本發(fā)明涉及農藥殘留物乙酰甲胺磷的檢測方法，具體地說是一種金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜制備用于電化學方法檢測乙酰甲胺磷。
背景技術：
有機磷農藥是一類含磷的有機化合物。與其他種類的農藥相比，有機磷農藥具有殺蟲譜廣、藥效高、殘留期短和價格低廉的特點，是我國目前使用范圍最廣、用量最大的農藥。有機磷農藥對節(jié)肢動物和哺乳動物會造成乙酰膽堿積累，引起神經功能障礙，從而導致對肌體的損傷。由于部分有機磷農藥毒性較大，目前已經被禁止使用、銷售，如甲胺磷、對硫磷、甲基對硫磷、久效磷、磷胺等。由于乙酰甲胺磷在降解過程中生成毒性更高的有機磷農藥甲胺磷，所以乙酰甲胺磷在環(huán)境中仍然殘留較大風險，我過規(guī)定乙酰甲胺磷在蔬菜中最大殘留量為1mg/kg。
目前農藥檢測分析方法主要有：色譜法、酶抑制法、免疫學方法、化學發(fā)光法等。色譜法是最為常用的檢測農藥的方法，由于一般所測樣品中雜質較多，容易受到干擾，通常在分析之前需要對樣品進行前處理，來提高方法的準確性和靈敏度。酶抑制法的靈敏度一般較差，重復率、回收率較低，且對不同農藥的靈敏度不同，所以一般適用于現(xiàn)場的快速檢測及大批樣品的篩選檢測。免疫學方法對試劑的選擇性要求較高，檢測時需要事先合成相對應的人工抗原。半抗原的合成不單工作量大、周期長，而且可能與待測農藥結構類似的農藥或待測農藥代謝物發(fā)生不同程度的交叉反應。化學發(fā)光法檢測的選擇性較差，而大多數的分析樣品成分復雜，所以通常將化學發(fā)光技術與分離技術聯(lián)用，以達到理想效果。因此，建立一種高靈敏度和特異性的快速篩檢農藥殘留物的方法，便成為當前該研究領域亟需解決的問題之一。
金屬有機框架材料，是一類具有高孔隙率、高比表面積、結構可調的化合物，利用其性質優(yōu)勢結合分子印跡膜材料可以提高吸附量。分子印跡敏感材料與生物敏感材料如生物酶、抗原抗體等相比，不但具有耐高溫、高壓、有機溶劑、酸、堿等，而且能夠多次重復使用；同時分子印跡聚合物材料對目標分子具有高選擇性、高吸附性，因此它比較適合用作電化學傳感器的敏感材料，組裝成分子印跡的電化學傳感器。此外，與常規(guī)和傳統(tǒng)的傳感器材料相比，它對目標化合物具有較好的選擇性、良好的穩(wěn)定性，將分子印跡材料作為電化學傳感器的敏感部件，然后通過電化學手段轉換成可測量電信號，可用于高選擇定量分析乙酰甲胺磷物質。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于建立一種金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜用于乙酰甲胺磷的電化學檢測方法。
所述的一種金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜用于乙酰甲胺磷的電化學檢測方法過程如下：
（1）硝酸銅與4,4'-聯(lián)苯二甲酸溶液置于反應釜，水熱反應后，洗滌、干燥，得到金屬有機框架材料Cu(BPDA)；
（2）選擇乙酰甲胺磷分子印跡聚合物膜的功能單體；
（3）以（1）中得到的Cu(BPDA)為支持體，將模板分子、功能單體、交聯(lián)劑、致孔劑和引發(fā)劑混合均勻，制備金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物溶液；
（4）利用索氏提取器通過洗脫劑去除掉其分子印跡聚合物中模板分子，得到Cu(BPDA)@MIP；
（5）取一定量（4）中得到Cu(BPDA)@MIP于nafion溶液中，超聲分散，旋涂于電極表面；
（6）電極置于含有乙酰甲胺磷的緩沖溶液中吸附一定時間，二次蒸餾水洗滌，置于含有硫堇的空白緩沖溶液采用差分脈沖伏安法檢測。
所述的一種金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜用于乙酰甲胺磷的電化學檢測方法具體步驟如下：
（1）金屬有機框架材料Cu(BPDA)的制備：取1.2 g 硝酸銅，1 g 4,4'-聯(lián)苯二甲酸，溶解在10 mL二次蒸餾水、10 mL N,N-二甲基甲酰胺和10 mL甲醇混合液中；充分混勻置于50 mL內襯聚四氟乙烯反應釜內膽中，130 ℃下反應24 h，依次用N,N-二甲基甲酰胺和二次蒸餾水洗滌3次，70 ℃干燥2 h，得到Cu(BPDA)材料。
（2）發(fā)明所述的乙酰甲胺磷分子印跡聚合物膜的功能單體為甲基丙烯酸。
（3）本發(fā)明所述的交聯(lián)劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯，致孔劑為乙腈、引發(fā)劑為偶氮二異丁腈。
（4）加入0.05 g金屬有機框架材料Cu(BPDA)，10 mL乙腈，加入0.386 g乙酰甲胺磷充分攪拌使其完全溶解，然后加入 0.68 mL甲基丙烯酸，充分攪拌1h，加入0.60 mL的乙二醇二甲基丙烯酸酯和40 mg偶氮二異丁腈，然后60 ℃水浴聚合24 h，得Cu(BPDA)@MIP。
（5）取上述物質Cu(BPDA)@MIP置于索氏提取器，加入135 mL甲醇和15 mL冰乙酸做洗脫劑，連續(xù)洗脫48 h，至洗脫液中無乙酰甲胺磷，70℃真空干燥，得干燥的金屬框架材料支持的分子印跡聚合物膜。
（6）取0.02g Cu(BPDA)@MIP置入1mL 5% nafion溶液，超聲分散，旋涂玻碳電極表面。
（7）將（6）制得電極置于含有不同濃度的乙酰甲胺磷的pH 6.2的磷酸緩沖溶液中吸附10 min，二次蒸餾水洗滌3次，將電極置于含有0.1mmol/L硫堇的pH6.2 的磷酸空白緩沖溶液，采用差分脈沖伏安法檢測，掃描電壓0-0.6V。
本發(fā)明的有益效果：
（1）本發(fā)明采用金屬框架材料作為支持體合成出比表面積大、傳質速度快的分子印跡聚合物膜。
（2）本發(fā)明所述的乙酰甲胺磷分子印跡聚合物選擇性強，對乙酰甲胺磷具有特異性識別。
（3）本發(fā)明成本低廉、實驗操作簡單，反應條件容易控制。
（4）本發(fā)明用于乙酰甲胺磷的檢測，具有穩(wěn)定性好，靈敏度高。
具體實施方式
下面對本發(fā)明的詳細實施例進行說明：一種金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜用于乙酰甲胺磷的電化學檢測方法。
實施例1：用于環(huán)境水樣中乙酰甲胺磷檢測
（1）金屬有機框架材料Cu(BPDA)的制備：取1.2 g 硝酸銅，1g 4,4'-聯(lián)苯二甲酸，溶解在10 mL二次蒸餾水、10 mL N,N-二甲基甲酰胺和10 mL甲醇混合液中；充分混勻置于50 mL內襯聚四氟乙烯反應釜內膽中，130 ℃下反應24 h，得到棒狀固體，依次用N,N-二甲基甲酰胺和二次蒸餾水洗滌3次，70 ℃干燥2 h，得到金屬有機框架材料Cu(BPDA)。
（2）以金屬有機框架材料為支持體，采用甲基丙烯酸為功能單體制備乙酰甲胺磷分子印跡聚合物膜。首先在100 mL圓底燒瓶中加入0.05g金屬有機框架材料Cu(BPDA)，10 mL乙腈，加入0.386 g乙酰甲胺磷充分攪拌使其完全溶解；然后加入 0.68 mL甲基丙烯酸，充分攪拌1 h，隨后再加入0.60 mL的乙二醇二甲基丙烯酸酯和40 mg偶氮二異丁腈，然后60 ℃水浴磁力攪拌下聚合24 h，得金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜Cu(BPDA)@MIP。
（3）取上述物質Cu(BPDA)@MIP置于索氏提取器，加入135 mL甲醇和15 mL冰乙酸做洗脫劑，連續(xù)洗脫48 h，至洗脫液無乙酰甲胺磷，70 ℃真空干燥，得到干燥金屬框架材料支持的分子印跡聚合物膜。
（4）取0.02 g Cu(BPDA)@MIP 加入1 mL 5% nafion溶液，超聲分散均勻，采用勻膠機均勻旋涂于玻碳電極表面。
（5）將制備制得電極置于含有不同濃度的乙酰甲胺磷的pH 6.2的0.01 mol/L磷酸緩沖溶液中吸附10 min，取出電極二次蒸餾水洗滌3次，將電極置于含有0.1 mmol/L硫堇的pH 6.2 的0.01 mol/L磷酸空白緩沖溶液，采用差分脈沖伏安法檢測，掃描電壓0-0.6 V；繪制工作曲線。
（6）實際水樣處理：采集河水、湖水實際樣品，通過孔徑為0.22 μm的濾膜過濾，取濾液5.0 mL，加入5.0 mL pH 6.2 0.01 mol/L磷酸緩沖溶液，將修飾工作電極置于樣品中10 min，取出電極二次蒸餾水清洗3次后，電極置于含有0.1mmol/L硫堇的pH 6.2 的0.01 mol/L磷酸空白緩沖溶液，采用差分脈沖伏安法檢測。因此，基于金屬有機框架材料表面負載分子印跡聚合物膜用于檢測乙酰甲胺磷，該方法實現(xiàn)了操作簡便，快速，費用低和無需專業(yè)人士即可檢測乙酰甲胺磷。