一種檢測兒童活動性結(jié)核病的試劑盒及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種檢測兒童活動性結(jié)核病的試劑盒及其應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB)引起的結(jié)核病是當(dāng)今世界 上最普遍的人類傳染病之一，被認(rèn)為是僅次于艾滋病的第二大疾病"殺手"，因此結(jié)核病已 成為威脅人類健康的最重要的疾病，是全球公共衛(wèi)生控制的一個難題。中國是世界上22 個結(jié)核病高發(fā)國家之一，結(jié)核病患者數(shù)量居世界第二位。我國兒童結(jié)核病的疫情也比較嚴(yán) 峻。2000年第四次全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報告顯示我國0~14歲兒童結(jié)核感染率 為9. 0%，活動性結(jié)核病患病率為91. 8/100, 000,近年來，我國兒童結(jié)核病也有明顯回升趨 勢。因此，加強(qiáng)兒童結(jié)核病的實驗室診斷、對活動性結(jié)核病早診斷及早治療已成為目前亟需 解決的問題。
[0003] 但是長期以來，兒童結(jié)核病診斷面臨著兩個難以解決的實際問題：一、兒童結(jié)核病 患者的細(xì)菌載量低，再加上兒童咳嗽反射和氣管纖毛運(yùn)動能力差，常常合并肺外結(jié)核，病原 學(xué)診斷的陽性率很低。結(jié)核病患兒發(fā)病早期臨床癥狀尚不明顯時，無法得到及時準(zhǔn)確的病 原學(xué)結(jié)果，常常延誤診斷，導(dǎo)致病情惡化，失去搶救的最佳時機(jī)。二、免疫功能低下，或患有 嚴(yán)重結(jié)核病如全身粟粒性結(jié)核和結(jié)核性腦膜炎，或患兒使用過免疫抑制劑時，機(jī)體免疫應(yīng) 答減弱，常規(guī)免疫學(xué)診斷方法往往出現(xiàn)假陰性，給疾病的診斷和早期預(yù)防治療帶來很大不 利影響。
[0004] 結(jié)核菌素皮試（Pro試驗）是目前診斷結(jié)核病的重要輔助手段，但由于pro是多種 抗原的混合物，所含抗原為致病性分枝桿菌、環(huán)境分枝桿菌及卡介苗菌株所共有，其結(jié)果受 到卡介苗接種及其他分枝桿菌感染的影響，特異度較差，?？蓪?dǎo)致假陽性結(jié)果。當(dāng)患兒出現(xiàn) 免疫功能低下時可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。y干擾素釋放試驗作為一種新型的免疫學(xué)診斷方法已 在歐美等國廣泛應(yīng)用于結(jié)核病和潛伏結(jié)核感染的常規(guī)診斷。由于該試驗結(jié)果不受卡介苗接 種的影響，因此尤其適用于卡介苗接種率較高的人群。但目前關(guān)于該實驗在兒童結(jié)核病診 斷中的準(zhǔn)確性如何，結(jié)論尚不一致。有研宄認(rèn)為y干擾素釋放試驗不受年齡的影響，在兒 童中具有較好的敏感度。而有的研宄則認(rèn)為該試驗即使在細(xì)菌培養(yǎng)陽性的兒童中，其敏感 度也很低，因此其不適于作為一種常規(guī)的兒童結(jié)核病診斷方法。
[0005] 代謝組學(xué)是20世紀(jì)90年代中期發(fā)展起來的一門新興學(xué)科，是系統(tǒng)生物學(xué)的重要 組成部分，是關(guān)于生物體系內(nèi)在或外在因素的刺激后其內(nèi)源性代謝物種類、數(shù)量及其變化 規(guī)律的科學(xué)。利用高通量、高靈敏度與高精確度的現(xiàn)代儀器分析技術(shù)，對機(jī)體整個代謝產(chǎn)物 譜進(jìn)行動態(tài)跟蹤分析，從而幫助臨床更好的理解病變過程并實施疾病的診斷。近年來，代謝 組學(xué)技術(shù)已被廣泛用于疾病的診斷，該技術(shù)通過分析機(jī)體病理改變所引起的代謝產(chǎn)物的變 化，運(yùn)用化學(xué)計量學(xué)方法對疾病組和正常組進(jìn)行辨識，尋找疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物，并用于 臨床診斷。該診斷技術(shù)克服了傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)診斷模式的一系列缺陷，包括診斷準(zhǔn)確率低、診斷指 標(biāo)單一、對專家診療水平依賴性強(qiáng)、治療模式缺乏個體化等，充分利用多種甚至是全代謝產(chǎn) 物系統(tǒng)分析，做出更準(zhǔn)確和客觀的評價，并避免人為因素的誤診。HNMR技術(shù)具有快速、樣品 處理簡單、所需樣本量少、重復(fù)性好等特點，是代謝組學(xué)研宄領(lǐng)用最常用的分析技術(shù)之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的一個目的是提供一種用于診斷兒童活動性結(jié)核病的產(chǎn)品。
[0007] 本發(fā)明提供的用于診斷兒童活動性結(jié)核病的產(chǎn)品包括記載有如下內(nèi)容的診斷卡： 對待測兒童血衆(zhòng)進(jìn)行核磁檢測，分別得到〇? 82-0. 88ppm、l. 19-1. 20ppm、l. 25-1. 30ppm、 1. 32-1. 34ppm、4. 11-4. 13ppm、l. 46-1. 48ppm、2. 03-2. 04ppm、2. 22-2. 23ppm、3. 20-4. OOppm 和3. 56ppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量；
[0008]若 1. 19-1. 20ppm、1. 32-1. 34ppm、4. 11-4. 13ppm、2. 03-2. 04ppm、2. 22-2. 23ppm 和3. 56ppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量均比正常兒童高，且0. 82-0. 88ppm、 1. 25-1. 30ppm、1. 46-1. 48ppm和3. 20-4. OOppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量均 比正常兒童低，則所述待測兒童為或候選為活動性結(jié)核病患者；
[0009]若 1. 19-1. 20ppm、1. 32-1. 34ppm、4. 11-4. 13ppm、2. 03-2. 04ppm、2. 22-2. 23ppm 和 3. 56ppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量不是均比正常兒童高，或0. 82-0. 88ppm、 1. 25-1. 30ppm、1. 46-1. 48ppm和3. 20-4. OOppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量不 是均比正常兒童低，則所述待測兒童不為或候選不為活動性結(jié)核病患者。
[0010] 上述產(chǎn)品中，所述正常兒童在所述〇. 82-0. 88ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相 對含量為46. 8655 ;
[0011] 所述正常兒童在所述1. 19-1. 20ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 19. 8161 ；
[0012] 所述正常兒童在所述1.25-1. 30ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 55. 7459 ；
[0013] 所述正常兒童在所述1.32-1. 34ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 185. 8018 ；
[0014] 所述正常兒童在所述4. 11-4. 13ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 34. 7537 ；
[0015] 所述正常兒童在所述1.46-1. 48ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 57. 5105 ；
[0016] 所述正常兒童在所述2. 03-2. 04ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 70.7800 ；
[0017] 所述正常兒童在所述2. 22-2. 23ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 12. 4336 ；
[0018] 所述正常兒童在所述3. 20-4. OOppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為 72. 1825 ；
[0019] 所述正常兒童在所述3. 56ppm化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對含量為25. 6423。
[0020] 上述產(chǎn)品中，所述核磁檢測包括如下步驟：對待測兒童血漿進(jìn)行核磁檢測，分 別得到 0.82-0. 88ppm、l. 19-1. 20ppm、l. 25-1. 30ppm、l. 32-1. 34ppm、4. 11-4. 13ppm、 1. 46-1. 48ppm、2. 03-2. 04ppm、2. 22-2. 23ppm、3. 20-4. OOppm 和 3. 56ppm 的化學(xué)位移的峰下 面積；根據(jù)每個化學(xué)位移的峰下面積，分別計算得到每個化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相對 含量。
[0021] 上述產(chǎn)品中，所述產(chǎn)品中還包括對待測兒童血漿進(jìn)行核磁檢測時使用的設(shè)備和試 劑。
[0022] 本發(fā)明的另一個目的是提供上述產(chǎn)品在制備用于診斷兒童活動性結(jié)核病的產(chǎn)品 中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明還有一個目的是提供利用核磁方法檢測待測兒童血漿中0. 82-0. 88ppm、 1. 19-1. 20ppm、l. 25-1. 30ppm、l. 32-1. 34ppm、4. 11-4. 13ppm、l. 46-1. 48ppm、 2. 03-2. 04ppm、2. 22-2. 23ppm、3. 20-4. OOppm和3. 56ppm的化學(xué)位移代表的差異產(chǎn)物的相 對含量時使用的設(shè)備和試劑在制備診斷兒童活動性結(jié)核病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0024] 本發(fā)