本發(fā)明涉及PM2.5實驗，具體地，涉及一種抗污染測試裝置及方法。
背景技術：
：近年來隨著全球工業(yè)化和城市化進程突飛猛進，造成的環(huán)境污染問題也引起了人們的廣泛關注。大氣污染物包括臭氧、PM顆粒物以及有機揮發(fā)物等。PM(ParticulateMatter)指的是懸浮在空氣中的細小顆粒，其中直徑大小在2.5微米左右的我們稱之為PM2.5。PM2.5含有很多成分，多環(huán)芳烴，各種重金屬，氮化物，硫化物，二次顆粒物，細菌，病毒等，在中國主要來源是汽車尾氣和燃煤。當我們身處空氣污染的環(huán)境中，人體最大的器官--皮膚不可避免地成為人體直接接觸外界污染的第一道防線，也是大氣污染物PM2.5進入機體的途徑之一。德國曾做過一個實驗，以住在德國的400名女性為對象，有研究調查過他們在24年來受到的大氣污染影響。結果發(fā)現(xiàn)在空氣污染嚴重的地方(一天有1萬臺車以上通過的道路100米內)居住的人額頭和臉頰有更多數(shù)量的斑和皺紋，還有法令紋等老化現(xiàn)象。研究發(fā)現(xiàn)污染物PM2.5顆粒本身接觸皮膚，引起表層皮脂氧化，造成第一層傷害；其次，污染物PM2.5顆粒、有機揮發(fā)物以及紫外線的協(xié)同作用之下，導致肌膚屏障受到損傷，造成第二層傷害；透過毛孔和受損的角質層屏障滲透到皮膚深層的PM2.5顆粒最終導致深層細胞發(fā)炎，即第三層傷害；更深層滲透后會導致基底細胞的細胞及DNA損傷，引起皮膚老化等深層傷害。目前全世界對抗污染化妝品訴求越來越強烈，但對于PM2.5透皮吸收的研究很少。PM2.5顆粒是如何透過皮膚，透過了多少，研究很少。目前在化妝品及其原料開發(fā)領域主要是針對單獨的多環(huán)芳烴貨香煙提取及重金屬進行淺層次的研究。技術實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種抗污染測試裝置及方法，更加真實地得到能夠透過皮膚深層的大氣PM2.5，并設計相應的抗污染測試評價方案，在體內和體外研究PM2.5對皮膚深層影響提供可行性。根據本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，包括PM接收裝置、PM10過濾器以及第一容納容器；其中，所述PM接收裝置的輸出口連通所述PM10過濾器的輸入空；所述PM10過濾器的輸出口連通所述第一容納容器。優(yōu)選地，還包括第二容納容器、水浴燒杯和第一氣泵；其中，所述第二容納容器連通所述第一容納容器；所述第一容納容器和所述第二容納容器之間設置有第一3D皮膚仿生滲透膜；所述水浴燒杯一方面通過第一管體連通所述第二容納容器，另一方面連通第二管體連通所述第一氣泵的氣口。優(yōu)選地，還包括透皮后PM2.5提取裝置；其中，所述透皮后PM2.5提取裝置設置在所述第一管體上；所述透皮后PM2.5提取裝置的輸入口連通所述第二容納容器，輸出口連通所述水浴燒杯。優(yōu)選地，所述第一管體上設置有第一流量控制器；所述第二管體上設置有第二流量控制器。優(yōu)選地，還包括第二3D皮膚仿生滲透膜、細胞培養(yǎng)處理膜以及DMEM培養(yǎng)基；其中，所述第二3D皮膚仿生滲透膜、所述細胞培養(yǎng)處理膜依次設置在所述DMEM培養(yǎng)基上；所述DMEM培養(yǎng)基設置在所述第一容納容器的底面上。優(yōu)選地，還包括隔板和第二氣泵；其中，所述隔板將所述第一容納容器分隔與第一區(qū)域和第二區(qū)域；所述第一區(qū)域通過連接通道連通至第二區(qū)域；所述第二3D皮膚仿生滲透膜、細胞培養(yǎng)處理膜以及DMEM培養(yǎng)基設置在所述第一區(qū)域；所述DMEM培養(yǎng)基通過所述連接通道延伸至第二區(qū)域；所述第二氣泵的氣口通過第三管體連通所述第二區(qū)域；所述第三管體上設置有第三流量控制器。優(yōu)選地，還包括水浴器皿；所述水浴器皿內盛有水浴水；所述水浴燒杯設置在所述水浴器皿中。本發(fā)明提供的抗污染測試方法，采用所述的抗污染測試裝置。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：1、本發(fā)明能夠更真實的模擬皮膚對其吸收情形，提高體外實驗的真實性和準確性；2、本發(fā)明采用3D皮膚仿生滲透膜進行實驗。更貼近人體測試，但比直接用人體測試更方便統(tǒng)計，更為安全和節(jié)約成本。附圖說明通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細描述，本發(fā)明的其它特征、目的和優(yōu)點將會變得更明顯：圖1為本發(fā)明的一種結構示意圖；圖2為本發(fā)明的另一種結構示意圖。圖中：1為PM接收裝置；2為PM10過濾器；3為第一容納容器；4為第二容納容器；5為第一3D皮膚仿生滲透膜；6為第一流量控制器；7為第二流量控制器；8為水浴燒杯；9為第一氣泵；10為第二3D皮膚仿生滲透膜；11為細胞培養(yǎng)處理膜；12為DMEM培養(yǎng)基；13為第三流量控制器；14為第二氣泵。具體實施方式下面結合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。以下實施例將有助于本領域的技術人員進一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應當指出的是，對本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。在本實施例中，本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，包括PM接收裝置、PM10過濾器以及第一容納容器；其中，所述PM接收裝置的輸出口連通所述PM10過濾器的輸入空；所述PM10過濾器的輸出口連通所述第一容納容器。本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，還包括第二容納容器、水浴燒杯和第一氣泵；其中，所述第二容納容器連通所述第一容納容器；所述第一容納容器和所述第二容納容器之間設置有第一3D皮膚仿生滲透膜；所述水浴燒杯一方面通過第一管體連通所述第二容納容器，另一方面連通第二管體連通所述第一氣泵的氣口。本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，還包括透皮后PM2.5提取裝置；其中，所述透皮后PM2.5提取裝置設置在所述第一管體上；所述透皮后PM2.5提取裝置的輸入口連通所述第二容納容器，輸出口連通所述水浴燒杯。所述第一管體上設置有第一流量控制器；所述第二管體上設置有第二流量控制器。本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，還包括第二3D皮膚仿生滲透膜、細胞培養(yǎng)處理膜以及DMEM培養(yǎng)基；其中，所述第二3D皮膚仿生滲透膜、所述細胞培養(yǎng)處理膜依次設置在所述DMEM培養(yǎng)基上；所述DMEM培養(yǎng)基設置在所述第一容納容器的底面上。本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，還包括隔板和第二氣泵；其中，所述隔板將所述第一容納容器分隔與第一區(qū)域和第二區(qū)域；所述第一區(qū)域通過連接通道連通至第二區(qū)域；所述第二3D皮膚仿生滲透膜、細胞培養(yǎng)處理膜以及DMEM培養(yǎng)基設置在所述第一區(qū)域；所述DMEM培養(yǎng)基通過所述連接通道延伸至第二區(qū)域；所述第二氣泵的氣口通過第三管體連通所述第二區(qū)域；所述第三管體上設置有第三流量控制器。本發(fā)明提供的抗污染測試裝置，還包括水浴器皿；所述水浴器皿內盛有水浴水；所述水浴燒杯設置在所述水浴器皿中。所述第一氣泵和所述第二氣泵采用吸揚式氣泵。第一3D皮膚仿生滲透膜、第二3D皮膚仿生滲透膜采用美國LifeScience公司生成的3D皮膚仿生滲透膜。本發(fā)明提供的抗污染測試方法，采用的抗污染測試裝置。當使用本發(fā)明提供的抗污染測試裝置時，如圖1所示。地點：在上海市中心(徐家匯)收集大氣PM2.5；時間：2016年1月14日-16日(每天提取8小時)共計24小時；大氣條件：實驗地段平均每天有700000±300輛汽車通過；動力：氣泵維持恒定流速1.2m3/分。通過本發(fā)明提供的抗污染測試裝置提取PM2.5，進行體外測試實驗，如下MTT法檢測小球藻生長因子(CPEs)對人成纖維細胞生長的影響取對數(shù)期生長的人成纖維細胞100μL(濃度為2*105個/mL)加入到96孔細胞板中，待細胞貼壁后，吸出培養(yǎng)基，加入終濃度為0.01％、0.05％和0.1％的小球藻生長因子(CPEs)溶液，置于溫箱培養(yǎng)24h，每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，37℃孵育4h。孵育完成后，用移液槍小心的吸出每孔培養(yǎng)基，加入150μLDMSO溶液，待甲瓚結晶溶解后，放入酶標儀震蕩混勻5min，以630nm波長為參考，在全波長酶標儀上檢測492nm波長處的OD值，并計算細胞存活率。細胞存活率＝加藥組/對照組*100％；對照0.01％CPEs0.05％CPEs0.1％CPEs細胞存活率100％104％110％121％CPEs對巨噬細胞Ana-1吞噬活性的影響。取對數(shù)生長期的細胞，吹打制成2*105個/mL單細胞懸液，每孔100μL，接種于96孔細胞板，細胞貼壁后棄培養(yǎng)上清液，設對照組、加藥組，每組6個復孔，加藥組加入終濃度為0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％CPEs溶液，分別培養(yǎng)24，48，72h后，每孔加新鮮配制的0.1％NR和PM2.5懸濁液20μL，輕輕混勻后繼續(xù)培養(yǎng)3h。之后小心吸棄含有NR的培養(yǎng)液，用生理PBS輕柔洗去未被吞噬的NR。每孔加150μL細胞裂解液(無水乙醇：乙酸＝1：1(v/v))，靜置2h，使細胞溶解，震蕩混勻后測定540nm處OD值[90]。細胞對NR的吞噬率如下：吞噬率＝加藥組/對照組*100％；對照0.005％CPEs0.01％CPEs0.02％CPEs0.03％CPEs0.04％CPEs巨噬細胞吞噬率100％150.3％192.4％216.4％193.3％188.2％當使用本發(fā)明提供的抗污染測試裝置時，如圖2所示，地點：在上海市中心(徐家匯)收集大氣PM2.5；時間：2016年1月14日-16日(每天提取8小時)共計24小時；大氣條件：實驗地段平均每天有700000±300輛汽車通過；動力：氣泵維持恒定流速1.2m3/分實驗步驟：1、準備三臺裝置，將3塊3D皮膚做免疫標記；A、直接培養(yǎng)人3D皮膚5天；B、提取PM2.51小時后培養(yǎng)人3D皮膚5天；C、在3D皮膚上均勻涂抹0.5％的小球藻深層凈化因子(CPEs)后再提取PM2.51小時，培養(yǎng)3D皮膚5天；2、5天后使用Leica’sQ500成像分析軟件測量A/B/C三種情況下人3D皮膚厚度；3、檢測標記物絲聚蛋白的表達量。以上對本發(fā)明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實施方式，本領域技術人員可以在權利要求的范圍內做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實質內容。當前第1頁1 2 3