液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法，旨在提供一種靈敏度高，定性定量準(zhǔn)確的液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法；其該方法是：1)制備供試品溶液；2)制備陰性對照溶液；3)制備對照品溶液；4)分別稱取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照溶液，上Agilent1295?6550C三重四級桿液相質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測；屬于化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【專利說明】
液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明提供一種測定鹽酸水蘇堿含量的方法，具體地說，是液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧 片中鹽酸水蘇堿含量的方法;屬于化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 婦康寧片處方由白芍、益母草、香附等八味中藥組成，具有養(yǎng)血理氣，活血調(diào)經(jīng)的 功效，主治血虛氣滯所致的月經(jīng)不調(diào)。方中益母草為中醫(yī)婦科良藥，屬唇形科植物益母草 (Leonurus iaponicus Houtt.)的新鮮或干燥地上部分，其性微寒，味苦、辛，具有活血調(diào) 經(jīng)，利水消腫，清熱解毒之功效，用于月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)經(jīng)閉，惡露不盡，水腫尿少，瘡腫毒。
[0003] 婦康寧片收載于《中國藥典》2010年版一部，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載了方中君藥白芍的含 量測定方法，而其臣藥益母草只有鹽酸水蘇堿的薄層鑒別方法。經(jīng)查閱文獻(xiàn)，未見報(bào)道測定 婦康寧片中鹽酸水蘇堿的含量方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種靈敏度高，定性定量準(zhǔn)確的液質(zhì)串聯(lián)檢 測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法。
[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：
[0006] -種液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法，依次包括下述步驟：
[0007] 1)取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加 入80 %乙醇20ml，密塞，稱定重量，超聲提取30min，放冷，再稱定重量，用80 %乙醇補(bǔ)足減失 的重量，搖勻，以lml/min流速通過分別以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml 水淋洗，棄去，再用5ml乙醇洗脫收集洗脫液，洗脫液于40°C下氮吹至近干，精密加入lml乙 醇溶解，用〇. 22mi有機(jī)濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0008] 2)取按處方比例及工藝制備的缺益母草陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制備 陰性對照溶液；
[0009] 3)精密稱定鹽酸水蘇堿對照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至每lml含鹽 酸水蘇堿〇.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀釋至25ml，得每lml含鹽酸水蘇堿 0.1388mg的對照品溶液；
[0010] 4)分別稱取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重 四級桿液相質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。
[0011] 進(jìn)一步的，上述的一種液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法，所述的 液相色譜與質(zhì)譜條件如下：
[0012] 色譜柱：Agilent ZORBAX Eel ipse Plus柱2 ? 1 X 50mm，1 ? 8m;流動相A為0 ? 1 % 甲 酸，流動相B為乙腈，采用梯度洗脫程序如下：0-2. Omin，A、2-98%，B、98-2% ; 2.0-9.5min， 八、5%，8、95%;9.5.-151^114、70%，8、30%;流速0.81111/111111;柱溫35°(： ;進(jìn)樣量如1;電噴霧 源ESI，正離子方式，選擇多反應(yīng)監(jiān)測MRM，載氣溫度：150 °C，載氣流量：15L/min，霧化器壓力 40psi，鞘氣溫度350°C，鞘氣流量：lOL/min，毛細(xì)管電壓3500V，定性定量離子:母離子m/z = 247.2，子離子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分別為5V和20V，F(xiàn)rag均為380V。
[0013] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的采用液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的 方法，檢測快速，檢測結(jié)果與采用藥典檢測的結(jié)果基本一致，為完善婦康寧片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，控 制其內(nèi)在質(zhì)量提供了一定的理論依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對 本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的 權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0015] 本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶 質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。
[0016] 實(shí)施例1
[0017] 1)取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加 入80 %乙醇20ml，密塞，稱定重量，超聲提取30min，放冷，再稱定重量，用80 %乙醇補(bǔ)足減失 的重量，搖勻，以lml/min流速通過分別以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml 水淋洗，棄去，再用5ml乙醇洗脫收集洗脫液，洗脫液于40°C下氮吹至近干，精密加入lml乙 醇溶解，用〇. 22mi有機(jī)濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0018] 2)取按處方比例及工藝制備的缺益母草陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制備 陰性對照溶液；
[0019] 3)精密稱定鹽酸水蘇堿對照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至每lml含鹽 酸水蘇堿〇.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀釋至25ml，得每lml含鹽酸水蘇堿 0.1388mg的對照品溶液；
[0020] 4)分別稱取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重 四級桿液相質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。
[0021 ]所述的液相色譜與質(zhì)譜條件如下：
[0022] 色譜柱：Agilent ZORBAX Eel ipse Plus柱2 ? 1 X 50mm，1 ? 8m;流動相A為0 ? 1 % 甲 酸，流動相B為乙腈，采用梯度洗脫程序如下：0-2. Omin，A、2-98%，B、98-2% ; 2.0-9.5min， 八、5%，8、95%;9.5.-151^114、70%，8、30%;流速0.81111/111111 ;柱溫35°(：;進(jìn)樣量如1;電噴霧 源ESI，正離子方式，選擇多反應(yīng)監(jiān)測MRM，載氣溫度：150 °C，載氣流量：15L/min，霧化器壓力 40psi，鞘氣溫度350°C，鞘氣流量：10L/min，毛細(xì)管電壓3500V，定性定量離子:母離子m/z = 247.2，子離子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分別為5V和20V，F(xiàn)rag均為380V。
[0023] 陰性干擾試驗(yàn):取對照品溶液、供試品溶液，陰性對照品溶液，按上述色譜條件測 定。結(jié)果陰性對照品溶液色譜圖中，在鹽酸水蘇堿色譜峰相應(yīng)位置無干擾，表明本品中其他 成分對鹽酸水蘇堿的測定無干擾
[0024]精密稱取已知含量的同一批號樣品6份，分別精密加入0.6940mg/ml的鹽酸水蘇堿 對照品溶液0.7、1.0、1.3ml各2份，其余操作按下供試品溶液的制備方法，測定，計(jì)算，結(jié)果 平均加樣回收率為100.36%，RSD = 0.95%(n = 6)，表明本方法準(zhǔn)確度較好 [0025]取四批樣品，分別按上述含量測定方法測定，其檢測結(jié)果基本一致，具體如下表所 示：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法，其特征在于，依次包括下述 步驟： 1) 取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入 80%乙醇20ml，密塞，稱定重量，超聲提取30min，放冷，再稱定重量，用80%乙醇補(bǔ)足減失的 重量，搖勻，以lml/min流速通過分別以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml水 淋洗，棄去，再用5ml乙醇洗脫收集洗脫液，洗脫液于40°C下氮吹至近干，精密加入1ml乙醇 溶解，用0.22μπι有機(jī)濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； 2) 取按處方比例及工藝制備的缺益母草陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性 對照溶液； 3) 精密稱定鹽酸水蘇堿對照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀釋至每1ml含鹽酸水 蘇堿0.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀釋至25ml，得每1ml含鹽酸水蘇堿0.1388mg的 對照品溶液； 4) 分別稱取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重四級 桿液相質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種液質(zhì)串聯(lián)檢測婦康寧片中鹽酸水蘇堿含量的方法，其特 征在于，所述的液相色譜與質(zhì)譜條件如下： 色譜柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus柱2.1X50mm，1.8m;流動相A為0.1% 甲酸，流 動相B為乙腈，采用梯度洗脫程序如下:0-2.0min，A、2-98%，B、98-2%;2.0-9.5min，A、5%， B、95%;9·5·-15min，A、70%，B、30%;流速0·8ml/min;柱溫35°C ;進(jìn)樣量2μl;電噴霧源ESI， 正離子方式，選擇多反應(yīng)監(jiān)測MRM，載氣溫度：150°C，載氣流量：15L/min，霧化器壓力40psi， 鞘氣溫度350 °C，鞘氣流量：10L/min，毛細(xì)管電壓3500V，定性定量離子:母離子m/z = 247.2， 子離子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分別為5V和20V，F(xiàn)rag均為380V。
【文檔編號】G01N30/02GK105911187SQ201610259400
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月25日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 陳江濤, 梁慧敏, 李亞, 李澄
【申請人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所