Ase-hplc測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種ASE?HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，旨在提供一種操作簡(jiǎn)單易行，靈敏度高的ASE?HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，其技術(shù)方案是取桔梗，研細(xì)，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為65℃，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為1次，沖洗體積80％；再以正丁醇為提取溶劑，提取溫度為70℃，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次；3)合并兩次提取液，減壓蒸干即得；4)稱(chēng)取步驟3)的干粉1g，加入體積比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，搖勻，放置，經(jīng)0.45um濾膜過(guò)濾，得試樣溶液，注樣入高效液相色譜儀，測(cè)定；屬于化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明提供一種ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法;屬于化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]桔梗，別名包袱花、鈴鐺花、僧帽花，是多年生草本植物，莖高20?120厘米，通常無(wú)毛，偶密被短毛，不分枝，極少上部分枝。葉全部輪生，部分輪生至全部互生，無(wú)柄或有極短的柄，葉片卵形，卵狀橢圓形至披針形，葉子卵形或卵狀披針形，花暗藍(lán)色或暗紫白色，可作觀賞花卉;其根可入藥，有止咳祛痰、宣肺、排膿等作用，中醫(yī)常用藥。在中國(guó)東北地區(qū)常被腌制為咸菜，在朝鮮半島被用來(lái)制作泡菜，當(dāng)?shù)孛裰{《桔梗謠》所描寫(xiě)的就是這種植物。
[0003]桔梗干燥根經(jīng)清洗、干燥、粉碎、裝罐、70%乙醇為溶劑，加熱回流提取三次，每次2小時(shí)，合并三次提取液，回收乙醇至無(wú)醇后，濃縮蒸發(fā)水至浸膏，噴霧干燥得桔梗提取物粉末，提取得率一般為15%，經(jīng)粉碎、過(guò)篩(100目)，混合，包裝得成品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)單易行，靈敏度高的一種ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法。
[0005]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下:
[0006]—種ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，依次包括下述步驟:
[0007]I)取桔梗，研細(xì)，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為65°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積80% ;
[0008]2)再以正丁醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次；
[0009]3)合并兩次提取液，減壓蒸干即得；
[0010]4)稱(chēng)取步驟3)的干粉I g，加入體積比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，搖勻，放置，經(jīng)
0.45um濾膜過(guò)濾，得試樣溶液，注樣入高效液相色譜儀，測(cè)定；
[0011 ] 所述的高效液相色譜法的參數(shù)如下:色譜柱:1nertsi 10DS-SP液相色譜柱，5μπι4.6X 250mm、柱溫:30°C、流速:lmL/min、流動(dòng)相:乙腈-水，檢測(cè)波長(zhǎng):315nm。
[0012]進(jìn)一步的，上述的ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，所述的乙腈和水的體積比為20:80。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案:操作簡(jiǎn)單易行，靈敏度高，為桔梗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究提供了科學(xué)依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0015]本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說(shuō)明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。
[0016]實(shí)施例1
[0017]I)取桔梗，研細(xì)，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為65°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積80% ;
[0018]2)再以正丁醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次；
[0019]3)合并兩次提取液，減壓蒸干即得；
[0020]4)稱(chēng)取步驟3)的干粉I g，加入體積比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，搖勻，放置，經(jīng)
0.45um濾膜過(guò)濾，得試樣溶液，取2μ1注樣入高效液相色譜儀，測(cè)定；
[0021 ] 所述的高效液相色譜法的參數(shù)如下:色譜柱:Inertsi 10DS-SP液相色譜柱，5μπι4.6X 250mm、柱溫:30 °C、流速:lmL/min、流動(dòng)相:乙腈-水(20:80)，檢測(cè)波長(zhǎng):315nm。
[0022]采用加樣回收法，精密稱(chēng)取已知含量的樣品6份，每份0.5g，精密添加桔梗皂苷D對(duì)照品3mg，同法制成樣品溶液，取2μ1進(jìn)樣，測(cè)定桔梗皂苷D的含量，算平均回收率99.25%,RSD = 1.08%,結(jié)果表明，本方法回收率好。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，依次包括下述步驟: 1)取桔梗，研細(xì)，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯對(duì)樣品進(jìn)行提取，所述的提取溫度為65°C，靜態(tài)提取時(shí)間為5min，提取次數(shù)為I次，沖洗體積80% ; 2)再以正丁醇為提取溶劑，提取溫度為70°C，靜態(tài)提取時(shí)間為3min，提取次數(shù)為2次； 3)合并兩次提取液，減壓蒸干即得； 4)稱(chēng)取步驟3)的干粉Ig，加入體積比20:80的乙腈:0.5 %磷酸，搖勾，放置，經(jīng)0.45um濾膜過(guò)濾，得試樣溶液，注樣入高效液相色譜儀，測(cè)定； 所述的高效液相色譜法的參數(shù)如下:色譜柱:Inertsi 1DS-SP液相色譜柱，5μπι4.6 X250mm、柱溫:30°C、流速:lmL/min、流動(dòng)相:乙腈-水，檢測(cè)波長(zhǎng):315nm。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ASE-HPLC測(cè)定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的乙腈和水的體積比為20:80。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105974006SQ201610263446
【公開(kāi)日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年4月26日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 陳江濤, 梁慧敏, 李亞, 李澄, 林冬
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所