地克珠利亞微乳的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及獸藥制劑領(lǐng)域，特別是一種地克珠利亞微乳的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 地克珠利值iclazuril)是由地克珠利屬=嗦苯乙臘化臺(tái)物，為新型、高效、低毒 抗球蟲藥，廣泛用于雞球蟲病。
[0003] 地克珠利抗球蟲作用機(jī)理還不太清楚。對(duì)球蟲主要作用峰期，隨球蟲的不同種屬 而異，如對(duì)柔嫩艾美耳球蟲主要作用點(diǎn)在第2代裂殖體球蟲的有性周期。但對(duì)巨型、布氏艾 美耳球蟲裂殖體無效。對(duì)巨型艾美耳球蟲作用點(diǎn)在球蟲的合子階段；對(duì)布氏艾美耳球蟲小 配子體階段有高效。地克球利對(duì)形成抱子化卵囊也有抑制作用。
[0004] 目前，市售地克珠利制劑包括地克珠利預(yù)混劑、地克珠利溶液等制劑，由于地克珠 利在水中幾乎不溶，在制備地克珠利溶液時(shí)，需要加入大量的有機(jī)溶劑進(jìn)行助溶，使用的有 機(jī)溶劑包括丙二醇、甘油甲縮醒、二甲基乙酷胺等等，其用量在40%~90%，存在用量較 大、毒副作用增強(qiáng)，且生產(chǎn)成本偏高，從而增加了養(yǎng)殖成本；而地克珠利預(yù)混劑通過飼料W 一定的藥物濃度濃度給藥，對(duì)于胃腸系統(tǒng)障礙或食欲不佳的動(dòng)物難W使用。傳統(tǒng)的溶液劑、 預(yù)混劑等劑型已難W滿足現(xiàn)在畜牧業(yè)的發(fā)展和需要，因此需要一種安全、有效、質(zhì)量可控、 毒副作用低的新型制劑。 陽0化]在我國獸醫(yī)臨床應(yīng)用的一些地克珠利傳統(tǒng)制劑，其藥物的釋放大多按一級(jí)動(dòng)力學(xué) 進(jìn)行，血藥濃度起伏大，常出現(xiàn)"峰谷"現(xiàn)象，有可能超出最低中毒濃度，且有效血藥濃度維 持時(shí)間短，需要多次重復(fù)給藥才能達(dá)到有效治療目的。有的劑型重復(fù)給藥對(duì)動(dòng)物的刺激較 大，應(yīng)激反應(yīng)明顯，且易發(fā)生藥物代謝緩慢，更易造成動(dòng)物性食品中藥物殘留，影響人類的 身體健康。同時(shí)藥物隨糞便、尿液排泄到環(huán)境當(dāng)中，對(duì)生態(tài)平衡也有著不容忽視的影響。
[0006] 亞微乳是目前醫(yī)藥領(lǐng)域中發(fā)展較快的劑型，其具有許多特點(diǎn)，能保護(hù)被包封藥物、 載藥量大、可提高藥物穩(wěn)定性、延長藥物作用時(shí)間、降低毒副作用、使藥物緩釋、控釋及具有 一定的祀向性等。另外，亞微乳劑的制備工藝簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)，因此地克珠利亞微乳 具有很好的應(yīng)用前景。地克珠利難溶于水，而口服用的亞微乳，可作為水溶性差或油溶性藥 物的重要載體，有利于減少不良反應(yīng)，增加藥物的溶解性，更好的發(fā)揮藥效。
[0007] 為了發(fā)展生態(tài)綠色農(nóng)業(yè)，提高肉質(zhì)食品的安全性和動(dòng)物用藥的有效、安全性及依 從性，因此需要研發(fā)一種安全、有效、穩(wěn)定、質(zhì)量可控、毒副作用低的地克珠利制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明之目的就是提供一種口服用地克珠利亞微乳，可有效解決地克珠利溶液穩(wěn) 定性差、藥效持續(xù)時(shí)間短、毒副作用強(qiáng)等問題，同時(shí)，還提供一種地克珠利亞微乳的制備方 法。
[0009] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
[0010] 本發(fā)明所述的地克珠利亞微乳的主要成分包括：地克珠利、植物油、乳化劑、助乳 化劑、抗氧化劑、防腐劑、增稠劑、純化水等組成。 1 ] 其配制比例有：地克珠利0. 1~1 %、植物油4~10 %、乳化劑4~10 %、助乳化劑 2~5%、抗氧化劑0. 2~0. 5%、防腐劑0. 1~0. 5%、有機(jī)溶劑2. 5~5%、增稠劑0. 2~ 1 %、調(diào)節(jié)試劑0. 5~1 %、純化水50~80 %。
[0012] 本發(fā)明所述的地克珠利亞微乳的制備方法： W13] 先將地克珠利溶于有機(jī)溶劑中，加入調(diào)節(jié)試劑，使其完全溶解，備用；將增稠劑、助 乳化劑加入純化水中，制成水相，備用；再將抗氧化劑、乳化劑加入植物油中，制成油相，溫 度保持在55~85°C恒溫下，邊攬拌邊將油相緩緩注入到水相中，攬拌均勻，在將溶解有地 克珠利的液體加入，攬拌均勻，把此溶液加入膠體磨中，W5000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速，研磨30min， 并不斷回流，制成初乳液。取出后，將防腐劑分別用適量的溶劑溶解后加入乳液中，再加適 量的純化水至規(guī)定的容量，制成終乳液，將初乳液放入高壓乳勻機(jī)中，在3. 089X104K化壓 力下，乳勻兩次，制成乳劑，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，分裝于玻璃瓶或塑料瓶中，封口，即得。
[0014] 所述的植物油為茶油、大豆油、麻油、棉巧油的任意一種或兩種W上的混合物；所 述的乳化劑為吐溫-60、吐溫-80、司班-60、司班-80的任意一種；所述的助乳化劑為丙= 醇、丙二醇、正下醇的任意一種；所述的增稠劑為簇甲基纖維素鋼、微晶纖維素中的任意一 種；所述的防腐劑為對(duì)徑基苯甲酸、對(duì)徑基苯甲酸乙醋、對(duì)徑基苯甲酸甲醋中的任意一種； 所述的抗氧化劑為維生素E，所述的有機(jī)溶劑為二甲亞諷；所述的調(diào)節(jié)試劑為乙醇胺、=乙 醇胺中的任意一種。 W15] 本發(fā)明制備的地克珠利亞微乳與傳統(tǒng)制劑相比有明顯的優(yōu)勢：①提高藥物的穩(wěn)定 性、增加了藥物的溶解性。②減少有機(jī)溶劑的用量，降低毒副作用，減少環(huán)境污染。③提高了 藥物吸收率，減少用藥量。④藥物在體內(nèi)能緩慢釋放，提高藥物的治療效果。⑥具有明顯的 祀向性，直接作用于腸道，并可W提高祀部位藥物濃度。⑧本發(fā)明制劑可W兌水使用，劑量 容易控制，兌水則不會(huì)出現(xiàn)沉淀或結(jié)晶現(xiàn)象，不會(huì)堵塞飲水系統(tǒng)。⑦本發(fā)明制備工藝簡單， 載藥量高，質(zhì)量可控，適合工業(yè)化和規(guī)?；a(chǎn)。
[0016] 本發(fā)明制備的地克珠利亞微乳，采用Nan〇-ZS90型激光納米粒徑分析儀測定乳滴 粒徑和zeta電位，結(jié)果顯示，地克珠利亞微乳的乳滴分布均勻，平均粒徑為485. 3nm，平均 zeta電位為-74. 5mv。
[0017] 根據(jù)《獸藥穩(wěn)定性試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》中藥物制劑加速試驗(yàn)的規(guī)定，進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)， 將=批地克珠利亞微乳置于溫度為40 + 2°C、相對(duì)濕度為75 + 5%的恒溫恒濕箱中，于第0、 1、2、3、4、5、6個(gè)月分別取樣測定，考察乳劑的外觀、粒徑、抑值及含量，結(jié)果見表1。
[0018] 含量測定方法：照高效液相色譜法測定。
[0019] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙臘-0. 2%憐酸 巧7 : 43)為流動(dòng)相，檢測波長為280nm。理論板數(shù)按地克珠利計(jì)算應(yīng)不低于1500。 W20] 測定法取本品適量，精密稱定，加二甲基甲酯胺制成每1ml中約含0.Img的溶液， 同法測定，按外標(biāo)法W峰面積計(jì)算；另取本品，同時(shí)測定其相對(duì)密度，將供試品量換算成ml 數(shù)，計(jì)算，即得。
[0021] 表-1地克珠利亞微乳穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
[0022]
[0023]
W24] 采用本發(fā)明制備的地克珠利亞微乳的臨床試驗(yàn)。
[00巧]地克珠利亞微乳對(duì)雞球蟲病的治療效果試驗(yàn)： 陽0%] 雞球蟲病是一種對(duì)養(yǎng)雞業(yè)危害極大的寄生蟲疾病。全世界每年因雞球蟲病造成的 損失達(dá)10多億美元，其中抗球蟲藥年消費(fèi)為3. 2億美元。目前市場上，抗球蟲藥物種類繁 多而且復(fù)雜，地克珠利作為一種廣譜、高效、成本低的抗球蟲藥深受養(yǎng)殖戶的青睞地克珠利 的體外試驗(yàn)中利用率不到10 %，動(dòng)物活體試驗(yàn)也證明了運(yùn)一點(diǎn)。因此，如何提高抗球蟲藥物 的抗球蟲效果是個(gè)極其重要的課題。 W27] 1試驗(yàn)設(shè)計(jì)
[0028] 購買1日齡健康維雞，飼喂不含有任何抗球蟲藥的飼料。飼養(yǎng)至14日齡，逐只稱 重選擇體重差異在lOgW內(nèi)的健康雞，分成5組，每組各50只，第1、2組分別為不給藥不攻 蟲對(duì)照組和感染不給藥組，第3、4、5組分別為試驗(yàn)組，分別為地克珠利乳劑組、地克珠利預(yù) 混劑組、地克珠利溶液組。從感染后第3天開始給藥，連續(xù)5天。
[0029] 除空白對(duì)照組外，各試驗(yàn)組每只維雞在分組當(dāng)天嗦囊灌服毒害艾美耳球蟲抱子化 亂囊1.0X105個(gè)，每天觀察記錄雞的精神、飲水欲、食欲、糞便情況和死亡數(shù)等。感染后第 5、6、7、8天早晨對(duì)各組進(jìn)行血便記分。第8天各組分別稱重、剖殺全部雞只，觀察小腸病變， 并進(jìn)行小腸內(nèi)卵囊計(jì)數(shù)。 W30] 2試驗(yàn)結(jié)果
[0031] 人工感染后第4天，感染不給藥組出現(xiàn)少量飼料便或是西紅柿樣糞便，雞只發(fā)病 明顯，表現(xiàn)精神沉郁，食欲減退，但沒有雞只死亡。第5天雞只異常糞便數(shù)量多而且嚴(yán)重，雞 只開始出現(xiàn)死亡。地克珠利預(yù)混劑組和地克珠利溶液組精神狀態(tài)差及飲食減少，地克珠利 乳劑組義食和飲水都正常，精神狀態(tài)良好。
[0032] 地克珠利乳劑治療人工感染雞毒害艾美耳球蟲療效指標(biāo)
[0033]
[0034] 試驗(yàn)結(jié)果顯示，推薦劑量的地克珠利乳劑組未出現(xiàn)感染小腸球蟲的癥狀、存活率 為100%，相對(duì)增重率高達(dá)98. 3%，小腸未見卵囊，其抗球蟲指數(shù)高達(dá)184. 9,均優(yōu)于地克珠 利預(yù)混劑組和地克珠利溶液組。表明通過改變地克珠利藥物的劑型可W獲得理想的抗球蟲 效果。
[0035] 3對(duì)臨床自然感染小腸球蟲的療效試驗(yàn)
[0036] 對(duì)12個(gè)感染球蟲的雞群進(jìn)行試驗(yàn)，雞拉西紅柿樣、魚腸子樣或飼料樣糞便，并對(duì) 病雞解剖化驗(yàn)，確定球蟲感染，但是腸道又檢測不到梭菌為試驗(yàn)對(duì)象，4個(gè)雞群為一組，分別 用地克珠利乳劑、地克珠利預(yù)混劑、地克珠利溶液進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。
[0037] 結(jié)果顯示使用地克珠利乳劑的4個(gè)雞群，用完后第2天雞群的糞便已經(jīng)好轉(zhuǎn)，第3 天恢復(fù)正常，治愈率達(dá)96. 2 %，使用地克珠利預(yù)混劑和地克珠利溶液的分別在第3天或第4 天糞便有所好轉(zhuǎn)，直到第5天雞群才恢復(fù)正常，治愈率分別為86. 7%和82. 5%。
[0038] 綜上所述，推薦劑量的地克珠利乳劑對(duì)雞小腸球蟲人工感染的抗球蟲指數(shù)大于 180,屬于高效的抗球蟲藥，臨床試驗(yàn)自然感染雞群治愈率高達(dá)96. 2%，因此臨床用于雞球 蟲病的治療，地克珠利乳劑是一種高效的抗球蟲劑型。
[0039] 4 討論
[0040] 地克珠利屬苯乙臘的衍生物，作用于球蟲裂殖生殖和抱子生殖階段，抗球蟲效果 很好，在組織中殘留濃度低，屠宰前無需停藥。
[0041] 本研究結(jié)果顯示，地克珠利乳劑對(duì)雞艾美耳球蟲感染引起的球蟲病的防治有顯著 的療效。由于地克珠利劑型的限制，導(dǎo)致地克珠利生物利用度低。地克珠利乳劑，通過劑型 的改變，極大地增