一種香豆素衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種香豆素衍生物及其制備方法和應(yīng)用，所述的香豆素衍生物，其分子式為C13H6N2O4。其制備方法包括：先制備4-氯甲基-7-羥基香豆素、4-羥甲基-7-羥基香豆素和7-羥基香豆素-4-甲醛；然后將7-羥基香豆素-4-甲醛加到水中，再加入丙二腈和1-甲基咪唑，室溫?cái)嚢?，過濾制得2,2-二氰基-3-（7-羥基-4-香豆素基）環(huán)氧乙烷。本發(fā)明制備的2,2-二氰基-3-（7-羥基-4-香豆素基）環(huán)氧乙烷可以作為選擇性檢測生物體內(nèi)半胱氨酸的熒光探針，也可用于熒光標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸，為臨床醫(yī)學(xué)中相關(guān)疾病的診斷提供幫助。
【專利說明】ー種香豆素衍生物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及香豆素衍生物，具體是2，2- 二氰基-3- (7-羥基-4-香豆素基)環(huán)氧乙烷的制備方法及其作為熒光探針在檢測生物體內(nèi)半胱氨酸中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】[0002]氨基酸是構(gòu)成生物體蛋白質(zhì)并與生命活動(dòng)有關(guān)的最基本的物質(zhì)，與生物的生命活動(dòng)有著密切的關(guān)系。半胱氨酸作為人體必須的氨基酸之一，是參與蛋白質(zhì)合成的20種氨基酸中的ー種，同時(shí)也是構(gòu)建重要的谷胱甘肽的三個(gè)氨基酸之一；而高半胱氨酸為甲硫氨酸代謝的中間產(chǎn)物，本身不參與蛋白質(zhì)的合成，體內(nèi)高半胱氨酸含量的大小與許多疾病相關(guān)聯(lián)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，細(xì)胞內(nèi)高半胱氨酸的表達(dá)與心血管疾病有直接關(guān)聯(lián)。因此，研制高選擇性地識(shí)別半胱氨酸和高半胱氨酸熒光探針并實(shí)現(xiàn)其在活細(xì)胞中的熒光成像具有十分重要的意義。
[0003]近幾年來，人們開始關(guān)注設(shè)計(jì)合成對(duì)半胱氨酸具有特異性響應(yīng)的熒光探針，并合成了幾類有機(jī)熒光探針，具有代表性的主要有:香豆素類，羅丹明類，熒光素類，熒光染料B0DIPY,萘腙衍生物，本探針化合物與半胱氨酸作用后，熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，其他一些常見氨基酸幾乎沒有顯著地?zé)晒忭憫?yīng)。因此本發(fā)明可以作為選擇性檢測生物體內(nèi)半胱氨酸的熒光探針，也可用于熒光標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸，為臨床醫(yī)學(xué)中相關(guān)疾病的診斷提供幫助。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]發(fā)明的目的在于提供ー種香豆素衍生物及其制備方法，該化合物可用于生物體內(nèi)半胱氨酸的檢測，也可用于細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸的熒光標(biāo)記。
[0005]本發(fā)明提供的ー種香豆素衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下:
[0006]
【權(quán)利要求】
1.ー種香豆素衍生物，其特征在于，分子式為C13H6N2O4，結(jié)構(gòu)式如下:

2.如權(quán)利要求1所述的香豆素衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)制備4-氯甲基-7-羥基香豆素； (2)用4-氯甲基-7-羥基香豆素制備4-羥甲基-7-羥基香豆素； (3)用4-羥甲基-7-羥基香豆素制備7-羥基香豆素-4-甲醛； (4)按質(zhì)量比1: 5~10將7-羥基香豆素-4-甲醛加到水中，再加入I~2倍7-羥基香豆素-4-甲醛摩爾量的丙二腈和0.1~0.3倍7-羥基香豆素-4-甲醛摩爾量的1-甲基咪唑，室溫?cái)埾榉磻?yīng)12小時(shí)，過濾得2，2- 二氛基-3- (7-羥基-4-香素基)環(huán)氧こ燒。
3.如權(quán)利要求1所述的的香豆素衍生物在檢測生物體內(nèi)半胱氨酸中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求1所述的的香豆素衍生物在細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記半胱氨酸中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N33/52GK103570701SQ201310533306
【公開日】2014年2月12日 申請(qǐng)日期:2013年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月1日
【發(fā)明者】鈔建賓, 張永斌, 張艷 申請(qǐng)人:山西大學(xué)