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一種基于Au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素A免疫傳感器的構(gòu)建的制作方法

文檔序號:12611528閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種基于Au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素A免疫傳感器的構(gòu)建,其特征在于,包括以下步驟:

(1)用Al2O3拋光粉打磨直徑為4 mm的玻碳電極,超純水清洗干凈,將6 μL、1.0 ~ 1.6 mg mL-1 Au八面體分散液滴加到電極表面,室溫下晾干成膜;

(2)依次滴加6 μL、1~5 μg mL-1的赭曲霉毒素A抗體anti-OTA,3 μL、質(zhì)量分數(shù)為0.5% ~ 2%的BSA溶液到電極表面,超純水洗凈,室溫下晾干;

(3)滴加6 μL、10-4~100 ng mL-1的一系列不同濃度的赭曲霉毒素A到電極表面,孵化2 h,超純水沖洗,室溫下晾干;

(4)滴加6 μL的Au八面體等離子膠體Au opc負載甲苯胺藍Tb的二抗標記物Au opc@Ab2@Tb溶液,超純水沖洗,室溫下晾干,制得一種夾心型免疫傳感器。

2.如權(quán)利要求1所述的一種基于Au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素A免疫傳感器的構(gòu)建,所述的Au八面體分散液,其特征在于,制備步驟如下:

將20 mg mL-1、1.2 mL氯金酸及0.1~1.8 g PDDA同時加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C條件下加熱0.1~10 h,通過在14500 rpm下離心并用超純水反復(fù)洗滌制得Au八面體。

3.如權(quán)利要求1所述的一種基于Au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素A免疫傳感器的構(gòu)建的制備方法,所述的Au八面體等離子膠體負載甲苯胺藍的二抗標記物Au opc@Ab2@Tb溶液,其特征在于,制備步驟如下:

(1)Au八面體等離子膠體的制備

將制得的Au八面體分散液用正丁醇溶液洗滌,然后通過超聲重新分散在一定量的去離子水中,形成膠體懸浮液,再把1 mL正丁醇溶液加入到上述膠體懸浮液中,超聲振蕩0.2~5 h,通過界面自組裝形成Au八面體等離子膠體,靜置5~100 min,得到的沉淀即為Au八面體等離子膠體;

(2) Au八面體等離子膠體負載甲苯胺藍的二抗標記物Au opc@Ab2@Tb溶液的制備

將0.5 mL、1.0 mg mL-1 Au八面體等離子膠體分散于1.0 mL超純水中搖勻,并加入0.1 mL的赭曲霉毒素A抗體anti-OTA和甲苯胺藍, 4 °C下振蕩1~5 h,得到的產(chǎn)物14500 rpm離心分離,固體重新分散在蒸餾水中即為Au八面體等離子膠體負載甲苯胺藍的二抗標記物Au opc@Ab2@Tb。

4.如權(quán)利要求1所述的一種基于Au八面體等離子膠體的赭曲霉毒素A免疫傳感器的構(gòu)建的制備方法,其特征在于,用于赭曲霉毒素A的檢測,制備步驟如下:

(1)使用電化學(xué)工作站以三電極體系進行測試,飽和甘汞電極為參比電極,鉑絲電極為輔助電極,所制備的免疫傳感器為工作電極,在10 mL的含有濃度為4~6 mmol L-1鐵氰化鉀和10-2~10 mmol L-1硝酸鉀溶液中進行測試;

(2)用方波伏安法對赭曲霉毒素A標準溶液進行檢測,其電壓測試范圍為-0.6V ~ 0.3V;

(3)當背景電流趨于穩(wěn)定后,觀察赭曲霉毒素A加入前后傳感器的峰電流值,然后記錄電流變化,繪制工作曲線。

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