Adamts1作為主動脈夾層臨床篩查分子標(biāo)記物的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物領(lǐng)域，具體設(shè)及用于ADAMTS1作為主動脈夾層臨床篩查分子 標(biāo)記物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[000引主動脈夾層（Aorticdissection，AD)是嚴(yán)重威脅生命的屯、血管急癥之一，是指主 動脈內(nèi)膜撕裂，循環(huán)中的血液通過裂口進(jìn)入主動脈壁內(nèi)，導(dǎo)致血管壁的分層。該種撕裂的血 管壁非常薄弱，易于擴(kuò)張或者破裂，而后者往往是致死性的。臨床上未經(jīng)治療的主動脈夾層 患者約36%-50%在起病后48小時內(nèi)死亡，約65%-75%在兩周內(nèi)死亡，一年死亡率高達(dá)90%， 10年死亡率幾乎100%。（ 1)目前介入治療和人工血管置換術(shù)是治療主動脈夾層破裂的主要 方法。盡管術(shù)式不斷發(fā)展，但目前總體發(fā)病率和死亡率并無改善；（2)即使及時控制病情， 仍可能出現(xiàn)遲發(fā)性動脈瘤擴(kuò)張及破裂一升主動脈夾層術(shù)后10%-26%的死亡由降主動脈破 裂所致。。AD人群發(fā)病率是2. 9/100000/年，3%患者巧死，發(fā)病2d內(nèi)病死率高達(dá)50%，臨床表 現(xiàn)復(fù)雜多變，多表現(xiàn)為胸痛、胸悶、氣短等類似冠屯、病的癥狀，誤診和漏診率可高達(dá)31. 8%， 誤診為屯、絞痛者占10. 1%，屯、肌梗死者占5%，其診斷往往依賴于超高速計算機(jī)斷層攝影術(shù)、 磁共振成像、經(jīng)胸或經(jīng)食管超聲屯、動圖、動脈造影等輔助檢查，但上述檢查復(fù)雜、費(fèi)時。而對 于ACS患者，時間就是生命，不允許我們把上述檢查作為篩查手段，因此，臨床急需一種方 便、快捷的手段對AD和ACS進(jìn)行鑒別診斷。
[0003] ADAMTS (adisintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin typel motifs)意為含I型血小板結(jié)合蛋白基序（TSP)的解聚蛋白樣金屬蛋白酶，是繼MMPs 后新發(fā)現(xiàn)的一類化"依賴的分泌型金屬蛋白酶。迄今在人類發(fā)現(xiàn)十九個成員，與多種人類 疾病密切相關(guān)。在人體的許多正常及病理的生理活動中起著重要的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn) 一些組織中有些ADAMTS家庭成員表現(xiàn)出抑癌基因的特性，在一些組織中有些家族成員表 現(xiàn)為表達(dá)沉默，并且表達(dá)沉默與啟動子區(qū)域的甲基化有關(guān)聯(lián)。其中ADAMTS-1是最早被發(fā)現(xiàn) 的成員，定位于人染色體21q21-q22,編碼含951個氨基酸的蛋白質(zhì)，分子量約為lOOkD，在 許多臟器、組織中均有表達(dá)，在生長、泌尿生殖系統(tǒng)的發(fā)育、抑制血管新生等多種生理和病 理過程中有重要作用。ADAMTS1是在對新的血管抑制因子的篩選中發(fā)現(xiàn)的，它通過對血管內(nèi) 皮生長因子（VEGF)或成纖維細(xì)胞生長因子2 (FGF2)的調(diào)節(jié)來發(fā)揮其抗血管生成的作用， 抑制新生血管的形成。ADAMTS1通過與不同的因子作用，釋放具有生物活性的抗血管生成的 片段。通過調(diào)控ADAMTS1在不同個體中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在沒有ADAMTS1表達(dá)的腫瘤組織中，血 管化程度及血管分布的范圍要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于有ADAMTS1表達(dá)的組織；在有ADAMTS1表達(dá)的組織 中腫瘤組織的水腫和壞死程度要高，是因為ADAMTS1能抑制血管化過程的發(fā)生。ADAMTS-1 是否參與血管壁基質(zhì)蛋白versican的降解，從而促進(jìn)主動脈夾層的發(fā)生發(fā)展，目前尚無報 道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的首要目的即在于提供ADAMTSl用作檢測主動脈夾層（AD)的蛋白質(zhì)分子 標(biāo)記的應(yīng)用。其可為主動脈夾層的早期診斷提供可W量化的指標(biāo)，尤其是提高主動脈夾層 早期診斷率，降低臨床誤診與漏診率。
[0005] 本發(fā)明通過大量研究發(fā)現(xiàn)，ADAMTSl的蛋白表達(dá)量與主動脈夾層存在極高的相關(guān) 性；隨著ADAMTSl的蛋白表達(dá)量的增加，人患有主動脈夾層的風(fēng)險明顯增加。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)主 動脈夾層病人血漿中的ADAMTSl含量較正常人至少高出50%。
[0006] 另外，在本發(fā)明的進(jìn)一步研究中，發(fā)現(xiàn)在ApoE-/-小鼠皮下埋累持續(xù)給予Ang II 建立的主動脈夾層模型中，Angll給藥組小鼠主動脈組織ADAMTSl蛋白表達(dá)水平升高，而 ADAMTSl的底物versican降解增加；提示ADAMTSl可能通過降解versican參與主動脈夾 層的發(fā)生發(fā)展。
[0007] ADAMTSl作為蛋白質(zhì)分子標(biāo)記可W極大的提高主動脈夾層早期診斷率，降低臨床 誤診與漏診率，但是其也可W與現(xiàn)有技術(shù)已知的主動脈夾層相關(guān)分子標(biāo)記聯(lián)合應(yīng)用于臨床 診斷，例如，平滑肌肌球蛋白重鏈（SM-MHCXC反應(yīng)蛋白（CRP)、纖維素標(biāo)記物、轉(zhuǎn)化生長因 子0 (TGF-0 )、D-二聚體化及彈性蛋白；W便進(jìn)一步提高主動脈夾層早期診斷率化及降低 臨床誤診與漏診率。也可將ADAMTSl作為藥物設(shè)計的祀點(diǎn)，找出具有調(diào)節(jié)ADAMTSl表達(dá)的 活性分子，從而促進(jìn)新的藥物發(fā)現(xiàn)。
[000引在實(shí)際應(yīng)用中，用于檢測ADAMTSl的樣本可W來自人體的組織或體液，所述體液 包括血液、尿液W及汗液，優(yōu)選為血液樣本。檢測方法可W通過現(xiàn)有技術(shù)已知的方法予W進(jìn) 行，例如，采用￡1^54、胖63*6口1-810*、1(：-15/15、激光共聚焦、電化學(xué)發(fā)光免疫^及免疫組化 等方法進(jìn)行檢測；從樣本處理W及檢測手段的簡便性和準(zhǔn)確性方面考慮，所述檢測方法優(yōu) 選為化ISA。
【附圖說明】
[0009] 圖1急性主動脈夾層患者的主動脈組織肥染色結(jié)果。
[0010] 圖2急性主動脈夾層患者的主動脈組織用免疫巧光染色結(jié)果。
[0011] 圖3小鼠主動脈夾層組織肥染色結(jié)果。
[0012] 圖4小鼠主動脈夾層組織免疫巧光染色結(jié)果。
[0013] 圖5小鼠主動脈夾層組織實(shí)時定量PCR及Western-Blot結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 下面將結(jié)合附圖W及進(jìn)一步的詳細(xì)說明來舉例說明本發(fā)明。需要指出的是，W下 說明僅僅是對本發(fā)明要求保護(hù)的技術(shù)方案的舉例說明，并非對該些技術(shù)方案的任何限制。 本發(fā)明的保護(hù)范圍W所附權(quán)利要求書記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。
[00巧]實(shí)施例1 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)檢測急性主動脈夾層（AAD)患者（16例)、急性屯、梗(AMI) 患者（26例）和正常人（19例）的血漿ADAMTSl水平， 主動脈夾層患者的收集標(biāo)準(zhǔn)；癥狀：突發(fā)劇烈胸背部撕裂樣疼痛，伴隨難控高血壓；輔 助檢查；主動脈CT或核磁顯示主動脈有假腔形成。
[0016] 各組病例具體情況參見下表：
【主權(quán)項】
1. ADAMTS1作為蛋白質(zhì)分子標(biāo)記物在制備主動脈疾病診斷試劑中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述主動脈疾病為主動脈夾層。
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物領(lǐng)域，具體涉及用于ADAMTS1作為主動脈夾層臨床篩查分子標(biāo)記物的應(yīng)用。發(fā)明通過大量研究發(fā)現(xiàn)，ADAMTS1的蛋白表達(dá)量與主動脈夾層存在極高的相關(guān)性；隨著ADAMTS1的蛋白表達(dá)量的增加，人患有主動脈夾層的風(fēng)險明顯增加。發(fā)明發(fā)現(xiàn)主動脈夾層病人血漿中的ADAMTS1含量較正常人至少高出50%。
【IPC分類】G01N33-68
【公開號】CN104569436
【申請?zhí)枴緾N201510042523
【發(fā)明人】鄭金剛, 高艷香, 吳文靜, 于長安
【申請人】鄭金剛, 高艷香, 吳文靜, 于長安
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月28日