油茶餅粕提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑及其制備方法
【專利摘要】油茶餅粕提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑及其制備方法，所述復(fù)配殺蟲劑由以下質(zhì)量百分比的原料制成：油茶餅粕提取物35～65%；蘇云金桿菌菌劑10～30%；表面活性劑4～20%；助劑4～20%；填料4～20%。本發(fā)明還包括所述復(fù)配殺蟲劑的制備方法。本發(fā)明之復(fù)配殺蟲劑殺蟲譜寬、活性高、殺蟲效果快而穩(wěn)定、殘效期長、對高齡幼蟲殺傷效果好、對環(huán)境影響小。利用本發(fā)明，還可提高油茶的附加值，也可促進(jìn)蘇云金桿菌更廣泛的應(yīng)用。
【專利說明】油茶餅粕提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物源殺蟲劑與微生物殺蟲劑復(fù)配殺蟲劑及其制備方法，尤其是涉及一種油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著近代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，化學(xué)農(nóng)藥因其適應(yīng)面廣，操作簡單，成本低，效果顯著等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用。但是由于化學(xué)農(nóng)藥的殺蟲專一性不強(qiáng)，田間殘效期較長，同時容易誘發(fā)害蟲對其產(chǎn)生抗藥性，特別是殘留化學(xué)農(nóng)藥對農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境的污染，導(dǎo)致婦女流產(chǎn)、嬰兒畸形以及誘發(fā)人類各種癌癥等疾病，因此使用生物農(nóng)藥防治害蟲日益受到人類的重視。生物農(nóng)藥主要包括微生物源農(nóng)藥(細(xì)菌、病毒、真菌及其次級代謝產(chǎn)物)、植物源農(nóng)藥和動物源農(nóng)藥等。相對于常規(guī)的化學(xué)農(nóng)藥而言，生物農(nóng)藥具有作用方式獨(dú)特，防止對象專一，對天敵等有益生物安全，用量小，降解快，對人、畜、環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)性低，特別適用于病、蟲、草害綜合防治等特點(diǎn)。隨著人類環(huán)境保護(hù)意識的增強(qiáng)，高效低毒的生物農(nóng)藥已成為當(dāng)今農(nóng)藥的發(fā)展方向。
[0003]W^iCamellia O/ei/era)起源于中國，為山茶科山茶屬植物,在中國具有悠久的栽培歷史，主要分布在湖南、江西、湖北、廣西、安徽等17個省的丘陵地區(qū)，以湖南栽培最多。油茶是與橄欖、油棕樹和椰子齊名的世界四大木本食用油源樹種。油茶餅柏是油茶籽榨完脂肪油后的渣滓，我國每年至少有100萬噸左右的油茶餅柏資源。油茶餅柏中各主要成分含量大致為:水分14%，脂肪5%，蛋白質(zhì)15%，粗纖維6%，糖類40%，灰分6%，皂素10%~14%,鞣質(zhì)類2% ;其中所含 皂素又名皂甙，屬三萜化合物，是茶皂素的一個重要來源。茶皂素的分子中具有親水性的糖體和疏水性的配位基團(tuán)，因此是一種優(yōu)良的非離子型表面活性劑。茶皂素具有乳化、分散、濕潤、發(fā)泡等性能，同時茶皂素具有明顯的抗炎、抗?jié)B透、祛痰、止咳、鎮(zhèn)痛、殺菌、殺蟲、及促進(jìn)植物生長等多種生理功效，非常適合于生產(chǎn)農(nóng)藥產(chǎn)品。單獨(dú)作為農(nóng)業(yè)助劑，茶皂素可提高農(nóng)藥的殺蟲、殺菌效果，這些優(yōu)點(diǎn)是化學(xué)合成表面活性劑所無法與之相比的；單獨(dú)作為生物農(nóng)藥，茶皂素可直接用于防治某些病害蟲。符合當(dāng)前農(nóng)藥工業(yè)和農(nóng)業(yè)綠色環(huán)保的可持續(xù)發(fā)展，具有良好的應(yīng)用前景。但是至今，我國的茶柏資源未得到充分開發(fā)利用，長期以來，人們主要將其用作肥料還田，還有部分餅柏當(dāng)燃料燒掉，或廉價出口到日本、東南亞等國家，利用率極低，造成資源的極大浪費(fèi)，更為嚴(yán)重的是，積壓的油茶餅柏發(fā)霉生蟲污染環(huán)境。
[0004]目前，從油茶餅柏中提取皂素的方法比較成熟的主要有:水提法和有機(jī)醇類溶劑提取法，此外，還有在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來的水提-沉淀法、水提-醇萃法、超聲波輔助提取法、微波輻射提取法等新方法。其中，水提法尚有不足，一是雜質(zhì)較多，粗提物中總皂苷含量較低，而且為提高提取物收率，需要較長的時間，費(fèi)時費(fèi)工；二是糖類、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)的大量存在給后續(xù)處理工作帶來很大的難度；有機(jī)溶劑浸提所得產(chǎn)品茶皂素含量有很大提高，但由于溶劑損耗等問題易使成本偏高，同時這種提取工藝對設(shè)備提出了更高的要求；水提-沉淀法綜合了水提法、化學(xué)沉淀法兩者的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，水提-醇萃法綜合了水提法、有機(jī)溶劑法、水提-沉淀法三者的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，超聲波輔助提取法和微波輻射提取法提取效果雖然優(yōu)于水提法和有機(jī)溶劑提取法，但是生產(chǎn)用的大功率的超聲波、微波裝置成本過高，應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)之中還有一定距離。
[0005]蘇云金桿菌{Bacillus thuringiensis，％取Bt)是一種革蘭氏陽性細(xì)菌,至今已證明該菌對10個目522種昆蟲具有不同程度的致病力，尤其對鱗翅目的幼蟲殺滅特別有效。它在形成芽孢的同時能夠產(chǎn)生由一種或幾種殺蟲晶體蛋白組成的伴孢晶體，晶體蛋白為其主要的殺蟲活性成分，其作用機(jī)理是通過依靠其所含有的伴孢晶體、外毒素及卵磷脂酶等致病物質(zhì)引起昆蟲腸道等病癥從而起到一種緩慢殺蟲的作用。由于蘇云金桿菌具有高特異性的殺蟲活性和對人畜及非目標(biāo)昆蟲的安全性，同時對環(huán)境沒有不利影響，因而得到了廣泛的應(yīng)用。目前蘇云金桿菌商品制劑已達(dá)100多種，是世界上應(yīng)用最廣泛、用量最大、效果最好的微生物殺蟲劑。然而由于Bt殺蟲劑的毒力不強(qiáng)、殺蟲譜較窄、速效性差、對高齡幼蟲不敏感、殺蟲活性穩(wěn)定性差、易產(chǎn)生抗藥性以及殘效期短等缺點(diǎn)，單劑單獨(dú)使用受到許多限制，從而也限制了 Bt殺蟲劑更廣泛的應(yīng)用。
[0006]近年來，興起了復(fù)配農(nóng)藥的熱潮，兩種農(nóng)藥合理復(fù)配，不僅克服了單個農(nóng)藥制劑本身存在的不足，同時取長補(bǔ)短發(fā)揮各自所長；而且兩種殺蟲劑混配后產(chǎn)生的毒效、防治范圍，超過各自單獨(dú)使用時的毒效和防治范圍的總和。例如，CN200510114684.9公開了一種蛇床子素蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，蛇床子素與蘇云金桿菌復(fù)配的質(zhì)量范圍為:1:1~60，這種由植物源生物農(nóng)藥蛇床子素與微生物源生物農(nóng)藥蘇云金桿菌進(jìn)行復(fù)配，從作用機(jī)制上屬于速效型與緩效型復(fù)配互補(bǔ)，從殺蟲時效上具有明顯的增效作用；可以減少蘇云金桿菌的用量，從而降低害蟲對其的選擇壓力，以其克服害蟲對蘇云金桿菌的抗藥性；可以減少蛇床子素的用量，從而降低對蛇床植株的消耗量，以減少對植物資源的依賴。但是由于蛇床子素的來源有限，使兩者的復(fù)配受到了一定的限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌{BacillusthuringiensisH Bt)復(fù)配殺蟲劑,該復(fù)配殺蟲劑可殺蟲活性高，又可提高油茶餅柏的資源利用率；同時也提高了蘇云金桿菌殺蟲效果。
[0008]本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是:
本發(fā)明之一種油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物35~65% ;蘇云金桿菌菌劑10~30% ;表面活性劑4~20% ;助劑4~20% ;填料4~20%ο
[0009]進(jìn)一步，所述油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物40~60% ;蘇云金桿菌菌劑15~30% ;表面活性劑5~15% ;助劑5~15% ;填料5~15%。
[0010]進(jìn)一步，所述種油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物粉料60%、蘇云金桿菌菌劑15%、表面活性劑10%、助劑10%、填料
5% ο
[0011]進(jìn)一步，所述油茶餅柏提取物采用以下方法制成:
(I)混合溶劑提取:將油茶餅柏經(jīng)過90~110°C (優(yōu)選100°C )烘烤5~7小時(優(yōu)選6小時)后，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比6~8:1 (優(yōu)選7:1)甲醇和丙酮混合提取液加熱至65~85°C (優(yōu)選75°C)回流提取2~4次(優(yōu)選3次)，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)=6~8:l (優(yōu)選7:1 )，每次提取時間為2~4小時(優(yōu)選3小時)，合并每次的提取液后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮提取物浸膏；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積:甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量=3~5:1 (優(yōu)選4:1);
(3)沉淀萃取分離:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入石油醚，所加入石油醚的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1 (優(yōu)選3:1 )，攪拌5~10分鐘(優(yōu)選8分鐘)，然后靜置萃取4~6小時(優(yōu)選3小時)后分層，取上層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收石油醚，收集下層水相，反復(fù)萃取3~5次(優(yōu)選3次)，合并每次萃取的下層水相；
(4)除雜萃取分離:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1 (優(yōu)選3:1)，攪拌5~10分鐘(優(yōu)選8分鐘)，然后靜置萃取4~6小時(優(yōu)選3小時)后分層，取下層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復(fù)萃取3~5次(優(yōu)選3次)，合并每次萃取的下層濃縮液后，進(jìn)行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶餅柏提取物浸膏，干燥，即為油茶餅柏提取物。
[0012]進(jìn)一步，所述蘇云金桿菌菌劑有效成分含量(毒力效價)為30000IU/mg~35000IU/mgo
[0013]進(jìn)一步，所述表面活性劑為聚氧丙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、山梨醇聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸鈉和十二烷基苯磺酸鈣中的一種或幾種的混合物。
[0014]進(jìn)一步，所述助劑為聚乙烯醇、Morwet D-400、羧甲基纖維素、木質(zhì)素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物。
[0015]進(jìn)一步，所述填料為硅藻土、膨潤土、淀粉、凹凸棒土、碳酸鈣、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。
[0016]本發(fā)明之油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑的制備方法是，將干燥的油茶餅柏提取物用粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，再將過篩物與蘇云金桿菌菌劑UaciBimthuringiensis, Bt)、表面活性劑、助劑、填料按預(yù)定質(zhì)量配比混勻，即成。
[0017]本發(fā)明之油茶餅柏提取物的制備方法，采用混合溶劑提取與水提聯(lián)合提取，相比單一有機(jī)溶劑提取法和水提法，所得油茶餅柏提取物中茶皂素純度更高，色澤更好，品質(zhì)更加；同時也降低了溶劑的損耗，實(shí)現(xiàn)了溶劑的循環(huán)利用，縮短了提取時間，大大地節(jié)約能源，工藝簡單可靠易于工業(yè)化；此外使用本發(fā)明提取總皂苷收率高，可達(dá)20.5%，而且總皂苷純度很高，粗提物中可達(dá)到78.3%以上，浸提后浸渣皂素含量小于1.2% (文獻(xiàn)報(bào)道中采用丙酮-水法自油茶柏中提取總皂苷，總皂苷的收率僅達(dá)12.80%,總皂苷含量僅為55.37%。[唐玲，李紅冰，陳躍龍，等.油茶柏中總皂苷的提取工藝優(yōu)選[J].時珍國醫(yī)國藥，2009，20(4): 851-852.])。
[0018]本發(fā)明之油茶餅柏提取物的制備方法，不僅可以提高油茶餅柏資源利用率，又可得到價值較高的皂素原料，開發(fā)出新型植物源殺蟲劑，使其變廢為寶，增加農(nóng)村地區(qū)的農(nóng)民
收入，還利于促進(jìn)我國油茶產(chǎn)業(yè)化的健康和可持續(xù)發(fā)展，可產(chǎn)生良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。
[0019]本發(fā)明利用油荼餅柏提取物(植物源殺蟲劑)與蘇云金桿菌(微生物殺蟲劑)進(jìn)行復(fù)配制成一種新型殺蟲劑，優(yōu)勢在于:一、油茶餅柏提取物是蘇云金桿菌水劑或可溶性粉劑農(nóng)藥的優(yōu)良助劑，能明顯改善蘇云金桿菌農(nóng)藥的物理性能，提高藥液在生物或植物體表的附著力和吸濕性，提高藥液的滲透力，起到對蘇云金桿菌農(nóng)藥的增效作用。二、油茶餅柏提取物獨(dú)特的拒食作用機(jī)制又有一定的內(nèi)吸作用:害蟲取食油茶餅柏提取物后，生長發(fā)育被抑制，化蛹延遲，且對害蟲還有一定的抗性作用；對高齡幼蟲表現(xiàn)出很高的浸殺活性，對其化蛹率具有明顯的抑制作用，且隨著油茶餅柏提取物濃度的升高抑制作用越明顯。三、油茶餅柏提取物中的茶皂素能自動降解，不污染環(huán)境，它在分離過程中，不會對農(nóng)藥的化學(xué)性能產(chǎn)生影響，有利于蘇云金桿菌農(nóng)藥的保存，使得蘇云金桿菌農(nóng)藥毒力效價下降速度減緩60%。
[0020]本發(fā)明之復(fù)配殺蟲劑具有殺蟲譜寬、活性高、殺蟲效果快而穩(wěn)定、殘效期長、對高齡幼蟲殺傷效果好、環(huán)境影響小的特點(diǎn)。試驗(yàn)證明，在噴灑稀釋1000倍的本發(fā)明復(fù)配殺蟲劑72小時后，平均殺蟲率可達(dá)90%以上。本發(fā)明復(fù)配殺蟲劑不但可以減少微生物農(nóng)藥速效性差、田間殘效期短的缺點(diǎn)，還可以提高植物源殺蟲劑的殺蟲效果。
[0021]本發(fā)明之油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑可用于果樹、蔬菜、茶葉、甘庶或瓜類等經(jīng)濟(jì)作物的害蟲的防治。利用本發(fā)明，可充分開發(fā)和利用山區(qū)油茶餅柏資源，可以解決目前生物農(nóng)藥缺乏的問題，減少油茶餅柏資源的浪費(fèi)，促進(jìn)山區(qū)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展。同時，也可促進(jìn)蘇云金桿菌更廣泛的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0022]以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0023]實(shí)施例1本實(shí)施例復(fù)配殺蟲劑由以下質(zhì)量百分比的原料配制而成:油茶餅柏提取物60% ;蘇云金桿菌菌劑15% ;壬基酚聚氧乙烯醚10% ；Morwet D-400 10% ;膨潤土 5%。
[0024]所述油茶餅柏提取物按照以下方法制備而成:
(O混合溶劑提取:將油茶餅柏經(jīng)過100°c烘烤6小時后，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，對過篩物用(體積比:7:1)甲醇和丙酮混合提取液加熱至75°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)=7:l，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得到甲醇和丙酮提取物浸膏；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入的水的質(zhì)量相當(dāng)于浸膏質(zhì)量的4倍；
(3)沉淀萃取分離:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入石油醚，所加入石油醚的體積相當(dāng)于甲醇和丙酮提取物水溶液的體積3倍，攪拌8分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取上層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收石油醚，收集下層水相，反復(fù)萃取3次，合并每次萃取的下層水相；
(4)除雜萃取分離:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積相當(dāng)于下層水相合并液的體積3倍，攪拌8分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取下層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復(fù)萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進(jìn)行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶餅柏提取物浸膏，干燥，即得油茶餅柏提取物。[0025]本發(fā)明油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑的制備方法:將所述干燥的油茶餅柏提取物用粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，再與蘇云金桿菌菌劑(有效成分含量32000IU/mg ；廣州多宇多生物科技有限公司)、壬基酚聚氧乙烯醚、Morwet D-400、膨潤土按質(zhì)量百分比60: 15: 10: 10: 5 混勻，即成。
[0026]本實(shí)施例1油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑的殺蟲藥效如表1、2、3所
/Jn ο
[0027](一)對斜紋夜蛾的毒殺作用
將實(shí)施例1復(fù)配殺蟲劑用水按不同倍數(shù)(1000倍、1500倍、2000倍)稀釋后，噴灑到甘藍(lán)葉表面，然后將活的斜紋夜蛾飼養(yǎng)于甘藍(lán)葉上進(jìn)行殺蟲藥效試驗(yàn)，重復(fù)三次，另設(shè)3組對照組:對照組1:不噴灑實(shí)施例1復(fù)配殺蟲劑；對照組2:噴灑稀釋1000倍的油茶餅柏提取物殺蟲劑(具體配方:油茶餅柏提取物粉料、壬基酚聚氧乙烯醚、Morwet D-400、膨潤土按質(zhì)量百分比75: 10: 10: 5混勻);對照組3:噴灑稀釋1000倍的蘇云金桿菌殺蟲劑(具體配方:蘇云金桿菌菌劑(有效成分含量32000IU/mg ;廣州多宇多生物科技有限公司)、壬基酚聚氧乙烯醚、Morwet D-400、膨潤土按質(zhì)量百分比75: 10: 10: 5混勻)。分別在不同的時間對殺蟲效果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表1。
表1實(shí)施例1復(fù)配殺蟲劑對斜紋夜`蛾的毒殺效果
【權(quán)利要求】
1.一種油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于:由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物35~65% ;蘇云金桿菌菌劑10~30% ;表面活性劑4~20% ;助劑4~20% ;填料4~20%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物40~60% ;蘇云金桿菌菌劑15~30% ;表面活性劑5~15% ;助劑5~15% ;填料5~15%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶餅柏提取物粉料60%、蘇云金桿菌菌劑15%、表面活性劑10%、助劑10%、填料5%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述油茶餅柏提取物采用以下方法制成: (1)混合溶劑提取:將油茶餅柏經(jīng)90~110°C烘烤5~7小時后，用粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，對過篩物用甲醇與丙酮的體積比為6~8:1的甲醇和丙酮混合提取液加熱至65~85°C回流提取2~4次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):油茶餅柏過篩物的質(zhì)量(g) =6~8:1，每次提取時間為2~4小時，合并每次的提取液后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮混合提取物浸膏； (2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量(g) =3~5:1 ; (3)沉淀萃取分離:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入石油醚，所加入石油醚的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1，攪拌5~10分鐘，然后靜置萃取4~6小時后分層， 取上層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收石油醚，收集下層水相，反復(fù)萃取3~5次，合并每次萃取的下層水相； (4)除雜萃取分離:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1,攪拌5~10分鐘,然后靜置萃取4~6小時后分層，取下層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復(fù)萃取3~5次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進(jìn)行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶餅柏提取物浸膏，即為油茶餅柏提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(I )，將油茶餅柏經(jīng)過100°C烘烤6小時后，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比7:1甲醇和丙酮混合提取液加熱至75°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)= 7: 1，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮提取物浸膏。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(2)，向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量(g)= 4:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求4~6之一所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(3)，向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入石油醚，所加入石油醚的體積(ml):甲醇和丙酮提取物水溶液的體積(g)= 3:1，攪拌8分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取上層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收石油醚，收集下層水相，反復(fù)萃取3次，合并每次萃取的下層水相。
8.根據(jù)權(quán)利要求4~7之一所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(4)，向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=3:1，攪拌8分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取下層溶劑相進(jìn)行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復(fù)萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進(jìn)行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶餅柏提取物浸膏。
9.根據(jù)權(quán)利要求1~8之一所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述蘇云金桿菌菌劑的毒力效價為30000IU/mg~35000IU/mg。
10.根據(jù)權(quán)利要求1~9之一所述的油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑，其特征在于，所述表面活性劑為聚氧丙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、山梨醇聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸鈉和十二烷基苯磺酸鈣中的一種或幾種的混合物；所述助劑為聚乙烯醇、MorwetD-400、羧甲基纖維素、木質(zhì)素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物；所述填料為硅藻土、膨潤土、淀粉、凹凸棒土、碳酸鈣、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。
11.一種如權(quán)利要求1~10之一所述油茶餅柏提取物與蘇云金桿菌復(fù)配殺蟲劑的制備方法，其特征在于，將干燥的油茶餅柏提取物用粉碎機(jī)粉碎，過200目篩，再將過篩物與蘇云金桿菌iBacillius thuringiensis, Bt)、表面活性劑、助劑、填料按預(yù)定質(zhì)量配比混勻，即成。`
【文檔編號】A01N65/08GK103814956SQ201410076240
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年3月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月4日
【發(fā)明者】毛紹名, 章懷云, 劉高強(qiáng) 申請人:中南林業(yè)科技大學(xué)