棉籽餅粕中棉籽糖的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種棉籽餅粕中棉籽糖的測定方法，屬于食品添加劑及其檢測方法領域。所述的棉籽餅粕中棉籽糖的測定方法,包括以下步驟：標準曲線制作：稱取棉籽糖，水溶，轉移至容量瓶中，稀釋備用，測定其峰面積并計算回歸方程及相關系數(shù)。試樣測定：稱取5.0g粉碎回流除脂后的棉籽餅粉于燒瓶中，加入乙醇溶液，攪拌提取1h，抽濾，重復提取2次，合并濾液，沉淀蛋白，離心，重復2次，至無鉛為止，將濾液真空濃縮，移至容量瓶，定容備用，測定其峰面積。(3)計算:根據(jù)標準曲線方程和試樣的峰面積，得到棉籽糖的含量。本發(fā)明簡單快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好、結果準確可靠。因此，本發(fā)明所述的測定方法可用于棉籽或棉籽餅粕中棉籽糖的快速常規(guī)分析測定。
【專利說明】棉籽餅粕中棉籽糖的測定方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種棉籽餅柏中棉籽糖的測定方法，屬于食品添加劑及其檢測方法領 域。
【背景技術】
[0002] 棉籽糖又稱蜜三糖，是a-D-批喃半乳糖（1 - 6) a-D-批喃葡萄糖（1 - 2) β-D-呋喃果糖，是存在于甜菜、棉籽、蜂蜜、馬鈴薯、玉米、豆科植物等中的一種低聚糖。在 植物界中，分布最廣泛中低聚糖除蔗糖外，就屬棉籽糖。
[0003] 長期以來，人們都認為棉籽糖是腸胃脹氣因子，常常在加工過程中利用各種方法 將其除去。后來隨著人們對棉籽糖的雙歧桿菌促生作用的認識，對棉籽糖的看法就有了新 的改變，人們發(fā)現(xiàn)棉籽糖除了是一種優(yōu)良的雙歧桿菌增殖因子外，還具有低能量、能抑制腸 內腐敗產(chǎn)物、改善排便功能、防止便秘及增強機體免疫力、抵抗腫瘤等多種生理功能。目前， 棉籽糖的分析測定方法，以往有紙色譜、薄層色譜等，但這些方法存在樣品前處理復雜、靈 敏度低、雜質干擾大等缺點，且用于定量的準確性低。
[0004] 因此，建立一種簡便、快速、準確測定棉籽糖的方法很有必要。
【發(fā)明內容】
[0005] 本發(fā)明旨在提供一種簡便、快速、準確的棉籽餅柏中棉籽糖含量的測定方法。
[0006] 本發(fā)明所述的棉籽餅柏中棉籽糖的測定方法，包括以下步驟： (1)標準曲線制作： 準確稱取〇. 25g棉籽糖標準品，用水溶解，定量轉移至250mL容量瓶中，并稀釋至體積 備用，通過高效液相色譜儀測定其峰面積并計算回歸方程及相關系數(shù)。
[0007] (2)試樣測定： 準確稱取5. Og經(jīng)粉碎并用石油醚回流除脂后的棉籽餅粉于燒瓶中，以料液重量比1:9 加入80%乙醇溶液，于60°C在攪拌下提取lh，抽濾，濾餅再于同樣條件下重復提取2次，合 并濾液，用10%醋酸鉛溶液沉淀蛋白，離心，重復2次至蛋白除盡，再用草酸除鉛至無鉛為 止，將所得濾液真空濃縮后，移至25mL容量瓶，并定容至體積備用，通過高效液相色譜儀測 定其峰面積。
[0008] (3)計算： 根據(jù)標準曲線方程和試樣的峰面積，可得到棉籽餅柏中棉籽糖的含量。
[0009] 優(yōu)選的，本發(fā)明所述的高效液相色譜儀的色譜條件是：迪馬C18柱，5μπι 4. 6*200mm ;柱溫25°C ;流動相流速為I. Oml/min ;紫外檢測器波長254nm。
[0010] 更優(yōu)選的，本發(fā)明所述的流動相為乙腈：水=20 :80的混合液。
[0011] 經(jīng)測定，本發(fā)明所述的測定方法此方法標準曲線線性好，濃度與峰面積間呈正相 關，相關性好，可用于外標法進行定量測定。此方法回收率與精密度試驗結果較好，回收 率在99. 2%(n=3)，變異系數(shù)為1. 82%，樣品重復測定3次的標準差為0. 0884,變異系數(shù)為 I. 69%ο
[0012] 本發(fā)明所述的測定方法采用高效液相色譜法，本方法具有簡單快速、靈敏度高、重 現(xiàn)性好、結果準確可靠等特點。因此，本發(fā)明所述的測定方法可用于棉籽或棉籽餅柏中棉籽 糖的快速常規(guī)分析測定。
【具體實施方式】
[0013] 實施例一： (1)標準溶液的配制：準確稱取0. 25g棉籽糖標準品，用水溶解，定量轉移至250mL容 量瓶中，并稀釋至體積備用，通過高效液相色譜儀測定其峰面積并計算回歸方程及相關系 數(shù)如表-1所示。
[0014] 表-1標準曲線
【權利要求】
1. 棉籽餅柏中棉籽糖的測定方法，包括以下步驟： (1)標準曲線制作：準確稱取0. 25g棉籽糖標準品，用水溶解，定量轉移至250mL容 量瓶中，并稀釋至體積備用，通過高效液相色譜儀測定其峰面積并計算回歸方程及相關系 數(shù)； (2)試樣測定：準確稱取5. 0g經(jīng)粉碎并用石油醚回流除脂后的棉籽餅粉于燒瓶中，以 料液重量比1:9加入80%乙醇溶液，于60°C在攪拌下提取lh，抽濾，濾餅再于同樣條件下重 復提取2次，合并濾液，用10%醋酸鉛溶液沉淀蛋白，離心，重復2次至蛋白除盡，再用草酸 除鉛至無鉛為止，將所得濾液真空濃縮后，移至25mL容量瓶，并定容至體積備用，通過高效 液相色譜儀測定其峰面積； ⑶計算：根據(jù)標準曲線方程和試樣的峰面積，可得到棉籽餅柏中棉籽糖的含量。
2. 如權利要求1所述的棉籽餅柏中棉籽糖的測定方法，其特征在于所述的高效液相 色譜儀的色譜條件是：迪馬C18柱，5 y m 4. 6*200mm ;柱溫25°C ;流動相流速為1. Oml/min ; 紫外檢測器波長254nm。
3. 如權利要求1或2所述的棉籽餅柏中棉籽糖的測定方法，其特征在于所述的流動相 為乙腈：水=20 :80的混合液。
【文檔編號】G01N30/02GK104391052SQ201410577147
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月24日 優(yōu)先權日:2014年10月24日
【發(fā)明者】李勇, 劉文斌 申請人:西安瑩樸生物科技股份有限公司