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一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒及其檢測方法

文檔序號:6175577閱讀:1022來源:國知局
一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒及其檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了屬于違禁品檢測分析【技術領域】的一種檢測尿液、唾液、血液、毛發(fā)中毒品的酶聯(lián)免疫試劑盒及其檢測方法。該試劑盒包含以下物質:毒品標準品溶液,毒品特異性抗體;包被有毒品特異性抗體的酶標板;毒品抗原酶標記物;顯色劑;濃縮洗滌液;終止液和樣品稀釋液。本發(fā)明的酶聯(lián)免疫試劑盒具有高特異性、高靈敏度、高準確度等特點,在毒品檢測中發(fā)揮重要作用。
【專利說明】-種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒及其檢測方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于違禁品檢測分析【技術領域】,具體涉及一種檢測尿液、唾液、血液、毛發(fā) 中毒品的酶聯(lián)免疫試劑盒及其檢測方法。

【背景技術】
[0002] 在國際毒潮泛濫影響下,我國的毒品形勢十分嚴峻,截止到2013年5月底的統(tǒng)計 數(shù)字,中國當前吸毒群體222萬人,此外還有不少隱性吸毒人員。因此,為了預防和懲治毒 品違法犯罪行為,保護公民身也健康,維護社會秩序的工作,建立準確可靠、靈敏度高的毒 品檢測是十分必要的。
[0003] 鴉片類毒品大都有致幻性和麻醉性,具有鎮(zhèn)痛作用,主要包括鴉片、大麻、海洛因、 嗎啡、6-單己醜嗎啡、可待因等。苯丙胺類毒品是指W苯丙胺為母體的一類人工合成的化合 物。在我國管制的精神藥品中,屬于該類毒品的有苯丙胺、甲基苯丙胺(冰毒)、還有其苯 環(huán)上的取代衍生物3,4-亞甲二氧基苯丙胺、3,4-亞甲二氧基甲基苯丙胺(搖頭丸)等。K 粉,醫(yī)學上稱氯胺麗,屬于靜脈全麻藥品,具有一定的精神依賴性。K粉成癒后,在毒品作用 下,吸食者會瘋狂搖頭,很容易搖斷頸椎;同時,瘋狂的搖擺還會造成也力、呼吸衰竭。吸食 過量或長期吸食,可W對也、肺、神經都造成致命損傷,對中樞神經的損傷比冰毒還厲害。據(jù) 近年國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《藥物濫用監(jiān)測報告》顯示,我國目前主要受到的是W 嗎啡、海洛因、杜冷下等為主的傳統(tǒng)毒品和W冰毒、搖頭丸、K粉、咖啡因等為主的新型毒品 的危害。
[0004] 目前報道用于檢測毒品的方法主要有氣相色譜法(GC)、氣相色譜-質譜聯(lián)用法 佑C / MS)、高效液相色譜(-HPLC)、高效液相色譜-質譜聯(lián)用法(HPLC / MS)、毛細管電泳 法(CE) W及免疫分析法(IA)等。色譜法是目前國際上普遍采用的檢測方法,靈敏度高、準 確性好,常作為藥物殘留檢測的確認方法,但其對儀器和操作人員要求都較高,成本也比較 高,一個樣品檢測要幾百元,檢測時間也很長,不利于在基層單位推廣使用。免疫分析法是 國際上通用的一種毒品篩選方法。目前常用的膠體金法受所用的生物制劑的影響,假陽性 出現(xiàn)的概率很高,而且由于膠體金法靈敏度低,顏色判斷有人為因素致使準確性差。
[0005] 因此建立一種快速、靈敏、準確,并可W大批量應用于毒品檢測的方法是具有非常 重要的現(xiàn)實意義的。


【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種檢測尿液、唾液、血液、毛發(fā)中毒品的酶聯(lián)免疫試劑 盒,解決目前的檢測毒品方法"快而不靈,靈而不快"的技術問題。
[0007] 本發(fā)明的目的還在于提供一種應用上述試劑盒進行毒品檢測的方法。
[0008] -種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,包含W下物質:毒品標準品溶液,毒品特異性抗 體;包被有毒品特異性抗體的酶標板;毒品抗原酶標記物;顯色劑;濃縮洗涂液;終止液和 樣品稀釋液。
[0009] 所述毒品為嗎啡,氯胺麗,大麻,海洛因,6-單己醜嗎啡,可待因或苯丙胺類化合 物。
[0010] 所述苯丙胺類化合物為苯丙胺,甲基苯丙胺,3,4-亞甲二氧基苯丙胺或3,4-亞甲 二氧基甲基苯丙胺。
[0011] 所述毒品特異性抗體為用毒品與載體蛋白通過碳化二亞胺法合成的偶聯(lián)物,所述 載體蛋白為鼠血清蛋白、牛血清蛋白、甲狀腺蛋白、兔血清蛋白或血藍蛋白。
[0012] 所述毒品抗原酶標記物中的標記酶為辣根過氧化物酶或堿性磯酸醋酶。
[0013] 所述顯色劑為鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺。
[0014] 所述濃縮洗涂液為含有0. 5%吐溫-20,0. Olmol / L的磯酸鹽緩沖液;終止液為 l-2mol / L的硫酸,鹽酸或氨氧化軸緩沖液;樣品稀釋液為0. Olmol / L的磯酸鹽緩沖液。
[0015] 采用上述試劑盒進行毒品檢測的方法,按照如下步驟進行:
[001引 (1)樣品前處理
[0017] 當被檢樣品為尿液,唾液,血液時,直接進行檢測;當被檢樣品為毛發(fā)時,先用甲 醇溶液清洗,清洗曬干后用剪刀剪成1-lOmm的片段,稱取2-20mg的上述毛發(fā)片段,加入 0. 5-2ml甲醇溶液,70-75C水浴兩小時后靜止冷卻至室溫,取上清液37C氮吹干,殘渣用 100-200U1樣品稀釋液稀釋,振蕩器上振蕩充分溶解,待檢測;
[0018] (2)向包被有毒品特異性抗體的酶標板上,加入樣品溶液或毒品標準品溶液W及 毒品抗原酶標記物溶液室溫賠育15-30分鐘,待測樣品中的毒品與酶標記的毒品競爭酶標 板上的毒品抗體,洗板3次,通過洗涂除去未結合的酶標記物,加顯色劑室溫賠育5-15分 鐘,顯色后用終止液終止,酶標儀測定樣品的吸光度值;
[001引 做步驟似獲得的吸光度值與樣品中毒品的量呈負關系,與標準曲線比較即可 得出樣品中毒品的濃度。
[0020] 本發(fā)明的有益效果;本發(fā)明所述的毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒可W定性、定量檢測 尿液、唾液、血液、毛發(fā)中毒品的含量,試劑盒對樣品的前處理要求低,樣品前處理過程簡 單,能同時快速檢測大批樣品;主要采用直接競爭酶聯(lián)免疫測定法,將W前酶聯(lián)免疫法中繁 瑣的操作步驟進行精簡、優(yōu)化,主要試劑又W溶液的形式提供,可減少試劑盒的操作步驟, 為使用者節(jié)省時間并降低因操作步驟繁瑣而造成的誤差;同時可W根據(jù)酶標板上的樣品顏 色的深淺,與毒品標準品系列濃度的顏色進行比較,不需要儀器即可判斷毒品的濃度范圍, 在定性檢測中,對儀器設備要求低,可實現(xiàn)現(xiàn)場的監(jiān)控;試劑盒保持時間長、自動化程度高、 成本低、無放射性同位素污染,經過對試劑盒的精密度和準確度測試實驗表明,本發(fā)明的酶 聯(lián)免疫試劑盒具有高特異性、高靈敏度、高準確度等特點,將在毒品檢測中發(fā)揮重要作用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021] 圖1為鴉片類檢測標準曲線圖。
[0022] 圖2為苯丙胺類檢測標準曲線圖。
[0023] 圖3為氯胺麗檢測標準曲線圖。

【具體實施方式】
[0024] 下面結合附圖和具體實施例對本發(fā)明做進一步說明。
[0025] 實施例1試劑盒組分的制備 [002引 (1)抗原的合成
[0027] A.嗎啡人工抗原的合成
[0028] 稱取嗎啡原料500mg,加入50mL苯和Ig玻巧酸酢,加熱回流她。裝好蒸發(fā)裝置, 蒸去苯。沉淀分別用無水己離、無水己醇洗涂,殘留物真空干燥,即得到粉末狀物質6-玻巧 酸-嗎啡。稱取上述粉末狀物質20mg溶于10ml PBS緩沖液(磯酸鹽緩沖液)中,加入30ul H己胺,再加入30ul氯甲酸異下醋,反應半小時。稱取20mg BSA溶解于PBS緩沖液中,加入 上述反應液,攬拌反應過夜,透析3天,高速冷凍離也機離也,收集上清液,得到嗎啡抗原。
[0029] B.甲基苯丙胺人工抗原的合成
[0030] 稱取甲基苯丙胺鹽酸鹽原料350mg溶于蒸觸水中,滴加Imol / L的化0H溶液至 甲基苯丙胺完全游離出來,加入無水Na2S〇4干燥過夜后,再加入氯仿萃取,分離出游離的甲 基苯丙胺油狀物,溶于適量的無水己醇,加入約200mg的玻巧酸酢,冰浴冷卻,加入約Ig無 水H氯化鉛。混合物在冰浴下攬拌4她,然后在低于1(TC的條件下滴加6mol / L的鹽酸水 解。直到凝結狀的固體物質粘附在燒瓶壁上,分去二氯甲焼層。加適量的水,滴加堿液調至 pH = 14,氯仿萃取后蒸干即得。將產物溶于少量水中,加入13. 5mgNHS,20. 24m班DC,攬拌 化后完成。取18. 32m濁SA溶于2mlPBS(0. 025mol / L,抑=7. 4)中,攬拌中將之前完成 的溶液滴入其中,偶聯(lián)化。最后在PBS透析液中低溫透析3天,高速冷凍離也機離也,收集 上清液,得到甲基苯丙胺抗原。
[0031] C.氯胺麗人工抗原的合成
[0032] 稱取氯胺麗鹽酸鹽原料274mg,調堿后用己酸己醋萃取得到氯胺麗游離堿。將氯 胺麗溶于20ml甲苯中,加入200mg^己胺,冰浴冷卻,用稀化0H溶液調抑至12,分出有機 相,用己酸己醋萃取,水洗涂有機相兩次,收集有機相,無水硫酸軸干燥比,除去溶劑后加入 至IJ甲醇中,并加入還原劑200mg反應過夜,經后處理即得。將上述物質與K0H、四正下基楓化 饋、KI和N-4-漠下基鄰苯二甲醜亞胺混合,加入己膳,升溫回流過夜,次日減壓除去溶劑, 加入水和己酸己醋,分層,收集有機相,減壓除去溶劑。將上述物質經脫解后得到氯胺麗半 抗原。取氯胺麗半抗原20mg溶于ImLDMF中,加入偶聯(lián)蛋白BSA和緩沖液PBS(0. Olmol / L,抑=7.4) 2ml的溶液,加入戊二酵,室溫攬拌化,4°C放置過夜,取出后在PBS溶液中透析 兩天。高速冷凍離也機離也,收集上清液,得到氯胺麗抗原。
[003引 似抗體的制備
[0034] 選取6只體重2-2. 5kg健康雄性新西蘭大白兔。將上述制備好的抗原與等量的弗 氏完全佐劑通過注射器對抽法混合成油包水的乳濁液,按Img / kg體重的量進行首次免 疫,采取背部皮下多點注射。每隔兩周加強免疫一次,用弗氏不完全佐劑代替弗氏完全佐 齊U,劑量及方法同首次免疫。從第H次免疫開始,每次免疫后10天,耳緣靜脈取血1ml,進行 抗體效價檢測,當抗體效價不再升高時,不加佐劑進行最后一次免疫,大腿肌肉注射,7天后 頸動脈放血,室溫凝固化后4°C過夜,800化/ min離也10分鐘,除去血塊,提取血清。經 透析后用S巧hadexG-25M層析,即得抗體。
[00對 做酶標板的制備
[003引 A.包被緩沖液神=9. 6,0. 05mol / L的碳酸鹽緩沖液仰巧。
[0037] B.封閉液:含有3%的聚己二醇,1 %的酪蛋白,4%的甘氨酸,1 %的卵清蛋白,1% 的明膠的磯酸鹽緩沖液。
[003引用包被緩沖液將上述(2)中的抗體稀釋至lug / ml,每孔加入100ul,37°C賠育化 或者4C過夜,倒去包被液,用洗涂液洗涂3次,拍干,然后每孔中加入200ul封閉液,37C溫 育化,倒去孔內液體,干燥后用鉛鉛真空密封保存。
[0039] (4)毒品抗原酶標記物的制備
[0040] 稱取辣根過氧化物酶25mg溶于1. 25 %戊二酵溶液中,于室溫靜置過夜,經 Se地adex G-25層析柱,用生理鹽水洗脫,流速控制在1ml / min,收集蹤色流出液,W聚二 己醇濃縮至5ml。稱取12. 5mg的毒品抗原,用生理鹽水稀釋至5ml,攬拌下逐滴加入上訴濃 縮液中。然后加入Imol / L的CBS0. 25ml,持續(xù)攬拌化,加0. 2mol / L的賴氨酸0. 25ml, 混勻后置于室溫化。在攬拌下逐滴加入等體積的飽和硫酸饋,4°C放置比。3000r / min離 也半小時,棄上清,沉淀用半飽和硫酸饋洗兩次,沉淀用〇.15mol / L的PBS溶解。將上述 溶液裝入透析袋中,用0. 15mol / L的PBS透析,去除饋離子后,lOOOOr / min離也半小時 去除沉淀,上清液即為毒品抗原酶標記物。
[0041] 實施例2鴉片類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒的組建
[0042] 組建鴉片類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,使其包含下述組分:
[0043] (1)嗎啡標準品溶液,濃度分別為 Ong / ml、0. 25ng / ml、0. 8ng / ml、2. 4ng / ml、化g / ml、21ng / /瓶,用下文所述的樣品稀釋液稀釋;
[0044] 似包被有嗎啡特異性抗體的酶標板,1塊,96孔;
[004引 (3)嗎啡酶標記物,1瓶,13ml ;
[0046] (4)顯色劑:四甲基聯(lián)苯胺磯酸鹽緩沖液,1瓶,13ml ;
[0047] (5)濃縮洗涂液;含有0. 5%吐溫、1%。疊氮化軸、O.Olmol / L PBS,1瓶,50ml,為 正常使用濃度的10倍;
[0048] (6)終止液;2mol / L 硫酸,1 瓶,13ml ;
[0049] (7)樣品稀釋液;0. Olmol / L PBS,1 瓶,5〇ml〇
[0050] 實施例3苯丙胺類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒的組建
[0051] 組建苯丙胺類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,使其包含下述組分:
[0052] (1)甲基苯丙胺標準品溶液,濃度分別為Ong / ml、0. 5ng/ml、l. 5ng / ml、 4. 5ng / ml、13. 5ng / ml、40. 5ng/ml,lml /瓶,用下文所述的樣品稀釋液稀釋;
[0053] (2)包被有甲基苯丙胺特異性抗體的酶標板,1塊,96孔;
[0054] 做甲基苯丙胺酶標記物,1瓶,13ml ;
[005引 (4)顯色劑:四甲基聯(lián)苯胺磯酸鹽緩沖液,1瓶,13ml ;
[0056] (5)濃縮洗涂液;含有0.5%吐溫、1%。疊氮化軸、O.Olmol / L PBS,1瓶,50ml,為 正常使用濃度的10倍;
[0057] (6)終止液;2mol / L 硫酸,1 瓶,13ml ;
[00則(7)樣品稀釋液;0. Olmol / L PBS,1 瓶,50ml0
[0059] 實施例4氯胺麗類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒的組建
[0060] 組建氯胺麗類檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,使其包含下述組分:
[006。 (1)氯胺麗標準品溶液,濃度分別為 Ong / ml、l. 5ng/ml、:3ng / ml、6ng/ml、 1化g / ml、24ng / /瓶,用下文所述的樣品稀釋液稀釋;
[0062] (2)包被有氯胺麗特異性抗體的酶標板,1塊,96孔;
[0063] (3)氯胺麗酶標記物,1瓶,13ml ;
[0064] (4)顯色劑:四甲基聯(lián)苯胺磯酸鹽緩沖液,1瓶,13ml ;
[00財 (5)濃縮洗涂液;含有0. 5%吐溫、1%。疊氮化軸、0. Olmol / L PBS,1瓶,50ml,為 正常使用濃度的10倍;
[0066] 做終止液;2mol / L硫酸,1瓶,ISml ;
[0067] (7)樣品稀釋液;0. Olmol / L PBS,1 瓶,50ml。
[006引實施例5血液樣品中鴉片類物質的檢測
[0069] 樣品前處理;直接取20ul血液樣本用試劑盒進行檢測。
[0070] 試劑盒檢測方法;向包有嗎啡特異性抗體的酶標板的微孔中添加系列標準溶液或 樣品溶液,每孔20ul,然后加入lOOul嗎啡酶標記物,室溫賠育30分鐘后倒去孔內液體,每 孔加300ul清洗液而后倒去,如此反復洗板3次,最后用吸水紙拍干板子后加入lOOul顯色 齊U,室溫反應15分鐘,用終止液中止反應,酶標儀測定每孔吸光度值。
[0071] 結果分析;所有標準品或樣品的吸光度炬)除W零標準的吸光度炬0),再乘W 100%,即得百分吸光度值:
[0072] 百分吸光度值(% )=炬/ B0) X100%
[0073] 將每個標準品的百分吸光度值輸入半對數(shù)系統(tǒng)中,對應各自標準品的濃度可W獲 得一個標準曲線,如圖1所示。然后,通過每一個樣品中的鴉片類物質的百分吸光度值可W 從標準曲線上找到對應的血液樣品中鴉片類物質的濃度。
[0074] 實施例6毛發(fā)樣品中苯丙胺類物質的檢測
[00巧](1)樣品前處理:毛發(fā)先用甲醇溶液清洗,清洗曬干后用剪刀剪成盡量小的片段, 稱取20mg的上述毛發(fā)片段,加入2ml甲醇溶液,75C水浴兩小時后靜止冷卻至室溫,取上清 液37C氮吹干,殘渣用160ul樣品稀釋液稀釋,振蕩器上振蕩充分溶解。
[0076] (2)試劑盒檢測方法:向包有甲基苯丙胺特異性抗體的酶標板的微孔中添加系列 標準溶液或樣品溶液,每孔20ul,然后加入lOOul甲基苯丙胺酶標記物,室溫賠育20分鐘后 倒去孔內液體,每孔加300ul清洗液而后倒去,如此反復洗板3次,最后用吸水紙拍干板子 后加入lOOul顯色劑,室溫反應8分鐘,用終止液中止反應,酶標儀測定每孔吸光度值。
[0077] (3)結果分析;所有標準品或樣品的吸光度炬)除W零標準的吸光度炬0),再乘W 100%,即得百分吸光度值:
[0078] 百分吸光度值(% )=炬/ B0) X100%
[0079] 將每個標準品的百分吸光度值輸入半對數(shù)系統(tǒng)中,對應各自標準品的濃度可W獲 得一個標準曲線,如圖2所示。然后,通過每一個樣品中的鴉片類物質的百分吸光度值可W 從標準曲線上找到對應的血液樣品中鴉片類物質的濃度。
[0080] 實施例7尿液樣品中氯胺麗類物質的檢測
[0081] (1)樣品前處理;直接取20ul尿液樣本用試劑盒進行檢測。
[0082] (2)試劑盒檢測方法:向包有氯胺麗特異性抗體的酶標板的微孔中添加系列標準 溶液或樣品溶液,每孔20ul,然后加入lOOul氯胺麗酶標記物,室溫賠育30分鐘后倒去孔 內液體,每孔加300ul清洗液而后倒去,如此反復洗板3次,最后用吸水紙拍干板子后加入 lOOul顯色劑,室溫反應30分鐘,用終止液中止反應,酶標儀測定每孔吸光度值。
[0083] (3)結果分析;所有標準品或樣品的吸光度炬)除W零標準的吸光度炬0),再乘W 100%,即得百分吸光度值:
[0084] 百分吸光度值(% )=炬/ B0) X100%
[0085] 將每個標準品的百分吸光度值輸入半對數(shù)系統(tǒng)中,對應各自標準品的濃度可W獲 得一個標準曲線,如圖3所示。然后,通過每一個樣品中的鴉片類物質的百分吸光度值可W 從標準曲線上找到對應的血液樣品中鴉片類物質的濃度。
[0086] 實施例8試劑盒精密度、準確度、保存期的試驗
[0087] (1)試劑盒精密度試驗
[0088] 分別取H批(A、B、C)試劑盒進行精密度試驗,每批試劑盒抽取3個試劑盒,每個試 劑盒取出10個微孔,測定4ng / ml標準品溶液的吸光度值,計算變異系數(shù)。測定結果如表 1所示,結果表明變異系數(shù)在0. 9% -6. 5%之間。
[0089] 表1試劑盒精密度試驗
[0090]

【權利要求】
1. 一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,包含以下物質:毒品標準品溶液,毒品 特異性抗體;包被有毒品特異性抗體的酶標板;毒品抗原酶標記物;顯色劑;濃縮洗滌液; 終止液和樣品稀釋液。
2. 根據(jù)權利要求1所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述毒品為嗎啡, 氯胺酮,大麻,海洛因,6-單乙酰嗎啡,可待因或苯丙胺類化合物。
3. 根據(jù)權利要求2所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述苯丙胺類化 合物為苯丙胺,甲基苯丙胺,3,4_亞甲二氧基苯丙胺或3,4_亞甲二氧基甲基苯丙胺。
4. 根據(jù)權利要求1所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述毒品特異性 抗體為用毒品與載體蛋白通過碳化二亞胺法合成的偶聯(lián)物,所述載體蛋白為鼠血清蛋白、 牛血清蛋白、甲狀腺蛋白、兔血清蛋白或血藍蛋白。
5. 根據(jù)權利要求1所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述毒品抗原酶 標記物中的標記酶為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酯酶。
6. 根據(jù)權利要求1所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述顯色劑為鄰 苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺。
7. 根據(jù)權利要求1所述一種毒品檢測酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于,所述濃縮洗滌液 為含有0.5%吐溫-20,0.01mol / L的磷酸鹽緩沖液;終止液為l-2mol / L的硫酸,鹽酸 或氫氧化鈉緩沖液;樣品稀釋液為〇. Olmol / L的磷酸鹽緩沖液。
8. 采用權利要求1所述試劑盒進行毒品檢測的方法,其特征在于,按照如下步驟進行: (1) 樣品前處理 當被檢樣品為尿液,唾液,血液時,直接進行檢測;當被檢樣品為毛發(fā)時,先用甲醇 溶液清洗,清洗曬干后用剪刀剪成l-l〇mm的片段,稱取2-20mg的上述毛發(fā)片段,加入 0. 5-2ml甲醇溶液,70-75°C水浴兩小時后靜止冷卻至室溫,取上清液37°C氮吹干,殘渣用 100-200ul樣品稀釋液稀釋,振蕩器上振蕩充分溶解,待檢測; (2) 向包被有毒品特異性抗體的酶標板上,加入樣品溶液或毒品標準品溶液以及毒品 抗原酶標記物溶液室溫孵育15-30分鐘,待測樣品中的毒品與酶標記的毒品競爭酶標板上 的毒品抗體,洗板3次,通過洗滌除去未結合的酶標記物,加顯色劑室溫孵育5-15分鐘,顯 色后用終止液終止,酶標儀測定樣品的吸光度值; (3) 步驟(2)獲得的吸光度值與樣品中毒品的量呈負關系,與標準曲線比較即可得出 樣品中毒品的濃度。
【文檔編號】G01N33/543GK104422762SQ201310410996
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2013年9月11日 優(yōu)先權日:2013年9月11日
【發(fā)明者】高穎, 魏建良 申請人:杭州優(yōu)瑪達生物科技有限公司
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