組織培養(yǎng)基的配方為13+6?8^/1瓊脂+25?29 鹿糖+ 0.3?0.8^/1 6?節(jié)基嘌呤+0.8?1.5^/I萘乙酸，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的邱值為6.5?7.0 ；將培養(yǎng)基放入高溫滅菌鍋，在121?1301、1.1?1.5條件下進(jìn)行滅菌30?50111111，然后取出冷卻至45。0后迅速在超凈工作臺中傾倒分裝到已經(jīng)經(jīng)過高溫滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)皿中。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述培養(yǎng)皿的規(guī)格為90X15111111 ；所述裝入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基為培養(yǎng)皿體積的1/3?1/2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述步驟(3)和步驟(4)中的光暗培養(yǎng)周期為光培養(yǎng)20?22匕暗培養(yǎng)2?處。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述步驟(3)中光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1500?1700勒克斯，步驟(4)中光培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為2000?3000勒克斯。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花茶的組培方法，其特征在于，所述金花茶葉為顏色嫩綠、完整、無病蟲害；金花茶葉的采摘時間為晚上1?2點。
【文檔編號】A01H4/00GK104488714SQ201410755504
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月11日
【發(fā)明者】張莘蔓, 韋玲菊, 陳程, 羅生芳 申請人:柳州博澤科技有限公司